Instituto Tecnolgico de Costa Rica, ITCR.

Facultad de Agronoma

EFECTO DE LA PELETIZACIN DE SEMILLAS SOBRE LA GERMINACIN DE TRES CULTIVARES DE ALFALFA (Medicago sativa) BAJO CONDICIONES DE LABORATORIO EN LA LOCALIDAD DE SANTA CLARA, SAN CARLOS, COSTA RICA.

Lora Villalobos, Diego1., Vsquez Cerdas Hannia2.

INTRODUCCION Frecuentemente la alfalfa (Medicago sativa) ha sido llamada la reina de las plantas forrajeras y esto es cierto tanto desde un punto de vista universal como particularmente referido a las zonas de clima templado, ya que es una pieza fundamental en la alimentacin del ganado en especial de produccin lechera (DAttellis, 2005). Para la implantacin del cultivo es recomendable utilizar semilla que logre una rpida y uniforme germinacin en el campo, para conseguir que la emergencia y cobertura del suelo se obtenga lo antes posible, ganndole a las malezas y minimizando las prdidas de semilla por depredadores (insectos de suelo, roedores, pjaros, etc.), para ello, se realizan los test de germinacin que nos dan una idea de la cantidad de semillas que podran producir una planta en el campo y se realizan tratamientos pregerminativos (Borrajo, 2006). Por definicin, la germinacin involucra todos aquellos procesos que comienzan con la absorcin de agua por la semilla quiescente, y terminan con la elongacin del eje embrionario. La seal visible de la finalizacin de la germinacin es en general, la emergencia de la radcula embrionaria a travs de las cubiertas seminales, aunque en el mbito de la produccin es aceptado que la seal de la germinacin suele tomarse como la visualizacin de

la plntula viable emergiendo del suelo (Varela y

Arana, 2011).

Hoy en da la tendencia es sembrar con mayor precisin y de manera ms eficiente al menor costo posible. Nuevas tecnologas nos permiten lograr esa mayor eficiencia, el peleteo de semillas es una de ellas. Existen diferentes tcnicas de peleteo de semillas por capas, donde cada componente se coloca en una capa distinta, as los inculos quedan separados de los terpicos y de esta manera se evitan posibles problemas de toxicidad (Figura 1), dentro de ellos el convencional donde se puede ver como todos los componentes rodean a la semilla y entran en contacto entre s, esto puede ocasionar interacciones desfavorables para la semilla. El mtodo Tecnocover al colocar cada componente en una capa distinta evita estas posibles interacciones, mejorando el aprovechamiento de los mismos (Ferrari, 2008).

Figura 1. Tcnicas de peletizacin de semillas. Fuente: Ferrari, 2008.

1. Estudiante de Agronoma, Instituto Tecnolgico de Costa Rica: dgloria17@gmail.com 2. Estudiante de Agronoma, Instituto Tecnolgico de Costa Rica: hanniva@gmail.com

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La peletizacin de leguminosas como la alfalfa es una tecnologa que permite extender el perodo de supervivencia de los rizobios sobre la semilla y por otra parte adecua al medio ambiente que rodea la semilla logrando una mejor implantacin de la pradera. Entre las ventajas podemos mencionar una mayor proteccin en suelos cidos y en condiciones de deficiencia hdrica en el momento de la siembra, evitando la germinacin hasta que los niveles de humedad no se eleven a valores cercanos a capacidad de campo. Los materiales que contemplan son; la semilla, inoculante (rizobios), adhesivo, polvo de recubrimiento, nutrientes, reguladores de pH y curasemillas compatibles (insecticidas, fungicidas) (Puente et al., 2011). Las semillas peleteadas poseen ventajas respecto a las semillas sin peletear, el recubrimiento al ser higroscpico mejora la absorcin del agua permitiendo una germinacin ms uniforme, los terpicos (funguicidas, insecticidas) las protegen de las adversidades que se presentan en el nacimiento como el ataque de hongos de suelo, de insectos. Adems se pueden incorporar micronutrientes para una rpida disponibilidad de stos en el momento de la emergencia radicular, mejorando el vigor de las plntulas. En el caso de leguminosas la preinoculacin asegura una concentracin de bacterias infectivas sobre la semilla lo que dar como resultado una buena nodulacin, indispensable para una excelente fijacin simbitica del nitrgeno (Ferrari, 2008). La fijacin biolgica de nitrgeno es un proceso importante que se realiza en las leguminosas por medio de rizobios; el pellet de las semillas le aporta a las mismas una capa de carbonato de calcio, el cual acta como un neutralizador del pH otorgando un medio adecuado para la nodulacin, y a su vez, adecua el medio ambiente que rodea la semilla para que se d una mejor implantacin (Puente et al., 2011). Las semillas peleteadas poseen un valor agregado que se refleja en una mejor implantacin de la pastura y por ende en una mayor productividad (Ferrari, 2008). Variedades nuevas de Alfalfa INTA, como la Alfalfa INTA Patricia, Alfalfa INTA Sper Monarca y Alfalfa INTA Mora se caracterizan por poseer una alta produccin de forraje, alta persistencia en el lote, alta resistencia a plagas y enfermedades, variando el rendimiento de cada una dependiendo de las condiciones ambientales. Con base en datos de INTA (2012), la variedad que puede presentar mejor respuesta en la germinacin es la variedad INTA Sper Monarca La literatura reporta que las semillas tratadas con la tcnica de peletizacin mostraran un mejor porcentaje de germinacin independientemente de la variedad o cultivar. Sabiendo que son buenas variedades con buenos rendimientos, el objetivo general de esta investigacin es evaluar es el porcentaje de germinacin de semillas de tres variedades de alfalfa tratadas con la tcnica de peletizacin y sin peletizacin debido a que la germinacin es una etapa clave para la implantacin del cultivo y el clculo de la densidad de semilla a utilizar por unidad de rea, donde inciden el % de germinacin y pureza, la densidad del cultivo y de la semilla (cantidad de semilla/kg); donde lo que se busca es utilizar la menor cantidad de semilla, con mayor calidad y costos rentables. Como objetivos especficos se pretende evaluar el efecto de la peletizacin y no peletizacin sobre el porcentaje de germinacin, seleccionar la variedad con mayor respuesta en la germinacin de acuerdo al peletizado y determinar posibles interacciones entre los factores de tratamientos (Variedad vs Peletizacin).

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MATERIALES Y METODOLOGA Localizacin de estudio: El desarrollo del ensayo se llev a cabo en el laboratorio de biotecnologa del ITCR sede Regional San Carlos.

Material experimental: Se emplearon tres tipos de variedades de semillas de Alfalfa ProINTA (13/09/2013), Patricia (VA), Sper Monarca (VB) y Mora (VC), tratadas con peletizacin y sin peletizacin. Cajas de Petri, papel germinativo y cmara de oscuridad para el proceso de germinacin.

Figura 2. Combinacin de factores de tratamientos.

Universo de estudio: El estudio se realiz sobre muestras de semillas de tres variedades de alfalfa (Medicago sativa), todas las muestras con igual fecha de empaque, y donde se las posibles diferencias entre las variedades y el peletizado en respuesta al porcentaje de germinacin bajo condiciones de laboratorio en zona tropical hmeda (Costa Rica).

Variable(s) de respuesta a estudiar: Como parte de la investigacin se medi nicamente una variable de respuesta que corresponde al porcentaje de germinacin en cada unidad experimental. Para ello se cuantific el nmero de semillas germinadas en cada unidad experimental, y el porcentaje de germinacin se calcul con la relacin de semillas germinadas entre el total de semillas de cada unidad experimental (u/100). Dicha valor de respuesta corresponde a una variable continua discreta (nmero de semillas germinadas).

Descripcin de tratamientos: En esta investigacin se estudi el efecto de la variedad y peletizado sobre la germinacin de semillas de alfalfa (Medicago sativa). Ambos factores son cualitativos, factor A corresponde a la variedad y el factor B a la peletizacin, con 3 niveles de variedad (VA, VB, VC) y 2 niveles de peletizado (Con peletizacin y Sin Peletizacin) para un total de 6 tratamientos con tres repeticiones para cada uno obtenindose un total de 18 unidades experimentales. (Figura 2).

Diseo experimental y de arreglo de tratamientos: Para la asignacin de los tratamientos a las unidades experimentales se emple un diseo experimental completamente al azar (DCA). Para la asignacin de los niveles y factores dentro del correspondiente diseo experimental se us el arreglo se tratamiento factorial simple de serie mixta (2x3), resumiendo diseo completamente al azar (DCA) con arreglo factorial simple de serie mixta (2x3) con tres repeticiones (18 unidades experimentales).

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Modelo estadstico correspondiente: y varianza comn 2, (ij : Yij j); [N(0,2)] y varianzas homogneas. Descripcin de unidad experimental y rea experimental: Cada unidad experimental consisti en una cajita de Petri con 100 semillas debidamente seleccionadas, y con la mayor homogeneidad posible, cada cajita de Petri de vidrio y con un dimetro de 90 mm para todas por igual y de la misma altura (15 mm). Las cajas de Petri se colocaron en bandejas plsticas y dichas se mantuvieron bajos condiciones lo ms homogneas posibles, y en condiciones de completa oscuridad y temperatura entre los 20 y 25 C. Se mantuvieron en condiciones adecuadas de humedad durante el tiempo necesario para la germinacin, a cada unidad experimental se le agreg 3 ml de agua para incorporar la humedad inicial necesaria para la germinacin. Se mantuvieron en dichas condiciones por un periodo de 72 horas para evaluar la germinacin.

Yijk = el % de germinacin obtenido al aplicar la isima Variedad (i=1,2,3; [VA, VB, BC]) en combinacin con el j-simo peletizado (j=1,2; [Con peletizacin, sin peletizacin]) a la k-sima unidad experimental (k=1,2,,18). = es la media global del % de germinacin de cualquier unidad experimental sin importar diferencias entre variedades y el peletizado. i = es el efecto debido a la i-sima variedad (i=1,2,3; [VA, VB, BC]) j = es el efecto debido al j-simo peletizado (j=1,2; [Con peletizacin, sin peletizacin]). ( )= representa al efecto de la interaccin entre la i-sima variedad y j-simo peletizado. = la variable aleatoria error asociada a la ksima unidad experimental (1,218) de la ivariedad (i=1,2,3) combinado con el j-simo peletizado (j=1,2), independientes con medias cero

Croquis o especificacin de diseo de tratamientos: Diseo completamente al azar en un arreglo factorial simple seria mixta (2x3) con tres repeticiones.

Figura 3: Distribucin en DCA con tres repeticiones para cada tratamiento. Identificacin de unidades experimentales: Cuadro 1. Identificacin de tratamientos y unidades experimentales.

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RESULTADOS Y DISCUSIN La seal visible de la finalizacin de la germinacin es en general, la emergencia de la radcula embrionaria a travs de las cubiertas seminales, aunque en el mbito de la produccin es aceptado que la seal de la germinacin suele tomarse como la visualizacin de la plntula viable emergiendo del suelo (Varela y Arana, 2011). Tomando como referencia este aspecto el proceso de germinacin fue efectivo y cuantificable en cada una de las unidades experimentales de cada uno de las combinaciones de factores de tratamiento una vez transcurrido el periodo establecido de 72 horas en condiciones de laboratorio establecidas para la germinacin, obtenindose diferentes porcentajes de germinacin en cada uno de los tratamientos, resultados que se detallan en el cuadro 2. Se registraron valores de germinacin variables para cada uno de tratamientos en estudio, donde el valor mximo fue de 93% perteneciente al tratamiento T1 (con peletizado y VA) y el valor mnimo de 36% perteneciente al tratamiento T6 (Sin peletizado y Variedad C).

Cuadro 2. Valores de estadsticas descriptivas para cada tratamiento.

VA = ProINTA Patricia., VB= ProINTA Sper Monarca., VC= ProINTA Mora Realizado el ANDEVA (=0.05) para del DCA no se encontr interacciones significativas entre el factor peletizado y factor variedad (p= 0.08). Por lo que los factores actan en forma independiente y pueden ser evaluados por separados. En cuanto al factor de peletizacin se encontraron diferencias altamente significativas (p<0.0001) entre al menos dos medias de los tratamientos que estuvieron sometidos a la peletizacin y no peletizacin (figura 5).

Figura 4. Grfico de interaccin de factores de tratamientos.

Figura 5. Grfico de la germinacin en funcin de la peletizacin y no peletizacin.

1. Estudiante de Agronoma, Instituto Tecnolgico de Costa Rica: dgloria17@gmail.com 2. Estudiante de Agronoma, Instituto Tecnolgico de Costa Rica: hanniva@gmail.com

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Cuadro 3. Comparacin de medias para factor peletizacin (Test: Tukey Alfa=0.05 DMS=0.079). Basados en la prueba de Tukey (=0.05) para el mismo factor no se encontraron diferencias significativas entre la variedad Patricia (VA) y variedad ProINTA Mora (VC) (p>0.05), encontrndose diferencias significativas (p0.05) de la variedad Sper Monarca (VB) con las otras dos variedades (Patricia y Mora). Cuadro 4. Comparacin de medias para factor variedades (Test: Tukey Alfa=0.05 DMS=0.119).

De acuerdo a anlisis Tukey (=0.05) se encontraron diferencias significativas entre las medias con peletizado y sin peletizar (p0.05), habiendo una mejor germinacin en los tratamientos que recibieron la peletizacin con una media de 81% y los que no recibieron peletizacin una media del 54% de germinacin. Las semillas peletizadas poseen ventajas respecto a las semillas sin peletizar, el recubrimiento al ser higroscpico mejora la absorcin del agua permitiendo una germinacin ms uniforme, los terpicos (funguicidas, insecticidas) las protegen de las adversidades que se presentan en el nacimiento como el ataque de hongos de suelo, de insectos (Ferrari, 2008). Con respecto a las tres variedades evaluadas (VA ProINTA Patricia., VB ProINTA Sper Monarca y VC=ProINTA Mora, por medio del anlisis ANDEVA (=0.05) se encontraron diferencias altamente significativas entre al menos dos medias de los tratamientos (p 0.0042).

Con base en datos de INTA (2012), la variedad que puede presentar mejor respuesta en la germinacin es la variedad INTA Sper Monarca, estos datos no contrastan con los obtenidos en esta investigacin donde la variedad INTA Sper Monarca obtuvo una menor media en el porcentaje de germinacin (57%), siendo superado por la variedad Mora y Patricia (74 y 72% respectivamente. Uno de los principales factores que pueden modificar la capacidad de germinacin son las condiciones climticas, debido a que INTA reporta valores para condiciones de clima templado y esta investigacin es realizada en condiciones de clima tropical. Queda establecido en la memoria escrita de este informe de investigacin que para los anlisis de varianza (ANDEVA) se cumplieron con los supuestos de normalidad de residuos basados en la prueba de Kolmogorov (p= 0.7695) y con el supuesto de homocedasticidad basados en la prueba de Levene (p= 0.0960), y el supuesto de independencia se pudo haber garantizado con la aleatorizacin de tratamientos y repetitividad de los mismos dentro del DCA en un arreglo factorial simple de serie mixta (2x3).

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CONCLUSIONES. La tcnica de peletizacin puede resultar una excelente alternativa para lograr un mejor porcentaje de germinacin que es factor fundamental durante el establecimiento del cultivo. El porcentaje de germinacin se incrementa considerablemente en las semillas peletizadas independientemente de las variantes genticas de las semillas (Variedades). La peletizacin incorpora condiciones ideales para la germinacin de semillas e incorpora factores claves para dicho proceso. Se pueden lograr diferencias altamente significativas en mejora del porcentaje de germinacin, hasta en un 30% utilizando semillas previamente tratadas con el peletizado. Las variedades muestras diferentes respuestas en cuanto a la germinacin, independientemente de ser o no previamente tratadas para la germinacin BIBLIOGRAFA Borrajo, C. 2006. Importancia de la calidad de semillas. (En lnea). Sitio Argentino de Produccin Animal. Recuperado el 16 de noviembre, 2013. Disponible en: http://www.produccion-animal.com.ar/

DAttellis, R. 2005. Alfalfa (Medicago sativa L.) Produccin de semilla; Tinogasta, Catamarcu. (En lnea). Direccin Provincial De Programacin del Desarrollo. Ministerio de Produccin y Desarrollo, Gobierno de la Provincia Catamarca. Recuperado el 16 de noviembre, 2013. Disponible en: http://www.produccioncatamarca.gov.ar/legisl acion/Sectores%20Productivos/Sector%20Agri cola/Produccion%20de%20Alfalfa.pdf

Ferrari, S. 2008. Porqu sembrar semillas peleteadas?. (En lnea). Sitio Argentino de Produccin Animal. Recuperado el 13 de octubre, 2013. Disponible en: http://www.produccion-animal.com.ar/

Puente, M; Garca, J; Perticari, P. 2011. Inoculacin de leguminosas forrajeras con rizobios eficientes. (En lnea). Sitio Argentino de Produccin Animal. Recuperado el 13 de octubre, 2013. Disponible en: http://www.produccion-animal.com.ar/

Varela, A; Arana, V. 2011. Latencia y germinacin de semillas. Tratamientos pregerminativos. INTA. Serie tcnica: Sistemas Forestales Integrados. rea Forestal-INTA EEA Bariloche.

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