UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

EAP. MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA

LABORATORIO DE ANÁLISIS QUÍMICOS Y BIOLÓGICOS

PROFESORA:
GUTIERREZ ARAUJO, Mayra Karina

ESTUDIANTES:
AGUILAR RODRIGUEZ, Smith
BARRETO LA CUNZA, Kevin

Trujillo – Perú
2019
 REAGINA PLASMÁTICA RÁPIDA (RPR)

I. INTRODUCCIÓN:

La sífilis es una enfermedad infecciosa causada por Treponema pallidum y aunque se

conocía desde finales del siglo XV, no fue hasta 1905 que Fritz Shaudin y Erich
Hoffman descubrieron el microorganismo (m.o.) espiral en el suero de una lesión
sifilítica secundaria.

Hasta el presente no ha tenido éxito la búsqueda de una vacuna, afortunadamente la

penicilina es eficaz en el tratamiento de la infección. Sin embargo, la experiencia
acumulada nos ha enseñado que ésta por sí sola no es suficiente, pues, aunque el
problema de la sífilis ha perdido, por lo general, gran parte de su gravedad, se ha
observado en los últimos tiempos un recrudecimiento inquietante de las infecciones
recientes de cierto número en diferentes regiones del mundo.

La transmisión congénita es menos frecuente, pero sigue observándose en proporción

suficiente para justificar el mantenimiento de las medidas preventivas.

El control de la sífilis depende de una combinación de factores que incluyen un alto

índice de sospecha, agudeza clínica, la historia epidemiológica, pruebas de
laboratorio y tratamiento.1

La prueba RPR (reagina plasmática rápida) utiliza un antígeno con partículas de

carbón y
detecta el padecimiento de sífilis. Es una prueba no treponemas y mide los
anticuerpos
presentes en la sangre de personas que pueden tener la enfermedad. Si la prueba de
detección es positiva, el siguiente paso es confirmar el diagnóstico con una prueba
más
específica para sífilis, como FTA-ABS. Esta última ayudará a diferenciar entre sífilis y
otras
infecciones o afecciones.

Todas las pruebas no treponémicas se basan en antígenos compuestos de soluciones

alcohólicas con cantidades predeterminadas de cardiolipinas, colesterol y lecitinas.
Miden
simultáneamente inmunoglobulinas IgG e IgM frente a estas sustancias que son
producidas
en los tejidos dañados por la treponema o por otras enfermedades. Puesto que no
miden
anticuerpos específicos frente a T. pallidum su positividad no asegura la enfermedad
 sifilítica.
Todas las pruebas no treponémicas pueden presentar fenómenos de prozona - falsos
negativos - cuando las muestras son fuertemente reactivas, por lo que es conveniente
titularlas siempre. Esto es especialmente cierto cuando la prueba se realiza con
muestra no
diluida y con un procedimiento incorrecto (como dispensar el antígeno sobre la
muestra no
extendida en el círculo de reacción). La temperatura de los reactivos es igualmente
importantísima en relación con la sensibilidad. También puede obtenerse un resultado
negativo en las fases muy tempranas del período primario, incluso cuando la
visualización
de las treponemas es positiva.

La presente práctica pretende conocer el procedimiento de la prueba RPR para el

diagnóstico de sífilis e interpretar los resultados.

II. MATERIALES Y MÉTODOS:

2.1. Materiales
 Reactivo A (antígeno de cardiolipina 0,003%, lecitina 0,02% y colesterol
0,09%, sobre partículas de carbón 0,02% tratado en buffer fosfatos 0,01
mol/l con cloruro de colina 0,72 mol/l, EDTA 12,5 mmol/l ).
 Control Positivo (dilución de suero reactivo).
 Control Negativo: (dilución de suero no reactivo).
 Muestra biológica: Suero o plasma.
 Solución fisiológica (ClNa 9 g/l).
 Tarjetas de reacción.
 Gotero metálico para dispensar el reactivo.
 Goteros plásticos descartables para dispensar y distribuir las muestras.
 Agitador rotativo de 100 rpm.

2.2. Método
a) Prueba cualitativa
Llevar a temperatura ambiente los reactivos y la muestra antes de realizar
el ensayo.
En cada uno de los círculos de la tarjeta de reacción colocar con un gotero
plástico, 1 gota (50 ul) de Muestra o Controles Con el extremo cerrado del
gotero distribuir la muestra uniformemente en todo el círculo.
 Con el gotero metálico, en posición vertical, agregar en el centro del
círculo, 1 gota (17 ul) del Reactivo A y SIN MEZCLAR, hacer rotar
horizontalmente la tarjeta de reacción en forma manual o con agitador
rotativo a 100 rpm durante 8 minutos.
Observar la presencia o ausencia de aglutinación al cabo de este tiempo.
Nota: Tiempos de lectura mayores pueden dar lugar a falsos resultados.

b) Prueba semicuantitativa

Efectuar diluciones seriadas 1:2, 1:4, 1:8, hasta 1:64 empleando solución
fisiológica y
proceder de la misma manera que en la técnica cualitativa.
El título estará dado por la inversa de la última dilución que se observe
reactiva.
Interpretación de los resultados
Reactivo: presencia de aglutinación visible en forma de grumos negros
sobre el fondo
claro, indica presencia de "reaginas" en la muestra.
No reactivo: aspecto gris homogéneo, indica ausencia de "reaginas" en la
muestra.

III. RESULTADOS:

Reactivo: Presencia de aglutinación visible en forma de grumos negros sobre el fondo

claro que indica presencia de "reaginas" en la muestra.
No reactivo: Aspecto gris homogéneo que indica ausencia de "reaginas" en la
muestra.

IV. COMENTARIOS:

En la prueba rápida para reaginas plasmáticas (RPR), las "reaginas" presentes

en el suero de individuos infectados con Treponema pallidum, se detectan por
acción de las mismas con antígeno de cardiolipina, lecitina y colesterol
adsorbido sobre partículas de carbón. La reacción produce una aglutinación
visible macroscópicamente, favorecida por las partículas de carbón. Las
reacciones inespecíficas se evitan con el empleo de antígeno altamente
purificado y el agregado de cloruro de colina, por lo que no es necesario
inactivar la muestra.
 El Reactivo A debe dispensarse manteniendo el gotero en posición vertical
respecto de la tarjeta de reacción a fin de asegurar que el volumen de la gota
sea el correcto. A temperaturas elevadas o humedad ambiente baja se
recomienda el uso de una cámara húmeda durante la rotación, para evitar que
las muestras se sequen.
En individuos con cuadros patológicos diversos como hepatitis, influenza,
brucelosis, lepra, malaria, asma, tuberculosis, cáncer, diabetes y enfermedades
autoinmunes, pueden obtenerse resultados falsos positivos.
Estos casos se presentan con títulos bajos y una historia clínica que no
coincide con las características de sífilis.
Pueden observarse resultados falsamente negativos cuando se presenta el
fenómeno de prozona. Por este motivo se recomienda repetir la prueba con
muestra diluida al 1:5 con solución fisiológica para verificar el resultado. Si en
estas condiciones se observa aglutinación, la muestra es reactiva.
No obstante, las ventajas del método, sus resultados, al igual que los de
cualquier método serológico, sólo constituyen un dato auxiliar para el
diagnóstico que debe corroborarse con la historia clínica del paciente.

V. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
 Zinsser Microbiología, Joklik W., Willett H. y Amos D., 17o edición Editorial
Médica Panamericana, 1983.
 Manual of Tests for Syphilis, cap. 8 - American Public Health Association,
Washington, D.C 20005, 1990.
 McGrew, B.E. et al. - Am. J. Clin. Path. 50:52, 1968.
 Stevens, R.W. and Stroebel, E. - Am. J. Clin. Path. 53:32, 1970.

VI. ANEXOS:
FIG.1. Prueba RPR en tarjeta de reacción, a la izquierda se observa de aspecto
gris homogéneo que indica ausencia de "reaginas (No reactivo), y a la derecha
presencia de aglutinación visible en forma de grumos negros sobre el fondo
claro que indica presencia de "reaginas" en la muestra (Reactivo).

FIG.2. Kit de Prueba RPR - VDRL