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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE MEXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA


PACHECO RODRIGUEZ CAROLINA
VELAZQUEZ PINEDA CECILIA VIVIANA
PROFA. CARINA
Laboratorio de Qumica Orgnica
REPORTE DE PRCTICA
CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA
GRUPO: 1305

RESUMEN
La cromatografa de capa fina es
estacionaria es una capa delgada de
este conjunto se le llama placa. La
disolventes, llamada eluyente, que
capilaridad.

un tipo de cromatografa donde la fase


un material depositado sobre un soporte, a
fase mvil es un disolvente o mezcla de
se mueve por la fase estacionaria por

INTRODUCCION:
La cromatografa de capa fina es un procedimiento que se utiliza para separar
molculas relativamente pequeas. Al igual que otras cromatografas, consiste de
una fase estacionaria y una fase mvil y el principio es el mismo: la sustancia de
inters se adherir a la fase estacionaria o se mover con la fase mvil, viajando
una distancia que es inversamente proporcional a la afinidad por la fase
estacionaria.

La fase estacionaria puede ser variada. Puede ser de papel, de celulosa o de un


gel de silicato (vidrio molido bien fino) unido a una superficie slida (una placa de
vidrio, aluminio, plstico o papel). Esta superficie slida puede ser rgida o flexible.
El tipo de fase estacionaria que se utilice en un experimento depender del tipo de
molculas que se quieran separar. Incluso vienen algunas placas con indicadores
fluorescentes. La fase estacionaria consiste de un solvente que puede ser agua,
un solvente orgnico o una mezcla de ambos.
MARCO TEORICO
La cromatografa se define como la separacin de una mezcla de dos o ms
compuestos
por distribucin entre dos fases, una de las cuales es estacionaria y la otra una
fase
mvil. Varios tipos de cromatografa son posibles, dependiendo de la naturaleza
de las
dos fases involucradas: slido-liquido (capa fina, papel o columna), liquido-liquido
y
gases-liquido ( fase vapor ).
Todas las tcnicas cromatogrficas dependen de la distribucin de los
componentes de la mezcla entre dos fases inmiscibles: una fase mvil, llamada
tambin activa, que transporta las sustancias que se separan y que progresa en
relacin con la otra, denominada fase estacionaria. La fase mvil puede ser un
lquido o un gas y la estacionaria puede ser un slido o un lquido,
Cromatografia en capa fina
En este caso se utiliza una placa recubierta con fase estacionaria manteniendo un
pequeo espesor constante a lo largo de la placa. El eluyente ascender, por
tapitaridao, por la placa y arrastrar los componentes a lo largo de sta
produciendo "manchas" de los componentes.
En la cromatografa en capa fina (ccf), el grado de elucin de las sustancias
depende tanto de su propia polaridad como de la polaridad del eluyente utilizado.
El adsorbente se coloca en forma de una capa delgada adherida sobre un soporte
rgido, que pueden ser placas de vidrio, aluminio o polister. Los tamaos de la
placa para ccf convencional son: 20 x 20; 't0 x20 y 5x2 cm.
Hay adsorbentes que contienen un indicador de fluorescencia para facilitar la
identificacin de muestras. Si no se usa indicador y los componentes no son
coloridos, se requerirn otras tcnicas de revelado.
Eluyentes ms comunes para cromatografa en capa fina
- ter de petrleo - cloruro de metileno
- n-hexano - acetato de etilo
- ciclohexano - acetona
' tolueno - rso-propanol
- dietil-ter - etanol

- f-butil-ter - metanol
- cloroformo - cido actico
Reveladores ms comunes para cromatografa en capa fina
Las manchas de color son, por supuesto, inmediatamente visibles; las incoloras
pueden revelarse mediante:
a) Luz UV: si la sustancia absorbe luz ultravioleta, se puede usar una fase
estacionaria impregnada con un indicador fluorescente (F25a F366), el nmero
que aparece como subndice nos indica Ia longitud de onda de excitacin del
indicador utilizado"
b) La introduccin de la placa en vapores de yodo
c) El roco con una solucin de agualH2SOa 1 :1 (dentro de un compartimiento
especialmente protegido y bajo una campana de extraccin de gases). Despus
calentar intensamente, por ejemplo, con un mechero hasta carbonizar los
compuestos.
Adsorbentes ms comunes para cromatografa en capa fina.
a) Gel de slice (se utiliza en el 80% de las separaciones)
b) Oxido de Aluminio Almina (cida, neutra bsica)
c) Celulosa (Nativa o micro-cristalina)
d) Poliamidas

OBEJETIVO
Mediante cromatografa separar los diferentes pigmentos contenidos en chile
guajillo utilizando el eluyente o mezcla de eluyentes adecuados.
HIPOTESIS
Por medio de cromatografa de capa fina se es para obtener los pigmentos del
chile guajillo con su eluyente acertado.
METODO EXPERIMENTAL
Materiales
Papel filtro
Capilar
Porta objetos
Vaso de precipitado 100 ml
Agitador
frascos
Chile guajillo
Acetona
Acetato de etilo

Benceno
Hexano
Silica gel
Cloruro de metileno
Tolueno

Procedimiento
1. Preparacin de la sustancia problema
Maceracin de chile guajillo (cortar en pedacitos muy finos sin
semilla ni vena)
Colocar en el frasco el chile y agregar 40 ml de tolueno
Dejar mancerar por 3 das
2. Instalacin de equipo para cromatografa en capa fina
Preparacin de la papilla (agregar silica gel para capa fina en el vaso
de precipitado e ir agregando acetato de etilo)
Agregar a cada portaobjetos hasta cubrir sin dejar de grumos y dejar
secar
Ponerlas en papel aluminio y meter a la estufa por 30 min
Sealar con un lpiz el lugar donde sern colocadas las aplicaciones
dejando una distancia de 1 cm.
Colocar la aplicacin de la muestra con ayuda de un capilar
previamente estirado con calor para que la aplicacin sea lo ms fina
posible.
3. Preparacin de la cubeta cromatografca
Colocar en cada frasco un pedazo de papel filtro
Agregar a cada frasco un eluyente diferente (3ml)
Introducir el cromatograma de forma vertical en cada frasco, evitando
que se caiga en el interior
Tapar cada frasco y esperar a que recorra el pigmento
RESULTADOS

DISCUSION DE RESULTADOS
Se realiz esta prctica con xito ya que el preparado de la papilla se realiz de
dos formas una con agua y la otra con acetato de etilo con agua se nos complic
ya que al secar tardo demasiado por lo cual estas placas se desecharon sin
embargo con acetato de etilo fue de forma rpido en la preparacin y secado; al
empezar a poner la muestra se introdujo cada placa a cada frasco con sus
respectivos eluyentes se pudo observar los colores que se iban desprendiendo en
cada uno de ellos en el caso del hexano se tuvo unas complicaciones ya que al ir
subiendo la fase mvil no se pudo observar el color deseado por lo cual se realiz
una vez ms.
CONCLUSION

La tcnica de cromatografa en capa fina tiene sus ventajas ya que es rpida y


barata y se ocupa muy poca cantidad de eluyentes. Al realizar esta tcnica se
pudo obtener un buen resultado ya que la muestra recorri mejor la placa con
cloruro de metileno y acetato de etilo el cual pudo recorrer los pigmentos
exitosamente as que se concluye que estos eran los indicados para la obtencin
de pigmentos.
CUESTIONARIO
A que grupo de compuestos pertenecen los pigmentos?
Carotenoides
Xantofilas
Clorofila a y b
A que se deben que estos compuestos sean coloridos?
-Carotenoides: son los responsables de la gran mayora de los colores amarillos,
anaranjados o rojos presentes en los alimentos vegetales
Entre mayor sea la intensidad del color mayor ser el contenido de carotenoides
-Las Clorofilas. El color verde tan uniformemente presente en los vegetales es
debido a la presencia de dos pigmentos estrechamente emparentados llamados
clorofila a y clorofila b. Se encuentran prcticamente en todas las plantas con
semilla, helechos, musgos y algas. Pueden formarse en las races, tallos, hojas y
frutos a condicin de que estos rganos estn situados por encima del suelo y
queden expuestos a la luz.
-En los cloroplastos dos clases de pigmentos amarillos y amarillo-anaranjados
que son los xantofilas y carotenides.
Explique la diferencia entre cromatografa de adsorcin y particin.
Cromatografa de particin
La mayora de las sustancias tendrn distinta solubilidad en diferentes solventes.
Si una sustancia se pone en contacto con dos solventes que no se mezclan entre
s, se distribuir entre los dos solventes en relacin a su solubilidad en cada uno.
Se llama efecto de particin a la distribucin de un soluto entre dos o ms
solventes que no se mezclan.El solvente o el liquido que es atrapado por el medio
del sostn sea este papel, gel, slice o almina, se llama fase estacionaria. Al
solvente revelador se le llama fase mvil. Se puede obtener una fragmentacin
completa si se permite al soluto
equilibrarse entre las fases estacionaria y mvil.
Adsorcin
La cromatografa de adsorcin o liquido-slido, es la forma clsica de
cromatografa de lquidos. La adsorcin se lleva a cabo cuando hay una
concentracin ms alta en la superficie de un slido que en la solucin
circundante. La adsorcin se refiere al enlace de una sustancia a la superficie de
otra. Generalmente los adsorbentes usados en cromatografa son el carbn
mineral, el gel de slice, y la almina.

Cuales son las ventajas y desventajas de la cromatografa en capa fina en


comparicin con la cromatografa en columna?
Cromatografa en columna:
Las separaciones en la cromatografa en columna pueden realizarse por reparto,
adsorcin o intercambio inico. El estado fsico del adsorbente ha de ser de tal
manera que permita el empaquetamiento uniforme de la columna y el flujo libre de
disolvente a travs de ella.
Cromatografa en capa fina
Cromatografa en papel y electro cromatografa. En todos los casos se emplea una
capa plana y relativamente delgada de una materia que a la vez es el soporte o
bien que recubre una superficie de vidrio, plstico o metlica. La fase mvil se
mueve a travs de la fase estacionaria por capilaridad, a veces ayudada por
gravedad o por aplicacin de un potencial elctrico. En la actualidad la
cromatografa en plano se centra en la tcnica de la capa fina, que es ms rpida,
tiene mejor resolucin y es ms sensible que su alternativa en papel.
Explique la diferencia que existe entre el adsorbente utilizado en cromatografa en
capa delgada y el de columna. Hacer una lista en orden creciente de actividad
En
columna:
Puede usarse cualquier medio adsorbente siendo los ms generales la celulosa,
gel de slice, almina oxido de magnesio, oxido de clcico y carbn activo (para
separaciones por adsorcin y de intercambio inico). Se emplea para la
separacin de mezclas o purificacin de sustancias a escala preparativa. Como
fase estacionaria se usa, generalmente, gel de slice o almina dentro de una
columna. La eleccin del disolvente es crucial para una buena separacin. Dicho
disolvente pasa a travs de la columna por efecto de la gravedad o bien por
aplicacin de presin (cromatografa flash). La columna se prepara mezclando el
soporte con disolvente
Capa delgada:
Silica gel (se utiliza en el 80% de las separaciones)
xido de Aluminio Almina (cida, neutra bsica)
Celulosa (Nativa o micro-cristalina)
Poliamidas
Estos adsorbentes deber tener las siguientes caractersticas:
Tamao de Partcula
o Volumen de Poro
o Dimetro de Poro
o rea Superficial
Homogeneidad
Pureza
Hacer una lista de los eluyentes usados comnmente en cromatografa en
columna y capa delgada en orden creciente de polaridad.

En capa fina:
ter de petrleo
Tolueno
Dietil-ter, t-butil-ter
Diclorometano
Acetato de etilo
n-pentano, n-hexano
Ciclohexano
Tetracloruro de carbono
ter dietlico
Cloroformo
Acetona
Iso-propanol
Etanol
Metanol
cido actico
Que compuesto es ms retenido una amina o un alqueno, ejemplifique en una
capa
cromatografita?
Un alqueno por su polaridad
Como se prepara el capilar para aplicar la muestra en la cromatoplaca?
Se le aplica calor para as poder romperlo pero esto hace que n nos quede un
orificio muy grande
Por que es necesario que la cmara de elusin este saturada con los vapores del
eluyente?
Por que as ser mas fcil el arrastre de los pigmentos
Explique cada uno de los siguientes trminos:
Eluyente: Un eluyente es un solvente que se usa en tcnicas de cromatografa
para extraer un compuesto que se quiere separar de otra fase.
Eluato: la sustancia que se separa o sale de la columna despus de cada
extraccin.
Eluccion fraccionada: Aparato de elucin fraccionada electrofortico tiene una
columna con una rotacin conjunta de sello en el que un delgado chorro de elucin
bfer es dirigido a travs de la luz de la columna electrofortica en una direccin
perpendicular a la de migracin electrofortica. El contenido de la columna se gira
en relacin con el jet estacionario o se gira el jet con respecto a la columna. El
sistema puede emplear electroforesis en solucin libre o en columnas
empaquetadas.
Adsorcion: La adsorcin es un proceso donde un slido se utiliza para eliminar una
sustancia soluble del agua. Es un proceso por el cual tomos, iones o molculas

son atrapados o retenidos


Particin:
Elusin: se produce por el flujo de una fase mvil de gas inerte
Adsorbente: es un slido que tiene la capacidad de retener sobre su superficie un
componente presente en corrientes lquidas o gaseosas. Se caracterizan por una
alta superficie especfica y por su inercia qumica frente al medio
en el que se van a utilizar.
Actividad del adsorbente: El nivel de actividad de la adsorcin depende de la
concentracin de la sustancia en el agua, la temperatura y la polaridad de la
sustancia. Una sustancia polar (= soluble en agua) no puede ser eliminada
Afinidad por el adsorbente
Cmo se clasifican la cromatografa en funcin de la fase estacionaria?
|Clasificacin General , Mtodo especifico |Fase estacionaria |Tipo de equilibrio |
|Cromatografa de Lquidos |Liquido-Liquido o reparto Liquido adsorbido sobre un
solid |Distribucin entre lquidos|Liquido-solid adsorcin Solid |Adsorcin
|Intercambio inico |Resina de intercambio inico |Intercambio
inico|Cromatografa de gases |Gas-liquido |Liquido adsorbido sobre un solid
|Distribucin entre un gas y un liquido |Solid |Adsorcin |Gas-solid |Especies
orgnicas enlazadas a una |Distribucin entre el liquido y Gas fase unida
qumicamente superficie solida la superficie enlazada|Cromatografa de fluidos |
|Especies orgnicas enlazadas a una |Distribucin entre el fluido superficie solida
supercrtico y la superficie enlazada |
Cmo se prepara la papilla para la cromatografa en capa fina?
Se machaca con ayuda de un mortero y pistillo hasta llegar a una papilla
Cundo es conveniente activar una placa y como se activa?
Antes de que se puedan usar las placas generalmente deben ser calentadas para
retirar el agua que acta como una impureza y evita una buena separacin. La
magnitud de calor depende del tipo de separacin que se requiere para
compuestos hidrofilicos o polares, el secado al aire o con un secador de pelo son
generalmente adecuados, para los compuestos hidrofobicos o no polares es
necesario un calentamiento ms intenso. Las placas de oxido de aluminio y de gel
de slice con adhesivo requieren ser secadas al aire durante aproximadamente 30
min. Y despus ser
activadas en un horno a 100C alrededor de 30 min. Las placas de celulosa
debern secarse al aire libre durante 30 min. y activarse al horno durante 10 min.
A 105C.
Qu espesor debe tener la fase estacionaria en una C.C.D.?
No tiene que ser espeso y No debe ser muy aguado, debe deslizarse solo por la
placa.
Cmo debe de ser la polaridad del eluyente al empacar una columna?

La polaridad del eluyente debe ser mayor


Cul es el orden de polaridad en que salen los compuestos de una cromatografa
en columna?
En la cromatografa de columna las molculas de una mezcla son separadas en
base a la afinidad de las molculas por la fase estacionaria o por la fase mvil. Si
una molcula A tiene ms afinidad por la fase estacionaria que la B, B bajar ms
rpido que A.
ter de petrleo.
ter dietlico.
Ciclohexano.
Acetato de etilo.
Tetracloruro de carbono.*
Piridina.
Benceno.*
Etanol.
Cloroformo.*
Metanol.
Diclorometano.
Agua.
cido actico.
*compuestos cancergenos.
Cmo se controla la salida de los componentes en una cromatografa en
columna?
Se controla con la llave de la bureta se va colocando los distintos pigmentos en
tubos de ensaye.
Por qu es importante que la muestra a separar por cromatografa deba estar lo
mas seca posible?
Las cantidades altas de flujo dan malas separaciones, el promedio es 3 a 4ml/min.
en una columna de 40 cm. de altura.

REFERENCIAS
Whitten, Qumica, Octava edicin, Mxico D.F., 2011
Petrucci; Qumica General; Hall Prentice; Octava edicin.

http://organica1.org/1311/1311_6.pdf