Escuela :Centro de Bachillerato Tecnologico Industrial y de Servicio No.

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DR. Jose Maria Liceaga

Ciudad: Coatzacoalcos, Veracruz.

Submodulo 3: Emplea Técnicas de identificación de microorganismos

Profesor: Q. F. B. Jesus Melesio Ornelas Mijangos

Nombre del estudiante: González Romero Ivana Valentina

Equipo: 2

Grado y Grupo: 3ALV

Especialidad: Tecnico Laboratorista Quimico

Competencia profesional del parcial NO 7: Aplica técnicas de identificación de

microoganismos siguiendo instrucciones y procedimientos y aplicando buenas practicas
de laboratorio

Tema: Ensayo critico del proyecto “Identificación de cationes, compuestos organicos y

microorganismos en una muestra biológica”

Periodo semestral: Agosto 2022 – Enero 2023

Fecha de entrega: 1 de Diciembre del 2022

 Introducción

La prueba de la lactosa se usa para diferenciar entre las enterobacterias en general y el

grupo de los coliformes. Una manera sencilla de realizar la prueba de la fermentación de
la lactosa en enterobacterias es sembrar el microorganismo en agar McConkey, ya que
este medio, además de ser selectivo frente a bacterias no entéricas, es diferencial ya que
contiene lactosa y un indicador de pH (rojo neutro). En agar McConkey las bacterias Gram
positivas ven inhibido su crecimiento debido a la presencia de sales biliares y cristal
violeta, pero entre ellas las que fermenten la lactosa (coliformes) liberarán productos
ácidos que producirán un cambio de pH que se detectará gracias al rojo neutro.

Objetivo

Podremos identificar los microorganismos de las diferentes técnicas de identificación que

se encuentran
 Procedimiento

Sacamos la caja Petri para comprobar si había echo efecto la lactosa, pudimos comprobar
que si había gracias a la colonia que salió.

Agar de Hierro y lisina:

1.- Suspender 33 g del medio deshidratado en un litro (1,000 l) de agua purificada.

2.- Remojar 15 minutos.

3.- Calentar cuidadosamente, agitando con frecuencia y hervir durante un minuto, o hasta
la

disolución completa del agar.

4.- Distribuir en tubos con tapón de rosca. Esterilizar a 121oC durante 12 minutos.

5.-Enfriar en posición inclinada. Cerrar con cuidado las tapas a fin de evitar pérdidas de
agua por

Evaporación.

Agar de hierro y triple azúcar:

Rehidratar 59.4 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15 minutos.

Calentar agitando frecuentemente hasta el

punto de ebullición durante 1 minuto para disolverlo por completo. Distribuir en tubos de
ensayo de 13x100 mm, tapar con algodón o

tapón de rosca flojo. Esterilizar en autoclave a 121oC ( 15 lbs de presión) durante 15

minutos. Enfriar en posición inclinada para obtener

un fondo de 1.5 a 2.0 cm . Conservar en refrigeración de 2 a 8oC.

Caldo Urea:

Rehidratar 3.87 g del medio en 100 ml de agua destilada. Reposar 10 a 15 minutos.

Cuando se ha disuelto, esterilizar por

filtración. Distribuir en tubos de ensayo en volúmenes de 0.5 a 2 ml. Es posible usar

cantidades mayores, pero las reacciones son más
lentas. Se puede esterilizar en autoclave de 5 a 8 libras de presión durante 15 minutos.
ES IMPORTANTE PROTEGERLO DE LA

LUZ. Conservar en refrigeración de 2o a 8o C.

Medio mio (agar semisólido)

1.-Disolver 31 g del medio deshidratado en un litro (1,000 ml) de agua purificada.

2.- Remojar 5 minutos

3.- Calentar a ebullición

4.- Distribuir 5 ml en tubos y esterilizar en autoclave a 121oC durante 15 minutos.

Agar citrato de Simmons:

Rehidratar 24.2 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15 minutos.

Calentar agitando frecuentemente hasta el

punto de ebullición durante 1 minuto para disolverlo por completo. Distribuir volúmenes de
3 a 5 ml en tubos de 13 x 100 mm.

Esterilizar a 121oC ( 15 lbs de presión) durante 15 minutos. Enfriar en posición inclinada

de manera que el medio en el fondo del tubo

alcance una profundidad de 1.0 a 1.5 cm. Conservar en refrigeración de 2 a 8oC.

Microorganis- Urea Citra Movili Indol Ornitina Gluc Gas Lact- Sacar Acido Lisina Lisina
-mo (genero -to -dad descarbo -osa osa -osa sullfhidr descar- desami
y aspecto) -xilasa -ico boxilasa -nasa
(H,S)
Escherichia - - + + + + + + + - + -
coli

Resultados y análisis de resultados.

 Conclusión.

Pudimos concluir que si se cumplio el objetivo de la practica y pudimos identificar los

mircroorganismos con las técnicas de identificación que utilizamos. Las técnicas que
utilizamos fueron Urea y fue negativa , Citrato al igual fue negativa, Movilidad fue positiva,
Indol también fue positiva, Ornitina descarboxilasa fue positiva, Glucosa fue positiva,
Sacarosa fue positiva ,Gas fue positiva, Lactosa fue positiva, Acido sulfhídrico fue
negativa, Lisina descarboxilasa fue positiva , Lisina desaminasa y por ultimo también fue
negativa, el genero y especie del microorganismo fue Escherichia coli.