REFLACTANCIA/REFLECTANCIA Y REFRACTOMETRIA

CONCEPTOS BASICOS

La luz puede atravesar el material

La luz puede rebotar y volver

FOTOMETRÍA DE REFLECTANCIA

FUNDAMENTO
Técnica que implica la medida de la intensidad de la luz REFLEJADA por
una FASE SÓLIDA. El haz de luz se propaga en un medio homogéneo e
isotrópico. Es directamente proporcional a la concentración del analito en
la muestra. Tras iluminar la fase sólida con un haz de luz de una longitud
de onda, ésta es absorbida por los analitos de interés.

Existen dos tipos de reflexión:

- La reflexión especular, en la que el ángulo del haz incidente es igual
al ángulo del haz reflejado.
- La reflexión difusa, que se produce en superficies rugosas o no tan
pulidas en la cual el ángulo del haz incidente va a ser diferente al del
haz reflejado. Forma como una semiesfera. En una misma superficie
pueden combinarse estos dos tipos de reflexión y para la
espectrofotometría de reflectancia la que nos importa es la
reflexión difusa.
COMPONENTES DE UN ESPECTROFOTÓMETRO DE REFLEXIÓN
- Fuentes de radiación: Lámparas de espectro luminoso continuo de
haluro de tungsteno o lámparas de espectro luminoso discontinuo
como el arco de xenón o los LED.
- Sistemas ópticos o esfera de Ulbricht: conjunto de espejos y lentes
en forma de esfera, cuyo fin es dirigir el haz de luz reflejada al
detector para su lectura.
- Reactivo en fase sólida: tiras reactivas o películas multicapa o slide.
- Detector y procesador de datos: se lee sobre la superficie al usar
tiras reactivas, mientras que se lee por el reverso de la superficie
para sistemas que utilizan slides.
APLICACIÓN/UTILIDAD CLINICA
Se utiliza para realizar los mismo exámenes que comúnmente se harían
con la química líquida, sólo que con esta técnica brinda mayor seguridad al
proporcionar mayor bioseguridad puesto que no se generan desechos
líquidos por lo tanto disminuye el riesgo biológico y además se obtienen
resultados en un tiempo menor, son seguros, exactos y confiables.
*EJEMPLOS DE UTILIZACION
Química seca – Fotometría de reflectancia
Química seca es una técnica que consiste en el empleo de reactivos
previamente deshidratados en una matriz porosa, generalmente tiras
de papel o plástico. La lectura de esta técnica se realiza por inspección
visual o por reflectometría (espectrofotometría de reflexión). Este
método analítico permite medir por reflexión de la luz en una
determinada longitud de onda los cambios de la intensidad de
coloración de una tira.
TIRAS REACTIVAS
Son métodos diagnósticos de química seca y son rentables en el
manejo de problemas concretos (la determinación de un solo
parámetro bioquímico). Lo stiempos de pre-incubación, reacción, la
temperatura, son controlados por el equipo.
POR PELÍCULAS MULTICAPAS (SLIDES)
Mide concentraciones de analitos en fase sólida. Están dispuestos en
diferentes capas que están montadas sobre un soporte de poliester
cortado al tamaño de una estampilla, Los sistemas de película
presentan reactivos como finas láminas superpuestas. Las películas
multicapas poseen 5 capas:
- La PRIMERA es la capa de esparcimiento: Aquí se esparce la muestra
que se medirá.
- La SEGUNDA es la capa difusora: Una capa porosa que permite
distribuir uniformemente la muestra además de funcionar como
filtro ya que no deja pasar moléculas como proteínas, lípidos,
hemoglobina y bilirrubina. También sirve como pantalla para la
reflexión de la luz.
- La TERCERA es la capa de reacción: Puede contener sustancias que
pueden ser enzimas o cualquier sustancia química que se encuentra
en condiciones muy controladas.
- La CUARTA es la capa indicadora: Contiene un colorante para
formar un complejo colorido que será proporcional a la
concentración del analito la cual se cuantifica por
espectrofotometría de reflexión.
- La Quinta es la capa de soporte: es la base de la laminilla donde
están depositadas las demás capas, es de plástico transparente,
permitiendo que pase la luz para ser medida.
VENTAJAS Y DESVENTAJAS
Fotometria de reflectancia
VENTAJAS
- Los reactivos se pueden almacenar mucho más tiempo porque
tienen un periodo mayor de caducidad.
- Los reactivos vienen preparados.

DESVENTAJAS
- Son mucho más caros
- No tienen uso difundido
- Se depende de la casa comercial para todo.
Química seca – Fotometría de reflectancia

VIDEO
https://www.youtube.com/watch?v=raaKd4m1UYk

FALTARIA…

procedimientos para garantía de calidad y mantenimiento preventivo.

https://www.youtube.com/watch?v=Z69aPrNuZ4Y

MANTENIMIENTO PREVENTIVO

- El filtro que impide el ingreso de polvo al equipo debe de lavarse.

- En algunos equipos el mantenimiento aparte de ser diario, se realiza cada 8 y 15 dias.
- Limpiar el cristal cada 15 días con WINDEX, humedecer una fibra que no deje residuos
ni deje rayas.