INFORME PRACTICA No.

1 DE ELABORACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO

NATURALES
RECUPERACIÓN, PURIFICACIÓN Y SELECCIÓN DE MICROORGANISMOS
DE IMPORTANCIA INDUSTRIAL

PRESENTADO POR
LIZBETH JOHANA PERALTA SALAZAR

ENTREGADO A
ELIANA MENDOZA MENDOZA

UNIVERSIDAD CATÓLICA DE MANIZALES

BIOTECNOLOGÍA
MANIZALES-CALDAS
2021
 INFORME DE ELABORACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO NATURALES
RECUPERACIÓN, PURIFICACIÓN Y SELECCIÓN DE MICROORGANISMOS
DE IMPORTANCIA INDUSTRIAL

Investigación
• ¿cómo preparar el agar papa dextrosa de forma natural?
R/ Para preparar este medio a partir de papas naturales se procede a lavar de 200 a 300
gramos de papas, no es necesario pelarlas, se rebanean y se hierven hasta que estén suaves
o blandas, luego se exprimen a través de dos o tres capas de manta delgada (gasa). Recibir
el filtrado en un matraz, añadir 20g de dextrosa y 20g de agar y aforar a un litro. Esterilizar
el medio 20 minutos a 15 libras de presión. Cuando el medio este casi frio (± 40°C)
verterlo en las cajas de petri.
En este medio de cultivo ciertos hongos como Neurospora, Mucor y Rhizopus, que
frecuentemente son contaminantes en los laboratorios, crecen rápidamente y enmascaran
el desarrollo de otros hongos mas lentos. Para eliminar bacterias se le añade al medio,
justo antes de vaciarlo a las cajas petri, 3 mL de HCL al 1% por litro de medio.

Muestra: suelo y raíces

 Resultados
Resultados obtenidos ocho días después de incubación de la siembra de las diluciones por
profundidad en medio zanahoria y avena y por superficie en los medios de control sabouraud
y nutritivo de muestra de suelo y raíces, el 6 de septiembre del 2021.

Descripción de cada medio y dilución

Medio de cultivo Dilución Imagen Características
macroscópicas
Agar zanahoria 10ˉ² Forma: filamentosa
Elevación: elevada
Borde: filamentoso
Color: blancas y
grisáceas
10ˉ³ Forma: colonias
filamentosas,
rizoides y circulares
Elevación: elevada,
planas.
Borde: filamentoso,
irregulares, entero.
Color: blancas y
amarillentas, opacas

10ˉ Forma: colonias

filamentosas,
puntiformes,
granular, circular
Elevación: planas,
elevadas
Borde: filamentoso,
entero, irregulares
Color: blancas,
opacas.

10ˉ Forma: rizoide,

granular
Elevación: plana,
elevada
Borde: irregulares,
dentada.
Color: blancas,
húmedas.
 10ˉ⁶ Forma: una colonia
circular y una rizoide
Elevación: plana
Borde: entero y
lobulado
Color: blancas,
secas

10ˉ⁷ No hubo crecimiento

de microorganismos

Agar avena 10ˉ² Forma: colonias

filamentosas,
granulares.
Elevación: plana y
elevadas.
Borde: lobulados
Color: blancas,
negras, húmedas y
secas
10ˉ³ Forma: colonias
filamentosas,
puntiformes,
Elevación: plana y
elevadas.
Borde: entero,
filamentoso
Color: blancas,
verdes, amarilla,
secas

10ˉ Forma: colonias

filamentosas,
puntiformes,
fusiforme
Elevación: plana y
elevadas.
Borde: entero,
filamentoso
Color: blancas,
verdes, amarilla,
secas

10ˉ Forma: colonias

circulares
Elevación: plana y
umbonada,
Borde: entero,
lobulada
Color: blanca, seca
transparentes,
brillantes.
 10ˉ⁶ No hubo crecimiento
de microorganismos

10ˉ⁷ No hubo crecimiento

de microorganismos

Agar sabouraud 10ˉ² Forma: colonias

filamentosas,
puntiformes
Elevación: plana y
elevadas.
Borde: entero,
filamentoso
Color: blancas,
amarillas y opacas
10ˉ³ Forma: colonias
filamentosas,
puntiforme,
circulares
Elevación: plana y
elevadas.
Borde: entero,
filamentoso
Color: blancas,
mate

10ˉ Forma: colonias

circulares,
puntiformes,
granulares
Elevación: planas y
convexas
Borde: entero,
ondulada
Color: blancas,
amarillas, opacas,
brillantes

10ˉ Forma: colonia

circular y granular
Elevación: plana
Borde: entero y
ondulada
Color: blanca,
amarilla, opaca y
brillante
 10ˉ⁶ No hubo crecimiento
de microorganismos

10ˉ⁷ Forma: colonias

circulares,
filamentosa
Elevación: plana y
elevada
Borde: entero y
filamentoso
Color: blanca,
amarilla, opacas y
brillantes

Agar nutritivo 10ˉ² Forma: granular,

puntiforme,
fusiforme
Elevación: plana
Borde: lobulado,
dentada
Color: blanca opaca
10ˉ³ Forma: granular
Elevación: plana
Borde: lobulado
Color: blanca opaca

10ˉ Forma: granular

Elevación: plana
Borde: lobulado
Color: blanca opaca

10ˉ Forma: ameboide,

puntiforme
Elevación: plana
Borde: ondulado,
entero
Color: blanca
opaca, amarillas
 10ˉ⁶ Forma: ameboide,
granular
Elevación: plana
Borde: lobulado,
ondulado
Color: blanca opaca

10ˉ⁷ Forma: circular,

ameboide, granular
Elevación: plana
Borde: lobulado,
entero
Color: blanca opaca
y brillantes

Posteriormente se eligió las mejores colonias, para ver las características microscópicas

1
Medio sabouraud Medio avena
dilución 10ˉ⁷ dilución 10ˉ
2

Medio nutritivo
Dilución 10ˉ⁷
Observaciones microscópicas
correspondientes al medio
sabouraud dilución 10ˉ⁷, donde se
evidencia estructuras fúngicas
como hifas y micelios, sin
estructuras completas.

Observaciones microscópicas
correspondientes al medio avena
dilución 10ˉ , colonia 2, se
evidencia estructuras fúngicas
correspondientes a Trichoderma,
estructura completa, el conidióforo,
las fiálides y los conidios

Observaciones microscópicas
correspondientes al medio avena
dilución 10ˉ , colonia 1, se evidencia
estructuras bacterianas gran
negativas correspondientes a
Actinomicetos, es un micelio
ramificado que tiende a fragmentarse
en elementos bacterianos.
 Observaciones microscópicas
correspondientes al medio nutritivo
dilución 10ˉ⁷, se evidencia estructuras
bacterianas gran negativas,
correspondientes a bacilos
esporulados.

Conclusiones
• las diluciones se hicieron con la técnica adecuada ya que se evidenció la disminución
de carga microbiana a medida que reducía la dilución, este aspecto es importante ya
que puede ser un indicador de contaminación ambiental, cuando se observa
crecimiento de hongos, y contaminación bacteriana, se puede deber a los materiales
en caso de no ser esterilizados de la mejor manera, al desarrollarse muchos
microorganismos saprofitos y no los de utilidad, en este caso de recuperación de
microorganismos de interés industrial.

• La muestra es suelo y raíces de un jardín, por lo tanto, no ha sido explotado mucho

por productos químicos, por esta razón se observó crecimiento de actinomicetos,
estos juegan un importante rol en la descomposición de materia orgánica, como la
celulosa y quitina, además son de gran aplicación biotecnológica, estos están
clasificados como un grupo heterogéneo de bacterias filamentosas, aunque
superficialmente son parecidos a los hongos. Muchos de estos llevan vida libre,
particularmente en el suelo, una aplicación es mejorar cultivos con el fin de establecer
un nuevo tipo de agricultura sostenible. La biofertilización, por tanto, consiste en el
aumento del número de microorganismos en un suelo para acelerar los procesos
microbianos y aumentar la cantidad de nutrientes asimilables por la planta.

• El medio zanahoria es útil para la recuperación y conservación de hongos, en

comparación con el medio sabouraud de control este si posee inhibidores, por lo tanto,
se convierte en un medio selectivo. Sin embargo, en el medio natural se observó mejor
el resultado, esto se debe a que es un medio rico en carbohidratos ideales para el
metabolismo de los hongos, ya que contiene porcentajes altos de sacarosa, fructosa y
glucosa, y solo un escaso porcentaje de celulosa y almidón.
 • El medio avena es útil para la recuperación de bacterias sin embargo, como se
evidencia en las fotografías, hubo más crecimiento de hongos que de bacterias, debido
a que este medio no posee algún inhibidor, en comparación con el agar nutritivo si se
observo el desarrollo de bacterias opacas y secas que me indicaban el crecimiento de
Bacillus, este medio está diseñado para crecimiento bacteriano y no de levaduras, ni
mohos, ya que presenta los nutrientes necesarios para que se desarrolle un crecimiento
de bueno y óptimo.

• También se puede decir que de acuerdo al microorganismo al cuál esté destinado el

medio natural, se debe mejorar la composición de acuerdo con sus necesidades tales
como: uso de fuentes de carbono, actividad enzimática, pH ideal para el crecimiento,
entro otros factores que podrían afectar la eficacia del crecimiento celular.

Bibliografía
• Weng Alemán, Zulia, Esther Díaz Rosa, Olvido, & Álvarez Molina, . Inalvis. (2005).
Conservación de microorganismos: ¿qué debemos conocer?. Revista Cubana de
Higiene y Epidemiología, 43(3) Recuperado en 13 de septiembre de 2021, de
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1561-
30032005000300006&lng=es&tlng=es.
• García MD, Uruburu F. La conservación de cepas microbianas . Act SEM.
2000;30:12-6.
• Castro G, Hernández JT, Aquino C. Manual sobre conservación de microorganismos.
México: Instituto Politécnico Nacional. Escuela Nacional de Ciencias Biológicas.
2000:21.
• Franco-Correa, Marcela. (2009). Utilización de los actinomicetos en procesos de
biofertilización. Revista Peruana de Biología, 16(2), 239-242. Recuperado en 13 de
septiembre de 2021, de
http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1727-
99332009000200019&lng=es&tlng=es
• Urcia A, Flor, & Guevara R, Miriam. (2002). Eficacia de Medios de Cultivo con
Infusiones de Variedades de Papa en la Identificación del Trichophyton rubrum.
Revista Peruana de Medicina Experimental y Salud Publica, 19(4), 206-208.
Recuperado en 13 de septiembre de 2021, de
http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1726-
46342002000400008&lng=es&tlng=en.