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MICROBILOGÍA Y

PARASITOLOGÍA
Dalila Silvestre
silvestre.dalila@gmail.com
INTRODUCCIÓN A LA
MICROBIOLOGÍA
¿Qué es la microbiología?

Es la ciencia que
estudia a los
microorganismos
(seres vivos no
visibles al ojo Hongos
humano)

Podemos
clasificarlos en
PROCARIOTAS y Algas

EUCARIOTAS
Bacterias Protozoos
EUCARIOTAS
vs
PROCARIOTAS

EUCARIOTAS PROCARIOTAS
TAMAÑO Son más grandes (10-100 µM) Son más pequeñas (0.1-5 µM)

REPRODUCCIÓN Asexual (mitosis) y sexual (meiosis) Asexual (fisión binaria)

ADN rodeado por envoltura nuclear ADN disperso en el citoplasma


MATERIAL GENÉTICO
(núcleo) (SIN núcleo)

CROMOSOMAS Múltiples cromosomas lineales Un único cromosoma circular

ORGANELAS ESPECIALIZADAS SÍ NO
Introducción a las biomoléculas
ÁCIDOS NUCLEICOS
HIDRATOS DE
ADN (ácido ARN (ácido PROTEINAS LÍPIDOS
CARBONO
desoxirribonucleico) ribonucleico)
Constituidos por
Compuesto por 4 bases Compuesto por 4 Constituidas por Constituidos por
átomos de
nitrogenadas: Adenina, bases nitrogenadas: una secuencia de moléculas muy
Carbono,
Citocina, Guanina y Adenina, Citocina, aminoácidos diversas, a partir
Hidrógeno y
Composición Timina. Y un azúcar: la Guanina y Uracilo. Y (determinada a de átomos de
Oxígeno. Pueden
desoxirribosa. Molécula un azúcar: la ribosa. partir de la Carbono,
formar polímeros
de doble cadena (hélice). Molécula de cadena secuencia en el Hidrógeno y
(ej. glucógeno,
(hélice) simple. ARN). Oxígeno.
almidón, etc).
Almacenan
Almacena la información Regulan procesos
grandes Proveen energía a
importante para todo el celulares. Son
cantidades de los procesos
organismo, la cual está Información copiada estructurales de las
energía a largo celulares: energía a
codificada en el orden de a partir del ADN, con paredes celulares.
Función plazo. También corto plazo.
los nucleótidos. instrucciones para la Muchas son
constituyen las También función
Transfiere la información síntesis de proteínas. enzimas que
membranas estructural (ej.
de generación en cumplen funciones
plasmáticas de peptidoglicano).
generación. específicas.
eucariotas.
Introducción a las macromoléculas involucradas en los
procesos biológicos
La secuencia de ADN (el
orden de nucleótidos)
determina la secuencia
del ARN, que a su vez
Transcripción determina la secuencia
Traducción
de las proteínas (el
Replicación
orden de aminoácidos).
Transcripción
reversa
Según la secuencia de
PROTEINA
aminoácidos, cada
proteína cumple una
función específica.
ADN ARN
¿Cómo nos relacionamos con los microorganismos?
Relaciones interespecíficas:

• MUTUALISMO: tanto el microorganismo como el hospedador se benefician de


la convivencia, aunque ninguno necesita del otro para sobrevivir. Ej.: bacterias que
habitan en nuestro intestino. Allí encuentran un ambiente adecuado para vivir y
ayudan a nuestro organismo en la digestión de los alimentos.

• COMENSALISMO: el microorganismo puede obtener beneficios sin afectar al


hospedador. Ej.: bacterias que habitan en nuestra piel. Se alimentan de los
desechos de nuestras células sin causarnos daño ni beneficiarnos.

• PARASITISMO: el microorganismo depende del hospedador y obtiene


beneficios, dañando al hospedador. Ej.: hongos que crecen sobre la piel,
alimentándose de ella y causando una lesión.

Los microorganismos que causan enfermedad se denominan PATÓGENOS.


BACTERIOLOGÍA
Bacterias: características generales
• Son los microorganismos más abundantes del planeta.
• Carecen de núcleo > material genético (ADN) disperso en
el citoplasma.
ADN
cromosómico
• Están formadas por:
• Pared celular
• Membrana plasmática
• Citoplasma
• Ribosomas
• Pueden tener fimbrias, cilios y flagelos.
Material genético accesorio y
• ADN cromosómico y ADN plasmídico TRANSFERIBLE. Ej:
Resistencia a antibióticos
ADN Cromosómico vs ADN Plasmídico
ADN cromosómico:
• Es el que la bacteria va a heredar a sus progenitores cada vez que se multiplique.
• Es indispensable para la vida, ya que son las instrucciones para la síntesis de todas las proteínas y el
funcionamiento del microorganismo (obtención de energía, rutas metabólicas, etc.)

ADN Plasmídico:
• Suele ser mucho más pequeño que el ADN cromosómico.
• Es posible que no sea indispensable para la vida del microorganismo, estos se pueden perder o ganar
por transferencia (horizontal) con otras bacterias -> comunicación entre bacterias

• Suelen tener las instrucciones para proteínas ADN cromosómico


específicas que pueden servir para poder nutrirse
a partir de algún azúcar atípico, o pueden tener
las instrucciones para sintetizar factores de
virulencia como ser: una toxina, o una
resistencia a antibióticos.
Clasificación según temperatura óptima de crecimiento

Cada microorganismo tiene una temperatura óptima de crecimiento, en la cual el crecimiento es


más rápido. Esta temperatura es característica de cada microorganismo y puede diferir
enormemente entre especies.
Clasificación según relación con oxígeno
AERÓBICO OBLIGADO y MICROAEROFÍLICO: Necesita el
MAYOR ENERGÍA Oxígeno sí o sí para vivir.
Si utilizan
METABÓLICA:
oxígeno en el
Respiración AERÓBICO/ANAERÓBICO FACULTATIVO: Si hay Oxígeno
metabolismo
aeróbica (E+++++) lo usa (más energía), sino utiliza la respiración
anaeróbica o realiza fermentación.

MENOR ENERGÍA
ANAERÓBICO OBLIGADO: El Oxígeno le es tóxico.
Si NO utilizan METABÓLICA:
oxígeno en el Respiración
metabolismo anaeróbica (E++++)
ANAERÓBICO AEROTOLERANTE: El Oxígeno no le
o Fermentación
resulta tóxico, pero no es capaz de usarlo.
(E++)
Respiración
anaeróbica:
Reemplazan al Fermentación:
Oxígeno con Reemplazan al
compuesto Oxígeno con un
inorgánico. Ej.: compuesto
SO4, NO3, etc. orgánico. Ej.:
ácido láctico,
etanol, etc.
Clasificación según morfología

Vibrio

Tras la división celular, algunas bacterias se agrupan y adoptan una disposición característica…

Diplobacilos
Estreptococos
Diplococos
Tétradas Sarcinas
Estafilococos
Estreptobacilos
Tinción de Gram
La tinción de Gram permite discriminar entre dos
grandes grupos bacterianos: Gram positivas y
negativas. Debido a la composición de sus paredes
celulares, un grupo es capaz de retener el
colorante (cristal violeta), mientras que el otro no.

Gram positivas: son capaces de


retener el colorante > VIOLETAS

Gram negativas: NO son capaces de


retener el colorante > ROSADAS
Esporulación
Las bacterias metabólicamente activas se denominan CÉLULAS VEGETATIVAS.

En condiciones fisiológicas adversas (falta de nutrientes, temperaturas fuera


del rango óptimo, estrés osmótico, etc) Algunas bacterias son capaces de dar
lugar a ESPORAS.

Las esporas NO son metabólicamente activas, sin


embargo, son extremadamente resistentes a las
condiciones de estrés (temperatura, desinfectantes,
etc.)
Cuando las condiciones del entorno vuelven a ser
favorables, estas esporas germinan, dando lugar
nuevamenta a una células vegetativa
(metabólicamente activa).
Cápsula Bacteriana
• La CÁPSULA BACTERIANA es una capa adicional
que recubre la pared celular de algunas
bacterias. Usualmente está formada por
glicoproteínas y polisacáridos. Muchos patógenos
se clasifican de acuerdo al tipo de antígenos
(moléculas que reconoce el sistema inmune) que
presentan en sus superficie.
• Le confiere a la bacterias patógenas una mayor
capacidad infectiva. Permite resistir la
fagocitosis (parte de la respuesta de las células
del sistema inmune) y facilita la adhesión a las
células animales (necesario para infectar).
• Protege a la bacteria de la desecación porque es
una fuente de almacenamiento de agua.
Aislamiento e Identificación de bacterias
• Medios de cultivo: son preparaciones líquidas o sólidas, que replican las
necesidades nutricionales de los microorganismos, con el fin de poder
aislarlos en laboratorio.
• Selectivo: permiten el crecimiento de un tipo de microorganismos
determinado, inhibiendo el desarrollo de los demás.
• Diferencial: permiten distinguir alguna característica del microorganismo
por su crecimiento diferencial en el medio.
• Caracterización fisicoquímica: Se estudian una serie de reacciones
metabólicas, que pueden permitir la “identificación” del microorganismo.
Medios de cultivo selectivos y diferenciales

AGAR EMB AGAR CETRIMIDA AGAR MOSSEL


Cada especie de bacteria tiene colonias con características especificas (forma, color, relieve, olor, etc). Algunos
medios de cultivo pueden poner en evidencia una característica en particular (ej. consumo de un azúcar,
producción de pigmentos, etc).
¿Por qué es importante que podamos aislarlas?
Para poder estudiar un patógeno, es necesario contar con un CULTIVO PURO.
A partir del cultivo puro se puede identificar el microorganismo mediante:
• Caracterización microscópica: morfología y tinción de Gram.
• Caracterización fisicoquímica: mediante diferentes ensayos a fin de conocer el
metabolismo (consumo de azúcares, producción de enzima catalasa, oxidasa, etc.)
• Caracterización molecular: Identificación mediante técnicas de secuenciación del material
genómico.

Una vez identificado, se puede determinar el mejor tratamiento a seguir. Tener un


cultivo puro también permite hacer análisis específicos, como ensayos para
determinar la sensibilidad a distintos antibióticos cuando el microorganismo es
multirresistente.
Colonias aisladas de un microorganismo (cultivo puro)
Hongo
¿Qué son los antibióticos?
Colonia de
Un ANTIBIÓTICO es una sustancia química (natural o bacterias
inhibidas
sintética) que mata a las bacterias (BACTERICIDA) o
inhibe su crecimiento (BACTERIOSTÁTICO).
Pueden ser de amplio espectro (actúan contra varias Colonia de
bacterias
especies de bacterias) o de corto espectro (sólo son normales
eficaces contra familias específicas de bacterias).
Alexander Fleming descubre la
penicilina en 1928 al observar que el
hongo Penicillum inhibía el
crecimiento de la bacteria S. aureus.

MECANISMOS DE ACCIÓN DE LOS ANTIBIÓTICOS


Resistencia a antibióticos
Desde un punto de vista práctico una bacteria es SENSIBLE a
un antibiótico, cuando el antibiótico es eficaz frente a ella y
podemos esperar la curación de la infección; por el
contrario, la bacteria es RESISTENTE cuando su crecimiento
sólo puede ser inhibido a concentraciones superiores a las
que el fármaco puede alcanzar en el lugar de la infección.
Son las bacterias, y no los seres humanos ni los animales, las
que se vuelven resistentes a los antibióticos.

Un ANTIBIOGRAMA es un estudio que permite determinar si


una bacteria específica es sensible o resistente a un
antibiótico. Permiten conocer la Concentración Mínima
Inhibitoria (CIM), es decir, la menor concentración de
antibiótico requerida para impedir que el microorganismo
continúe replicándose. La bacteria es
sensible a este
La resistencia adquirida es transmitida a su progenie. antibiótico

También puede transmitirse a otra bacteria que no es su


progenie por medio de plásmidos. La bacteria es
resistente a este
antibiótico
¿Todas las bacterias son patogénicas?
• Bacterias comensales: conviven con nosotros en distintas partes de nuestro cuerpo,
como la piel y la boca. El grupo más grande habita en nuestros intestinos, donde
forman parte de la barrera intestinal, contribuyen con la absorción de nutrientes y
modulan el sistema inmunológico.
• Bacterias asociadas a procesos fermentativos: lideran procesos fermentativos en los
alimentos, y muchas son capaces de colonizar el intestino y formar parte de la flora
comensal (probióticas).
• Patógenos oportunistas: pueden no resultar ni beneficiosas ni perjudiciales, pero
en determinadas circunstancias (incorrecto funcionamiento del sistema
inmunitario, trasgresión de barreras físicas, etc) pueden volverse patógenas y
causar enfermedad.
• Patógeno: microorganismo capaz de producir alguna enfermedad o daño en un
huésped, sea animal o vegetal. Las bacterias patógenas pueden causar
enfermedades de varias maneras; pueden afectar directamente a las células de su
huésped, producir endotoxinas que dañen las células de su huésped o provocar una
respuesta inmunitaria lo suficientemente fuerte como para que las células del
huésped resulten dañadas.
INFECCIONES
BACTERIANAS
Staphylococcus aureus
• Coco Gram positivo, NO esporulante, aerobios facultativos, mesófilos
(30-37°C), productora de enzimas catalasa y coagulasa.
• Aproximadamente el 20%-30% de la población es portadora de este
microorganismo, habitualmente en fosas nasales, piel y tracto
gastrointestinal.
• Es un patógeno oportunista. Las infecciones más frecuentes son las de
la piel (Ej., impétigo y foliculitis) y de tejidos blandos (forúnculos,
abscesos e infecciones de heridas, sobre todo heridas quirúrgicas).
• Desde el foco de infección los microorganismos pueden diseminarse a
tejidos adyacentes o invadir la sangre y producir cuadros graves de
sepsis, neumonía, endocarditis, artritis u osteomielitis.
• Las toxicoinfecciones alimentarias por S. aureus son una causa
importante de gastroenteritis, causadas por enterotoxinas que no se
destruyen con el calor (termoestables) preformadas en el alimento
contaminado.
• Tratamiento: todas las cepas de S. aureus son resistentes a los
antibióticos betalactámicos (ej. penicilina), se emplean penicilinas
especiales llamadas penicilinas resistentes (cloxacilina o meticilina).
Streptococcus pneumoniae (neumococo)
• Coco Gram positivo, NO esporulante, microaerófilo, mesófilo (25-40°C), no
productora de catalasa, es alfa-hemolítico (puede degradar parcialmente la
hemoglobina), capacidad de formar cápsula.
• Hay más de 90 cepas, y la vacuna es capaz de proteger contra varias de ellas.
• Aproximadamente el 5% de adultos y el 20% de los niños, son portadores de este
microorganismo. Siendo habitual en las regiones orofaríngeas y nasofaríngeas.
• Cuando alcanza tejidos más profundos es capaz de causar enfermedad:
o INFECCIONES PULMONARES INVASIVAS: Estos microorganismos invaden los tejidos
alveolares de los pulmones, donde la cápsula les permite evitar la fagocitosis e inducir
en el huésped una fuerte respuesta inflamatoria. Por la acumulación de líquido y el
reclutamiento de las células fagocíticas se produce neumonía.
o Desde el foco de infección el patógeno puede alcanzar otros tejidos produciendo
INFECCIONES ÓSEAS, DEL OÍDO INTERNO Y ENDOCARDITIS.
o MENINGITIS NEUMOCÓCICA: Generalmente se produce a partir de una infección previa
en el oído.
• Tratamiento: usualmente con penicilina y sus derivados. Frente a cepas
multirresistentes, es posible emplear eritromicina, fluoroquinolonas,
cefalosporinas y otros.
Neisseria meningitides (meningococo)
• Coco Gram negativo, NO esporulante, aeróbica, mesófila (35-37°C), posee
cápsula, prueba de oxidasa positiva.
• Forman parte de la flora normal entre el 5-20% de la población sana. Hay
cepas patógenas oportunistas (no tienen cápsula), y otras que son
patógenas (siempre tienen cápsula). Clasificadas en distintos serogrupos,
ej.: A, B, C, W e Y.
• La meningitis meningocócica se produce sobre todo en niños y
adolescentes; se presenta habitualmente con vómitos, cefalea, fiebre y
rigidez de nuca, y si no se diagnóstica y se trata precozmente origina una
infección diseminada que puede evolucionar muy rápidamente (horas) a un
cuadro dramático de shock séptico con coagulación intravascular diseminada
y fallo multiorgánico, mortal en la mayoría de los casos. Las infecciones del
torrente sanguíneo causan erupciones caracterizadas por manchas rojas.
• Tratamiento: Incluye la utilización de cefalosporinas, un antibiótico que
también protege contra otras bacterias causantes de meningitis.
• La vacuna antimeningocócica conjugada tetravalente (ACYW) protege contra
la enfermedad meningocócica invasiva y sus complicaciones (en lactantes y
adolescentes).
Neisseria gonorreae
• Coco Gram negativo, NO esporulante, aerobio facultativo, mesófila (35-
37°C), a diferencia de N. meningitidis NO poseen cápsula, prueba de
oxidasa positiva.
• Es un patógeno de transmisión sexual y su único reservorio es el ser
humano.
• En el hombre produce Uretitis gonocócica o gonorrea. En la mujer se
manifiesta con cervicitis que es una infección en el cérvix uterino. Puede
resultar asintomática. En algunos casos si no es tratada la infección
puede afectar las trompas produciendo obstrucción y esterilidad.
• Si no es tratado puede llegar a la sangre y producir infección diseminada.
• Es transferible durante el parto, lo que puede provocar conjuntivitis
neonatal.
• Tratamiento: antibióticos que combaten también a cepas resistentes a
penicilina (cefalosporinas o quinolonas).
Clostridium tetani
• Bacilo Gram positivo*, esporulante, anaerobias estrictas, mesófilas (30-
40°C).
• El reservorio suele ser el suelo y el intestino de algunos animales
herbívoros. El ingreso del microorganismo suele ser mediante una herida
contaminada (corte profundo, quemadura, etc.) donde las esporas logran
germinar.
• El desarrollo de la enfermedad es debido a la producción de la toxina
tetánica. la toxina se fija a las terminaciones nerviosas, bloqueando los
impulsos inhibitorios y provocando espasmos musculares prolongados y
dolorosos. en la cara aparece una expresión característica (risa
sardónica) y en estadios más avanzados aparece rigidez de toda la
musculatura extensora, adoptándose una postura en arco rígido
(opistótonos).
• Es una enfermedad NO transmisible, y el período de incubación va de 4
días a varias semanas.
• Hay 3 tipos frecuentes: tétanos generalizado, tétanos local o tétanos
neonatal.
• Tratamiento: Inmunización pasiva (inmunoglobulina antitetánica
humana) e inmunización activa (vacunación con toxina inactivada),
relajantes musculares y ventilación.
Género Escherichia (E. coli)
• El género Escherichia involucra 6 especies de bacterias Gram negativas, siendo la más
relevante E. coli. Son NO esporulantes, anerobios facultativos, mesófilos (37°C),
oxidasa negativos, catalasa positivos.
• Son microorganismos comensales normales de la flora intestinal. Sin embargo, hay
algunas cepas que tienen factores de virulencia (patógenos). Se clasifican según la
presencia de determinadas estructuras en la superficie de la bacteria: antígenos
somático (O), capsular (K) y flagelar (H).
• La transmisión ocurre mediante el agua, alimentos, contacto de persona a persona
(manos), contacto con animales y su materia fecal. Son un indicador de
contaminación.
• Las cepas portadores de factores de virulencia pueden causar infecciones urinarias,
intestinales, intrabdominales, intrahospitalarias, sepsis, meningitis y bacteriemias.
• La cepa O157 es la causante del Síndrome Urémico Hemolítico. Los vasos sanguíneos
de los riñones se dañan e inflaman, provocando la formación de coágulos que generan
insuficiencia renal, lo que puede ser mortal.
• Tratamiento: apoyo de las funciones corporales clave, a veces diálisis renal; en
algunos casos el fármaco eculizumab un inhibidor del complemento del sistema
inmune (los pacientes son susceptibles a infecciones meningocócicas por lo que deben
vacunarse contra la meningitis).
Género Salmonella
• El género Salmonella involucra dos especies de bacterias Gram
negativas, NO esporulantes, anaerobios facultativos. No poseen
capsula y poseen flagelos. Existen numerosos setoripos.
• El reservorio es humano y animal. La forma de adquirir la infección
es a través de carnes (bovinos y porcinos), aves, huevos y derivados,
leche, fruta, verdura, agua, etc.
• S. typhi es la causa de la fiebre tifoidea, una infección sistémica
grave. Ingresa por el intestino hasta llegar a la sangre,
posteriormente se localiza en diversos órganos y produce fenómenos
inflamatorios y necróticos, debido a la liberación de endotoxinas. El
único reservorio es el ser humano (asintomáticos).
• Otros serotipos pueden producir inflamación local, provocando
gastroenteritis y enterocolitis.
• Tratamiento: la fiebre tifoidea suele ser tratada con antibióticos
específicos como el cloranfenicol, la ampicilina o la ciprofloxacina.
Treponema pallidum
• Espiroquetas Gram negativos muy delgados. Difícil de aislar por lo que
es dificultoso caracterizarla en profundidad, aunque es posible
cultivarlas en medios complejos en condiciones anaeróbicas.
• El único reservorio es el ser humano, fuera del mismo no le es posible
sobrevivir.
• T. pallidum es el agente causal de la sífilis, enfermedad de transmisión
sexual.
• La primera manifestación es la aparición de un chancro de inoculación,
y luego ocurren los períodos secundario, de latencia y terciario.
• El diagnóstico se realiza mediante microscopía de muestras tomadas a
partir del chancro de inoculación. Se detectan también anticuerpos
específicos para Treponema mediante métodos serológicos.
• Tratamiento: se utiliza de preferencia penicilina, debido a que el
microorganismo es muy sensible. De forma alternativa es posible utilizar
tetraciclinas o eritromicina.
Mycobacterium tuberculosis
• Son microorganismos ácido-alcohol resistentes y no se tiñen fácilmente con los
colorantes de Gram.
• Es un bacilo, no esporulante, aerobia estricta y una pared celular inusual rica en
lípidos (clave de su virulencia).
• El reservorio de la tuberculosis es casi exclusivamente humano (menos del 5% de
los casos tienen origen animal, bovino fundamentalmente). Se transmite a partir
de aerosoles (inhalación de gotas de saliva en el aire) y con un inóculo muy bajo.
• Infección primaria: Una vez en los pulmones, es fagocitada por los macrófagos,
en los cuales logra inhibir su digestión y crecer. Desde allí, se diseminan al resto
del organismo. Luego de unas semanas el crecimiento se limita y entra a periodo
de latencia.
• Los pacientes con infección latente habitualmente son asintomáticos y no
infecciosos (riesgo de un 10% de desarrollar tuberculosis activa). El riesgo de
enfermedad tuberculosa, con manifestaciones clínicas, aumenta en pacientes
infectados por el VIH.
• La enfermedad tuberculosa se presenta de varias formas que se pueden resumir
en tuberculosis pulmonar (altamente contagiosa), tuberculosis extrapulmonar y
tuberculosis diseminada. En los niños, la meningitis tuberculosa se produce
precozmente después de la infección primaria.
• Tratamiento: aparición de resistencias es el principal problema. Para evitarlo se
administraran de forma conjunta varios fármacos (al menos tres) de forma
prolongada (por lo general 6 meses).

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