La cromatografía

Es una técnica que permite la

separación y purificación de
sustancias con base en las diferencias
de adsorción entre dos fases: una
móvil y una estacionaria.
Existen diferentes cromatografías, según las fases involucradas:

-Sólida-líquida (cromatografías de columna, de capa delgada y

de papel)

-Líquido-líquido (cromatografía líquida de alta resolución)

-Gas-líquido (en fase de vapor)

Una técnica cromatográfica más sencilla que se utiliza para

analizar la separación de una mezcla de compuestos es la
cromatografía de capa fina

Que se basa en la preparación de una capa uniforme, de un

adsorbente sobre una placa de vidrio o de aluminio, el
desarrollo del cromatograma en capa fina se realiza
normalmente por el método ascendente, esto es, al permitir
que un eluyente ascienda por una placa casi en vertical, por la
acción de la capilaridad

-La mezcla que se desea separar se disuelve en una

pequeña cantidad del solvente orgánico de bajo punto
de ebullición para evaporarlo fácilmente luego del
experimento y con un capilar de punta muy fina se
realiza un toque sobre la placa.

-Estos toques deben quedar ubicados sobre una línea

margen a una distancia del borde inferior de un
centímetro aproximadamente. Esto se hace para
caracterizar los valores de Rf.

-La constante Rf expresa la posición de un

compuesto sobre una placa y mide la
retención de un componente. Se define como
el cociente entre la distancia recorrida por
el soluto y la distancia recorrida por el
solvente.
 𝑑𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑖𝑑𝑎 𝑝𝑜𝑟 𝑙𝑎 𝑠𝑢𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑋
𝑅! = =
𝑑𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑖𝑑𝑎 𝑝𝑜𝑟 𝑒𝑙 𝑓𝑟𝑒𝑛𝑡𝑒 𝑑𝑒𝑙 𝑠𝑜𝑙𝑣𝑒𝑛𝑡𝑒 𝑌

-La cromatografía de capa fina es una técnica

útil en química orgánica, puesto que permite

- Determinar el grado de pureza de un

compuesto.

Se puede determinar así, por ejemplo, la efectividad

de una etapa de purificación.

- Comparar muestras.
Si dos muestras corren igual en placa podrían ser
idénticas. Si, por el contrario, corren distinto entonces
no son la misma sustancia.

- Realizar el seguimiento de una reacción.

Es posible estudiar cómo desaparecen los reactivos y
cómo aparecen los productos finales o, lo que es lo
mismo, saber cuando la reacción ha acabado.

El término cromatografía fue introducido en 1906 por el botánico

ruso Mikhalil Tswett.

Para hacer referencia a la separación de los pigmentos contenidos en extractos

vegetales, conforme éstos se filtraban a través de una columna rellena con un
sólido poroso

(Keulemans (1959) definió cromatografía como:

“Método físico de separación en el que los componentes a separar se distribuyen

en dos fases, una de las cuales constituye un lecho estacionario de gran desarrollo
superficial y la otra un fluido que pasa a través o a lo largo del lecho estacionario
(fase móvil)”.
 TERMINOLOGIA EN CROMATOGRAFIA

Absorción

Es la retención de una especie química por parte de una masa y depende de la tendencia
que tiene ésta a formar mezcla o a reaccionar químicamente con la misma.

Adsorbente

Fase estacionaria en la cromatografía de adsorción y de reparto.

Adsorción

Es la retención de una especie química en los sitios activos de la superficie de un sólido,

quedando limitado el fenómeno a la superficie que separa las fases o superficie
interfacial, esta retención superficial puede ser física o química.

Disolvente o revelador

Cualquier fase móvil.

Elución

Proceso de extraer un soluto de la fase estacionaria.

Eluyente

La fase móvil una vez que se extrae de la columna.

Fase estacionaria

Material que permanece dentro de la columna cromatográfica durante la cromatografía y

que retiene algún componente de la muestra, posee una gran área superficial y puede ser
un sólido o un líquido dispuesto sobre un sólido que actúa como soporte.

Fase móvil

Es un fluido que puede ser líquido, gas o fluido supercrítico que se usa como portador de
la mezcla y que se hace pasar a través de la columna cromatográfica y la fase
estacionaria.

Origen

Lugar físico donde se coloca la muestra al principio.

Revelado

Proceso de separar un soluto de la muestra por medio de cromatografía.

Soporte

El material sólido inerte que en la cromatografía de reparto sirve para sostener la fase
estacionaria líquida en su sitio.

Sorbente

Cualquier fase estacionaria.

REFERENCIAS

Chicharro, M. 2005. Cromatografía, principios y aplicaciones. Análisis Químico.

García-Segura, J.M., Gavilanes, J.G., Martinez del Pozo, A., Montero, F., Oñaderra, M.
Vivanco, F. Eds. 1996. Técnicas Instrumentales de Análisis en Bioquímica. Editorial
Síntesis, S.A. Madrid (España).

Keulemans, A.I.M. 1959. “Gas Chromatography”, Second Edition, Reinhold Publisher

Corp. New York (USA). Nollet, L.M.L. 2006.

Chromatographic Analysis of the Environment. Third Edition, Jack Cazes Chief Ed.
CRC Press,Taylor & Francis, Florida (USA).