Técnica

Histológica
MUESTRA
La muestra se obtiene realizando un corte
del tejido que se quiere analizar de forma
que quepa dentro del cito cassette.
Tomar en cuenta qué parte del tejido se va a
cortar, si va a ser de un extremo o del centro y
que sea adecuado para el cito cassette.

FIJACIÓN
El agente de fijación más utilizado es el formol,
ya que evita el deterioro de las características
morfológicas y celulares del tejido.
FORMOL

La cantidad a usar de formol es 20 veces más que el

volumen del tejido.
El tiempo de impregnaicón dependerá del tamaño de
la muestra

DESHIDRATACIÓN
Se utilizan una serie de alcoholes a distintas
concentraciones (70, 80, 96 y 100). El tiempo
sumergida dependerá del tamaño de la
muestra y de la pureza de los alcoholes.
Antes de comenzar este paso, se lava la muestra con agua
para evitar una reacción entre el formol y el alcohol.

ACLARAMIENTO
Se utiliza un solvente intermedio que
reemplazará al alcohol y producirá una X
I
transparencia en el tejido. El solvente L
frecuentemente utilizado es el xilol. O
L

IMPREGNACIÓN
Se deja la muestra (sin el cito cassette) en
un baño de parafina líquida para que se
impregne en todo el tejido.

INCLUSIÓN
Se introduce la muestra en el molde
(puede ser de cualquier material)
para sumergirlos en parafina y
generar el bloque.
Técnica
Histológica
CORTE
Se hace mediante el microtómo y
los cortes comúnmente van
desde 5 a 7 micras.
Considerar que en este paso se deben usar
navajas de buena calidad y siempre con filo.

BAÑO DE FLOTACIÓN
Sirve para extender el corte que se realizó
con el microtómo y posteriormente se
pone en un portaobjetos.
Cuidar que no se deje mucho tiempo ya que se puede
sobreextender.

TINCIÓN
La hematoxilina y la eosina se utilizan en histología
principalmente para poner en evidencia las
características estructurales de los tejidos.
Antes de teñir,se debe retirar el exceso de
parafina con xileno o tolueno
El tejido debe ser rehidratado con una serie
de alcoholes de concentración decreciente
El tejido en el portaobjetos se tiñe con
hematoxilina en agua
Se vuelve a deshidratar la muestra en
soluciones alcohólicas de concentración
creciente.
Se tiñe con eosina en alcohol
Finalmente la muestra se debe pasar por
xileno o tolueno

MONTAJE
Colocar una gota de resina (Cytoseal XYL)
sobre la muestra y encima un
cubreobjetos.

Es importante cuidar que seque bien la resina y

no dejar burbujas en la muestra

OBSERVACIONES
MICROSCÓPICAS

Montar la muestra en el microscopio

para hacer el análisis del tejido.