MOVIMIENTO DE COGOLLERO EN LA PLANTA

Movimiento de las larvas en la planta y comportamiento de alimentación del gusano del ejército
de otoño (Lepidoptera: Noctuidae) en la reproducción Spodoptera frugiperda J.E. Smith (gusano de
la caída) es considerado una de las plagas más destructivas del maíz en todas las Américas. Aunque
esta plaga ha sido ampliamente estudiada, se sabe poco sobre su movimiento larvario y su
comportamiento de alimentación en la reproducción en comparación con las etapas vegetativas
del maíz. Por lo tanto, realizamos estudios con dos etapas de maíz (R1 y R3) y cuatro zonas de
plantas de maíz (tassel, por encima de la espiga, zona de la espiga y por debajo de la espiga) en el
campo en Concord, NE (EE. UU.), y en el campo y el invernadero en Botucatu, SP (Brasil), para
investigar el movimiento de larvas en la planta. Los efectos de los diferentes tejidos de maíz
(dobeja abierta, borla cerrada, seda, grano y hoja), dos escenarios de secuencia de alimentación
(dolo cerrado, hoja, seda-núcleo y hoja-seda-núcleo) y la dieta artificial (control positivo) sobre la
supervivencia y el desarrollo de las larvas también se evaluaron en el laboratorio. La zona del oído
tiene un fuerte efecto en la elección de alimentación y la supervivencia de las larvas de gusano del
ejército de otoño, independientemente de la etapa reproductiva del maíz. La elección del lugar de
alimentación es hecha por first-instar. Las hojas de maíz de las plantas reproductivas no eran
adecuadas para el desarrollo temprano, pero los tejidos de la seda y el grano tuvieron un efecto
positivo en la supervivencia y el desarrollo de las larvas de gusano de ejército de otoño en el maíz
en etapa reproductiva.

El gusano del ejército de otoño Spodoptera frugiperda J.E. Smith (Lepidoptera: Noctuidae) se
considera una de las principales plagas de origen tropical-subtropical en el hemisferio occidental
que va desde Argentina hasta el sur de Canadá (Luginbill 1928, Clark et al. 2007, Adamczyk et al.
2008, Farias et al. 2008). Se ha informado de que infesta más de 80 especies de plantas, incluidos
importantes cultivos agrícolas como el algodón, la soja y el maíz (Luginbill 1928, Pogue 2002,
Capinera 2008)

En Brasil, el gusano del ejército de otoño se considera la plaga más destructiva y económicamente
importante del maíz (Cruz y Turpin 1983, Cruz et al. 1999, Diez-Rodrigues y Omoto 2001, Carvalho
et al. 2013, Huang et al. 2014). En los Estados Unidos, se ha descrito como una importante plaga
que limita el rendimiento en los campos de maíz del sur (Buntin et al. 2004, Chilcutt et al. 2007,
Hardke et al. 2011). Esta especie no hace diáustica durante el invierno, siendo vulnerable a las
bajas temperaturas invernales, solo sobrevive durante todo el año en los climas subtropicales en
las regiones del sur de Florida y Texas (Sparks 1979, Buntin 1986, Mitchell et al. 1991). Por lo tanto,
las poblaciones de S. frusiperda migran y reinvaden los cultivos de maíz en las regiones más frías
de América del Norte, incluido Canadá, durante el verano (Mitchell et al. 1991, Nagoshi et al 2012).
Aunque el gusano del ejército de otoño puede atacar todas las etapas del maíz (Flanders et al.
2007, Cruz et al. 2008, Knutson 2009), su lesión suele ser relacionado con el consumo foliar y el
daño indirecto a la producción de granos debido a la reducción del área fotosintética (Cruz y Turpin
1983, Pitre y Hogg 1983, Buntin 1986, Melo y Silva 1987, Capinera 2000, Vilarinho et al. 2011). En
consecuencia, gran parte de la investigación de S. frugiperda en el maíz se ha dirigido hacia su
manejo en las primeras etapas del maíz, generalmente cuando la región del verticilo todavía está
presente, donde la mayoría de las larvas de gusanos del ejército de otoño se encuentran
alimentándose de las hojas en desarrollo (Cruz y Turpin 1983, Harrison 1986, Melo y Silva 1987,
Bokononon-Ganta et al. 2003, Siebert et al. 2008).
Aunque se ha informado que el gusano del ejército de otoño se comporta de manera similar al
gusano del oído del maíz (Helicoverpa zea Boddie, Lepidoptera: Noctuidae), penetrando en la oreja
y alimentándose de granos (Buntin 1986, Capinera 2000, Vilarinho et al. 2011), sigue siendo
necesaria una mejor comprensión de la infestación del gusano del ejército de otoño en las etapas
de maíz reproductivo, así como por qué las larvas "eligen" ese sitio de alimentación. Tal
comportamiento tiende a infligir un mayor daño al maíz debido a la lesión de los componentes de
las plantas reproductoras. También podría limitar el uso de estrategias de control importantes,
como el control biológico y convencional a través de la pulverización de pesticidas, porque las
larvas estarán protegidas. En este contexto, el conocimiento del movimiento de las larvas es
fundamental para aplicar eficazmente las estrategias de manejo de plagas (Ross y Ostlie 1990.

Traducción pagina 2.

Spangler y Calvin 2001, Paula-Moraes et al. 2012). El movimiento de los lepidópteros de estrellas
tempranas dentro de las plantas huésped determina en gran medida dónde se establecen los sitios
de alimentación (Zalucki et al. 2002, Perkins et al. 2008). La descripción de este movimiento
ayudará a aplicar estas estrategias de manera más eficiente, ya que durante su exploración, las
larvas son vulnerables a los depredadores, parasitoides, patógenos e insecticidas (Zalucki et al.
2002, Johnson et al. 2007, Perkins et al. 2008). Debido a que el gusano del ejército de otoño
reinvade el norte de los Estados Unidos durante el verano de cada año, generalmente encontrando
maíz en las etapas reproductivas, la información sobre el movimiento de las larvas durante estas
etapas es importante. En Brasil, los factores que afectan a la incidencia de gusanos del ejército de
otoño, como la sucesión de cultivos anfitriones, la producción de maíz y sorgo "fuera de
temporada", y las áreas cercanas con maíz en diferentes fenologías, han estado aumentando
(Nagoshi 2009, Barros et al. 2010), lo que requiere además una mejor comprensión del
comportamiento de este insecto. Otra razón importante para comprender mejor el
comportamiento de las larvas surge con la llegada del maíz transgénico que expresa toxinas Bt. La
información sobre el movimiento de las plagas, así como el comportamiento de alimentación de
las larvas, es importante porque la movilidad del insecto podría afectar la exposición de las larvas a
las concentraciones letales y subletales de toxinas Bt en diferentes tejidos vegetales (Paula-Moraes
et al. 2012), influyendo así en la supervivencia y en la selección de la resistencia de los insectos.
Esta información ayudará a diseñar estrategias para gestionar la resistencia (Gould 1998, Dirie et
al. 2000), especialmente en el caso de Brasil, donde se ha informado de la supervivencia
inesperada y la posterior resistencia de S. frugiberda al maíz CrylF y CrylAb en varias regiones
(Farias et al. 2014, Huang et al. 2014, Niu et al. 2014, Monnerat et al. 2015). Investigamos el
movimiento en la planta de las larvas de gusano de ejército de otoño en dos etapas diferentes de
maíz reproductivo en condiciones de campo e invernadero, así como el comportamiento de
alimentación en las etapas de maíz reproductivo. También evaluamos el rendimiento larvario en
diferentes tejidos de maíz en el laboratorio.

Materiales y métodos:

Movimiento de larvas en la planta

La supervivencia, el desarrollo y la distribución de las larvas en la planta de maíz se caracterizaron

en el campo en el Laboratorio Agrícola Haskell del Centro de Investigación y Extensión del Noreste
de la Universidad de Nebraska, Concord, NE, durante 2013, y en el invernadero y el campo de la
Universidad Estatal de Sao Paulo, Departamento de Protección de Cultivos, Botucatu, SP, Brasil,
durante la temporada 2014-2015. Para estos estudios, se utilizaron dos híbridos de maíz no
transformados Channel 208-71R y Pioneer 30F35 en los Estados Unidos (campo) y Brasil
(invernadero y campo), respectivamente. El diseño del tratamiento fue un factorial de 2 por 4 para
todos los estudios, con dos etapas de maíz (silado o R1 y etapa de leche o R3; Ritchie et al. 1993), y
cuatro zonas de plantas diferentes (tassel, por encima de la oreja, zona de la oreja y por debajo de
la oreja). Se llevaron a cabo tres experimentos en condiciones de campo, uno en los Estados
Unidos y dos en Brasil. Para todos los experimentos, las áreas experimentales tenían dos etapas de
maíz establecidas utilizando diferentes fechas de siembra. Las dos etapas de maíz se asignaron al
azar en un diseño de bloque completo aleatorio. Había cuatro parcelas por etapa de maíz con ocho
en total. En Concord, NE, cada parcela experimental consistía en ocho filas de 10 m de largo con un
espacio entre plantas de 15 cm y 0,76 m entre filas. En Botucatu, SP (Brasil), cada parcela
experimental constaba de 6 filas por 12 m, con un espaciado de plantas de 15 cm y 0,45 m entre
filas. Para el segundo experimento de campo en Brasil, 10 plantas de maíz de cada parcela en el
campo fueron enjauladas desde la emergencia para asegurar que las plantas permanecieran libres
de infestaciones naturales y enemigos naturales. Las plantas se utilizaron para evaluar el
movimiento de la planta. Las jaulas tenían 1,0 m de ancho, 1,3 m de largo y 2,5 m de alto con
soportes hechos de tubo de PVC (1,9 cm) y toda la estructura cubierta con una pantalla de insectos
blanca (malla 16 u agujeros de 1,19 mm).

En los Estados Unidos, las parcelas se regaron según fuera necesario con un sistema de riego
lateral por encima de la cabeza. En Brasil, todas las parcelas (a excepción de las jaulas de campo) se
rociaron con un insecticida no persistente deltametrina Decis 25 EC (Bayer, São Paulo, SP) (S)-a-
cyano-3-fenoximebencil (1 R,3 R)-3 - (2,2-dibromovinilo)-2,2-dimetilciclopropano-carbox-vlate (200
ml ha-1 o 5 g de a.i. ha') cada 3 días hasta el final de la etapa de verticilo para garantizar que no
haya infestaciones naturales de lepidópteros antes de la formación del oído. Otro ensayo de
movimiento en las plantas se llevó a cabo en el invernadero de Brasil. Las semillas de maíz híbrido
Pioneer 30F35 convencional se plantaron en macetas de plástico de 8 litros que contenían suelo
fertilizado de acuerdo con las recomendaciones culturales estándar. El estudio se llevó a cabo
como un diseño completamente aleatorio con cinco repeticiones. El riego y las prácticas de gestión
estándar se utilizaron según sea necesario para garantizar un crecimiento óptimo hasta las etapas
de reproducción del maíz.

Se llevó a cabo una infestación artificial con masas de huevos en todos los sementales. En los
Estados Unidos, las masas de huevos se compraron a una colonia de poblaciones en un laboratorio
comercial (Benzon Research, Carlisle, PA). En Brasil, las masas de huevos se recogieron de una
colonia de investigación en el Departamento de Protección de Cultivos, Facultad de Ciencias
Agronómicas, UNESP, Botucatu, SP (Brasil). Los insectos se mantuvieron en condiciones
controladas (temperatura = 25 ‡ 2°C; humedad relativa [RH] =60 ‡ 10%; fotoperíodo de 14:10 [L:D]
h), y se criaron de acuerdo con Parra (2001). Las hojas de papel de oviposición que contenían
masas de huevo se cortaron y se mantuvieron en la cámara de crecimiento a una temperatura de
25 °C hasta que los huevos estuvieron cerca de la eclosión.

El número de huevos se contó con un estereoscopio de microscopio

(Nikon - Microscopio de zoom estéreo SMZ 645). En los Estados Unidos, se utilizaron 100 huevos
para infestar cada planta. En Brasil, se utilizaron 200 huevos por planta debido al alto número de
enemigos naturales observados y las fuertes lluvias que generalmente ocurren durante la
temporada de lluvias que podrían poner en peligro la supervivencia y recuperación de las larvas.
Los huevos se seleccionaron para la uniformidad y se infestaron cuando las cápsulas de la cabeza
que se oscurecieron se hicieron visibles a través del coro del huevo (etapa de la cabeza trasera), lo
que indica una eclosión inminente. Se desarrolló un método de infestación artificial: las masas de
huevo seleccionadas se transfirieron a un "sobre" (6 cm de largo por 4 cm de alto) hecho de tejido
orgánico con una abertura en la parte superior, con el fin de evitar la desecación o la humedad
excesiva. Un solo "sobre" por planta se engrapó en la superficie superior de la hoja, al final de la
primera hoja completamente extendida por encima de la oreja primaria (por encima de la zona de
la oreja). La selección de la hoja simuló la oviposición natural de polillas hembra de S. frugiperda
en maíz en etapa reproductiva (observaciones de campo preliminares). Diez plantas en la fila
central de cada parcela estaban infestadas en los estudios de EE. UU. y Brasil.

Antes de la infestación, las plantas eran inspeccionadas para detectar la presencia de infestaciones
naturales. En los Estados Unidos, no se detectó ninguna infestación natural de gusano de ejército
de caída en las parcelas durante el estudio. En Brasil, se eligieron plantas no dañadas para el
estudio. Para determinar el movimiento de las larvas, las evaluaciones se realizaron sobre la base
de los métodos descritos por Paula-Moraes et al. (2012), donde la planta de maíz se dividió en
cinco zonas vegetales (tassel, por encima de la oreja, oreja primaria, oreja secundaria y por debajo
de la oreja). Sin embargo, en el presente estudio, decidimos combinar las zonas de la oreja
primaria y secundaria en una zona llamada "zona de la oreja", ya que muchas de las plantas de
maíz utilizadas en nuestros estudios tenían una sola espiga. El muestreo de plantas se llevó a cabo
a las 3, 6, 10, 13 y 16 días después de la infestación (DAI) (los huevos eclosionaron dentro de las 24
horas posteriores a la infestación).

Traducción página 3

La planta se evaluó en cada parcela, en cada día de muestreo. Se descartaron las plantas que no
tenían larvas vivas de gusano de las masas de huevos, y se tomó la muestra de otra planta. Cada
zona de la planta de maíz fue inspeccionada para detectar la presencia de larvas (muestreo
destructivo). El movimiento de las larvas en la planta de maíz se evaluó en función del número de
larvas recuperadas en cada zona de la planta. La supervivencia de las larvas se calculó dividiendo el
número de larvas encontradas por el número de huevos infestados por planta. Las larvas
recuperadas fueron transferidas a viales translúcidos de 6 ml llenos de alcohol 100% etílico para la
medición posterior del ancho de la cápsula de la cabeza. La clasificación de Instar se basó en Pitre y
Hogg (1983).

Los datos se analizaron por separado por sistema de cultivo (campo de EE. UU., campo de Brasil,
jaulas de campo e invernadero), y se probó la normalidad de los residuos y la homogeneidad de la
varianza (PROCGLIMMIX PLOT = RESIDUAL PANEL; SAS Institute 2009). La distribución con el mejor
ajuste fue lognormal, que se determinó a través de la opción DISTRIBUCIÓN en PROC GLIMMIX
(Instituto SAS 2009). Se examinaron las relaciones e interacciones entre el número de larvas en
diferentes zonas de plantas y las etapas del maíz. El procedimiento de Dunnett se utilizó para
detectar diferencias desde el control (zona de la planta donde se realizó la infestación de masa de
huevos) hasta las otras zonas de la planta (Paula-Moraes et al. 2012).

Alimentación de larvas:

La supervivencia y el desarrollo de las larvas del gusano de la parasitación se evaluaron en

condiciones de laboratorio (temperatura = 25 ‡ 2 °C; RH=60 ‡ 10%; fotoperíodo de 14:10 [L:D] h).
Se probaron diferentes tejidos de maíz a partir del mismo híbrido de maíz Pioneer 30F35 utilizado
en los estudios de campo en Brasil. Los diferentes tejidos se retiraron del campo cuando fue
necesario y se limpiaron con alcohol para evitar la contaminación y eliminar el material extraño
(Dorhout 2007, Paula-Moraes et al. 2012). Las masas de huevos se obtuvieron de la colonia de
investigación como se describió anteriormente para el estudio de la planta. Los huevos se
mantuvieron en una cámara de crecimiento a 25 °C hasta la eclosión. Los recién nacidos del gusano
del ejército de otoño (<24 h de edad) fueron seleccionados al azar y transferidos con un pincel fino
en viales (100 ml) que contenían un papel de filtro humedecido en la parte inferior y sellados con
tapas de plástico. Cada vial contenía un recién nacido y ~5 g de cada tejido de maíz diferente. Los
tejidos de maíz se reemplazaban todos los días. Los viales se mantuvieron en el laboratorio a 25 ‡
2°C, 60 = 10% de humedad, y un fotoperíodo de 14:10 (L.D) h. El estudio se llevó a cabo como un
diseño completamente aleatorio con 40 repeticiones. Cada vial representaba una replicación. Se
evaluó una dieta (control positivo), cinco tejidos de maíz diferentes y dos escenarios de
alimentación: dieta para el gusano del ejército de otoño hecha de acuerdo con Parra (2001), borla
abierta (OT), borla cerrada (T), seda (S), granos (K), hojas (L), L-S-K (hojas, seda y grano) y T-L-S-K
(doja cerrada, hojas, seda y granos). La borla abierta se recogió en la etapa de borla, cuando ya
estaba expuesta al aire por encima de las otras partes, pero no se secó por completo. La borla
cerrada se recogió durante la etapa de pre-sal, cuando estaba totalmente verde encerrada en las
hojas de la verticia. La seda se retiró de la oreja durante la etapa de seda, cuando las estructuras
todavía estaban verdes. Los granos se utilizaron en la etapa de leche, y las hojas se recogieron de la
parte superior de las plantas de maíz (zona superior de la oreja). Los escenarios de alimentación se
eligieron en función del daño del gusano del ejército de otoño y el posible movimiento en las
plantas de maíz. En los escenarios de alimentación, el tipo de tejido de maíz se cambió a los 5d
después de la exposición larvaria al tejido hasta el último material, que permaneció hasta la etapa
de pupación o el final de los ensayos (por ejemplo, para el escenario de alimentación I-S-K: 5d
expuesto al tejido foliar; 5d expuesto al tejido de seda; tiempo restante hasta la pupación expuesto
al tejido del núcleo).

TABLA

De la tabla

La recuperación de las larvas se calculó dividiendo el número de larvas encontradas por la

estimación del número de huevos infestados por planta.

Infestado con 100 huevos por planta. Número total de 400 huevos por evaluación.

Infestado con 200 huevos por planta. Número total de 800 huevos por evaluación.

No se evaluaron plantas en las quintas fechas de muestreo.

Los anchos de la cápsula de la cabeza son ~0,35, 0,45, 0,75, 1,3, 2,0 y 2,6 mm, en particular, para
las estrellas 1-6 (Pitre y Hogg, 1983)

La supervivencia de las larvas se evaluó en 3, 5, 8, 10, 13, 15, 17 y 20.

DAI. Después de este período, la supervivencia de las larvas se comprobó diariamente hasta la
pupación registrando el número de larvas vivas. El desarrollo larvario (tiempo hasta la pupación) se
midió diariamente. El peso de la pupa se evaluó y se llevó a cabo el segundo día después de la
pupación utilizando una escala (Modelo Marte AY220, Shimadzu, Kyoto, Japón) a 0,1 mg. Los datos
se analizaron utilizando un modelo mixto generalizado (Proc Glimmix, SAS Institute 2009) para
detectar las diferencias entre las medias. Cuando se apropiaba, los medios se separaban utilizando
las diferencias menos significativas de Fisher

Procedimientos (a = 0,05).

Resultados:

Movimiento de larvas en la planta

La recuperación general de larvas en todos los experimentos fue baja al considerar el número de
huevos infestados, independientemente de la ubicación o el sistema de cultivo. En general, se
observó una disminución en el número de larvas recuperadas desde la primera hasta la última
fecha de muestreo. El porcentaje de recuperación de larvas fue inferior al 10 % para todas las
fechas de muestreo, excepto para la primera fecha de muestreo en el estudio de invernadero, con
una recuperación de larvas del 12,3 % (245 individuos recuperados; Tabla 1).

Todas las larvas recuperadas en las primeras fechas de muestreo fueron las primeras estrellas
(Tabla 1), y en la segunda fecha todas las larvas fueron las segundas estrellas.

TABLA

Traducción página 4

General, en las fechas de muestreo tercera, cuarta y quinta, la mayoría de las larvas se clasificaron
como tercera, cuarta y quinta estrella, respectivamente (Tabla 1). En el invernadero, algunas de las
larvas recuperadas ya habían alcanzado la cuarta estrella en la tercera fecha de muestreo, y la
mayoría de las larvas eran quinta estrella en la cuarta y quinta fecha de muestreo. No hubo plantas
evaluadas en las quintas fechas de muestreo en los experimentos de campo en Brasil (Brasil,
campo y jaulas de campo), ya que no hubo plantas infestadas. Algunas plantas no tenían
infestación de gusanos del ejército en las fechas de muestreo anteriores, y tuvieron que ser
descartadas (Tabla 1).

No hubo un efecto significativo en la etapa de maíz para el número medio de larvas de gusano de
ejército de otoño para ninguna fecha de muestreo para todos los experimentos (Tabla 2). Del
mismo modo, no hubo una interacción significativa entre la etapa de maíz y la zona de la planta
(Tabla 2). Hubo un efecto significativo de la zona de plantas en todas las fechas de muestreo para
todos los experimentos (P <0,05), excepto la primera fecha de muestreo en Brasil para las plantas
de maíz enjauladas (Tabla 3). No se evaluaron plantas para la quinta fecha de muestreo en las
áreas de campo en Brasil (campo de Brasil y jaulas de campo) debido a la falta de plantas
infestadas (Tabla 2).

No se encontraron larvas en la zona de borlas, independientemente de la fecha de muestreo o de

la etapa del maíz (Tabla 3; Fig. 1). En general, la mayoría de las larvas se recuperaron en el oído
anterior y la zona del oído con una mayor concentración en la zona del oído en la primera y
segunda fechas de muestreo. A partir de la tercera fecha de muestreo, casi todas las larvas
infestadas se recuperaron en la zona del oído en todos los experimentos (Tabla 3; Fig. 1).

Para las áreas de campo de EE. UU. y Brasil (excluyendo el estudio de la jaula de campo), el número
medio de larvas recuperadas en la zona del oído fue significativamente mayor (P < 0,001) en
comparación con las otras zonas de plantas en la primera fecha de muestreo, incluida la zona del
oído anterior donde se colocaron las masas de huevo (Tabla 4). Sin embargo, el número medio de
larvas recuperadas en la zona del oído fue el mismo que en la zona del oído anterior para el
experimento en el invernadero, y no difirió de la misma zona en el experimento de jaula para la
misma fecha de muestreo. En general, se observó una concentración significativamente mayor de
larvas en la zona del oído en todos los experimentos desde la segunda hasta la última fecha de
muestreo (Tabla 4; Fig. 1).

Alimentación de larvas:

La supervivencia de las larvas fue significativamente mayor para los insectos criados con dieta
(85,0 %; control positivo; P <0,001; Tabla 5). Al comparar las larvas criadas en los diferentes tejidos
de maíz y los escenarios de alimentación, la borla cerrada y la seda tuvieron la supervivencia
larvaria más alta (57,50% cada una). Los porcentajes más bajos se observaron para las larvas que
se alimentaban de hojas (10,0%) y borlas abiertas (0%; Tabla 5). Las tasas de supervivencia en otros
tejidos de maíz y la secuencia de los escenarios de alimentación variaron del 40,0% (T-L-S-K) al
25,0% (núcleo y L-S-K). El desarrollo más rápido se observó con larvas criadas en granos (16,5 d)
que difieren de los otros tejidos de maíz, la secuencia de los escenarios de alimentación y la dieta
(20,2 d; P < 0,001; Tabla 5). Además de dar lugar a altas tasas de mortalidad, el tejido foliar (24,0d)
retrasó el desarrollo de las larvas en comparación con los otros tratamientos (P < 0,001).

Las larvas criadas con una borla cerrada dieron como resultado el menor peso de la pupa (P
<0,001). Aunque la borla cerrada y la seda proporcionaron la mayor supervivencia de las larvas,
dieron como resultado los pesos más bajos de la pupa. No hubo diferencia entre los escenarios de
alimentación de la secuencia T-L-S-K e I-S-K, el grano y la dieta (control positivo) para el peso de la
pupa (Tabla 5).Todas las larvas confinadas en una borla abierta murieron por 8 DAI (Fig. 2).Del
mismo modo, el 80 % de las larvas que se alimentan de tejido foliar no sobrevivieron durante el
mismo período. Las larvas criadas con dieta tuvieron la mortalidad más baja en todos los días
evaluados y no alcanzaron el 20 % de la mortalidad hasta el final del ensayo. Ninguna larva murió
después de 20 DAI.

Debate

Según Zalucki et al. (2002), la mortalidad en las primeras etapas larvarias suele ser alta en los
lepidópteros. Los autores informaron que casi el 40 % de la mortalidad se produce por ataque de
parasitismo del huevo y otros factores durante la etapa del huevo, y el 50 % durante la primera
estrella. Esperábamos encontrar un mayor porcentaje de recuperación de larvas en nuestros
estudios porque las plantas.

Traducción pagina 5

TABLA

Estaban infestados de huevos inmediatamente antes de la eclosión y estaban algo protegidos

dentro de una envoltura de malla; sin embargo, la recuperación de las larvas fue baja (3,5 a 12,5%),
particularmente para las primeras estrellas en la primera fecha de muestreo (Tabla 1). El bajo
porcentaje de recuperación de las larvas puede deberse en parte al movimiento de las larvas lejos
de la planta infestada. Este comportamiento es innato en todas las especies de artrópodos
(Andrewartha y abedul 1954), incluyendo varias especies de Noctuidae (Zalucki et al. 2002). Dicha
dispersión es un mecanismo adaptativo mediante el cual los insectos buscan recursos y adquieren
compañeros, sitios de oviposición y anidación, y refugios (Bell 1990, Price 1997) esenciales para el
crecimiento, el desarrollo y el mantenimiento del individuo (Bell 1990). Las causas de la mortalidad
larvaria no siempre están claras, en parte debido al pequeño tamaño de las primeras estrellas. Del
mismo modo, factores como la exposición a los enemigos naturales y los efectos del clima,
incluidas las precipitaciones y las temperaturas altas o bajas, también son factores de mortalidad
significativos para las primeras estrellas (Zalucki et al. 2002). Aunque se necesitan más estudios

Para definir mejor las causas de la mortalidad, la ausencia de estos factores abióticos en nuestro
estudio de invernadero parece haber influido en el número de larvas recuperadas en Brasil (Tabla
1). En la primera fecha de muestreo, los porcentajes variaban desde el 4,6 % en el área de campo,
el 6,5 % en las jaulas de campo, hasta el 12,5 % en el invernadero (Tabla 1). En general, se observó
este mismo patrón en todas las evaluaciones de los experimentos. En las áreas de campo de Brasil,
observamos un alto número de enemigos naturales, especialmente Doru luteipes Scudder
(Dermaptera: Forficulidae), y fuertes lluvias durante todo el período de evaluación, que pueden
haber afectado la supervivencia de las larvas. Por otro lado, la falta de estos factores bióticos y
abióticos que afectaron la supervivencia de las larvas de la lombriz de la sisa de otoño en Brasil
puede haber sido responsable de la mayor recuperación de las larvas en el estudio de EE. UU.
(Tabla 1), ya que el gusano de la caída no pasa el invierno en Nebraska y sus enemigos naturales no
son tan abundantes. En general, se observó una disminución en el número de larvas recuperadas
desde la primera hasta la última fecha de muestreo (Tabla 1). Otoño

Traducción pagina 6

Se sabe que el gusano del ejército tiene un comportamiento caníbal. A pesar de las masas de
huevos de puesta compuestas por cientos de huevos, normalmente solo se encuentran una o muy
pocas larvas por planta debido a este comportamiento (Sparks 1979, Vilarinho et al. 2011). Aunque
otros factores como los efectos ambientales y una serie de enemigos naturales potenciales podrían
haber contribuido a esta disminución, también se observó una mortalidad relativamente alta para
los estudios de invernadero y jaulas de campo (Tabla 1), lo que refuerza la posible influencia del
canibalismo en un sitio de alimentación compartido (Chapman et al. 2000). Los resultados de
nuestros estudios en la planta no indicaron un efecto de la etapa de maíz o una interacción entre la
etapa de maíz y las zonas de la planta.
Tabla 5. Efectos de los diferentes tejidos de maíz en la mortalidad larvaria del gusano del ejército
de otoño, el desarrollo larvario y el peso de la pupa

La distribución de las larvas (Tabla 2). Nuestros datos indican un movimiento significativo en la
planta con una concentración en la zona de la oreja a partir de la primera fecha de muestreo,
independientemente de la etapa de maíz reproductivo evaluada (Tabla 3; Fig. 1). El movimiento
inicial dentro de las plantas huésped se discute en la literatura como el comportamiento que
determina en gran medida dónde se establece el sitio de alimentación (Zalucki et al. 2002, Johnson
y Zalucki 2007, Perkins et al. 2008). Sin embargo, las lesiones al maíz causadas por las larvas de
gusano del ejército de caída se reportan típicamente como consumo foliar, y esporádicamente
como daño a las partes reproductivas como las estructuras de las orejas (Cruz y Turpin 1983, Pitre y
Hogg 1983, Buntin 1986, Melo y Silva 1987, Capinera 2000, Vilarinho et al. 2011). Por el contrario,
nuestros hallazgos indican un fuerte efecto de la zona de la oreja para las larvas de gusano del
ejército de otoño durante las etapas reproductivas del maíz, y la consiguiente alimentación de la
oreja en lugar del consumo de hojas. Es importante enfatizar que el alto consumo de hojas
generalmente se informa cuando las plantas de maíz todavía están en etapas vegetativas, con una
alimentación significativa en el tejido foliar en desarrollo, y hasta la fecha se sabe poco sobre la
elección larvaria del gusano del ejército de otoño durante las etapas reproductivas del maíz.

En los estudios de Brasil, en las primeras fechas de muestreo, observamos un alto número de
larvas recuperadas en la hoja donde se grapan las masas de huevo (Tabla 3). Según la literatura
(Zalucki et al. 1986, 2002; Johnson et al. 2007), durante la exploración de un sitio de alimentación
adecuado, si las larvas sondean el sustrato y reconocen que el huésped o la parte de la planta no
es adecuada, entonces es probable que la exploración continúe (Chang et al. 1985, Hochberg 1987,
Varela y Bernays 1988, Terry et al. 1989, Khan et al. 1996, Foster y Howard 1999, Zalucki et al.
2002).

Una vez que las larvas están en un huésped adecuado, generalmente se asentarán y establecerán
un sitio de alimentación (Chang et al. 1985, Hochberg 1987, Varela y Bernays 1988, Therry et al.
1989, Khan et al. 1996, Foster y Howard 1999, Zalucki et al. 2002). En general, se observó la mayor
concentración de larvas en la zona del oído desde el segundo hasta el

Tabla

Traducción página 7

Última evaluación, independiente de la etapa de maíz (Tabla 3; Fig. 1). Por lo tanto, después de la
exploración, las larvas establecieron su sitio de alimentación en la zona del oído, más
específicamente en el tejido de seda, donde se encontraron la mayoría de las larvas recuperadas
hasta que pudieron llegar a los granos.

El movimiento de las larvas en las plantas puede estar influenciado por varios factores tanto
abióticos como bióticos, como la edad, los depredadores, la luz, la arquitectura de las plantas y la
fototaxis (movimiento hacia arriba y hacia afuera; Madge 1964, Alonso y Herrera 1996, Johnson y
Zalucki 2007, Johnson et al. 2007). Aunque estos mecanismos por los cuales las larvas localizan
huéspedes adecuados o parte de los huéspedes no están claros, la presencia de depredadores no
parecía importante en nuestros estudios. No observamos ningún enemigo natural del gusano del
ejército en las plantas en el estudio de campo de EE. UU. o en el estudio de invernadero.
Aunque la infestación de gusanos del ejército de otoño se realizó por encima de la zona del oído,
las larvas se movieron hacia abajo hasta la zona del oído. Teniendo en cuenta los resultados
generales del estudio de campo, suponemos que este comportamiento se debe en parte a la
elección de la alimentación. Después de la eclosión, los recién nacidos encontrados en las plantas
infestadas permanecieron en la hoja infestada durante un corto período y luego se movieron para
encontrar un sitio de alimentación adecuado (oreja de maíz).

De hecho, observamos una baja supervivencia larvaria en las hojas en el estudio de alimentación
(Tabla S), donde a los cinco DAI hubo un 67,5% de mortalidad, y a los ocho DAI, ~82,50% de
mortalidad (Fig. 2). Aunque el gusano de la parasitación de otoño puede considerarse un folivoro,
sus larvas pueden tener un hábito de alimentación mixto. Según Scriber y Slansky (1981), y
también Bernays y Chapman (1994), para estos folivoros, la edad y la calidad de las hojas son
factores críticos que afectan el establecimiento, el crecimiento y la supervivencia de los recién
nacidos. En general, algunos factores cambian en una hoja a medida que envejece, como la
disponibilidad de agua, la tenacidad, el nitrógeno y otros factores de calidad, que pueden resultar
en una alta mortalidad neonatal, incluso si las mismas hojas son adecuadas para las estrellas
mayores (Cockfield y Mahr 1993). Estos cambios en la calidad de las hojas durante la etapa
reproductiva del maíz probablemente influyeron en la elección y la supervivencia de los recién
nacidos en nuestro estudio de campo. Además, la etapa de borla (doja abierta) parecía no ser
adecuada para las larvas de gusano de ejército de otoño, y no permitió el desarrollo (Tabla 5).

Cinco DAI, hubo un 87,5% de mortalidad, y el 100% de las larvas murieron después de 8 DAI (Fig.
2). Esto probablemente explica por qué no se encontraron larvas en la zona de borlas en los
estudios en la planta (Tabla 3).

Muchos investigadores han observado larvas de gusano de ejército de otoño alimentándose de la

estructura de la borla en los campos de maíz. Sin embargo, el daño a esta estructura siempre se
observó cuando estaba encerrada en hojas de espiral. Por esta razón, decidimos incluir esta
estructura en el estudio de alimentación, incluso si la borla encerrada en hojas de verticilo, o borla
verde, no estaba disponible para las larvas en las etapas de maíz evaluadas.

Se confirmó una alta supervivencia de las larvas y un desarrollo rápido para las larvas criadas en
esta estructura; sin embargo, las pupas restantes tenían el peso más bajo en comparación con las
criadas en los otros tejidos de maíz. Del mismo modo, las larvas criadas en tejido de seda tuvieron
resultados similares (Tabla 5).

Probamos diferentes fuentes de tejido en función de posibles escenarios de alimentación. Para L-S-
K (hoja-seda-núcleo-núcleo), 5d de la alimentación de tejido foliar parecía ser excesiva para los
recién nacidos de gusano de ejército de otoño, lo que resultó en un ~55% de mortalidad (Fig. 2).
Para el escenario de alimentación T-L-S-K (tassel-leaf-silk-kernel), la supervivencia de las larvas tuvo
un valor intermedio (Tabla 5). Sin embargo, todas las larvas que se alimentaban de granos tenían
un mayor peso de pupa (Tabla 5). Los granos parecen tener algún efecto positivo en el desarrollo
del gusano del ejército de otoño, ya que las larvas criadas solo en esta estructura mostraron un
desarrollo más rápido en comparación con las larvas criadas en los otros tejidos y escenarios (Tabla
5).
Sobre la base de nuestros resultados, concluimos que el tejido de la oreja de maíz tiene un fuerte
efecto positivo en la elección de alimentación de las larvas del gusano del ejército de otoño y la
supervivencia durante la etapa reproductiva del maíz, y la elección del lugar de alimentación
parece ser realizada por los primeros estrellas. Sugiere que las hojas de maíz no son adecuadas
para el desarrollo temprano en el maíz en etapa reproductiva. Lo

También es posible que los tejidos de la seda y el grano desempeñen un papel en la supervivencia
de las larvas y el desarrollo de las larvas de gusanos del ejército de otoño. La seda parece
proporcionar refugio y un microclima ideal para el desarrollo temprano de las larvas, y los granos
parecen tener alguna calidad nutricional positiva para el desarrollo de las larvas.

Teniendo en cuenta la implementación de los programas de manejo de plagas, hay un breve

intervalo entre la eclosión del huevo del gusano de lacayo de otoño y el establecimiento de larvas
en la oreja en el maíz en la etapa reproductiva. El establecimiento de larvas en la espiga de maíz
probablemente proporcionaría refugio a las larvas y, en consecuencia, reduciría la eficiencia de
algunas estrategias de control, como la aplicación de insecticidas (por ejemplo, la pulverización). La
aplicación de insecticida, cuando sea necesario, debe hacerse antes de que las larvas colonicen la
oreja y durante la exploración de larvas, cuando estén expuestas al control de insecticidas. El
conocimiento sobre el movimiento de las larvas en las plantas y el comportamiento de
alimentación también es necesario para las estrategias de manejo de la resistencia a los insectos.

Existe un potencial de variabilidad de la expresión de la toxina Bt en diferentes tejidos de maíz

(Nguyen y Jehle 2007, Székács et al. 2010), y esto debería ser un foco de estudios futuros,
especialmente para los insectos que tienen diferencias de alimentación específicas de la etapa de
la planta o un comportamiento de alimentación mixto, donde los insectos podrían estar expuestos
a dosis letales o subletales de toxinas (Paula-Moraes et al. 2012).

En el caso del gusano del ejército de otoño, los resultados indican que las larvas de gusano de
ejército de otoño establecieron con éxito un sitio de alimentación en la oreja. Tal establecimiento
de alimentación puede exponer a las larvas a una menor concentración de toxinas que se
encuentra en los granos de maíz (Nguyen y Jehle 2007, Székacs et al. 2010, Burkness et al. 2011).
Del mismo modo, las larvas pueden estar expuestas a niveles intermedios de toxinas en un refugio
con espigas de maíz de polinización cruzada. Ambos escenarios pueden acelerar la selección de
resistencia (Chilcutt y Tabashnik 2004, Ives et al. 2011, Razze y Mason 2012). En las zonas
templadas, como en el Cinturón del Maíz de EE. UU., las poblaciones seleccionadas de gusanos de
otoño no pasarían el invierno, pero la presión de selección puede agravarse en áreas tropicales,
como Brasil. El gusano del ejército de otoño puede tener hasta 12 generaciones al año (Capinera
2000), y varias generaciones ocurren durante las etapas de reproducción del maíz. Estos factores
requieren atención en el desarrollo de cualquier estrategia de gestión de la resistencia a los
insectos.

Agradecimientos

Agradecemos a Logan Dana su apoyo técnico. También agradecemos a la Coordinación para la

Mejora del Personal de Nivel Superior o Educación (CAPES) por una beca de doctorado otorgada al
primer autor, y al Consejo Nacional para el Desarrollo Científico y Tecnológico (CNPq) por la beca
de productividad en la investigación otorgada al segundo autor.