Biología celular y molecular

Práctica 2
 Biología celular y molecular

Práctica 2
Coloración supravital y técnica citologíca

Alumno:
Katherine Leslie Galicia Aguilar

Código:
20192835

Perú - Arequipa
Objetivo: Realizar una coloración supravital, hematoxilina de
células descaradas de la mucosa oral
 Observación de organismos unicelulares

El agua estancada puede estar llena de bacterias, virus y parásitos que pueden causar
distintos tipos de infecciones. La bacteria E. Coli y el parasitó criptosporidio son amenazas,
especialmente si ha habido algún tipo de aguas residuales involucradas

Observamos
Cascar una muestra de agua y colocarla en un porta objetos para luego cubrirla con el cubre
objetos, teñimos y luego procedemos a extenderla en el porta objetos y a secarla o dejándola
con un mechero, con cuidado de no quemar la bacteria, el siguiente paso es fijar la muestra
en el porta objetos aplicando metanol durante 1 minuto. Posteriormente se aplica colorante
violeta de genciana, al porta objetos y se deja reposar 1 minuto. El colorante atraviesa la
pared bacteriana por lo que tiñe bacterias gram positivas como gram negativas

En el microscopio
En el microscopio utilizamos el objetivo x4, x10, x40 respectivamente calibran o nuestro
microscopio, primero en el x4 mediante el tornillo macro y micro métrico, el objetivo x10
y x40 solo calibramos mediante el tornillo micro métrico
 Observación de organismo

Obtención de la muestra

Sacamos una muestra raspando suavemente con una lámina

Colocamos en otra lámina la muestra obtenida haciendo presión en un ángulo de 45 º

Fijación

Colocamos la muestra en alcohol heter durante 5 minutos

Hidratación
Colocamos la muestra de mayor a menor concentración, pasando la muestras de 95º1,
alcohol 70º, alcohol 50º y agua destilada

Coloración

Colorante
Pasamos por la hematoxilina que tiene un color morado oscuro

Virage
Lo pasamos por agua 2 veces para sacar el colorante

Colorante
Colocamos las muestras en la eosina que es un colorante básico de color rojizo

Deshidratación
Pasamos la muestra en alcohol de 70º, alcohol 95º1, y alcohol 100º1

Aclaramiento
Pasamos la muestra dentro del xilol 1 durante 3-5 minutos, nosotros lo colocamos
4 min

Montaje

Ponemos 1 gota de bálsamo de Canadá en un cubre objetos y presionamos rápido para

terminar
Esquematizar muestra con células descamadas de la mucosa oral