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UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE NUEVO LEÓN

Químico Clínico Biólogo

Laboratorio de Bioquímica

Profesor: Dra. C. Elsa N. Garza Treviño


Reporte No.4

Práctica 4: Determinación de proteínas totales en suero


mediante el método de Biuret

Equipo 3
Integrantes
Ana Sofía Martínez Castillo / 2009442
Jacqueline Michelle Ledezma Gámez / 1975371
Devani Moreno Sánchez / 1980216
José Manuel Zaleta Rosados / 1997718
Alev Navarro López / 1854453
Rubén Yahir Jacinto González / 1950823
Mauricio Martínez Garza / 1808774

11 marzo 2023
Competencia
Como competencia de esta práctica tenemos el conocer las principales funciones de las
proteínas y la importancia de la determinación de las proteínas totales en suero, así como
también se busca que apliquemos los conocimientos en práctica mediante el método de
Biuret para llevar a cabo esta determinación en el laboratorio de clase.

Marco teórico
Proteínas

Todos los tejidos vivos contienen proteínas. Se distinguen químicamente de los lípidos y de
los hidratos de carbono por contener nitrógeno. Son polímeros de aminoácidos (hay 20
distintos) unidos por enlaces peptídicos. Una proteína puede contener varios cientos o miles
de aminoácidos y la disposición o secuencia de estos aminoácidos determina la estructura
y la función de las diferentes proteínas. Algunas son estructurales (como el colágeno del
tejido conectivo o la queratina que se encuentra en pelo y uñas o la elastina), otras son
enzimas (catalizadores bioquímicos de las reacciones que ocurren en nuestro cuerpo),
hormonas, de protección inmune como las inmunoglobulinas, etc.

Podemos distinguir cuatro niveles de estructuración en las proteínas: Estructura primaria,


estructura secundaria, estructura terciaria y estructura cuaternaria. Los enlaces que
determinan la estructura primaria son covalentes (enlace amida o enlace peptídico),
mientras que la mayoría de los enlaces que determinan la conformación (estructuras
secundaria y terciaria) y la asociación (estructura cuaternaria y quinaria) son de tipo no
covalente.

Las proteínas son el constituyente principal de las células y son necesarias para el
crecimiento, la reparación y la continua renovación de los tejidos corporales y esto
determina su continua necesidad.

Importancia de la determinación de las proteínas totales en suero

Cuando el organismo sufre alguna agresión (infección, traumatismo, intervención


quirúrgica, etc.) se inicia un proceso de reacción para hacerle frente. En el hígado comienzan
a sintetizarse las proteínas reactantes que cumplirán con una función protectora del
organismo al limitar la agresión y contribuir a la reparación.

Durante este proceso de reacción, al que se denomina reacción de fase aguda, la proporción
entre albúmina y globulinas cambia y se alteran las propiedades fisicoquímicas del plasma
de forma representativa. La determinación de las proteínas totales sirve para el diagnóstico
de distintas afecciones en el organismo. Como ejemplo claro tenemos a la albúmina que
constituye el 50-60% de la proteína plasmática. Se sintetiza en el hígado y permanece en
circulación unos 19 días hasta que se metaboliza en los tejidos para los que es fuente de
aminoácidos. Sus funciones más importantes guardan relación con su tamaño, que le
mantiene dentro del torrente circulatorio, contribuyendo a retener líquido en este espacio,
La determinación de las proteínas totales sirve para el diagnóstico de distintas
enfermedades que alteran las proteínas de la sangre, orina o del líquido cefalorraquídeo

Determinar la concentración de proteínas en una muestra biológica es una técnica de rutina


básica cuando se aborda un esquema de purificación de una proteína concreta, cuando se
quiere conocer la actividad específica de una preparación enzimática, para el diagnóstico de
enfermedades, así como para otros muchos propósitos. Existen diferentes métodos para la
cuantificación de proteínas y en este caso nos centraremos en el Método de Biuret.

Método de Biuret

Se basa en la formación de un complejo coloreado entre el Cu2+ y los grupos NH de los


enlaces peptídicos en medio básico. 1Cu2+ se acompleja con 4 NH. La intensidad de
coloración es directamente proporcional a la cantidad de proteínas (enlaces peptídicos) y la
reacción es bastante específica, de manera que pocas sustancias interfieren. La sensibilidad
del método es muy baja y sólo se recomienda para la cuantificación de proteínas en
preparados muy concentrados (por ejemplo, en suero).
Diagrama de flujo
Resultados y cálculos

Mesa 1 Mesa 2

Proteínas
Abs. del 0.148 Abs. del 0.180
problema: problema:
Abs. del 0.135 Abs. del 0.102
estándar: estándar:
0.148 0.108
( ) × 7 = 7.6741𝑔/𝑑𝐿 ( ) × 7 = 7.41 𝑔/𝑑𝐿
0.135 0.102

(7.6741+7.41)
Promedio de ambas mesas: = 𝟕. 𝟓𝟒 𝒈/𝒅𝑳
2

Interpretación de resultados
En la práctica previamente realizada se obtuvo un resultado de 7.54 g/dL como promedio
de ambas mesas que realizaron la determinación de proteínas, lo que esto nos indica es que
lo podemos interpretar como un valor normal o que se encuentra dentro del rango normal
de proteínas totales en suero ya que este rango normal es de 6.3 – 8.2 g/dL, lo que no nos
indica un valor inferior o superior a lo normal.

Conclusiones
Con esta práctica pude comprender la importancia que tienen las proteínas ya que tienen
múltiples funciones como catalizadores bioquímicos de reacciones que se llevan a cabo en
mi cuerpo, la importancia que tienen en el sistema inmune y así también como la función
estructural que tienen en el organismo entre otras. Por lo que mediante el método de Biuret
pudimos comprender y determinar cuántas proteínas totales se encontraban en una
muestra de suero ya que este método ayuda a medir la concentración de proteínas ya que
la intensidad del color que se obtiene es proporcional a la cantidad de proteínas totales que
se tienen.
Bibliografía
Carbajal, Á. (sin inf). Manual de Nutrición y Dietética. Departamento de Nutrición. Facultad
de Farmacia. Universidad Complutense de Madrid. Fecha de consulta: 11/03/2023. [PDF].
Sitio web: https://www.ucm.es/nutricioncarbajal/

Fernández, E. & Galván, A. (sin inf). 27. Métodos para la cuantificación de proteínas.
Departamento de Bioquímica y Biología Molecular, Campus Universitario de Rabanales, Edificio
Severo Ochoa, Córdoba. Fecha de consulta. 11/03/2023. [PDF]. Sitio web:
https://www.uco.es/organiza/departamentos/bioquimica-biol-
mol/pdfs/27%20METODOS%20PARA%20LA%20CUANTIFICACION%20DE%20PROTEINAS.pdf

Monreal, J. (sin inf). Análisis de proteínas plasmáticas. Clínica Universidad de Navarra, España. Fecha
de consulta: 11/03/2023. Sitio web: https://www.cun.es/enfermedades-tratamientos/pruebas-
diagnosticas/analisis-proteinas-plasmaticas

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