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Sistemática y Evolución Vegetal (2022) 308:27

https://doi.org/10.1007/s00606-022-01817-z

ARTÍCULO ORIGINAL

Flores de invierno para abejas: biología reproductiva de Trixis praestans

(Asteráceas)

Camila Cufa1 · María Carolina Cerino2 · Pablo Andrés Tomas2 · Eliana de Luján Exner2

Recibido: 11 junio 2021 / Aceptado: 27 abril 2022

© Los autores, bajo licencia exclusiva de Springer-Verlag GmbH Austria, parte de Springer Nature 2022

Resumen
El arbusto Trixis praestans (Asteraceae) se encuentra ampliamente distribuido en Argentina, Brasil, Uruguay y Paraguay. Tiene un gran
potencial como recurso melífero, ya que su abundante floración se produce en invierno (cuando la oferta de flores es escasa) y primavera,
y es intensamente visitado por las abejas melíferas. Este estudio proporciona información sobre algunos aspectos de la biología reproductiva,
que son esenciales para el cultivo, conservación y reproducción de la especie. Se observó la fenología de la floración, la biología foral y los
visitantes forales. El mecanismo de fructificación se evaluó a través de experimentos manipulativos, análisis embriológicos y caracterización
genotípica de la descendencia utilizando marcadores de ADN molecular. La longevidad de la flor fue de 3,5±1 días y la duración del capítulo
en estado foral fue de 15±6 días; el pico de floración se produjo a mediados de agosto. Los visitantes florales pertenecieron a nueve
especies de los órdenes Hymenoptera, Diptera y Lepidoptera. Apis mellifera fue la especie más abundante y mostró comportamiento de
forrajeo de polen y néctar. El cuajado de frutos fue un 70% mayor en los tratamientos de polinización abierta y polinización cruzada manual
(xenogamia) que en los tratamientos de autopolinización manual y autopolinización autónoma. El análisis embriológico indicó una vía de
desarrollo sexual que originó un saco embrionario reducido (gametofito femenino). El análisis molecular mostró una prevalencia de
fertilización cruzada en frutos derivados de polinización abierta. Con base en los resultados, concluimos que T. praestans es una especie
sexual en la que predomina la xenogamia y que los polinizadores son necesarios para la fructificación.

Palabras clave Apis mellifera · Apicultura · Sistema de cría · Flores silvestres melíferas

Introducción especies es una estrategia para aumentar la disponibilidad y

Las abejas dependen de los recursos forales (especialmente
néctar y polen) para una nutrición adecuada (Wright et al. 2018;
Brodschnei der y Crailsheim 2010). Las áreas de abundancia foral
y riqueza de especies están en drástica reducción debido
principalmente a la intensifcación del uso del suelo asociado a los monocultivos
y prácticas agrícolas perjudiciales (Naug 2009; Ollerton et al.
2014; Goulson et al. 2015). El enriquecimiento de entornos
seminaturales y periurbanos con plantas hospedantes
Editor de manejo: Mauricio Bonifacino.
* Camila Cufa
cami.cufa@gmail.com
1 donde el desarrollo de actividades agrícolas convencionales es
Instituto de Ciencias Agropecuarias del Litoral, Facultad de
Ciencias Agrarias, Universidad Nacional del Litoral -
Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas,
Kreder 2805, 3080 Esperanza, Argentina
2
Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad Nacional del
Litoral, Calle 2805, 3080 Esperanza, Argentina
diversidad de recursos forales y, por lo tanto, mejorar la nutrición
de las abejas en todo el mundo (Decourtye et al. 2010; Vaudo et
al. 2015; Danner et al. 2016). Estas acciones son especialmente
importantes en América del Sur, donde hay registros de altas
pérdidas de colonias (Maggi 2016) debido al estrés nutricional, lo
que contribuye al efecto sinérgico de muchos otros factores estresantes (Naug 20
Las plantas hospedantes silvestres para las abejas melíferas
tienen el potencial de ser utilizadas como recursos fitogenéticos
para los programas de nutrición apícola. Numerosas especies de
fora argentina fueron mencionadas como fuente de recursos
abundantes y de alta calidad; además, contribuyen a la diversidad
de la dieta (Andrada y Tellería 2005; Fagúndez et al. 2016; Forcone
et al. 2011; Galetto y Bernardello 2003). Las especies nativas
tienen la ventaja de adaptarse a la variabilidad ambiental (Endler
1986; Street et al. 2016), incluido el estrés edafoclimático en áreas
difícil. La selección de especies nativas requiere de un proceso de
priorización basado en criterios de interés para la apicultura,
incluyendo la fenología de la floración, la calidad de las recompensas
de las flores, la intensidad de uso, entre otros (Zabala et al. 2021).

Vol.:(0123456789) 1 3
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Por lo tanto, el conocimiento de aspectos básicos de las especies
vegetales, como su sistema reproductivo, es un prerrequisito fundamental
para el aprovechamiento de su germoplasma (Hay y Probert 2013).
Trixis praestans (Vell.) Cabrera (Nassauvieae, Aster aceae) es un
recurso vegetal silvestre prometedor para mejorar la nutrición de las
abejas melíferas. Este arbusto está ampliamente distribuido en Argentina,
Brasil, Uruguay y Paraguay y fue identificado como recurso alimenticio
para varias especies de la fauna de abejas (Steiner 2010), incluyendo
Apis mellifera L. (Lusardi et al.
2005). De hecho, su polen se encontraba frecuentemente en miel y
propóleos (Salgado 2000; Telleria 2009). Trixis praestans
Florece de mayo a septiembre (Katinas 2015), lo cual es un rasgo
destacable para la actividad apícola. Los recursos disponibles en este
período, ya sean consumidos o almacenados, aumentan la supervivencia
de las colonias al mejorar la fisiología de las abejas (Alaux et al. 2017;
Smart et al. 2016). Las comunidades florísticamente diversas son
importantes para fortalecer las colonias en el período previo al invierno,
cuando las tasas de mortalidad de las abejas domésticas son altas debido
a la falta de alimentos en las regiones templadas (Steinhauer et al. 2014).
En la enorme familia Asteraceae, los sistemas de reproducción
exhiben una diversidad considerable. La autoincompatibilidad es un
mecanismo frecuente en esta familia, y algunas especies exhiben
autoincompatibilidad y autocompatibilidad parciales (Ferrer y Good-Avila
2007). Se ha observado la presencia de apomixis y autogamia en varias
especies (Werpachowski et al.
2004; Hojsgaard et al. 2014). En cuanto a la biología foral, la dicogamia
protándrica y la presentación secundaria de polen son características
distintivas de la familia (Erbar y Leins 2015). Las características
embriológicas típicas del desarrollo del megagametofito Asteraceae
muestran la presencia de endospermo celular y sacos embrionarios del
Fig. 1 Trixis praestans (Aster aceae).
a Plantas en un bosque dominado por
Schinopsis bal ansae (07/08/2016,
Malabrigo, Santa Fe, Argentina); b capitu
lum con todas las flores bilabiadas; C
Apis mellifera visitando las flores; d
cypselae con papus. Las imágenes a y b
se obtuvieron de
Base de datos IRUPÉ http://www.fca.
unl.edu.ar/prodocova/IRUPE/
índice2
13
C. Cufa et al.
tipo poligonal; También se observaron óvulos anátropos, unitegmáticos y
tenuinucelados (Johri et al. 1992). Los estudios de polinización indican el
predominio de la entomofilia en las especies de Aster aceae, incluidos los
insectos visitantes forales de los órdenes Hymenoptera, Lepidoptera,
Diptera y Coleoptera (Torres y Galetto 2002; Shabir et al. 2013). Para las
especies de Trixis P. Browne, los únicos dos trabajos publicados
previamente sobre aspectos reproductivos mencionaron la presencia de
apomixis en T. verbascifolia (Gardner) Blake (Werpachowski et al. 2004)
y la polinización mediada por insectos, principalmente por Diptera e
Hymenoptera en T. divaricata (Kunth) Spreng var. descolorar
(D. Don) Griseb (Torres y Galetto 2002). Además, T. divaricata (Kunth)
Spreng subsp. divaricata se observó con polinización ornitófila (Katinas
1996).
Para proporcionar más información sobre la biología reproductiva de
T. praestans, (a) describimos la fenología de floración; (b) visitantes de
flores identifcadas; (c) evaluaron su sistema de reproducción a través de
polinizaciones controladas y análisis molecular de la progenie derivada de
la polinización abierta; y (d) estudió el desarrollo del gametofito femenino
(saco embrionario).
materiales y métodos
Especies de estudio
Trixis praestans está compuesta por arbustos heliófilos, de 1 a 4 m de
altura (Fig. 1a), ampliamente distribuidos en Argentina, Brasil, Paraguay
y Uruguay (Katinas 1996, 2015). Crece en suelos alimentados con modi
a lo largo de los bordes de los caminos, en laderas rocosas y en los
márgenes de las riberas. A veces ocurre en bosques y ambientes
montañosos desde el nivel del mar hasta los 1400 m snm (Katinas 1996, 2015);
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Flores de invierno para abejas: biología reproductiva de Trixis praestans (Asteraceae)
las ramas y las hojas son pubescentes; hojas de 7–22 cm de largo,
membranosas; capítulos isomorfos, forets 25–30, perfectos, corolas
de 8–11 mm de largo bilabiadas (Fig. 1b); anteras sagitadas; ramas
del estilo truncadas y coronadas apicalmente por un penacho de
papilas (tricomas colectores); cypselae de 1.5 a 6.0 mm de largo,
papus de 7 a 8 mm de largo, uniseriadas, amarillas (Fig. 1d) (Katinas
1996, 2015).
Material vegetal
El material vegetal evaluado se obtuvo de 40 individuos (n=10
individuos por población de cuatro poblaciones) cultivados en un
campo experimental en la Facultad de Ciencias Agropecuarias,
Universidad Nacional del Litoral (FCA-UNL), Esperanza, Argentina
(31° 27ÿ S, 60° 56ÿ O). Los individuos fueron recolectados vivos
(desenterrados) de diferentes lugares de la provincia de Santa Fe,
Argentina (Cuadro 1), y sembrados al azar en parcelas experimentales
un año antes del inicio de los ensayos. Los especímenes de referencia
de cada población fueron depositados en SF (acrónimos según Thiers,
continuamente actualizados) de la FCA-UNL (Online Resource 1).
Fenología
Se describió el inicio, pico y final de la floración a nivel individual de 14
individuos seleccionados al azar (n=7 individuos de dos poblaciones).
Se registró la proporción de capítulos en cada individuo en los
siguientes estados: (a) yema madura; (b) flor abierta (desde la primera
hasta la última flor abierta); y (c) fruto, semanalmente durante 102 días
hasta que todas las ramas presentaran sólo frutos.
Para describir la longevidad del capítulo y la duración de la
presentación del polen y la receptividad estigmática, marcamos 10
capítulos sin abrir (todos los forets en la etapa de yema madura antes
de la antesis) en tres individuos por población de dos poblaciones (N
= 60 capítulos). En cada capítulo, describimos la duración de los
siguientes estados fenológicos: (I) bosque externo en fase estaminada
y bosque central en etapa de brote, (II) bosque externo en fase
pistilada y bosque central en fase estaminada, (III) bosque externo
marchito y bosques centrales en fase pistilada, (IV) todos los bosques
marchitos
Cuadro 1 Origen de los individuos de Trixis praestans cultivados en el campo experimental de la Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad Nacional del Litoral,
Esperanza, Argentina (31° 27ÿ S, 60° 56ÿ O)
ID GB Departamento Sitio
311 San Javier La Brava, Estancia 'El Matrero II'
312 San Javier Alejandra, 2 km N al canal 'Pájaro blanco'
360 vera RP 98 de Vera a Tostado, Campo Fundapaz
364 San Javier Alejandra, Estancia 'Pancho Cue'
ID GBnúmero de identificación en el banco de germoplasma 'Ing. Agr. Número de identifcación de José Mario Alonso y cédula en el Herbario SF de la Universidad Nacional
del Litoral, Esperanza, Argentina
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y fruto en desarrollo (ver Fig. 2). Las fases estaminada y pistilada se
definieron por el inicio y la duración de la presentación del polen y la
receptividad estigmática, respectivamente. Las fases se registraron
cada dos días desde la dehiscencia de la yema hasta el marchitamiento
inicial. La disponibilidad de polen y la producción de néctar se
determinaron cualitativamente observando a simple vista la presencia
de granos de polen en las anteras y el néctar dentro de la corola. La
receptividad estigmática se evaluó bajo estereomicroscopio binocular
con una solución de guayacol 0,1 M y peróxido de hidrógeno 0,1 M,
con cambio de color (de blanco a marrón) y burbujeo del estigma que
indica tejido receptivo.
visitantes florales
El comportamiento de alimentación y la riqueza de visitantes forales
diurnos se evaluaron mediante observaciones directas y captura de
insectos durante dos temporadas reproductivas consecutivas (2017-2018).
Las observaciones se realizaron entre las 11:00 y las 15:00 h durante
un período de 4 días no consecutivos en agosto de 2017 y 2018
(tiempo total de observación: 960 min por año). Se observaron
individuos (n=40 por año) cuando las condiciones climáticas permitieron
la actividad de forrajeo de los visitantes. Los visitantes florales fueron
capturados con redes entomológicas cuando se alimentaban de T. praestans
flores, mantenidas en un congelador a -20 °C durante 48 h, y luego
conservadas en cajas entomológicas antes de su identifcación.
sistema de crianza
Ensayos de polinización
El mecanismo de fructificación se determinó mediante la realización
de cuatro experimentos de manipulación en un número conocido de
flores no polinizadas durante dos temporadas reproductivas
consecutivas (2017-2018). Los tratamientos fueron: (a) polinización
abierta (control): capítulos no manipulados expuestos a polinización
libre; (b) autopolinización autónoma (autofecundación espontánea
dentro de las flores): capítulos con todas las flores en la etapa de
yema cubiertas con bolsas de gasa; ausencia de polinización manual;
c) autopolinización manual (autocompatibilidad): capítulos con todos
los fores en la etapa de yema cubiertos con bolsas de gasa y
posteriormente polinizados a mano con polen del mismo genotipo
Coordenadas geográficas ID SF
30° 51´ 0,38´´ S; 60° 15´ 5,52´´ O 29° 48´ C410
30,5´´ S; 59° 47´ 47,5´´ O C 411
29° 27, 240´S; 60° 18,156 O 29° 92 P10303
´ 0,57´´ S;65° 81´ 5,69´´ O C417
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27 Página 4 de 11 C. Cufa et al.

Fig. 2 Etapas fenológicas de la

inflorescencia de Trixis praestans . a, b
I-bosques externos en fase estaminada
y fores centrales en etapa de yema, c II-
bosques externos en fase pistilada y
fores centrales en fase estaminada, d

III-bosques marchitos externos y fores

centrales en fase pistilada.

En representación esquemática:
círculosbosques amarillos en fase
pistilada, círculosbosques blancos en fase
estaminada, círculos grisesbosques
marchitos. Barra de escala 2 mm

(los capítulos se embolsaron en gasa después de la polinización hasta
la evaluación del cuajado); y (d) polinización cruzada manual (xenogamia):
capítulos con todas las flores en la etapa de yema cubiertas con bolsas
de gasa y posteriormente polinizadas a mano con polen de otro genotipo
de población (las flores fueron embolsadas en gasa después de la
polinización hasta la evaluación del cuajado).
La polinización manual se realizó en la “fase pistilada”
(Fig. 3c, d), cuando los estigmas eran receptivos, al cepillar polen fresco
a través de un estigma hasta que la deposición de granos de polen fuera
visible a simple vista. Las bolsas de gasa se volvieron a abrir todos los
días y los forets se polinizaron hasta que todos los estigmas presentaron
una coloración marrón (Fig. 3e). Los tratamientos fueron

Fig. 3 Desarrollo de Trixis praestans forets. a, b fase estaminada; c, d fase pistilada; e estigmas con coloración marrón; f corola marchita cae. pg granos de polen, ramas estilo sb . Barra de
escala 2 mm

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Flores de invierno para abejas: biología reproductiva de Trixis praestans (Asteraceae)
se compararon mediante la variable cuajado (porcentaje de frutos en
relación al número inicial de forets per capitulum). El número inicial de
forets por capítulo se cuantificó en 30 capítulos por genotipo tratado.
Análisis embriológico
Se estudió el desarrollo del gametofito femenino (saco embrionario).
Inflorescencias en diferentes etapas de crecimiento de todas las
poblaciones se fijaron en FAA (formalina, ácido acético y alcohol al 70%
en 5:5:90) durante 48 h (Ruzin 1999) y se almacenaron en etanol al
70%. El material diseccionado se deshidrató en una serie de alcohol-xilol
y se incrustó en cera de parafina (Zar lavsky 2014). Se cortaron
secciones (de 7 a 9 ÿm de espesor) con un micrótomo rotatorio (Reichert
Technologies, Austria) y se tiñeron con safranina y verde rápido
(Zarlavsky 2014). Las fotografías fueron tomadas con una cámara Canon
EOS RebelT2i (DS126271).
Confirmación molecular de la fertilización cruzada
Se utilizaron marcadores moleculares de repetición de secuencia
intersimple (ISSR) para analizar el tipo de polinización que produjo frutos
y las diferencias genéticas entre los padres y su descendencia. Se
analizó la presencia de bandas paternas en 23 descendientes de 7
madres aleatorias de tres poblaciones. El ADN genómico total se extrajo
de 500 mg de hojas jóvenes cortadas de progenitores femeninos y sus
descendientes, que se obtuvieron del tratamiento de polinización abierta,
utilizando un protocolo de bromuro de cetil trimetilamonio (CTAB) (Doyle
y Doyle 1990).
Después de la extracción, las muestras se trataron con ARNasa
pancreática (concentración final de 10 ÿg/ml), y el ADN se resuspendió
en Tris-HCl 10 mM pH 8 y se almacenó a -20 °C hasta su uso. Los
análisis moleculares se realizaron utilizando siete cebadores ISSR, que
se seleccionaron por su reproducibilidad de polimorfismos y patrones de
bandas. Todas las reacciones de PCR se realizaron en un volumen de
20 µl que contenía 25 ng de ADN, 0,2 mM de cada dNTP, 2,5 mM de
MgCl2, 1 µM del cebador respectivo y 1 unidad de ADN polimerasa Taq
(Embiotec, Argentina). Las amplificaciones se realizaron en un
termociclador Techne TC-312, y consistieron en 2 min a 94 °C, seguido
de 39 ciclos de 45 s cada uno a 94 °C, 45 s a la temperatura de recocido
(Tm) del cebador correspondiente y 90 s a 72 °C, con una extensión
final de 7 min a 72 °C.
Los productos amplificados se extendieron en geles de agarosa al
1,2% con tampón TAE 1X a 100 V. Se utilizó un marcador de ADN de
100 pb (Fermentaciones) como estándar de peso molecular. Los geles
se tiñeron con colorante fluorescente GelRed (Genbiotech) y los patrones
de bandas se visualizaron con un transiluminador UV.
Se realizaron comparaciones con el genotipo parental correspondiente;
la presencia de bandas paternas (ausentes en la hembra
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progenitor, pero presente en la progenie) se registró como un indicador
de cruzamiento.
En el análisis genético de la descendencia de T. praestans , se
eligieron las progenies del tratamiento de control solo para el análisis
molecular, asumiendo que el 100% de los individuos procedían del cruce
en el tratamiento de polinización cruzada manual; se empleó este
procedimiento porque no era posible obtener frutos por autofecundación
forzada. Por lo tanto, la prueba por polinización abierta era la única
forma de verificar el origen y de indicar el tipo de polinización que ocurría.
Los cebadores se eligieron en base a una prueba previa de la capacidad
de discriminación entre progenitores, asumiendo que el origen probable
del polen son los individuos de las poblaciones presentes en nuestro
campo experimental. Estos individuos pueden provenir o no de la misma
población, por lo que la capacidad de cada iniciador para demostrar la
variabilidad intrapoblacional es clave para la eficiencia de la técnica (Lin
et al. 2010; Tomas et al. 2017). Por otra parte, se asumió que una alta
proporción de loci se encuentran en estado heterocigoto según el tipo de
polinización que predomine, por lo que la efectividad de cada cebador
estuvo relacionada con el número de fragmentos generados (Tomas et
al. 2013).
análisis estadístico
Las diferencias en el número de capítulos en cada etapa foral durante la
floración se evaluaron en muestras independientes mediante una prueba
t (previamente se probó la normalidad y la homogeneidad de las
varianzas). Las fases florales y los estados de inflorescencia se
analizaron mediante un análisis descriptivo. Los tratamientos de
polinización se aplicaron en un diseño de bloques completos al azar,
con el individuo como factor de bloqueo (n en el Cuadro 3) y el número
total de inflorescencias (capítulos) por tratamiento por individuo como
unidad experimental. El número total de flores e inflorescencias
manipuladas por tratamiento varió entre tratamientos (ver Tabla 3). Las
diferencias en el cuajado de frutos por tratamiento se analizaron
ajustando modelos lineales generales (GLM)
(Pinheiro et al. 2011) y usando el lenguaje estadístico R (R Core Team
2011) a través de la interfaz 2011 provista por InfoStat (Di Rienzo et al.
2011). Las medias de los tratamientos se compararon mediante la
prueba de Di Rienzo, Guzmán y Casanoves (Di Rienzo et al. 2002). La
normalidad y la homocedasticidad se probaron gráficamente, utilizando
las gráficas Q-Q y residual versus predictor, respectivamente (Pinheiro
et al. 2011).
Resultados
Fenología
En las dos poblaciones evaluadas, la floración se inició en los primeros
días de julio, cuando los individuos presentaron inforescencias maduras,
con flores iniciando la antesis. El período de floración se alcanzó a
mediados-finales de agosto (76-80 días
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27 Página 6 de 11 C. Cufa et al.

Cuadro 2 Visitantes florales capturados en las inflorescencias de Trixis praestans en fase, las ramas del estilo se extendieron y la corola adquirió una
el campo experimental de la Facultad de Ciencias Agrícolas, Universidad Nacional del coloración amarillo pálido (Fig. 3c, d). Posteriormente, los estigmas
Litoral, Esperanza, Argentina (31°
recurrentes se tornaron marrones y la corola marchita se cayó (Fig.
27ÿ S, 60° 56ÿ W) durante las temporadas reproductivas de 2017 y 2018
3e, f).
Ordenar Familia Especies

dípteros Sírfidos Allograpta sp.

visitantes florales

Copestylum sp.

Ocyptamus meridionalis Fluke Se observaron diez especies de insectos pertenecientes a los órdenes

Palpada elegans Blanchard Hymenoptera (cinco especies), Diptera (cuatro especies) y Lepidoptera

himenópteros ápidos Apis mellifera Linneo (una especie) visitando las flores de T. praestans

Xilocopa artifex Smith (Tabla 2). Muchos individuos de abejas domésticas (Apis mellif era)

Xilocopa sp. estuvieron presentes durante las dos temporadas de floración

Halictidae Augoclora sp. evaluadas (2017-2018). Los individuos de esta especie se desplazaron

Véspidae Polibia occidentalis Oliver dentro del capítulo y visitaron varias flores de forma secuencial;

lepidópteros Arctiidae Filoros opaca Boisduval chupaban néctar y transportaban polen en sus ménsulas (Fig. 1c).

Los individuos de la mosca sírfida (Copestylum sp.) aterrizaron en

el capítulo, recolectaron néctar y depositaron polen en la parte ventral
Cuadro 3 Porcentaje de cuajado por inflorescencia en diferentes tratamientos del abdomen durante las visitas. Individuos de A. mellifera y Copestylum
realizados para evaluar el sistema reproductivo de Trixis praestans en las épocas spp. contacto con la superficie estigmática durante las visitas. El resto
reproductivas de dos años consecutivos (2017 y 2018)
de las especies recolectadas (como Xylocopa artifex) realizaron visitas
esporádicas, en algunos casos extremadamente breves; por lo tanto,
Tratamiento norte
Set de frutas (%)
no fue posible verificar el uso de ningún tipo de recurso foral.
2017 2018

Polinización abierta 42/3 67/6 79± 2a 91± 1a

– 23/7 – sistema de crianza
Polinización cruzada manual 89± 1a

Autopolinización manual 10/3 10/3 7± 4b 42/6 8± 2b

Ensayos de polinización
Autopolinización autónoma 10/3 2± 6b 2± 1c

Abreviaturas: n número de capítulos polinizados/número de genotipos, – ausencia de

tratamiento. Letras diferentes dentro de la columna indican diferencias signifcativas
según la prueba de Di Rienzo, Guzmán y Casanoves (DGC) a p<0.05
después del inicio de la floración), cuando los individuos de ambas
poblaciones presentaron el 50% de sus capítulos con flores abiertas.
Los primeros frutos se formaron a finales de julio. La floración finalizó
a mediados de septiembre, cuando todos los capítulos estaban fructificados.y 2018, respectivamente) y autopolinización autónoma (2 % para
La longevidad del capitulum fue de 15 ± 6 días, desde el momento
en que las flores externas estaban en fase estaminada (Fig. 2a) hasta
el momento en que las flores del centro de la inflorescencia estaban
en fase pistilada y las flores exteriores marchitas (Fig. 2d). En el
capítulo, la presentación de polen ocurrió a los 6,5 ± 2,5 días y la
receptividad estigmática a los 8 ± 3 días. El desarrollo de diferentes
capítulos dentro del individuo no fue sincrónico.
La longevidad de los flósculos de T. praestans fue de 3,5 ± 1 días
(desde el momento en que se separaron los lóbulos de la corola hasta
que se marchitaron las ramas del estilo). Durante la fase estaminada
(presentación de polen por ramas de estilo), la corola presentó una
coloración amarilla intensa y se produjo producción de néctar (Fig. 3a,
b). Al principio del pistilado
El cuaje de frutos varió entre tratamientos y entre las épocas
reproductivas 2017 y 2018 (2017: F=167.63, p < 0.0001, R2 = 0.87;
2018: F = 2438.53, p < 0.0001; R2=0.98) (Cuadro 3). El cuajado de
frutos fue alto en los tratamientos de polinización abierta y polinización
cruzada manual. En estos tratamientos, las flores de T. praestans
produjeron al menos un 70% más de frutos que en los tratamientos de
autopolinización manual (autocompatibilidad) y autopolinización
autónoma (autofecundación espontánea dentro de la flor). El cuajado
de frutos fue más bajo en autopolinización manual (7 y 8 % para 2017
ambos años), con diferencias significativas.
Análisis embriológico
Todos los individuos estudiados presentaron un solo gametofito
femenino por óvulo. Una célula archesporial se diferenció del tejido de
la nucela y funcionó como la célula madre de megasporas (mmc) (Fig.
4a). Este mmc se dividió por meiosis, lo que resultó en una tétrada
lineal de megasporas haploides (Fig. 4b). De estos, la megaspora
chalazal (cm) se volvió funcional, mientras que los tres restantes
degeneraron (dm) (Fig. 4c). La megaspora funcional, a través de
sucesivas divisiones mitóticas acompañadas de la formación de una
pared, dio lugar a un gametofito femenino.

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Flores de invierno para abejas: biología reproductiva de Trixis praestans (Asteraceae)
Fig. 4 Microfotografías de óvulos de Trixis praestans . una célula madre de megasporas, b
tétrada de megasporas lineales, c megasporas viables y megasporas degeneradas, d, e, f
Gametofito femenino tipo Polygonum con un óvulo, dos sinérgidos, dos núcleos polares y
tres antipo
compuesto por dos células sinérgicas (s), un óvulo (ec), dos núcleos
polares (pn) y tres células antípodas (a) (Fig. 4d, e, f).
Análisis de la diversidad genética de la descendencia
Las progenies se analizaron a partir del tratamiento de polinización
abierta (control). Los cebadores ISSR generaron diferentes números de
bandas polimórficas (entre 3 y 22). Se seleccionaron dos cebadores,
(AC)8YG y (TG)8RC (Y =T+C; R= G + A), en función del número de
fragmentos polimórficos generados y su capacidad para diferenciar los
genotipos maternos.
Al registrar las bandas paternas con solo los dos cebadores ISSR
seleccionados, pudimos confrmar el origen cruzando el 70% de los
genotipos estudiados, sin que se observaran diferencias obvias entre las
progenies de las diferentes madres. El número de bandas paternas por
individuo fue bajo; de hecho, el número de bandas parentales promedio
por genotipo fue de 1,27 para el iniciador (AC)8YG y de 1,13 para el
iniciador (TG)8RC.
Página 7 de 11 27
células dal. a células antípodas, cm megasporas chalazales, dm megasporas degeneradas,
ec óvulo, mm megasporas micropilares, mmc megasporas célula madre, núcleos polares
pn , s células sinérgicas. Barra de escala 50 µm
Discusión
Los resultados del presente estudio mostraron que Trixis praestans
es una especie en la que predomina la xenogamia y depende de
vectores polínicos para el cuajado. Estos hallazgos son consistentes
con los generalmente propuestos para Asteraceae, con prevalencia de
alogamia (Cabrera y Dieringer 1992; Demauro 1993; Brennan et al.
2003; Hiscock 2000; Young et al.
2002). Los resultados obtenidos en los ensayos experimentales indican
la presencia de algún tipo de autoincompatibilidad, ya que el cuaje de
frutos bajo autopolinización manual (autocompatibilidad) fue
signifcativamente bajo (<8%). La autoincompatibilidad esporofítica es el
tipo más común de autoincompatibilidad que se encuentra en Asteraceae
(Ferrer y Good-Avila 2007; Allen et al. 2011) y es susceptible de ser
interrumpida esporádicamente; es común un bajo cuajado con el propio
polen de la planta (Lloyd y Schoen 1992). Se demostró la incapacidad
de producir frutos por autopolinización espontánea para Trixis divaricata
var. descolorar
(Torres y Galetto 2008). Es posible que T. praestans
presenta este mecanismo de autoincompatibilidad; se necesitan estudios
adicionales para confirmar esta suposición.
Los análisis moleculares de descendencia apoyaron los hallazgos
obtenidos de los tratamientos de polinización, ya que los resultados
indicaron prevalencia de fecundación cruzada en cuajado de frutos bajo
polinización abierta, con base en trabajos de verifcación realizados con
13
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27 Página 8 de 11
solo dos cebadores, e incluso con un bajo número de bandas paternas por
cebador. El número de bandas paternas en las pruebas de paternidad está
directamente relacionado con los niveles de polimorfismo que presenta cada
padre, en comparación con otros padres individuales (Conceição et al. 2011;
Tomas et al. 2013). Asimismo, los análisis embriológicos descartan la ocurrencia
de eventos apomícticos, como aposporía, diplosporía o embrión adventicio,
debido a la reducción meiótica del material genético durante la formación de
una tétrada de megasporas que continúan el desarrollo normal (Koltunow 1993).
Las características embriológicas observadas en T. praestans concuerdan con
las características generales propuestas para Asteraceae (Johri 1992).
La fenología observada de las poblaciones de T. praestans es consistente
con los registros de Katinas (2015), quien encontró que el período de floración
ocurre en otoño-invierno. Sin embargo, puede extenderse al período primavera-
verano, ya que existen registros de floración tardía (GBIF.org 2021). Capitula
siguió el patrón de maduración centrípeta común a Aster aceae (Lane 1996;
Wagenius 2004; Wetzstein et al. 2014).
Las etapas fenológicas se superpusieron temporalmente entre bosques dentro
del capitulum; por lo tanto, la deposición de polen propio sobre los estigmas es
posible debido al movimiento de los visitantes forales, aumentando la
probabilidad de autopolinización.
Sin embargo, el porcentaje de cuaje de frutos por autopolinización manual fue
bajo, lo que apoya la posibilidad de algún tipo de autoincompatibilidad.
El conjunto de visitantes forales de T. praestans estuvo compuesto
principalmente por himenópteros y dípteros, lo cual es consistente con la
actividad polinizadora observada en otros estudios de Asteraceae (Lane 1996;
Torres y Galetto 2002; Cerana 2004; Czarnecka y Denisow 2014; Camina
2019) . Este ensamblaje fue menos diverso que el de otras especies de
Asteraceae de Argentina (Cerana 2004; Torres y Galetto 2008). El conjunto en
los hábitats nativos de la especie es probablemente más diverso y puede incluir
visitantes forales nocturnos. Dado que las flores permanecen abiertas durante
la noche y sus flores tienen un intenso aroma dulce, esta especie podría resultar
atractiva para el visitante nocturno perteneciente a los lepidópteros y coleópteros,
al igual que ocurre con otras especies de la familia (Torretta et al.
2009; Torres y Galetto 2008). Entre los visitantes, A. mellif era se destacó por
la alta frecuencia de visitas efectivas (es decir, contactaron con los órganos
reproductivos de las flores). Aunque el uso intensivo del recurso no
necesariamente se traduce en un alto contenido de polen coespecífico
compatible (Wilson y Thomson 1991), el alto porcentaje de cuaje de frutos bajo
polinización abierta nos permite sugerir que A. mellifera se encuentra entre los
polinizadores diurnos de T. praestans.
Trixis praestans es visitado por muchos insectos probablemente debido a
sus diversos rasgos forales, como olor, estructura, color y recompensas; estas
exhibiciones forales atraen polinizadores (Belsare et al. 2009). La especie tiene
flores dentro de la inflorescencia y un intenso olor foral (Katinas 1996); el primer
rasgo es muy elegido debido a la relación entre el tamaño de la flor
13
C. Cufa et al.
y contenido de néctar (Dufeld 1993). La coloración de las flores se asocia con
la recompensa del néctar (Giurfa et al. 1995), y las abejas melíferas suelen
elegir el amarillo (Real 1981), probablemente porque este color es más fácil de
detectar que otros (Papiorek 2016).
Con respecto a las recompensas por las flores, los polinizadores pueden
ser selectivos y modular su comportamiento de búsqueda de alimento en
plantas con alto valor nutricional (Hendriksma y Shafr, 2016; Vaudo et al.
2020). Se ha informado que el contenido de proteína del polen de Asteraceae
es relativamente bajo en comparación con otras familias (Nicolson y Human
2013; Somerville y Nicol 2006; Vaudo 2020). Sin embargo, se ha encontrado
que el contenido de proteína del polen de la familia es variable (Tellería 2019)
y los estudios mencionados no incluyeron Nassauvieae, donde Trixis
pertenece Por otro lado, las especies de Asteraceae mostraron una gran
variabilidad en la composición del azúcar del néctar (Torres y Galetto 2002),
pero tendieron a tener las concentraciones y proporciones más altas de todos
los aminoácidos esenciales (Venja kob 2022), lo que probablemente explica por
qué T. praestans fue visitado con frecuencia.
Además, una alta actividad de forrajeo podría estar relacionada con el
período de escasez de alimentos (otoño-invierno), cuando las flores disponibles
son escasas. Las abejas melíferas recolectan una gran cantidad de recursos
de las especies disponibles, especialmente en el período preinvernal, para
satisfacer las demandas de consumo y almacenamiento durante el invierno,
independientemente de su contenido nutricional (Danner et al. 2016; Smart et
al. 2016). En este sentido, son necesarios más estudios para comprobar si el
uso de T. praestans
recursos refeja su disponibilidad en una temporada de escasa oferta floral en el
paisaje o su calidad nutricional.
Los resultados de este estudio tienen implicaciones potenciales para el
manejo de las abejas melíferas en términos de optimizar la ubicación de las
colmenas en áreas con presencia de T. praestans, principalmente para mejorar
la supervivencia de las abejas melíferas durante el invierno. Se encontró que la
cantidad de polen recolectado en el período previo al invierno está directamente
relacionado con la supervivencia del colmenar durante el invierno (Smart et al. 2016).
En este sentido, la abundancia de recursos forales de T. praestans recolectados
por A. mellifera podría contribuir a su fortalecimiento para la invernada. Además,
la inclusión de este arbusto en esquemas agroambientales destinados a
aumentar la diversidad y disponibilidad de recursos vegetales podría mejorar la
productividad apícola, el mantenimiento de la biodiversidad y la producción de
cultivos en paisajes agrícolas en países donde T. praestans está ampliamente
distribuida.
Conclusión
Demostramos la presencia de un sistema de reproducción sexual,
predominantemente xenógamo, que podría presentar autoincompatibilidad.
Esto reduce la posibilidad de geito nogamia facilitada por el forrajeo de visitantes
forales. Más lejos
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Flores de invierno para abejas: biología reproductiva de Trixis praestans (Asteraceae)
estudios sobre el tipo de autoincompatibilidad aclararán los
mecanismos reproductivos de esta especie. El uso intensivo por parte
de A. mellifera de los recursos proporcionados por T. praestans
demuestra la importancia de esta especie vegetal como fuente de
alimento para la apicultura.
Información sobre material complementario electrónico
Recurso en línea 1. Origen de los individuos de Trixis praestans cultivados en el campo
experimental de la Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad Nacional del Litoral,
Esperanza, Argentina (31° 27ÿ S, 60° 56ÿ W).
Información complementaria La versión en línea contiene material complementario
disponible en https://doi.org/10.1007/s00606-022-01817-z.
Agradecimientos Agradecemos a Juan Pablo Torreta por su ayuda en la determinación
taxonómica de insectos ya Damián César Castro por su ayuda en el análisis estadístico
de los datos. El apoyo financiero para esta investigación fue proporcionado por la
Universidad Nacional del Litoral y el Consejo Nacional de Investigaciones Científcas y
Técnicas.
Contribuciones de los autores Todos los autores contribuyeron al estudio, la concepción
y el diseño. La preparación del material, la recopilación y el análisis de datos fueron
realizados por CC, MCC, PAT y ELE. CC y MCC contribuyeron por igual a la redacción
del primer borrador del manuscrito; los autores restantes comentaron versiones anteriores
del manuscrito. Todos los autores leyeron y aprobaron el manuscrito final.
Financiamiento El apoyo financiero para esta investigación fue proporcionado por la
Universidad Nacional del Litoral y el Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y
Técnicas.
Declaraciones
Conflicto de intereses No existen conflictos de intereses en relación con este documento.
Referencias
Alaux C, Allie RF, Decourtye A, Odoux JF, Tamic T, Chabirand M, Delestra E, Decugis F,
Le Conte Y, Henry M (2017) Un enfoque de 'fisiología del paisaje' para evaluar la
salud de las abejas destaca los beneficios del paisaje foral enriquecimiento y semi-
natural. Nature Sci Rep 7:40568. https://doi.org/10.1038/srep40568
Allen AM, Thorogood CJ, Hegarty MJ, Lexer C, Hiscock SJ (2011)
Interacciones entre polen y pistilo y autoincompatibilidad en Aster aceae: nuevos
conocimientos a partir de estudios de Senecio squalidus (hierba cana de Oxford).
Ann Bot (Oxford) 108:687–698. https://doi.org/10.1093/
aob/mcr147
Andrada AC, Tellería MC (2005) Polen colectado por abejas melíferas (Apis mellifera L.)
del sur del distrito de Caldén (Argentina): origen botánico y contenido proteico.
Grana 44:115–122. https://doi.org/10.
1080/00173130510010459
Belsare P, Sriram B, Watve M (2009) La optimización conjunta de la exhibición foral y la
recompensa del néctar. J Biosci 34:963–967. https://doi.org/
10.1007/s12038-009-0110-7
Página 9 de 11 27
Brennan AC, Harris SA, Hiscock SJ (2003) La genética poblacional de la
autoincompatibilidad esporofítica en Senecio squalidus L. (Aster aceae): evitación
de las restricciones de apareamiento impuestas por el bajo número de alelos S.
Phil Trans Roy Soc Londres B 358: 1047–1050. https://
doi.org/10.1098/rstb.2003.1300
Brodschneider R, Crailsheim K (2010) Nutrición y salud en las abejas melíferas. Apidologie
41:278–294. https://doi.org/10.1051/apido/
2010012
Cabrera L, Dieringer G (1992) Biología reproductiva de una población de Acourtia
runcinata (Asteraceae: Mutisieae: Mutisieae) en el límite nororiental de su área de
distribución. Amer Midl Nat 128: 83–88. https://
doi.org/10.2307/2426415
Camina JL, Tourn E, Andrada AC, Pellegrini C, Ashworth L (2019)
Distribución espacial y temporal de las recompensas forales dentro de los capítulos:
el caso de Hyalis argentea (Asteraceae). Bol Soc Argent Bot 54: 117–127. https://
doi.org/10.31055/1851.2372.v54.n1.
23577
Cerana MM (2004) Morfología floral y polinización en Mika nia (Asteraceae). Flor 199:
168–177. https://doi.org/10.1078/
0367-2530-00145
Conceição LD, Belo GO, Souza MM, Santos SF, Cerqueira-Silva CBM, Corrêa RX (2011)
Confirmación de la fertilización cruzada utilizando marcadores moleculares en
híbridos de pasionaria ornamental. Genet Molec Res. 10:47–52. https://doi.org/
10.4238/vol10-1gmr894
Czarnecka B, Denisow B (2014) Biología floral de Senecio macro phyllus M. BIEB.
(Asteraceae), una rara planta esteparia centroeuropea. Acta Soc Bot Pol 83:17–27.
https://doi.org/10.5586/asbp.
2014.002
Danner N, Molitor AM, Schiele S, Härtel S, Stefan-Dewenter L (2016)
La composición de la estación y el paisaje afecta las distancias de alimentación del
polen y el uso del hábitat de las abejas melíferas. Ecol Appl 26:1920–1929. https://
doi.org/10.1890/15-1840.1
Decourtye A, Mader E, Desneux N (2010) Mejora del paisaje de los recursos forales para
las abejas melíferas en agroecosistemas. Apidologie 41:264–277. https://doi.org/
10.1051/apido/2010024
Demauro M (1993) Relación del sistema de reproducción con la rareza en la margarita
de la orilla del lago. Conserva Biol 7:542–550. https://doi.org/10.1046/j.
1523-1739.1993.07030542.x
Di Rienzo JA, Guzmán AW, Casanoves FA (2002) Un método de comparaciones
múltiples basado en la distribución de la distancia al nodo raíz de un árbol binario.
J Agric Biol Environ Stat 7:129–142. https://doi.
org/10.1198/10857110260141193
Di Rienzo JA, Casanoves F, Balzarini MG, Gonzalez L, Tablada M, Robledo CW (2011)
InfoStat, versión 2011. Grupo InfoStat, FCA.
Universidad Nacional de Córdoba, Córdoba
Doyle JJ, Doyle JL (1990) Aislamiento de ADN vegetal a partir de tejido fresco.
Enfoque 12:13–15
Dufeld GE, Gibson RC, Gilhooly PM, Hesse AJ, Inkley CR, Gilbert FS, Barnard CJ (1993)
Elección de flores por abejas melíferas (Apis mellifera): posibles señales
morfológicas. Ecol Entomol 18:191–197
Endler JA (1986) Selección natural en la naturaleza. Prensa de la Universidad de
Princeton, Princeton
Erbar C, Leins P (2015) Diversidad de estilos y mecanismos de presentación de polen
secundario en Asteraceae basal: nuevos conocimientos sobre filogenia y función.
Flor 217: 109–130. https://doi.org/10.
1016/j.fora.2015.10.002
Fagúndez GA, Reinoso PD, Aceñolaza PG (2016) Caracterización y fenología de especies
de interés apícola en departamento Dia mante (Entre Ríos, Argentina). Bol Soc
Argenta Bot 51: 243–267
Ferrer MM, Good-Avila SV (2007) Análisis macrofilogenéticos de la ganancia y pérdida de
autoincompatibilidad en las Asteraceae. Nuevo Phytol 173: 401–414. https://doi.org/
10.1111/j.1469-8137.2006.
01905.x
Forcone A, Aloisi P, Ruppela S, Muñozb M (2011) Composición botánica y contenido
proteico del polen recolectado por Apis mellifera L.
13
Machine Translated by Google
27 Página 10 de 11
en el noroeste de Santa Cruz (Patagonia argentina). Grana 50: 30–39. https://
doi.org/10.1080/00173134.2011.552191
Galetto L, Bernardello G (2003) Composición del azúcar del néctar en espermatozoides
de angio de Chaco y Patagonia (Argentina): ¿asunto de un visitante animal?
Plant Syst Evol 238: 69–86. https://doi.org/10.1007/
s00606-002-0269-y
GBIF.org (2021) Descarga de eventos de GBIF. Disponible en: https://
doi.org/10.15468/dl.6hycgs. Consultado el 12 de octubre de 2021
Giurfa MJ, Nunez J, Chittka L, Menzel R (1995) Preferencias de color de abejas vírgenes
a las flores. J Comp Physiol A 177: 247–259
Goulson D, Nicholls E, Botáas C, Rotheray EL (2015) Disminución de abejas impulsada
por el estrés combinado de parásitos, pesticidas y falta de flores. Ciencia
347:1255957. https://doi.org/10.1126/scien
ce.1255957
Hay FR, Probert RJ (2013) Avances en la conservación de semillas de especies de
plantas silvestres: una revisión de investigaciones recientes. Conserv Physiol
1:cot030. https://doi.org/10.1093/conphys/cot030
Hendriksma HP, Shafr S (2016) Los recolectores de abejas melíferas equilibran las
deficiencias nutricionales de las colonias. Comportamiento Ecol Sociobiol 70:509–
517. https://doi.org/10.1007/s00265-016-2067-5
Hiscock S (2000) Autoincompatibilidad en Senecio (Asteraceae). Ann Bot (Oxford)
85:190. https://doi.org/10.1006/anbo.1999.1058
Hojsgaard D, Klatt S, Baier R, Carman JG, Hörandl E (2014) Taxonomía y biogeografía
de la apomixis en angiospermas y características de biodiversidad asociadas.
Crit Rev Plant Sci 33:414–427. https://doi.org/10.1080/07352689.2014.898488
Johri BM, Ambegaokar KB, Srivastava P (1992) Embriología comparativa de
angiospermas. Springer-Verlag, Nueva York
Katinas L (1996) Revisión de las especies sudamericanas del género Trixis (Asteraceae,
Mutisiae). Darwiniana 34:27–108. https://doi.
org/10.14522/darwiniana.2014.341-4.374
Katinas L (2015) Subtribu nassauviinae menos. En: Zuloaga FO, Belgrano MJ, Antón
AM (eds) Flora vascular de la República Argentina, Vol 7(2): Dicotyledoneae-
Asteraceae (Cichorieae, Helenieae-Mut isieae), Instituto de Botánica Darwinion,
Buenos Aires, pp 391–
486. https://doi.org/10.2307/j.ctt19dzdnt
Koltunow AM (1993) Apomixis: sacos embrionarios y embriones formados sin meiosis o
fertilización en óvulos. Célula vegetal 5: 1425–1437. https://doi.org/10.1105/
tpc.5.10.1425
Lane MA (1996) Biología de la polinización de las compuestas. En: Caligari P, Hind DJN
(eds) Compositae: biología y utilización. Actas de la conferencia internacional de
compuestos, Kew, 1994. Royal Botanic Gardens, Kew, págs. 61–80
Lin XC, Lou YF, Liu J, Peng JS, Liao GL, Fang W (2010) Cruzamiento de especies de
Phyllostachys (Poaceae) e identificación de sus híbridos usando marcadores
ISSR. Genet Molec Res. 9:1398–1404. https://doi.org/10.4238/vol9-3gmr855
Lloyd DG, Schoen DJ (1992) Fertilización propia y cruzada en plantas I Dimensiones
funcionales. Int J Plant Sci 153:358–369. https://doi.
org/10.1086/297040
Lusardi M, Prado D, Gattuso S (2005) Contenido polínico de las mieles del sur de la
provincia de Santa Fe (Argentina). Bol Soc Robot Argenta 40:85–90
Maggi M, Antúnez K, Invernizzi C, Aldea P, Vargas M, Negri P, Bras esco C, De Jong
D, Weinstein Teixeira E, Principal J, Barrios C, Rufnengo S, Rodríguez Da Silva
R, Eguaras M (2016) Honeybee salud en América del Sur. Apidologie 47:835–
854. https://doi.org/
10.1007/s13592-016-0445-7
Naug D (2009) El estrés nutricional debido a la pérdida de hábitat puede explicar los
colapsos recientes de colonias de abejas. Biol Conserv 142:2369–2372. https://
doi.org/10.1016/j.biocon.2009.04.007
Nicolson SW, Human H (2013) Composición química del polen de “baja calidad” de
girasol (Helianthus annuus, Asteraceae). Apid ologie 44:144–152. https://doi.org/
10.1007/s13592-012-0166-5
Ollerton J, Erenler H, Edwards M, Crockett R (2014) Disminución de los polinizadores.
Extinciones de polinizadores acuulados en Gran Bretaña y el
13
C. Cufa et al.
papel de los cambios agrícolas a gran escala. Ciencia 346: 1360–1362. https://
doi.org/10.1126/science.1257259
Papiorek S, Junker RR, Alves-dos-Santos I, Melo GA, Amaral-Neto LP, Sazima M,
Wolowski M, Freitas L, Lunau K (2016) Bees, birds and yellow fowers: polynator-
dependent convergent evo lution of UV patrones. Plant Biol 18: 46–55. https://
doi.org/10.
1111/plb.12322
Pinheiro J, Bates D, DebRoy S, Sarkar D, R Development Core Team (2011) nlme:
modelos de efectos mixtos lineales y no lineales. Paquete R Versión 3.1-101
R Core Team (2011) R: un lenguaje y entorno para la computación estadística. R
Fundación para la Informática Estadística, Viena. Disponible en: http://www.R-
project.org
Real L (1981) Incertidumbre e interacciones polinizador-planta: el comportamiento de
envejecimiento de abejas y avispas en flores artificiales. Ecología 62:26. https://
doi.org/10.2307/1936663
Ruzin SE (1999) Microtécnica y microscopía de plantas. Oxford University Press, Nueva
York
Salgado C (2000) Comparación de los recursos apibotánicos en dos localidades del
Dpto. Bellavista. Argentina, Corrientes, UNNE.
Publicación EEA Bella Vista. Serie Técnica Nº 16.
Shabir PA, Nawchoo IA, Wani AA (2013) Fenología floral, presentación de polen
secundario y mecanismo de polinización en Inula racemosa
(Angiospermas: Asteraceae). J Taxones de amenazas 5:4498–4503. https://
doi.org/10.11609/JoTT.o3320.4498-503
Smart M, Pettis J, Rice N, Browning Z, Spivak M (2016) Vinculación de las medidas de
salud de abejas melíferas individuales y de colonias con la supervivencia entre
colmenares expuestos a diferentes usos agrícolas de la tierra. PLoS UNO 11:1–
28. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0152685
Somerville DC, Nicol HI (2006) Composición de proteínas y aminoácidos crudos de
gránulos de polen recolectados por abejas melíferas del sureste de Australia y
una nota sobre disparidad de laboratorio. Austral J Exp Agric 46: 141–149. https://
doi.org/10.1071/EA03188
Steiner J, Zillikens A, Kambe R, Pickbrenner E, de Barcellos FD (2010) Abejas y plantas
melittófilas de hábitats secundarios del bosque atlántico en Santa Catarina, sur
de Brasil. Escuela Austral 14:16–39. https://doi.org/10.4257/oeco.2010.1401.01
Steinhauer NA, Rennich K, Wilson ME, Caron DM, Lengerich EJ, Pet tis JS, Rose R,
Skinner JA, Tarpy DR, Wilkes JT, vanEngelsdorp D (2014) Una encuesta nacional
de abejas melíferas gestionadas 2012–2013 pérdidas anuales de colonias en
Estados Unidos: resultados de la Asociación informada por abejas. J Apicultor
Res 53:1–18. https://doi.org/10.3896/
IBRA.1.53.1.01
Street K, Bari A, Mackay M, Amri A (2016) Cómo se utiliza la estrategia de identificación
enfocada de germoplasma (FIGS) para extraer características adaptativas de las
colecciones de recursos genéticos vegetales. En: Maxted N, Dulloo ME, Ford-
Lloyd BV (eds) Mejora del uso del acervo genético de cultivos: captura de la
diversidad de parientes silvestres y variedades locales para la mejora de cultivos.
CABI, Wallingford, págs. 54–63. https://doi.org/10.1079/97817
80646138.0054
Tellería MC (2009) Asteraceae visitadas por abejas en Argentina: un registro de estudios
entomopalinológicos. Bol Soc Argent Bot 44: 65–74
Tellería MC, Salgado-Laurenti CR, Marinozzi LA, Apóstolo N, Pérez B (2019) Contenido
proteico del polen de asteraceae recolectado por abejas melíferas. Mundo de
abejas 64: 1–4. https://doi.org/10.1080/00057
72x.2019.1634958
Tomas PA, Gottlieb AM, Schrauf GE, Poggio L (2013) Utilización de marcadores
morfológicos y moleculares AFLP en la identif cación de germoplasma nativo y
cultivado de Elymus scabrifolius
(Poáceas). Rev Fac Ci Agrar Univ Nac Cuyo 45:85–100
Tomas PA, Zietz R, Cerino MC (2017) Análisis de diversidad genética en Ziziphus
mistol Griseb mediante marcadores moleculares ISSR. FAVE Secc Ci Agrar
16:153–162. https://doi.org/10.14409/
fa.v16i1.6756
Machine Translated by Google
Flores de invierno para abejas: biología reproductiva de Trixis praestans (Asteraceae)
Torres C, Galetto L (2002) ¿La composición del azúcar en el néctar y la longitud del tubo
de la corola están relacionados con la diversidad de insectos que visitan las flores
de Asteraceae? Plant Biol 4: 360–366. https://doi.org/10.
1055/s-2002-32326
Torres C, Galetto L (2008) Importancia de los polinizadores en la reproducción de
asteráceas de Argentina Central. Acta Bot Venez 31: 473–494
Torretta JP, Navarro F, Medan D (2009) Visitantes forales nocturnos del girasol (Helianthus
annuus, Asterales: Asteraceae) en la Argentina. Rev. Soc. Entomol Argent 68:339–
350
Vaudo AD, Tooker J, Grozinger C, Patch H (2015) Nutrición de abejas y restauración de
recursos forales. Curr Opin Insect Sci 10: 133–141. https://doi.org/10.1016/
j.cois.2015.05.008
Vaudo AD, Tooker JF, Patch HM, Biddinger DJ, Coccia M, Crone MK, Fiely M, Francis JS,
Hines HM, Hodges M, Jackson SW, Michez D, Mu J, Russo L, Safari M, Treanore
ED, Vanderplanck M , Yip E, Leonard AS, Grozinger CM (2020) Las proporciones
de macronutrientes de proteína de polen: lípidos pueden guiar patrones amplios de
preferencias forales de especies de abejas. Insectos 11:132. https://doi.org/10.3390/
insects11020132
Venjakob C, Ruedenauer FA, Klein AM, Leonhardt SD (2022) Variación de la calidad del
néctar en 34 especies de plantas de pastizales. Plant Biol 24: 134–144. https://
doi.org/10.1111/plb.13343
Wagenius S (2004) Persistencia del estilo, limitación de polen y formación de semillas en
la planta común de pradera Echinacea angustifolia (Asteraceae). Int J Plant Sci 165:
595–603. https://doi.org/10.1086/386376
Werpachowski JS, Varassin IG, Goldenberg ER (2004) Ocorrência de apomixia e
partenocarpia em algumas espécies subtropicais de Asteraceae. Rev. Brasil Bot
27:607–613. https://doi.org/10.1590/
S0100-84042004000300020
Página 11 de 11 27
Wetzstein HY, Porter JA, Janick J, Ferreira JFS (2014) Morfología floral y secuencia foral
en Artemisia annua (Asteraceae). Soy J Bot 101: 875–885. https://doi.org/10.3732/
ajb.1300329
Wilson P, Thomson JD (1991) La heterogeneidad entre los visitantes forales genera
discordancia entre la remoción y la deposición de polen.
Ecología 72: 1503–1507. https://doi.org/10.2307/1941124
Wright GA, Nicolson SW, Shafr S (2018) Fisiología nutricional y ecología de las abejas
melíferas. Ann Rev. Entomol 7:327–344. https://doi.
org/10.1146/annurev-ento-020117-043423
Young AG, Hill JH, Murray BG, Peakall R (2002) Sistema de reproducción, diversidad
genética y estructura clonal en la hierba subalpina Ruti dosis leiolepis F. Muell.
(Asteráceas). Biol Conserv 106: 71–78. https://doi.org/10.1016/S0006-3207(01)00230-0
Zabala JM, Exner E, Cerino C, Buyatti M, Cufa C, Marinoni L, Kern V, Pensiero JF (2021)
Recursos ftogenéticos forestales, forrajeros, de interés apícola y paisajístico nativos
de la provincia de Santa Fe (Argentina). FAVE Secc Ci Agrar 20:99–131. https://
doi.org/
10.14409/fa.v20i1.10253
Zarlavsky GE (2014) Histología vegetal, técnicas simples y complejas, 1ª. Sociedad
Argentina de Botánica, Buenos Aires
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jurisdiccionales en los mapas publicados y las afiliaciones institucionales.
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