Caries Research

Las proteínas salivales: protección valor

diagnóstico en cardiología?
A. van Nieuw Amerongen J.G.M. Bolscher E.C.I. Veerman

Palabras clave
Péptidos antimicrobianos • aglutinina • catelicidina • histatinas • lactoferrina • mucinas •
saliva • proteínas salivales

Abstract
La saliva es esencial para la conservación de la dentición. Muchas de las funciones de la
saliva están implicados en el mantenimiento de la salud oral y la protección de los dientes:

1. La superficie del diente está constantemente protegida contra el desgaste mediante

una capa de mucinas salivales y glicoproteínas ricas en prolina.
2. Las proteínas tempranas películares, proteínas ricas en prolina y, estaterinas,
promueven la remineralización del esmalte mediante la atracción de los iones de
calcio.
3. La desmineralización es retardada por las proteínas peliculares, con los iones calcio
y fosfato en la saliva y en el fluido de la placa.
4. Varias (glico) proteínas salivales impiden la adherencia de microorganismos orales
a la película de esmalte e inhiben su crecimiento.
5. El sistema tampón (buffer) bicarbonato salival / carbonato es responsable de la
rápida neutralización de los ácidos.

Una visión general se presenta en los principales sistemas antimicrobianos en la saliva

humana. En la primera línea de defensa de la cavidad oral, no sólo están involucradas las
más conocidos y grandes glicoproteínas salivales, incluyendo mucinas, glicoproteínas
ricas en prolina e inmunoglobulinas, sino también una serie de (glico) proteínas salivales
menores, incluyendo aglutinina, lactoferrina, lisozima, y cistatinas. Además, ha. Entrado
en el foco pequeños péptidos antimicrobianos catiónicos, como defensinas,
catelicidina, e histatinas. Estos son potencialmente adecuados como plantillas para el
diseño de una nueva generación de antibióticos, ya que matan un amplio espectro de
microorganismos, a diferencia de los antibióticos clásicos, que apenas evocan la
resistencia.

La saliva contiene un gran número de proteínas que participan en la protección de los tejidos
orales, por ejemplo: lisozimas, lactoferrina, lactoperoxidasa, inmunoglobulinas,
aglutininas y mucinas. Además, se han identificado varios péptidos con actividad de
eliminación de bacterias, estos incluyen histatinas, defensinas y la única catelicidina
humana, LL-37 (tabla 1). Debido a que todas estas proteínas y péptidos tienen un amplio
espectro de actividad antimicrobiana parece que hay un solapamiento considerable en su
funcionalidad. Esto puede explicar la observación de que la susceptibilidad a las
enfermedades orales puede no parecer estar relacionada con la concentración de un solo
componente. La razón exacta de esta «redundancia» no es muy conocida, pero las
diferentes funciones podrían desempeñar un pape.

La cavidad oral es el hogar de diferentes microorganismos, de los cuales muchos siguen

esperando identificación y caracterización. Además, un número desconocido de
microorganismos son huéspedes temporales o que están presentes de forma transitoria.
Para hacer frente a una amplia variedad de posibles invasores, la defensa oral debe estar
equipada con un armamento diverso para prevenir la colonización descontrolada de
microorganismos. En este contexto cabe señalar que las condiciones en la cavidad oral
para algunos sistemas de defensa, no son óptimas, por ejemplo, la actividad microbicida
de los péptidos antimicrobianos catiónicas como defensinas, histatinas y LL37 es
conocido por ser sensible al entorno iónico, que se evidencia por una reducción en las
altas concentraciones de sal, o bajas concentraciones de cationes divalentes.

Cada tipo de glándula salival secreta un espectro característico de proteínas. El arsenal

completo de proteínas Antimicrobianas presentes en la saliva total es, la suma de las
contribuciones de los diferentes glándulas. Como consecuencia, la concentración de una
sola proteína antimicrobiana puede variar durante el día de acuerdo con la actividad
de su fuente glandular.

El solapamiento funcional en sistemas defensivos significa que ningún componente

individual es necesario para la capacidad antimicrobiana general del sistema de
defensa salival.

El arsenal de saliva contiene componentes / sistemas de defensa que protegen

específicamente a la dentición. Ejemplos de sistemas de ‘dientes específicos’ son el
sistema tampón de carbonato / bicarbonato (para la rápida neutralización de los ácidos)
y proteínas específicas que forman una capa protectora en la superficie del esmalte,
que sirve como barrera para impedir la difusión libre de ácido. Además hay sistemas de
protección genéricos, que comprenden proteínas antimicrobianas y péptidos, que
brindan protección contra las infecciones microbianas y también se encuentran en otras
secreciones de protección.

Con la excepción de las inmunoglobulinas, los componentes antimicrobianos de la

saliva no se centran en la eliminación de especies específicas (cariogénicas), como
Streptococcus mutans (tabla 2). Más bien impiden el crecimiento masivo o excesivo de
mi-croorganismos, y rigen el establecimiento y mantenimiento de un ecosistema
estable en el que las especies inofensivas suleran en número a las especies
potencialmente peligrosas, formando así un protección en su propio derecho.
 En este trabajo se discutirán diferentes aspectos de la acción antimicrobiana de una serie
de sistemas de protección salivales.

Table 1. Proteínas Antimicrobianas en

Salivary (glyco)protein Tissue of origin Relative %
las glándulas salivales
MUC5B (mucin MG1) all mucous salivary glands 5-20
MUC7 (mucin MG2) all mucous salivary glands 5-20
Immunoglobulins B lymphocytes: in all salivary glands 5-15
Proline-rich glycoprotein parotid 1-10
Cystatins submandibular > sublingual 10
Histatins parotid and submandibular 5
EP-GP (= GCDFP15, SABP, PIP) submandibular, sublingual 1-2
Agglutinin (= DMBT1, gp340) parotid > submandibular > sublingual 1-2
Lysozyme sublingual > submandibular, parotid 1-2
Lactoferrin all salivary glands: mucous > serous 1-2
Lactoperoxidase parotid > submandibular <1
Cathelicidin (hCAP18, LL37) salivary glands, neutrophils <1
Defensins salivary glands, epithelial cells, neutrophils <1

Propiedades protectoras de las principales proteínas

salivales
Las proteínas antimicrobianas más importantes de la saliva, y su origen glandular, se
resumen en la tabla 1.

Las inmunoglobulinas salivales pertenecen principalmente (> 85%) a la subclase IgA

y en menor medida a la subclase IgG. Juntos constituyen aproximadamente el 5-15% del
total de proteínas salivales. La IgA salival sintetiza por los linfocitos B, situados en la
proximidad de los epitelios secretores.

Después de la secreción en el fluido intersticial, que es absorbido por las células acinares
y ductales de la glándula salival y posteriormente secretada en la saliva. IgG en saliva
deriva principalmente de fluido crevicular filtrado en la cavidad oral. Debido a sus
características de unión altamente específicas, una sola inmunoglobulina se une y aglutina
a sólo una o como mucho, unas pocas especies microbianas de reacción cruzada. Sin
embargo, toda la población de inmunoglobulinas salivales se une a la mayoría de los
microorganismos presentes en la saliva, presentando así un sistema de defensa de
amplio espectro. En contraste con las inmunoglobulinas en el suero, IgA en la saliva no
funciona como un agente de opsonización, ya que en condiciones normales no hay células
T citotóxicas presentes en la saliva. También componentes del sistema del complemento,
que en el suero causan muerte directa de las bacterias, están ausentes en la saliva. Por lo
tanto, las funciones principales de inmunoglobulinas salivales tentativamente serán
inhibición de la adherencia y la colonización bacteriana, por ejemplo, mediante el
bloqueo de las estructuras de superficie implicadas en la unión.

Las mucinas constituyen otra clase importante de glicoproteínas salivales. En la saliva no

estimulada, son los componentes principales, constituyendo el 20-30% del total de
proteínas. Se pueden distinguir dos tipos de genéticamente diferentes de mucinas
salivares:

1. MG1, mucina (Mr 10-30 MDA) de alto peso molecular, codificada por el gen MUC5B.
2. MG2, mucina (Mr ~ 130 kDa), de bajo peso molecular, producto de la traducción del
gen MUC7.

Una carcterística de las Mucinas es la abundancia de cadenas laterales de

carbohidratos, que se encuentran unidas covalentemente a las cadenas principales de
polipéptidos, obligando a la molécula a tener una conformación extendida. Sobre una base
de peso, los hidratos de carbono comprenden de un 60% (para MUC7) a un 80% (para
MUC5B) de la molécula.

1. Las grandes dimensiones y forma alargada de MUC5B, en combinación con la

presencia de un recubrimiento de azúcar hidrofílico, son responsables del carácter
viscoelástico de soluciones que contienen MUC5B. MUC5B se sintetiza
exclusivamente en las células acinares mucosas de toda glándula salival
(sero) mucosa. MUC5B es un componente de las capas de proteínas que se forman
en el esmalte dental después de incubación prolongada con saliva, y es
indispensable para la función de barrera de protones de las llamadas películas.
Debido a sus propiedades hidrofílicas, MUC5B contiene películas que lubrican
las superficies dentales, protegiéndolas contra el desgaste mecánico. A pesar de
su gran variedad de población de oligosacáridos, que son receptores potenciales
para adhesinas bacterianas, MUC5B se une a relativamente pocos
microorganismos orales, incluyendo “Haemophilus parainfluenzae” y
“Helicobacter pylori”.
2. El bajo peso molecular de la mucina MUC7 difiere de MUC5B en estructura,
localización y función. MUC7 es una sola proteína monomérica, con cadenas
laterales de oligosacáridos cortos (de 2 o 3 residuos de longitud). MUC7 se sintetiza
en las células acinares y serosas de las glándulas (serio)mucosas y es
detectable en todas las glándulas salivales (serio)mucosas..

En contraste con MUC5B, MUC7 se une a una gran variedad de especies bacterianas,
incluyendo S. Mutans. Ambas mucinas han sido implicados en la protección contra
los virus.

La glicoproteína rica en prolina, que sólo está presente en la saliva parótida,

representa aproximadamente el 15-20% de todas las proteínas parótidas. En la saliva no
estimulada es un componente menor que aumenta con el aumento de la estimulación
de las glándulas parótidas a aproximadamente 10% en toda la saliva estimulada. Esta
pequeña glicoproteína catiónica (Mr 36 kDa) interactúa especialmente con “Fusobacterium
nucleatum” y está implicada en la formación de placa.
 Salivary protein Properties

Agglutinin aggregation of bacteria

Cathelicidin (LL37) broad-spectrum killing of bacteria
Cystatins/VEGh protease inhibitor
Defensins broad-spectrum killing of bacteria
EP-GP unknown
Histatins broad-spectrum killing of bacteria
Immunoglobulins inactivation and aggregation of bacteria
Lactoferrin growth inhibition
Lactoperoxidase growth inhibition
Lysozyme killing
MUC5B (mucin MG1) proton-diffusion barrier in pellicle
MUC7 (mucin MG2) aggregation
Proline-rich glycoprotein unknown: aggregation?
Proline-rich proteins (aPRPs) adherence
Proline-rich proteins (bPRPs) unknown: membrane disturbing?
Statherin adherence

Table 2. Salivary proteins: protective properties

Propiedades protectoras de las proteínas salivales

menores
Además de las principales proteínas descritas anteriormente, que representan
aproximadamente el 50% de las proteínas totales, la saliva contiene una serie de proteínas
antimicrobianas que están presentes en concentraciones más bajas (tabla 1). Un número
de estas son enzimas que incluso en bajas concentraciones pueden ejercer actividad
biológica significativa. Ejemplos de proteínas con actividad enzimática antimicrobiana
son lactoperoxidasa y lisozima.

1. Lactoperoxidasa cataliza la oxidación de SCN- por el peróxido de hidrógeno, lo que

resulta en la formación de OSCN-.
2. La lisozima (muramidasa) es otro ejemplo de enzima antimicrobiana. Por hidrólisis
de la pared celular de polisacáridos, hace que las bacterias sean más vulnerables
a la lisis, debido a, por ejemplo, condiciones hipo-osmóticas en la saliva, u otros
componentes antimicrobianos. Sorprendentemente, después de la inactivación
por calor, la lisozima todavía muestra actividad bactericida, probablemente a
través de su carácter catiónico. Esto sugiere un mecanismo de trabajo de dos
etapas, que implica:
1- escisión enzimática inicial de la pared celular
2- seguida de la matanza de la bacteria debido a la perturbación físico-química de
la membrana celular por la misma lisozima o por otros sistemas antibacterianos.

Los estudios sobre la acción cooperativa de sistemas de defensa salivales en condiciones

fisiológicas son escasos, pero es concebible que la acción concertada de las proteínas que
tienen diferentes mecanismos de acción, aumenta el poder de la defensa oral.
La lactoferrina es un ejemplo de una proteína antimicrobiana. Su acción antimicrobiana
se atribuye generalmente a su propiedad quelante de hierro, que priva a los
microorganismos de este elemento esencial. Además de las exposiciones de lactoferrina
en actividades anti-inflamatorias in vitro.

Por otra parte, varios dominios están presentes sin cadenas de polipéptidos que presentan
actividad antimicrobiana. Una de ellas es la lactoferricina, un péptido N-terminal de
residuos de 40 aminoácidos que se libera tras unión de pepsina y digestión de tripsina.
Lactoferricina es un péptido catiónico que tiene un amplio espectro actividad
bactericida.

Otro dominio de la lactoferrina se ha implicado en la unión a aglutinina salival, lo que

sugiere que ambas proteínas salivales pueden actuar en conjunto. La aglutinina salival se
caracterizó originalmente como una glicoproteína de “S.mutans-agglutinating” aislada de la
saliva parótida, pero también está presente en la saliva submanmandibular y sublingual.
Ahora se ha puesto de manifiesto que, además de S. mutans, una variedad de otros
microbios están obligados por agglutinina. La unión parece estar mediada por un tramo de
péptido relativamente corto, en el receptor de Dominios Scavenger. Además de estar en la
saliva, aglutinina o proteínas estrechamente relacionadas se han detectado en el fluido
pulmonar, designado gp-340, y en el cerebro, designado DMBT1.

Fig. 1. Principales funciones de la saliva en relación con sus constituyentes

Propiedades de protección de péptidos salivales

En la saliva, se pueden distinguir al menos, tres tipos de péptidos antimicrobianos:
 1. Histidinas
2. Defensinas
3. hCAP18 / LL37, catelicidina humana.

1-De estos péptidos antimicrobianos salivares, las histatinas han atraído la mayor atención
en las últimas décadas. Estos péptidos antimicrobianos tienen una amplia actividad
antimicrobiana no sólo contra bacterias, sino también contra las levaduras. Tales
péptidos no solo pueden ser usados como plantillas para desarrollar una nueva generación
de antibióticos, ya que trabajan muy rápidamente y de manera eficiente, mientras que
son insignificantemente citotóxicos y no evocan resistencia. Años antes del
descubrimiento de los magaininas, se informó que las proteínas ricas en histidina en la
saliva humana habían matando actividad contra Candida albicans y S. Mutans. Desde
entonces la mayor parte de la investigación sobre histatinas se ha centrado en su actividad
fungicida. Las histatinas se sintetizan en las glándulas parótidas y submandibulares,
lo que significa que tanto bajo condiciones estimuladas y no estimuladas de flujo de
saliva, las histatinas serán secretadas en la saliva. El fungicida, y en menor medida la
actividad bactericida, de histatinas es sensible a la fuerza iónica, disminuyendo con el
aumento de las concentraciones de sal.

2-Las glándulas salivales contribuyen relativamente poco a la población defensina en la

saliva, que se deriva principalmente de células y neutrófilos epiteliales. En particular,
durante las inflamaciones bucales, por ejemplo, la expresión de Beta-defensinas-2 es
regulada.

3-Lo mismo es cierto para hCAP18 / LL-37, calcetín una humana, derivada de neutrófilos
y de las glándulas salivales. Para hCAP18, el precursor de LL-37, ninguna actividad
biológica se ha demostrado hasta el momento. La activación de los resultados hCAP18 en
la liberación de LL-37, que consiste en los 37 aminoácidos C-terminal, que tiene un amplio
espectro de actividad antimicrobiana.

Future Perspectives for Research

Información sobre el mecanismo de acción, además de los conocimientos de la relación
estructura-función de antimicrobianos, proteínas y péptidos, hace que sea posible el diseño
de péptidos pequeños biológicamente activos que se pueden utilizar como antimicrobianos
naturales. En muchos casos no es necesario para biosintetizar mediante técnicas
recombinantes de la cadena polipeptídica conjunto de proteínas biológicamente activas y
por tanto solo péptidos, que comprenden el dominio funcional. Esto abre nuevas
perspectivas para la aplicación de péptidos como instrumentos para luchar combatir
microorganismos multirresistentes, o como aditivos en los enjuagues bucales, para
restaurar funcionalidad en pacientes en los que se ve comprometida la protección
natural.

Impacto potencial en la práctica clínica

Nuevas formulaciones contienen péptidos antimicrobianos derivados de componentes
salivares naturales que han sido probados por su aplicabilidad en el tratamiento de
procesos inflamatorios orales tales como la gingivitis y la periodontitis. Ejemplo de
un péptido antimicrobiano potencial, clínicamente aplicable es IB-367, un péptido sintético
derivado de protegrina con actividad antimicrobiana in vitro e in vivo frente a la
microflora asociada con la mucositis oral en Protegrina es el análogo porcino de
catelicidina humana.

Otro ejemplo es el P113, un fragmento de ácido 11-amino-3 de la histatina. La

aplicación tópica de P113, o el uso de un enjuague bucal que contiene P113, conduce
a la reducción significativa de la gingivitis experimental, sin causar efectos
secundarios. Además, el derivado P113D no hidrolizable conserva su actividad de
eliminación de Pseudomonas aeruginosa en presencia de esputo con aumento de las
concentraciones de electrolitos de pacientes con fibrosis quística.