Taller de química en alimentos 2

Aura María Baquero Osorio

Mary Tatiana Molina Gonzalez

PREGUNTA

Al realizar el estudio cinético de la enzima histidina amoniaco liasa, se obtuvieron los

siguientes datos:

Vo(µM/
(s)(mM) min)
10 0,0587
12,5 0,0683
16,7 0,082
25 0,1015
50 0,1342

Para determinar Km y Vmax en Michaelis Menden se toma la tabla original dada y en el problema
y se grafica donde en el eje x se toma (s)(mM) y el eje y se toma Vo(µM/min) dando como
resultados la siguiente gráfica:

0.16
0.1342
0.14
f(x) = 0.0471767651760071 ln(x) − 0.0504637678044484
0.12 R² = 0.999835481138322
0.1015
0.1
0.082
(s)(mM)

0.08 0.0683
0.0587
0.06
0.04
0.02

0
5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55
Vo(µM/min)

Donde se determinó Km y V(max).

¿Cómo se determina V(max)?

Se determino V(max ) observando el grafico y así determinar el punto máximo que se observa en
la grafica donde en este caso su resultado es 0,1342.
¿Cómo se determina Km?

Posteriormente se determina Km mediante la velocidad máxima divida entre 2 se conoce (Y) para
así remplazarla en la ecuación de la línea exponencial que arroja la grafica de la cual se despeja
In(x), Como se observa en los siguientes pasos.

0,0674=0,0472Ln(x)-0,0505

0,0674+0 , 0505
=Ln(x)
0,0472

2,491 ln( x)
e =
e
X=12,07 mM

Ya así conoceríamos el corte en X y en Y de la gráfica.

Su corte en Y= 0,0671 µM/min

Su corte en X= 12,07 mm

Para determinar Km y Vmax en Linewever - Burke se toma la tabla original dada y en el problema y
se divide 1(s) y 1(Vo) y se grafica mediante la tabla que nos dio

1/(s) 1(Vo)
0,1 17,0357751
0,08 14,6412884
0,05988024 12,195122
0,04 9,85221675
0,02 7,45156483

18
16 f(x) = 119.788317544602 x + 5.05076354653291
R² = 0.999981963529982
14
12
10
1/Vo

8
6
4
2
0
0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06 0.07 0.08 0.09 0.1 0.11
1/[s)

Mediante los resultados de el grafico se coloca una línea de tendencia y se le agrega la ecuación de
la pendiente y mediante esta ecuación podemos conocer V(max) y Km.

¿Cómo se conoce V(max)?

Conociendo la ecuación de la pendiente tomamos el ultimo resultado que se ve en la ecuación que
es 5,0508 y lo dividimos por 1

1/5,0508 dando así la V(max) que es: 0,19798844 mM

Y ya teniendo V(max) calculamos Km mediante su pendiente por V(max)

Km=119,802629* 0,19798844

Km=23,7195353 µM/min

Conclusiones:

Teniendo en cuenta los gráficos donde se obtiene que el método de Linewever – Burke es el más
preciso, esto se debe a que es una tendencia lineal y la de Michaelis Menden es una tendencia
exponencial, teniendo en cuenta los resultados se puede determinar que dan valores parecidos en
cada grafica aun sabiendo que una es lineal y la otra exponencial como se mencionó
anteriormente, ya que la lineal es mucha mas sencilla que la exponencial. Se debe de tener en
cuenta que en la tendencia lineal los valores de y tienden a diferencias iguales, pero en la
tendencia exponencial los valores de y tienden a razones iguales.