Texto Ilustrado de Biología Molecular e Ingeniería Genética

José Luque, Ángel Herraez

Editorial Elsevier
España, 2001
Biología molecular

— Estudia todos aquellos

procesos celulares que
contribuyen a que la
información genética se
almacene, se transmita
eficientemente de unos seres a
otros y se exprese en los
individuos.
— Genética Clásica (≈1850-1920’s)

— Segunda Etapa de la Genética (≈1940’s-1950’s)

— Era de la Biología Molecular (≈1960’s)

— Tecnología del DNA Recombinante (≈1970’s)

◦ Ingeniería genética (Biotecnología genómica)
◦ Proyecto Genoma (Genómica)
◦ Análisis de las funciones de cada gen (Genómica Funcional)
◦ Disección de la estructura y función de las proteínas (Genómica Estructural, Proteómica).
◦ Estudio directo de comunidades de microorganismos en su entorno natural, evitando la necesidad
de aislar cada una de las especies que compone dicha comunidad (Metagenómica)
 Chapter 1. The Early development of genetics

1865 Medelian Inheritance

The rediscovery of Mendel’s laws in 1900 marks the birth of genetics

G. Mendel formulated a set of rules to explain the inheritance of biological characteristics. The basic
assumption of these rules is that each heritable property of an organism is controlled by a factor, called gene,
that is a physical particle present somewhere in the cell.
 Aislamiento del ADN. 1869 (1971)
Buscaba determinar la composición
química de las células.

Demostró que las proteínas y los lípidos

son los principales componentes del
citoplasma.
Johan Friedrich Miescher
(Suiza, 1844-1895) Inspeccionó el esperma de salmón y
pus de heridas abiertas, encontrando
una sustancia que no es proteína

Esta sustancia contenía carbono,

nitrógeno, hidrógeno y oxígeno,
pero carecía de sulfuro y contenía
grandes cantidades de fósforo.

Nucleína
Aisló moléculas ricas en nitrógeno y fósforo, a las cuales llamó nucleínas (actualmente ácidos
nucleicos) a partir del núcleo de los glóbulos blancos, preparando el camino para su identificación como
los portadores de la información hereditaria, el ADN.

Las proporciones de N y P eran diferentes a cualquier otro material biológico estudiado por lo que concluyo que
había aislado un componente biológico no descrito previamente, asociado casi exclusivamente con el núcleo.
 Walter Stanborough Sutton
E. U. 1877 - 1910

En 1903 establece la hipótesis según la cual los cromosomas, segregados de modo

mendeliano, son unidades hereditarias.

Fue el primer científico que probó las Leyes Mendelianas de

segregación y clasificación independiente con el uso de cromosomas
de saltamontes

William Bateson
Inglaterra, 1961-1926

1905-1906 propone el término «genética»

Re-descubridor de los trabajos de Mendel.
 Ley de la herencia ligada al sexo 1910

Thomas Hunt Morgan

E. U. 1866-1945

LOS CROMOSOMAS SON PORTADORES DE LOS GENES

Fue galardonado con el Premio Nobel de Fisiología y Medicina en 1933. Gracias a su trabajo,
Drosophila melanogaster se convirtió en uno de los principales organismos modelo en Genética.
1928 Experimento de Griffith

Descubrió lo que él llamó ”principio de

transformación”.

Frederick Griffith
Inglaterra, 1879 – 1941
Postula que el “principio transformante” transporta “propiedades” de un tipo de bacteria
(cepa virulenta “S” de S. pneumoniae inactivada por calor) se transfieren a otro (cepa no
virulenta “R” de S. pneumoniae)

El material
hereditario de
bacterias muertas
puede ser
incorporado en
bacterias vivas
 1929 - Phoebus Levene
— Kossel àlas bases de purina y pirimidina, el azúcar
y el ácido fosfórico.
— 1909 identificó el azúcar como pentosa
— 1929 demostró que los nucelótidos del ADN esta
conformado por desoxirribosa, un grupo
fosfato y 4 bases nitrogenadas
 1902-1909 – Archibald Garrod

— Archibald Garrod fue el primero en sugerir

que los genes tienen relación con las enzimas
— Alcaptonuria – patrón recesivo
1941 "one-gene-one enzyme"
Beadle and Tatum
The Nobel Prize in Physiology or Medicine 1958
discovery that genes act by regulating definite chemical events

George W. Beadle Edward L. Tatum

E.U. 1903-1989 E.U. 1909-1975

Neurospora crassa
— Neurospora crassa tiene vías bioquímicas que convierten el azúcar, sales y biotina en
todos los demás componentes que necesita (aminoácidos y vitaminas)

— Beadle y Tatum demostraron que cada gen tiene una relación con una enzima
— Beadle y Tatum indujeron mutaciones en
enzimas específicas que les permitieran
vivir en medio completo, pero no en
medio mínimo.
 1944 DNA transfer confers virulence
Avery, MacLeod, and McCarty

— Publicaron su descubrimiento: “Un ácido nucleico del tipo desoxirribosa es

componente fundamental del principio transformador del neumococo
tipo III”
1950 – Erwin Chargaff

— Las proporciones de adenina a timina y de

citocina a guanina eran próximas a 1 en todas las
especies estudiadas

— Esta relación es esencial en la estructura del

DNA y su función: la especificidad de
emparejamiento de pases
 1952 Viral Replication
Alfred Hershey and Martha Chase

Hershey together DelbrÜck and Luria:

Nobel Prize
in Physiology or Medicine 1969

— El DNA es el material genético

 Experimento de Hershey y Chase
(1952)

Conclusión: El DNA introducido en la bacteria contiene la

información necesaria para generar nuevos virus, es
decir, el DNA es el portador de la información genética.

§ P32
§ S35
— Despite the brilliance of the classical genetic studies, there was no real understanding of
the molecular nature of the gene until 1940’s.

◦ DNA was the genetic material.

1. El DNA es el responsable de la transformación por Avery,

MacLeod y McCarty en 1944.
2. El DNA introducido en las bacterias contiene la información
necesaria para generar nuevos virus por Hershey y Chase en
1952.

◦ Up until then it was widely though that genes were made of protein.
 1953 - Rosalind franklin y Maurice Wilkins

— Proyectando un haz de rayos X a través de cristales de DNA,

confirmaron que esta molécula es una hélice
— Propusieron un modelo estructural que ha demostrado ser
esencialmente correcto
 Los científicos sabían:

— El DNA era el legado químico transmitido por los cromosomas

— Se trataba de una molécula muy larga y muy fina
— Composición: El DNA estaba hecho de nucleótidos
Formados por 3 ingredientes distintos:
1.- Bases nitrogenadas (A,G,T,C)
2.-Azúcar de 5 carbonos (Desoxirribosa)
3.-Un grupo fosfato
— Los pares de nucleótidos A-T y G-C tenían una proporción cercana a 1
— Algunas biomoléculas forman estructuras helicoidales
1953 DNA Helix
Crick and Wilkins together with Watson

— Utilizando los datos de difracción

de Franklin y Wilkins junto con
los datos obtenidos por Erwin
Chargaff, describen la estructura
en doble hélice del ADN como
una doble hélice, formada por
dos cadenas orientadas en
direcciones opuestas, cuya
estructura es mantenida por
puentes de hidrógeno entre las
bases, orientadas al interior. Nobel Prize in Physiology or Medicine 1962
Descubrimiento de la Estructura del DNA

Con base en estudios realizados por otros

investigadores, Watson y Crick comenzaron a
construir modelos, hasta que demostraron la
forma helicoidal del DNA.

El 28 de febrero de 1953, presentaron su

descubrimiento. “Hemos encontrado el secreto
de la vida”, declaró Francis Crick a los
asistentes.

En 1962, James Watson, Francis Crick y

Maurice Wilkins recibieron el Premio Nobel de
Medicina por sus investigaciones.
 1957 – Francis Crick

— El Dogma
Central
¿Cómo se replica el
DNA?

Modelos de replicación
 1958 – Mathew Meselson y Franklin Sthal

— Describieron la replicación del DNA

 1958 – Mathew Meselson y Franklin Sthal

• Describieron la replicación del DNA

 1961 - Sydney Brenner, Francois Jacob y Mathew Meselson

— Descubren el RNAm

— El RNAm se copia
directamente del DNA , se
procesa y sale del núcleo
para ser traducido a
proteína por los ribosomas,
por ello se le llama
mensajero
 1961-1966 – La piedra rosetta de la genética

— Har Gobind Khorana, Marshall

Niremberg y Heinrich Matthaei
— Descubrieron el código genético
que hizo posible la comprensión de
la información almacenada en un
gen, la cual se traducía en una
secuencia de aminoácidos
— Lograron determinar que los 20
aminoácidos esenciales aparecen
codificados en el DNA por uno o
más tripletes
 1964 – Robert W. Holley

Descubrió que la transportación de

los aminoácidos a los ribosomas
ocurre con la ayuda de un tipo de
RNA llamado RNA de transferencia
(tRNA).
En 1964 Robert Holley determinó
la secuencia nucleotídica completa
del tRNA de alanina.
1968 - 1970 – Las primeras endonucleasas de restricción

— Werner Arber describió por primera vez las enzimas de restricción a finales de
1960
— Hamilton Smith y Kent Wilcox descubren y caracterizan la primer enzima de
restricción en Haemophilus influenzae en 1970
— Daniel Nathans en 1971 demostró que la enzima HindIII corta el DNA del SV40
en 11 fragmentos definidos

Arber, Nathans y Smith reciben

el premio Nobel de fisiología y medicina en 1978
1968 - 1970 – Las primeras endonucleasas de restricción
 Frederick Sanger
England, 1918 -

Premio Nobel
1958 y 1980

En 1955 determinó la secuencia de los aminoácidos de la insulina.

En 1975 desarrolló el método de secuenciado del ADN. Empleó esta técnica para secuenciar el genoma del
bacteriófago Φ-X174, el primer organismo del que se secuenció totalmente el genoma.
Stanley Cohen Herbert Boyer
E.U. 1935 - E.U. 1936 - Recombinant DNA Technology or
Genetic Engineering

Demonstrated that the gene for frog ribosomal RNA

could be transferred into bacterial cells and expressed
by them.
Gene Cloning
 Genetic Engineering Technology, Inc
Founded in 1976

Modern Biotechnology: puts genes to

work in production of proteins and other
compounds needed in medicine and
industrial processes.
1987 PCR

Kary Mullis
1993 Nobel Prize in Chemistry
1989
Fundada en 1998 por Applera
Corporation y J. Craig Venter,
con el objetivo primario de
secuenciar y ensamblar el
genoma humano en plazo de
tres años.
 El DNA como material genético:
— Nucleina formada por una parte ácida por Miescher en 1869.

— Agente transformante de Griffith en 1928.

— El DNA es el responsible de la transformación por Avery, MacLeod y McCarty en

1944.

— El DNA introducido en las bacterias contiene la información necesaria para generar

nuevos virus por Hershey y Chase en 1952.

— Propuesta de la estructura de dóble hélice del DNA por Watson y Crick en 1953.
Flujo de la información genética
Flujo de la información genética