FACTORES QUE ALTERAN LA CINETICA ENZIMÁTICA

I. RETROALIMENTACIÓN

Escriba la Ecuación de la cinética enzimática Micheliana

V Max⌊ S ⌋
Vo= K m +[ S ]

VO: Velocidad de la reacción Km: Constante km

VMax: Velocidad máxima [ S ] : Concentración de sustrato

II. MATERIALES Y REACTIVOS:

MATERIALES:

Pizeta Gradilla

Tubos de ensayo Propipeta

Pipetas Vaso de precipitado de 500 ml

Termómetro Fiola
 REACTIVOS:

 Sustrato: Solución de almidón al 1%

 Enzima: Solución de alfa amilasa salival dializada 1%
 Buffer fosfato 0,1M a pH 2,0; 7,0 y 9,0
 Indicador: Sol. Ioduro de K
 Indicador: Sol de Benedict

III. PROCEDIMIENTO:

Primer paso

Se pone en cada tubo de ensayo los

reactivos según la tabla.
Segundo paso
Después de poner cada reactivo en los tubos de ensayo vamos a llevar al tubo 1 a
calentar a 100°C y el tubo 2, congelarlo.

El tubo de ensayo 1 se pone a calentar al Baño María por 30 minutos

El tubo de ensayo 2 se pone a congelar por 30 minutos también

Tercer Paso:

Ponemos agua fría en un vaso de precipitados de 500 ml y agregamos después

también agua caliente

Cuarto Paso:
 Vamos a poner los tubos de ensayo cuando el termómetro tenga 37°C y
retirarlos cuando se bajen de estos 37°C y así hacer hasta que pasen 30
minutos

Quinto Paso:

En el tubo de ensayo 1 y 2 se hizo la prueba de lugol y benedict y se pone tres

gotas de lugol en los demas tubos y vamos a ver como reacciona cada tubo.
 Realizamos una comparación entre las muestras sometidas a cada reactivo.

• Reactivo IKI

• Si se torna a un color grisáceo o azul oscuro nos indica la presencia

del almidón

• Si continua su color amarillento nos indica que no hay almidón