Ejercicios sobre cinética enzimática

1. El siguiente grupo de datos describe una reacción catalizada por enzimas. Grafique
estos resultados usando ambos métodos (Michaelis-Menten y Lineweaver-Burk)
discutidos en clase y determine los valores para la KM y la Vmáx (la concentración de
la
enzima es la misma en todos los experimentos).

Gráfica de Michaelis-Menten
Tabla de datos: Concentración del sustrato y velocidad inicial

[S] V0

2.0 0.020
4.0 0.032
8.0 0.049
12.0 0.056
16.0 0.059
20.0 0.062

Gráfica Michaelis -Menten

0.08

0.07
vMax
Velocidad (mmol/min-1)

0.06

0.05

0.04
vMax/2
0.03

0.02
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20
Km Concentración del Sustrato (mM)

Vmáx Km
 0.064 4

Gráfico de Lineweaver-Burk
Tabla de datos: Concentración del sustrato y velocidad inicial
[S] V0
2 0.02
4 0.032
8 0.049
12 0.056
16 0.059
20 0.062

Tabla de resultados: Inversa de los datos de concentración del sustrato y velocidad

inicial
1/[S] 1/V0
0.5 50
0.25 31.25
 0.125 20.408163
3
0.0833333 17.857142
3 9
0.0625 16.949152
5
0.05 16.129032
3

[S] V0
0.0146 0.182
0.0292 0.265
0.0438 0.311
0.0585 0.335
0.0875 0.372

Vmáx Km
0.0847314 6.47127605

2. La lactosa es hidrolizada a D-galactosa y D-glucosa, a través de un experimento

clásico de cinética. La reacción es catalizada por la enzima lactasa, un tipo de β-
galactosidasa. Usando los siguientes datos experimentales, determine por el método
de Lineweaver-Burk el tipo de inhibición de esta reacción por un inhibidor denominado
Xbp1. Calcular los valores para la KM y la Vmáx en presencia y en ausencia del
inhibidor.

Concentración del sustrato en relación con la velocidad inicial sin inhibidor.

Tabla de datos: Concentración del sustrato y velocidad inicial sin inhibidor.
Tabla de resultados: inversa de los datos de Concentración del sustrato y velocidad inicial sin inhibidor

[S] V0
0.0146 0.083
0.0292 0.119
0.0438 0.154
0.0585 0.167
0.0875 0.192

Tabla de resultados de Vmax y Km.

Vmax
1/[S] Km 1/[V0]
0.472277368.4931507
0.0231888 5.49450549
234.2465753 2 3.77358491
22.8310502 3.21543408
17.0940171 2.98507463 Concentración del sustrato en relación con
11.4285714 2.68817204 la velocidad inicial con inhibidor.
Tabla de datos: Concentración del sustrato y velocidad inicial sin inhibidor.
Tabla de resultados: inversa de los datos de Concentración del sustrato y velocidad inicial sin inhibidor

1/[S] 1/[V0]
68.4931507 12.04819277
34.2465753 8.403361345
22.8310502 6.493506494
17.0940171 5.988023952
11.4285714 5.208333333
Tabla de resultados de Vmax y Km.

Vmax Km
0.254997 0.0306762
96 55