Laboratorio y Trabajo de Campo III.

Química Analítica
Trabajo Práctico N°1
Preparación de reactivos

1. Se mezclan 1.4 g de hidróxido potásico y 1 g de hidróxido sódico. La mezcla se disuelve en

agua y se diluye hasta 100 mL. Calcular el pH de la disolución.

2. Calcule la concentración de una disolución acuosa de amoniaco si se desea que tenga un pH =

12 y evalúe su grado de ionización a esta concentración. Kb = 1,8x10-5.

3. Describe como prepararías 2 litros de cloruro de bario (BaCl 2) 0.108 M

4. Describe la preparación de 100 ml de HCl 6M a partir del HCl concentrado cuya botella
indican 1.18 g/mL y 37% p/p.

5. Calcular la concentración Molar en una solución al 70% en peso de Ácido Nítrico (HNO 3); la
densidad de la solución es de 1.42 g/mL

6. Calcula la molaridad de una solución acuosa 1.52 m de CaCl 2. La densidad de la solución es

1.129 g/mL.

7. Calcula la molalidad de una solución de ácido sulfúrico concentrado 98% en peso y

densidad1.15g/mL.

8. El agua potable puede contener solamente 1.5 ppm de NaF. ¿Cuántos litros de agua se pueden
fluorar con 454 g de NaF?

9. Calcula la molaridad de la solución que resulta de mezclar 15 mL de una solución 0.240M

con 35 mL de agua.

10. Ud desea preparar 100 ml del Buffer que contiene: Hepes10 mM (PM: 238,3 g/mol),
glucosa 10 mM (180 g/l), NaCl 140 mM, KCl 5 mM, CaCl2 2,5 mM, MgCl2 1mM.

11. Para realizar la cuantificación de glucosa se le ofrece el siguiente protocolo:

Reactivo Tubo número
  1 2 3 4 5 6 7 8
Glucosa 1 mM (ml) - 0,1 0,3 0,5 0,7 0,9 1,7 1,3
Agua (ml) 2 1,9 1,7 1,5 1,3 1,1 - -
Muestra - - - - - - 0,3 0,7
Reactivo de
Somogy (ml) 1 1 1 1 1 1 1 1
  Incubar 10 minutos a 100° C
Reactivo de Nelson
(ml) 1 1 1 1 1 1 1 1
Agua (ml) 2 2 2 2 2 2 2 2
  Mezclar

Indique como prepararía las cantidades apropiadas de reactivo de Somogy y de Nelson.

Datos:
Reactivo de Somogyi: 28 g Na2HPO4 anhidro, 40 g tartrato de Na y K
(KNaC4H4O6·4H2O; PM: 282,22 g/mol ), 100 ml NaOH 1 N, 6 g CuSO4.
(CuSO4·5H2O; PM: 249,68 g/mol ) y 180 g Na2SO4 anhidro (PM: 142,04 g/mol).
Llevar a un litro.
 Reactivo de Nelson: 45 g de (NH4)6Mo7O24 ((NH4)6Mo7O24·4H2O; PM:1235,86) , 900
ml H2O, 42 ml H2SO4 y 4 g Na2HAsO4.7H2O (Na2HAsO4.7H2O; PM: 312,01 g/mol).
Llevar a un litro.

12. Se desean preparar 500ml. de una solución de hidróxido de bario 0,4N (sn. A) a partir de
una solución de hidróxido de bario 15%P/P y δ=1,12g/ml.
a) Calcule el volumen necesario de la solución concentrada.
b) Si 150ml. de la sn A se mezclan con 200ml. de una sn de hidróxido de bario 0,2M
calcule la M resultante.
c) Calcule el volumen de la sn A necesario para preparar 300ml de una dilución 1/30.
Considere volúmenes aditivos.

13. Para frenar la reacción de un RIA de testosterona hacen falta 25 ml de suspensión de

carbón-dextrano en buffer. Cuánto debo pesar de cada uno si la concentración requerida
es carbón 1 %P/V y dextrano 0.1 % P/V.

14. Para realizar una curva Standard de PGE2 se dispone de una solución madre 5
mg/ml en etanol. Cómo realiza la curva si los diferentes puntos de la misma deben tener
1000, 500, 200, 100, 50 pg/ 100 ul de prostaglandina en buffer? En el protocolo carga
100 ul para estándar/muestra y se procesa cada punto por duplicado.

15. Ud realiza la inmunomarcación de un corte de tejido cardiaco. Este proceso implica

tres pasos separados por lavados con PBS 1X Tritón-X100 0,1%.
En un primer paso realizar un bloqueo con SFB 5% en PBS 1X y Tritón-X100
1%.
A continuación incuba con el anticuerpo primario en una concentración final
0,0163 mg/ml. Para ello parte de una solución madre de anticuerpo de 3,26 mg/ml y lo
diluye en SFB1% en PBS 1X, tritón-X100 0,1% hasta obtener la concentración
indicada.
Por último incuba con el anticuerpo secundario en una concentración final
0,0013 mg/ml. Para ello parte de una solución madre de anticuerpo de 1 mg/ml y lo
diluye en SFB1% en PBS 1X, Tritón-X100 0,1% hasta obtener la concentración
indicada.
Indique como prepararía todas las soluciones indicadas partiendo de PBS 10X,
Tritón-X100 puro y SFB puro, además de la soluciones madre de anticuerpo citadas.