Facultad de Bioanálisis, Manual de Procedimientos de

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PRACTICA 8
Determinación de la curva de concentración de ácido
acetil salicílico (AAS).

1.- INTRODUCCIÓN
El ácido acetilsalicílico se administra principalmente por vía oral, aunque también
existe para uso rectal y como terapia intravenosa. Los comprimidos de aspirina para
administración oral se hidrolizan con facilidad cuando se ven expuestos al agua o aire
húmedo, de modo que deben permanecer almacenados en sus envoltorios hasta el
momento de su administración. La aspirina que se ha hidrolizado así despide un olor
a vinagre (en realidad es ácido acético) y no debe ingerirse. La aspirina también
viene en preparados masticables para adultos. Los preparados efervescentes y
saborizados son aptos para quienes prefieran la administración líquida del
medicamento
Los niveles terapéuticos de acido salicilico rara vez ascienden a más de 20 mg/100
ml. En sangre o en suero. Por encima de 30 mg/100 ml. Pueden observarse síntomas
tóxicos como dolor de cabeza, zumbido de oídos, enrojecimiento e hiperventilación.
Los electrolitos en suero han de ser examinados de manera continua para corregir
cualquier desequilibrio. Los niveles mortales de salicilato son de ordinario mayores de
60 mg/100 ml.

Las recuperaciones de salicilato agregado son cuantitativas y las siguientes

substancias, en las concentraciones indicadas no interfieren: Fosfato, Bilirrubina,
Fenol, Heparina, Glucosa y urea.

2.- OBJETIVOS
2.1. El alumno por medio de la técnica empleada medirá la absorbancia de
concentraciones conocidas de AAS para obtener una grafica de acuerdo a la ley de
Beer. .

3.- PRINCIPIO Y METODOLOGÍA DE LA DETERMINACIÓN

3.1.- El proceso que se lleva a cabo para la determinación de salicilatos y curva
se basa en la formación de un complejo de color violeta entre hierro férrico y fenoles.

La curva de calibrado es un método de química analítica empleado para medir la

concentración de una sustancia en una muestra por comparación con una serie de
elementos de concentración conocida. Se basa en la existencia de una relación en
principio lineal entre un carácter medible (por ejemplo la absorbancia en los enfoques

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de espectrofotometría) y la variable a determinar (la concentración). Para ello, se

efectúan diluciones de unas muestras de contenido conocido y se produce su lectura
y el consiguiente establecimiento de una función matemática que relacione ambas;
después, se lee el mismo carácter en la muestra problema y, mediante la sustitución
de la variable independiente de esa función, se obtiene la concentración de esta. Se
dice pues que la respuesta de la muestra puede cuantificarse y, empleando la curva
de calibración, se puede interpolar el dato de la muestra problema hasta encontrar la
concentración del analito. Las curvas de calibración suelen poseer al menos una fase
de respuesta lineal sobre la que se realiza un test estadístico de regresión para
evaluar su bondad.

4.- LISTA DE REQUERIMIENTOS

4.1 Reactivos
NUM. CLAVE NOMBRE DEL REACTIVO CONC. CANTIDAD
1 Acido acetil salicílico R.A 4 gr.
2 Agua destilada 1 lt.

Reactivo de color.-Se disuelven 40 grs. De cloruro mercúrico en 850 ml. De agua

destilada, por calentamiento. Se enfría la solución y se agrega 120 ml. De HCL 1 N y
40 grs. De Nitrato Férrico. Cuando se ha disuelto todo se diluye la solución hasta 1
litro con agua destilada. Es estable por tiempo indefinido

4.2. Equipos de Laboratorio

4.2.1
NUM. CANTIDAD DESCRIPCIÓN
1 1 Espectrofotómetro

4.3 Materiales de laboratorio

4.3.1 Material:

NUM. CANTIDAD DESCRIPCIÓN

1 1 Pipeta Pasteur
2 1 Gradilla
3 3 Pipeta automática de 1ml.
4 3 Pipeta automática de 0.2 ml.
5 4 Tubo de ensaye de 13x100
6 2 Cubetas para lectura

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5.- TÉCNICA O PROCEDIMIENTO

5.1 Muestra
5.1.1 Estándar de acido acetil salicílico.

5.2 Muestreo

10.1.1 Preparación de estándar.

5.3 Preparación del sistema de Medición

5.3.1 Justificar que el espectrofotómetro este calibrado.
5.3.2 Se prepara una serie de estándares en matraz volumétrico como sigue:

A B C D E F G H I

AAS (mg) 0.05 0.1 1 5 10 20 30 40 50

AGUA 100- 100 100 100 100 100 100 100 100
DESTILADA (ml)

Se pasan estos estándares en tubos de ensaye claramente etiquetados y se lleva a

cabo el siguiente procedimiento:

A B C D E F G H I Bco.

Reactivo 1 ml. 1 ml. 1 ml. 1 ml. 1 ml. 1 ml. 1 ml. 1 ml. 1 ml. 1ml.
de color

Estándar 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 -
preparado ml. de ml. ml. de ml. ml. ml. ml. ml. ml.
A de B C de D de E de F de G de H de I

5.4.-Uso del sistema del equipo.

5.4.1. Ajustar el espectrofotómetro a 540 nm. De longitud de onda.
5.4.2. Previo a la lectura verificar que las celdas no estén ralladas ni contaminadas.
5.4.3. Leer los estándares frente al blanco.
5.4.4. Desechar los materiales de acuerdo con el procedimiento de desecho.

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6.- PROCESAMIENTO Y REPORTE DE RESULTADOS

6.1 Calculo de resultados

6.1.1 Realizar la curva de calibración de la siguiente manera:

Graficar las observancias obtenidas contra concentraciones conocidas en una hoja
milimétrica.
6.2 Reporte de resultados

6.2.1 Anotar la concentración final de AAS en suero.

6.2.2 Esquemas de elaboración de la práctica y conclusión.

La determinación de la curva de concentración de ácido acetil salicílico es determinación

de la cual se obtienen resultados colorimétricos, los cuales se pasan a celdas para
posteriormente ser medidos y así poder elaborar la curva.

Resultados:

Conclusiones: La determinación de la curva de concentración de ácido acetil salicílico es

una prueba más compleja, no difícil, pero si más compleja de la cual los resultados los
obtenemos de una forma muy rápida.

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Curva:

7.- CONFIABILIDAD ANALÍTICA

7.1 Montaje de Control de acido acetil salicílico.

8.- GARANTIA DE CALIDAD (CONTROL DE CALIDAD)

8.1. El espectrofotómetro deberá estar calibrado.

9.- PRACTICABILIDAD

9.1 El analista es un alumno de química clínica supervisado por el docente ó el

técnico académico.

10.- REFERENCIAS

10.1 MedlinePlus Aspirina (en español). Enciclopedia médica en español.

Consultado el 7 de novimebre, 2008.

10.2 Montoya Cabrera Miguel Angel. Toxicología Clinica. 2ª Edicion Editorial

Mendez Editores. Mexico 2000. Pag. 53, 55, 127-133.
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10.3 Harris, Daniel Charles (2003). Quantitative chemical analysis. San Francisco:
W.H. Freeman. ISBN 0-7167-4464-3.

Obtenido de "http://es.wikipedia.org/wiki/Curva_de_calibrado"
Consultado Enero 2011

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