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Guía de trabajos prácticos

2023
Unidad Curricular 8

Histología general y biofísica del músculo y


la locomoción
Facultad de Medicina - UdelaR

Participan en el curso práctico 2023:

Br. Clara Fernández Dra. Camila Julián Br. Paulina Simoes


Br. Nadia Hornos Br. Paula Pintos Dra. Agustina Toledo
Br. Santiago Vidal Br. Jóselin Piriz
Br. Ramiro Veleda
Br. Sofia Salgueiro
Br. Belén Rouvier Br. Lucas Vignolo
Br. Sofía López
Br. Santiago Pietroroia

Coordinación

Dra. Fernanda Skowronek - Dr. Gabriel Anesetti


PRÁCTICO N°2 – TEJIDO CONJUNTIVO – VARIEDADES – ADIPOSO - CARTILAGINOSO

Objetivos:

Al finalizar esta actividad el estudiante deberá ser capaz de:


1. Conocer los componentes tisulares pertenecientes al tejido conjuntivo.
2. Comprender la organización general y distribución del tejido conjuntivo, y los
criterios para la clasificación de sus distintas variedades.
3. Interpretar en preparaciones histológicas las características celulares distintivas,
nucleares o citoplasmáticas, los componentes de la matriz y organización tisular de
las diferentes variedades de tejido conjuntivo.
4. Clasificar y conocer las variedades especializadas de tejido conjuntivo (tejido
adiposo y cartilaginoso).
5. Relacionar la organización histológica de las distintas variedades con su función.

Materiales:

Preparados Nº 9 – Intestino - Tejido conjuntivo laxo y tejido conjuntivo denso H-E


Preparado Nº 112 – Piel. H-E
Preparado N°15 – Tendón. H-E
Preparado N° 21 - Tejido adiposo blanco (adulto). H-E
Preparado N° 22 – Tejido adiposo pardo. H-E
Preparado N° 60 - Tráquea. Cartílago hialino. H-E
Preparado N° 27 - Cartílago Elástico. H-E
Preparado N° 28 - Corte de Raquis. Fibrocartílago. TCG
Preparado N° 130 - Cartílago Articular. H-E
Micrografías ópticas de inmunohistoquímica vinculadas a las preparaciones
histológicas
Micrografías electrónicas vinculadas a las preparaciones histológicas

Actividades:

PREPARADO N°9 – INTESTINO. H-E

Este preparado corresponde a un corte de


intestino, ya fue estudiado en el práctico anterior
para identificar el tejido epitelial, y ahora nos
avocaremos al análisis del tejido conjuntivo. En el
mismo podrá observar variedades de tejido
conjuntivo y sus componentes. Las variedades que
podrá observar corresponden al tejido conjuntivo
laxo y al denso irregular. Para ello nos
detendremos en los sectores de tejido conectivo
que presenta dicho órgano (lámina propia y
submucosa).
Deberá identificar ambas variedades de tejido conjuntivo, así como sus componentes
celulares y fibrilares.
A menor aumento localice la lámina propia, inmediatamente por debajo del epitelio, en
el eje de las vellosidades intestinales, formando parte de la mucosa, conformada por
tejido conjuntivo laxo donde verá los componentes celulares del tejido. En la
submucosa observará tejido conjuntivo denso irregular y las fibras dispersas en el
mismo.
A mediano y mayor aumento en la lámina propia se verán fibroblastos,
polimorfonucleares, plasmocitos, linfocitos, etc. Los fibroblastos se caracterizan por la
presencia de un núcleo generalmente ovalado, eucromático y con nucléolo evidente.
Esta descripción corresponde a los fibroblastos en actividad ya que los fibrocitos poseen
un núcleo más pequeño y heterocromático. Asimismo, podemos encontrar muchas de
las células sanguíneas como ser: polimorfonucleares (neutrófilos), eosinófilos y
linfocitos ubicados en la lámina propia. También pueden identificarse, aunque no tan
fácilmente, macrófagos, los cuales se caracterizan por ser células grandes, de núcleo
irregular y muchas veces arriñonado. Los otros tipos celulares fácilmente identificables,
en esta localización, son los plasmocitos, caracterizados por su núcleo excéntrico y con
cromatina dispuesta en rueda de carro.
Con esta técnica, además de las características nucleares, pueden estudiarse detalles
citoplasmáticos de las células. En el fibroblasto además de las características nucleares
citadas se observa su forma groseramente fusiforme con delgadas prolongaciones y su
citoplasma ligeramente eosinófilo. En el macrófago es posible observar un citoplasma
de aspecto heterogéneo con límites irregulares. En los plasmocitos es factible observar
que la mayor parte del citoplasma es netamente basófilo.
En la submucosa identificará fibroblastos, vasos sanguíneos y una gran abundancia de
fibras colágenas de diferentes diámetros, eosinófilas, dispuestas en diferentes
direcciones. Las fibras colágenas se observan como gruesos haces eosinófilos
groseramente rectos, y fibras elásticas delgadas y de forma flexuosa, más difíciles de
observar. Las fibras reticulares necesitan de técnicas específicas para su visualización.
Dado que las fibras en este tejido no presentan un ordenamiento reconocible, lo
clasificamos como un tejido conjuntivo denso irregular.
Más externamente se encuentra la capa muscular, formada por músculo liso el cual
veremos en otro práctico.

PREPARADO N°15 - TENDÓN. H-E

A simple vista podrá reconocer en el preparado dos sectores de coloración eosinófila.


En ambos sectores el sentido del corte fue diferente por lo que observará haces cortados
longitudinal y transversalmente. Diferencie el tejido conjuntivo denso regular del tejido
muscular que habitualmente lo acompaña. En el tendón podrá observar estructuras
fibrilares gruesas dispuestas en paralelo, que con esta tinción se ven intensamente
eosinófilas. Otra característica de las mismas es que no se ramifican. Estas fibras
corresponden a fibras de colágeno. ¿Qué variedad de colágeno es? ¿Cuál es la función
de esta variedad de colágeno en particular?
Entre las fibras de colágeno se pueden observar dispersos núcleos fusiformes con un
citoplasma eosinófilo alargado. ¿A qué tipo celular corresponden? ¿Cuál es su origen
embrionario?
PREPARADO N°112 – PIEL. H-E

En este preparado, podrá


observar el epitelio
superficial, que corresponde
a un epitelio estratificado
plano con capa córnea.
Localice e identifique
también las variedades del
tejido conjuntivo.
Inmediatamente por debajo
del epitelio, formando parte
de la dermis superficial o
papilar, se encuentra tejido
conjuntivo laxo
caracterizado por la gran
abundancia de células. Más profundamente, formando parte de la dermis reticular, se
encuentra una zona más eosinófila correspondiente a tejido conjuntivo denso. ¿A qué
se debe esta diferencia de coloración? ¿Qué características definen cada una de estas
variedades de tejido conjuntivo?
Profundamente en la dermis podrá observar, en algunos preparados, acúmulos de
células adiposas que forman parte del panículo adiposo.

PREPARADO N°21 - TEJIDO ADIPOSO BLANCO (ADULTO). H-E

El preparado corresponde a un corte de tejido adiposo blanco maduro. Observe con el


aumento topográfico un tejido poco coloreado, con tabiques eosinófilos de tejido
conjuntivo laxo, en el que encontrará vasos sanguíneos cortados en todas las
direcciones.
A mediano y mayor aumento observe las características de las células que componen
este tejido, los adipocitos; las mismas son de gran tamaño y de forma poliédrica o
esférica. Histológicamente se caracterizan por presentar una única gota lipídica grande
que ocupa la mayor parte del citoplasma. Ésta desplaza el núcleo hacia la periferia, el
cuál muestra aspecto aplanado. Por estas características se puede denominar también
a este tejido, adiposo unilocular. En el mismo preparado se podrá observar, además,
tejido muscular estriado esquelético, en cantidades variables.

PREPARADO N°22 – TEJIDO ADIPOSO PARDO. H-E

A simple vista observe un preparado más coloreado que el anterior el cual se obtuvo a
partir de un animal de pocos días de vida. En comparación con el preparado analizado
previamente, observe células de forma similar, pero de menor tamaño. A mayor
aumento podrá reconocer un citoplasma de mayor proporción, en el que se distinguen
múltiples gotas lipídicas de diferentes tamaños y un núcleo esférico y excéntrico. ¿En
qué sector de la economía puede ser encontrado? ¿Qué función cumple?
PREPARADO N°60 - TRÁQUEA – CARTÍLAGO HIALINO. H-E

A simple vista observe un


preparado que muestra
el corte transversal de
dos órganos
canaliculares, los cuales
corresponden al esófago
y la tráquea. Éste
preparado ya ha sido
utilizado en el práctico
anterior. Para esta
actividad debe centrar su
atención en la tráquea.
Con el aumento
topográfico identifique
en su pared un tejido basófilo, que corresponde al cartílago hialino. Observe el aspecto
homogéneo de su matriz.
A mediano y mayor aumento reconozca las células que constituyen este tejido, las cuales
se denominan condrocitos, y los espacios que ocupan, llamados condroplastos.
Identifique los llamados grupos isogénicos, formados por condrocitos originados
mediante divisiones mitóticas de una misma célula. Dentro de estos se diferencian los
axiales, dispuestos en columnas; y los coronarios, dispuestos en forma de corona.
Analice la matriz ¿es posible observar diferencias tintoriales en la misma? ¿A qué se
deben?
Observe el tejido conjuntivo denso que rodea el cartílago, llamado pericondrio, el cual
se subdivide en un sector externo fibroso, debido a la abundancia de haces de colágeno
y un sector interno celular o condrogénico.
¿Ha visto vasos sanguíneos dentro del cartílago? ¿Es esto habitual? ¿Cómo se nutre este
tejido?

PREPARADO N°27 - CARTÍLAGO ELÁSTICO. H-E


Este preparado corresponde a un corte del pabellón auricular. Localice a menor
aumento la placa cartilaginosa que se encuentra en el centro.
A mediano y mayor aumento observe las características del pericondrio; compare el
número de condrocitos con respecto al preparado anterior, repase sus características.
Busque grupos isogénicos. Identifique en la matriz los sectores que corresponden a
matriz territorial y matriz interterritorial, ¿a qué se debe la diferencia tintorial? Observe
en la matriz la disposición de elementos fibrilares que corresponden a fibras elásticas.

PREPARADO N°28 - CORTE DE RAQUIS – FIBROCARTÍLAGO. TCG.

En un corte longitudinal de
la columna vertebral
observe los cuerpos
vertebrales en proceso de
osificación. A aumento
topográfico encontrará
entre dos cuerpos
vertebrales una estructura
de forma discoidea que
corresponde al disco
intervertebral.
En el centro puede
observar la región del
núcleo pulposo formada
por tejido condroide y en
torno a él verá
fibrocartílago.
A mediano y mayor
aumento observe la
disposición concéntrica de
los condrocitos y el
aspecto de la matriz. ¿Qué
componentes predominan
en la misma? ¿Cómo los evidencia con esta técnica de coloración?
PREPARADO N°130 - CARTÍLAGO ARTICULAR – CORTE DE RODILLA DE RATA. H-E

Este preparado corresponde a un corte longitudinal de miembro inferior de un animal


joven, que no ha terminado su crecimiento. Observe la pierna y el muslo, identifique a
mediano y mayor aumento las estructuras cartilaginosas que conforman la articulación
de la rodilla: tibia, fémur y rótula. Verá un sector de partes blandas compuesto por tejido
muscular esquelético que se encuentra próximo a la articulación.
Localice el cartílago articular, como su nombre lo indica, se ubica en el sector de la
articulación; el mismo corresponde a una variedad de cartílago hialino que carece de
pericondrio. Analice sus características morfológicas.

Microscopía
Microscopía electrónica
electrónica de
de transmisión. Tejido
transmisión. Tejido
conjuntivo laxo.
conjuntivo laxo.
Fibroblasto, fibras
Fibroblasto, fibras
colágenas y elásticas
colágenas
Microscopía
Microscopía electrónica
electrónica de
de transmisión.
transmisión. Fibras
Mastocito
colágenas.

Microscopía electrónica
de transmisión. Microscopía
Macrófago electrónica de
transmisión. Tejido
conjuntivo laxo. Fibras
Microscopía electrónica
colágenas y elásticas
de transmisión.
Plasmocito

Cartílago hialino. Pericondrio. Cartílago Hialino. Condrocitos activos.


Microscopía óptica. Microscopía Electrónica de Transmisión.
Fibroblastos - Inmunohistoquímica para SDF-1 (Stromal cell-derived
factor 1)en un corte de piel humana. La inmunopositividad aparece
de color rojizo y marca el citoplasma de los fibroblastos. La imagen
de la derecha muestra la misma técnica en el tejido de granulación,
con fibroblastos activos, más numerosos y de citoplasma más
abundante.
Mastocitos – Identificación de estas células mediante un anticuerpo
que reconoce la presencia de triptasa, enzima localizada en los
gránulos de los mastocitos. Se puede ver la distribución de estas
células en la lámina propia del intestino.
Macrófagos – Detección inmunohistoquímica de macrófagos en el
tejido linfoideo, marcados con un anticuerpo anti-lisozima, una
enzima lisosómica (no exclusiva de estas células). Note que su
morfología no siempre coincide con las descripciones clásicas.
Eosinófilos – Detección inmunohistoquímica de Inmunoglobulina
tipo A (IgA) en la mucosa intestinal. Permite conocer distribución y
abundancia de los eosinófilos en este tejido.
Neutrófilos – Detección de granulocitos neutrófilos en un proceso
inflamatorio agudo del tejido conjuntivo. Inmunoreactividad para
lisozima (la misma que en el caso de los macrófagos). Compare
ambas fotos e identifiquelas diferencias que permiten reconocer uno
y otro tipo celular.
Fibras de colágeno y elásticas – Imagen obtenida por microscopía de
barrido mostrando el colágeno que rodea a las células epiteliales de
la glándula mamaria con su disposición ondulada (flecha superior) y
tensa (flecha inferior). Fibras con las mismas características y que
responden a la estructura de colágeno pueden ser observadas en
una biopsia del tejido vivo mediante microscopía de barrido laser
multifotónica. La organización del colágeno y la densidad del mismo
pueden tener un profundo efecto en el comportamiento de las
células de cáncer de mama.
La micrografía electrónica muestra la estructura típica de la una fibra
elástica madura, con un eje de elastina y rodeada de microfibillas de
fibrilina, rodeadade fibrillas de colágeno.

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