INFORME DE PRACTICA NO.

2 CARACTERÍSTICAS MACRO Y
MICROSCÓPICAS DE BACTERIAS, HONGOS FILAMENTOSOS Y
LEVADURAS DE IMPORTANCIAS AGROPECUARIA E INDUSTRIAL

PRESENTADO POR
LIZBETH JOHANA PERALTA SALAZAR

PRESENTADO A
ELIANA MENDOZA MENDOZA

UNIVERSIDAD CATÓLICA DE MANIZALES

BIOTECNOLOGÍA
MANIZALES-CALDAS
2021
 Informe de practica No.2 características macro y microscópicas de bacterias, hongos
filamentosos y levaduras de importancias agropecuaria e industrial

Introducción
Las características macro y microscópicas de los microorganismos, nos permite ver en que
estadio están, su desarrollo, su reproducción en el caso de los hongos, por lo tanto, es
importante observar y reconocer estas características para identificar sus estructuras.
Además, todos los microorganismos no son malos, la mayoría de ellos cumplen funciones
vitales en este mundo, aunque la mayoría de las personas los asocie con enfermedades, solo
el 1 por ciento las produce. El resto cumple diversas funciones, entre ellas participan en
procesos simbióticos con el ser humano como la síntesis de vitaminas, fermentación de
carbohidratos complejos indigeribles, reciclaje de elementos a nivel biogeoquímico,
producción de sustancias químicas en la industria y biorremediación, como vemos tienen más
aplicaciones buenas que malas, de aquí la motivación de seguir descubriendo esos beneficios
que poseen estos seres microscópicos.

Objetivos
Identificar y reconocer las características macro y microscópicas de hongos
filamentosos, levaduras, lactobacilos y bacterias esporuladas.
Comprender el fundamento de cada una de las tinciones empleadas en la práctica de
laboratorio.
Definir las aplicaciones biotecnológicas de los microorganismos vistos en la práctica
de laboratorio.
Resultados
Descripción macro y microscópicas de cada uno de los microorganismos (hongos
filamentosos, levaduras, lactobacilos y bacterias esporuladas) vistos en la práctica de
laboratorio.
Microorganismo Imagen macroscópica Observaciones Imagen microscópica Observaciones
macroscópicas microscópicas
HONGOS FILAMENTOSOS
Aspergillus niger Colonias negras En 40X se observa
con bordes estructura
irregulares, completa, se
elevadas, evidencia el
rugosas y conidióforo, la
polvorienta. vesícula esférica y
los conidios.

Penicillium spp. Colonias En 40X se observa

verdosas, borde estructura
irregular, completa, se
planas y textura evidencian hifas
polvorienta, en hialinas septadas,
la parte reversa el conidióforo, las
se ven colonias métulas, las
de color fiálides y los
amarillas. conidios.
Trichoderma spp. Colonias En 40X se observa
verdosas de estructura
forma granular, completa, se
planas, con evidencia el
bordes conidióforo, las
irregulares, fiálides y los
rugosa y conidios.
aterciopelada.

Beauveria bassiana Colonias En 40X se observa

blancas de estructura
forma granular, completa, se
umbonadas, evidencia hifas
bordes hialinas septadas,
filamentosos, conidióforos y
aterciopelada. conidios.
Metarhizium Colonias En 40X se observa
anisopliae blancas, forma estructura
rizoide, completa, se
elevación evidencia, micelio,
umbonada, los conidióforos,
rugosas, bordes las fiálides y las
filamentosos, conidias
aterciopelada,
en el reverso se
ven colonias
amarillas
pálidas.

Paecilomyces Colonias En 40X se debe

lilacinus rosadas pálidas, observar
forma granular, estructuras
umbonadas, completas como la
borde dentado, de la imagen,
aterciopeladas. conidióforos,
métula, fiálides y
conidias.

Tomado de: http://thunderhouse4-

yuri.blogspot.com/2012/04/paecilomyces-
variotii.html
LEVADURAS
Saccharomyces Colonias En 40X en
cerevisiae blancas- solución salina y
amarillentas con la tinción de
cremosas, lisas azul de lactofenol
de forma se evidencia
puntiforme y levaduras en forma
bordes ovalada y en
circulares gemación.

Azul de lactofenol

BACTERIAS
Bacterias lácticas Colonias de En 40X se
color naranja, observan bacilos
forma gram positivos
puntiforme,
convexas y
brillantes
Bacillus subtilis Colonias En 40X se
blancas de evidencia en la
forma coloración de gram
puntiforme bacilos
borde entero y esporulados gram
granular, positivos y en la
opacas y planas coloración verde
malaquita se
evidencian las
esporas color verde
y los bacilos no
esporulados color
rosa.

Bacillus Colonias En 40X se

thuringiensis blancas de evidencia en la
forma coloración de gram
puntiforme bacilos
borde entero y esporulados gram
granular, positivos y en la
opacas y planas coloración verde
malaquita se
evidencian las
esporas color verde
y los bacilos no
esporulados color
rosa, además se
diferencia del B.
 subtilis con la
presencia de
cristales
paraesporales.

Actinomicetos Colonias En 40X se

blancas con evidencia
forma rizoide, estructuras
borde ondulado bacterianas gran
son pálidas y negativas
secas correspondientes a
Actinomicetos, es
un micelio
ramificado que
tiende a
fragmentarse
en elementos
bacterianos.
Posteriormente se realizó un microcultivo de uno de los hongos, en este caso de Trichoderma spp,
este es un procedimiento adecuado para la identificación de estructuras fúngicas pues permite
visualizar al microscopio el micelio en su conjunto no solo una parte del mismo, como ocurre con el método
de disociación.

Observaciones de estructuras
Microcultivo de Trichoderma spp. fúngicas de Trichoderma spp. En 40X

Interpretación de los resultados

Dicho anteriormente, los microorganismos tienen un gran potencial a nivel biotecnológico, por lo
tanto, describiré que beneficios tiene cada uno.
Aspergillus niger
Los hongos filamentosos son un grupo de interés industrial en la producción de enzimas.
Aspergillus es un organismo ampliamente utilizado en la producción de una gran variedad de
glucanasas con un espectro tal que puede lograrse la completa degradación de la celulosa. Las
glucanasas son utilizadas en muchos procesos industriales, como bioblanqueo, panificación,
extracción y clarificación de jugos, elaboración de alimento animal, industria textil, entre otras.
Aspergillus muestra algunas ventajas para la producción industrial de enzimas: tiene un alto nivel
de producción, presenta buenas propiedades para el cultivo, lo que posibilita la producción a gran
escala, sus productos son generalmente considerados como GRAS (generally regarded as safe), lo
que permite su aplicación en la industria de alimentos tanto para el hombre y animales.
En un estudio que se realizó se demostró que las biopelículas de Aspergillus niger se caracterizan
por la presencia de canales internos que permiten el flujo interno y, por otro lado, producen una
mayor cantidad de celulasa en comparación al cultivo con micelio libre. Esta primera aproximación
busca enfocar la investigación hacia este aspecto de crecimiento y producción en hongos
filamentosos.

Penicillium spp.
Diversas investigaciones muestran el potencial antimicrobiano de los hongos del género
Penicillium, se mencionan varias especies de este hongo filamentoso con actividad antimicrobiana
sobre diversas bacterias entre ellas S. aureus, S. epidermidis, B. subtilis. Así mismo, la actividad
sobre S. aureus coloca a estas cepas en un potencial de exploración más profunda, porque cepas de
S. aureus resistentes a Meticilina que hoy en día se constituyen un problema de salud.
Además, otro genero como P. chrysogenum se ha demostrado que produce enzimas extracelulares
degradadoras de pared celular, según estudio se describe por primera vez la actividad feruloil
esterasa de este hongo, así como la sobreexpresión de dichas secuencias para la obtención de cepas
superproductoras de enzimas con actividad feruloil esterasa y su potencial aplicación industrial en
la degradación de la pulpa de remolacha y la obtención de ácido ferúlico. Así mismo se analiza por
primera vez el secretoma completo de P. chrysogenum B13, cepa superproductoras de PcFaeB en
condiciones de producción de FAEs. Pudiéndose emplear este conocimiento en la mejora de
algunos de los procesos biotecnológicos industriales más comunes en las industrias: alimentaria,
del papel, de biocombustibles, textil, farmacéutica, cervecera, de detergentes, etc., así como para
la producción biotecnológica de compuestos de interés.

Trichoderma spp.
Las especies pertenecientes al género Trichoderma se caracterizan por ser hongos saprófitos, que
sobreviven en suelos con diferentes cantidades de materia orgánica, los cuales son capaces de
descomponerla y en determinadas condiciones pueden ser anaerobios facultativos, lo que les
permite mostrar una mayor plasticidad ecológica. Las especies de Trichoderma se encuentran
presentes en todas las latitudes, desde las zonas polares hasta la ecuatorial. Esta distribución tan
amplia y su plasticidad ecológica están estrechamente relacionadas con la alta capacidad
enzimática que poseen para degradar sustratos, un metabolismo versátil y resistencia a inhibidores
microbianos.
En la acción biocontroladora de Trichoderma se han descrito diferentes mecanismos de acción que
regulan el desarrollo de los hongos fitopatógenos dianas. Entre estos, los principales son la
competencia por espacio y nutrientes, el micoparasitismo y la antibiosis, los que tienen una acción
directa frente al hongo fitopatógeno. Estos mecanismos se ven favorecidos por la habilidad de los
aislamientos de Trichoderma para colonizar la rizosfera de las plantas. Otros autores han sugerido
distintos mecanismos responsables de su actividad biocontroladora, que incluyen, además de los
mencionados, la secreción de enzimas y la producción de compuestos inhibidores.
También se conoce que Trichoderma presenta otros mecanismos, cuya acción biorreguladora es de
forma indirecta. Entre estos se pueden mencionar los que inducen mecanismos de defensa
fisiológicos y bioquímicos como es la activación en la planta de compuestos relacionados con la
resistencia, con la detoxificación de toxinas excretadas por patógenos y la desactivación de enzimas
de estos durante el proceso de infección; la solubilización de elementos nutritivos, que en su forma
original no son accesibles para las plantas. Tienen la capacidad, además, de crear un ambiente
favorable al desarrollo radical lo que aumenta la tolerancia de la planta al estrés.

Beauveria bassiana
El hongo Beauveria bassiana es considerado uno de los agentes de control biológico con mejor
eficiencia en el sector agrícola. Existen experiencias de todas partes del mundo en el control exitoso
de varios tipos de plagas, que causan daño y grandes pérdidas en el sector.
El uso masivo de hongos entomopatógenos como Beauveria bassiana producidos en sustratos
naturales para el control de hormigas cortadoras del género Atta spp. tiene un gran potencial de
disminuir la cantidad de plaguicidas químicas aplicadas en la agricultura. La multiplicación de
Beauveria bassiana se puede realizar por los mismos agricultores, en unidades de producción muy
sencillas en sus fincas utilizando arroz común como sustrato, y formulando solución con esporas
del hongo para el control de hormigas cortadoras.
En la actualidad este hongo se emplea con éxito en la lucha biológica contra diferentes plagas:
mosca blanca, trips y pulgones principalmente, y en menor grado otras plagas como picudos, piojos
y otros insectos.
Metarhizium anisopliae
Este hongo ha demostrado ser efectivo en el control de plagas de insectos como palomilla dorso de
diamante (Plutella xylostella) y gallina ciega (Phyllophaga spp.) Cuando entra en contacto con una
de las 300 especies de insectos hospederos, Metarhizium anisopliae, que en los campos de cultivo
se suministra en forma de espora, genera una hifa infectiva, un tubo que por presión mecánica y
degradación enzimática rompe la cutícula del insecto y penetra hasta llegar a la hemolinfa,
equivalente al torrente sanguíneo en humanos.
En la hemolinfa, el hongo encuentra los nutrientes necesarios para continuar desarrollándose y
emerge nuevamente por la cutícula del insecto, hasta envolverlo por completo por medio del
micelio, similar a una estola blanca, para después generar esporas color verde olivo. La aplicación
de Metarhizium anisopliae en campos de cultivo tiene por finalidad establecer un control biológico,
es decir, mantener un balance entre los organismos para que los insectos no se conviertan en plagas.
Paecilomyces lilacinus
Es un hongo que controla fitonematodos, principalmente especies del nematodo agallador
Meloidogyne spp. Este hongo parasita huevos, adultos y quistes de nematodos. También puede
afectar nematodos móviles que están fuera de las raíces. De modo que puede infectar cualquiera de
estos estadios del nematodo, causándoles la muerte o evitando que el nematodo complete su ciclo
de vida, disminuyendo de esa manera las poblaciones en el campo. En ausencia de nematodos el
hongo puede sobrevivir como saprófito en el suelo.
En la naturaleza P. lilacinus es encontrado como habitante del suelo. Este hongo tiene la habilidad
de sobrevivir en materia orgánica en el suelo y siempre se encuentra presente en el campo
principalmente en zonas húmedas y donde hay bastante plaga. P. lilacinus es también patógeno de
insectos, pero su mayor relevancia es como patógeno de fitonematodos, ya que causa una alta tasa
de mortalidad reduciendo las poblaciones de fitonematodos en los cultivos.

Saccharomyces cerevisiae
Es una levadura que constituye el grupo de microorganismos más íntimamente asociado al progreso
y bienestar de la humanidad. Es una levadura heterótrofa, que obtiene la energía a partir de la
glucosa y tiene una elevada capacidad fermentativa. Es un producto del proceso de producción de
alcohol, que a su vez constituye una valiosa fuente de proteínas y vitaminas para la alimentación
animal. El uso más extendido está enmarcado en la panificación y en las industrias de fabricación
de cerveza, vinos y alcohol. La levadura inactivada por temperatura se usa como fuente de
nutrimentos en alimentación animal y humana, tanto en forma de levadura íntegra como a partir de
sus derivados. Esta levadura es una de las especies considerada como microorganismo GRAS, por
lo que ha sido aprobada para su uso como aditivo alimentario. La levadura de recuperación de
cerveza la componen las células inviables deshidratadas de la levadura Saccharomyces cerevisiae
o S. ovarum en algunos casos. Esta levadura históricamente ha sido utilizada en la producción de
alcohol con resultados satisfactorios.

Bacterias lácticas (BAL)

Las BAL además de contribuir en la biopreservación de los alimentos, mejoran las características
sensoriales y aumenta su calidad nutritiva. La mayoría de los probióticos pertenecen a las bacterias
lácticas y son usadas por la industria alimentaria en la elaboración de productos fermentadas y
como complementos alimenticios con la finalidad de promover la salud; también en el área pecuaria
son usados para mejorar producción animal.
En el caso de Lactobacillus plantarum recientes investigaciones han demostrado que la edad
avanzada provoca una serie de trastornos, como son la decadencia del sistema inmunitario,
problemas intestinales como estreñimiento, y malnutrición, que afectan a la calidad de vida de las
personas que los padecen. Muchas de estas alteraciones están asociadas a un cambio en la
composición y actividad de la flora intestinal. Algunos estudios indican que en las personas
mayores se produce un descenso de los niveles de bifidobacterias y un incremento de clostridios y
enterobacterias. Los probióticos y prebióticos ofrecen una buena estrategia para reducir los cambios
en la flora intestinal debidos a la edad y para mantener una microflora intestinal saludable,
favoreciendo el mantenimiento de las funciones intestinales y reduciendo la susceptibilidad a
infecciones en personas mayores. Recientemente, estudios han demostrado la capacidad de las
cepas probióticas Lactobacillus plantarum CECT 7315/CECT7316 de estimular el sistema
inmunitario en ancianos.

Bacillus subtilis y Bacillus thuringiensis

El género Bacillus se encuentra ampliamente distribuido en los agro-sistemas y una de sus
principales aplicaciones es el control de enfermedades de cultivos agrícolas. Una gran diversidad
de especies del género Bacillus han demostrado tener actividad antagónica contra diversos
microorganismos fitopatógenos de cultivos agrícolas, tales como maíz, arroz, frutales, entre otros.
El estudio de esta capacidad de Bacillus se inició por el descubrimiento de la actividad insecticida
de las proteínas Cry producidas por B. thuringiensis; en la actualidad diversas especies del
género Bacillus (B. subtilis, B. pumilus, B. amyloliquefaciens y B. licheniformis) son ampliamente
estudiadas para mitigar la incidencia de enfermedades de importancia agrícola. Entre las
principales vías por las cuales estas cepas evitan el establecimiento y desarrollo de organismos
fitopatógenos es a través de diferentes mecanismos, que incluyen la excreción de antibióticos,
sideróforos, enzimas líticas, toxinas e induciendo la resistencia sistémica de la planta.
Una de las características más importantes del género Bacillus es su capacidad de producir una
gran variedad de antibióticos con capacidad de inhibir el crecimiento de agentes fitopatógenos,
entre éstos, los lipopéptidos cíclicos no ribosomales han sido los más estudiados.
Actinomicetos
Tiene aplicaciones biotecnológicas como descomposición de los residuos animales y vegetales,
participación activa en los procesos de humificación, mineralización del humus, secreción de
sustancias antibióticas, y acción fitopatógena, su propio micelio representa una interesante materia
prima para la síntesis de compuestos húmicos. Además, se reconoce en la industria farmacéutica.
Existen un amplio número que inhibe microorganismos blanco sensibles a esos antibióticos,
También la aplicación de estas bacterias puede mejorar cultivos con el fin de establecer un nuevo
tipo de agricultura sostenible. La Biofertilización, por tanto, consiste en el aumento del número de
microorganismos en un suelo para acelerar los procesos microbianos y aumentar la cantidad de
nutrientes asimilables por la planta. Se ha visto que son efectivos frente a numerosos patógenos de
la planta, son baratos, duraderos, no contaminan y no alteran el ecosistema.
Los Actinomicetos intervienen en el compostaje, estos dan el olor característico a tierra ya que son
especialmente importantes en la formación del humus. Sus enzimas les permiten romper
químicamente residuos ricos en celulosa, lignina, quitina y proteínas.
Conclusiones
✓ Es tranquilizador saber que estos microorganismos, los cuales clásicamente son conocidos
como causantes de enfermedad, ahora pueden verse como una posible ayuda para "salvar
al mundo" proporcionándonos beneficios desde el punto de vista de la salud y
proporcionando alternativas amigables para el ambiente, para la producción de sustancias
necesarias en la industria y hasta para resolver directamente problemas
medioambientales mediante la degradación de toxinas.
✓ El mejor entendimiento de las biopelículas de hongos filamentosos utilizando técnicas
moleculares y visualización microscópica directa contribuirán grandemente al desarrollo
de procesos productivos basados en las ventajas fisiológicas de las biopelículas de hongos
de interés industrial.
✓ De esta práctica se resalta la importancia de reconocer e identificar las características micro
y macroscópicas del microorganismo, este conocimiento es vital desde el punto de vista
práctico, debido a que permite una adecuada y mejor selección de aislamientos con mayor
potencialidad para el control de diferentes fitopatógenos. Mientras más modos de acción
estén presentes en un aislamiento, mayor será la eficacia del mismo en el control del
fitopatógeno, y, por ende, menor el daño que puede causarle al cultivo.
✓ En el microcultivo se observó una contaminación por Aspergillus niger, por esta razón la
importancia de trabajar en condiciones estériles para evitar resultados no esperados.

Anexos
• ¿Consulta del fundamento de la tinción de verde malaquita?
R/ La tinción de esporas es la metodología usada para colorear las estructuras de resistencia
que forman algunos géneros bacterianos cuando se encuentran en condiciones
desfavorables; estas estructuras corresponden a una forma de supervivencia.
La tinción específica de esporas requiere dos colorantes:
1.- Verde malaquita: capaz de teñir las esporas en caliente.
2.- Safranina: colorante de contraste que tiñe las formas vegetativas.
Las endosporas, tras la primera tinción, no perderán el colorante en el lavado con agua, y
sí lo harán las formas vegetativas, que quedarán teñidas con el segundo colorante.
Se emplearán cultivos en fase estacionaria para dar lugar a que las bacterias produzcan las
esporas. Esta tinción es delicada en su realización y para poder obtener unos resultados
satisfactorios hay que seguir cuidadosamente las instrucciones.
La posición y la morfología de la endospora en el interior de la bacteria constituyen un
carácter taxonómico útil para diferenciar especies dentro de un mismo género.
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