Bioprocesos

M.Sc. Estudiante Ph.D Johanna

Andrea Serna Jiménez

1
Parámetros de crecimiento
μ
• Velocidad de crecimiento celular texp-1

µs:
• velocidad específica de consumo de sustrato (g
sustrato/ g cells. h)

µx:
• velocidad específica de crecimiento de biomasa (h-1)
• Biomasa/biomasa*h=h-1

(Yx/s):
• Rendimiento verdadero de sustrato en biomasa (g
biomasa / g sustrato)

(Yp/s):
• Rendimiento verdadero de sustrato en producto (g
producto / g sustrato)

Ks:
• Constante promedio de velocidad. Concentración de
sustrato a la mitad del máximo de velocidad
decrecimiento. masa/unidad de volumen
29
Crecimiento celular

Fase Velocidad
específica de
crecimiento
Adaptación μ= o
Aceleración μ < μmax
Crecimiento μ= μmax
Desaceleración μ< μmax
estacionaria μ= o
muerte μ< 0

30
 Cinética de crecimiento
ΣS+XèΣP+nX La velocidad de crecimiento está relacionada con
la concentración de células.

μ= 1 . dX = d(lnX) = Δ(lnX) X=X0.eu.t

X dt dt Δt

Yx/s=-ΔX Xy S varían en sentido contrario. Rendimiento global. Yx/s=-dX

ΔS ds

Tiempo de duplicación = ln2

u 32
 Ejemplo

La tabla muestra los resultados obtenidos durante una fermentación alcohólica.

Calcular las velocidades específicas de crecimiento de levadura, consumo de
azúcar y producción de etanol cuando han transcurrido 5 horas de fermentación.

Tiempo (h) Biomasa (g/L) Sustrato (g/L) Etanol (g/L)

0 2 100 0
1 2.05 100 0
2 2.1 98 0.5
3 2.3 96 1
4 2.9 94 3
5 3.45 88 7
6 3.8 76 12
7 3.9 63 19.5
8 3.95 48 28
9 3.95 28 37.5

33
 Cinética de crecimiento
t (días) Células/mL
0 4,5e+5
0,2 5,2e+5
0,5 6,5e+5
1 8,1e+5
1,5 1,22e+6
2 1,77e+6
2,5 2,13e+6
3 3,55e+6
3,5 4,02e+6
4 3,77e+6
4,5 2,20e+6
a) Calcular la velocidad específica del crecimiento celular
durante la fase de crecimiento
34
b) El tiempo de duplicación del cultivo
 Cinética de crecimiento
Se han medido 34000 bacterias/L luego de 4 horas de haber inoculado un
medio. Después de 24 horas el número de bacterias aumentó a 5.2 10exp 6.
Asumiendo que la fase de demora es despreciable, calcular:
1. La velocidad específica de crecimiento.
2. El número de bacterias que fueron inoculadas.

Solución:
1. ln(N2/N1)= μ (t2-t1)
μ= ln(5.2 10exp 6/34000)/(24-4)=0.25 h-1

2. De la ecuación X=X0.eu.t
X0=34000 bact/L e0.25x4= 12500 células/L

35
 Modelo cinetico de monod

La cinética de Monod (1950), quién propuso una

expresión similar a la ecuación de Michaelis-
Menten de velocidad de reacción enzimática:

1 dx
= µ x = µm
x dt s + Ks
µ: tasa de crecimiento
específica
µm: tasa máxima de
crecimiento específica
S:concentración de sustrato
KS: constante de saturación.
s
•Cultivo por lotes
•Fermentador perfectamente mezclado
•Fase de crecimiento exponencial
•Ausencia de sustancias inhibitorias
•Prácticamente todo el sustrato se transforma
en biomasa
•El sustrato es limitante de la velocidad de
crecimiento 36
 μ

μmax

μmax/2 s
µ x = µm
s + Ks

Ks [S]

37
 Lineweaver- Burk

1 Ks 1 1
= . +
µ µ max S µ max
La representación gráfica de 1/µ versus 1/s, en el caso de
microorganismos que se comportan de acuerdo con el modelo de
Monod, corresponde a una línea recta, cuyo intercepto es 1/µmax
y pendiente es Ks/µmax

µmax=1/b
Ks=m*µmax
 Langmuir

S Ks 1
= + S.
µ µ max µ max

La representación gráfica de s/µ versus s, en el

caso de microorganismos que se comportan de
acuerdo con el modelo de Monod, corresponde a
una línea recta, cuyo intercepto es Ks/µm y cuya
pendiente es 1/µm

µmax=1/m
Ks=b*µmax
 S/μ

Ks/μmax 1/μmax

Langmuir
 Eadie-Hofstee

µ
µ = µ max - .Ks
S
La representación gráfica de µ versus µ /s, en
el caso de microorganismos que se comportan
de acuerdo con el modelo de Monod,
corresponde a una línea recta, cuyo intercepto
es µm y cuya pendiente es -Ks

µmax=b
Ks=-m
 S/μ

μmax
-Ks

Eadie-Hofstee
 Producción industrial

Producir más células

(biomasa)
Objetivo de la
producción industrial
Metabolitos primarios
de células o
microorganismos Producir compuestos
(intra o extra
celulares)
Metabolitos
secundarios

43
 Metabolitos primarios
Moléculas generalmente
sencillas, que participan de Son más baratos y sencillos
los caminos metabólicos de producir, tienen bajo
esenciales. Son casi contenido de “actividad
idénticos en todos los biológica”.
organismos.

Componentes Derivados del

esenciales de las metabolismo
células : intermedio:

azúcares (fructosa, ribosa), ácidos orgánicos

(gluconato, ácido láctico, cítrico, acético, propiónico,
proteínas, ácidos nucléicos, polisacáridos (gelanos, succínico, fumárico), alcoholes (xilitol, etanol,
xantanos) y poliésteres, ácidos grasos glicerol, sorbitol, butanol), aminoácidos (Lys, Thr,
(insaturados), esteroles. Glu, Trp, Phe), vitaminas (B2, B12),
nucleótidos saborizantes (ácidos inocínico y
guanílico), polisacáridos y poliésteres de reserva.
44
 Metabolitos secundarios

Son muy variados y su estructura es

Moléculas mas complejas, que
fuertemente dependiente de la especie
participan de caminos metabólicos no-
y variedad utilizada para su producción.
esenciales, pero confieren capacidades
Se generan en condiciones particulares
de supervivencia en situaciones de
y son más valiosos y complicados de
etrés.
producir

-Generalmente son productos

especiales (alto precio). Funcionan en
los organismos que los producen como:
• 1. Armas contra otros microorganismos
(antibióticos, toxinas, inhibidores enzimáticos,
pesticidas)
• 2. Factores de crecimiento (hormonas)
• 3. Agentes de interacción microbiana
• 4. Efectores externo

45
 Qué son Bioprocesos?

Procesos que se llevan a cabo en un“bio”-

reactor mediante los cuales se transforman
los sustratos de un medio de cultivo
(materias primas) en metabolitos y/o en
biomasa (productos) empleando para este
fin microorganismos, células o enzimas.

46
 Procesos tecnológicos

Materias primas Productos

Pre-tratamiento Bioreactor o Pos-tratamiento

(upstream) fermentador (downstream)

Operaciones unitarias Operaciones unitarias

Proceso en sí: modifica

sustancialmente

Reciclo

47
Propagación • Tubo de ensayo, cultivo congelado o una
colonia.
celular • Se propaga par air aumentando de volumen.

Fermentación • Preparación de medios.

• Esterilización de medios
o bioproceso • El volumen va a depender de la escala

Separación y • Separaciones de ruptura, centrifugación,

purificación filtración.
 BIORREACTORES
Aparato dentro del cual se llevan a cabo transformaciones bioquímicas
por acción de enzimas o microorganismos vivos

http://2014.igem.org/

http://www.infors-
ht.com/index.php/en/products/bioreactors
49
 50
https://encrypted-tbn1.gstatic.com/images
 51
h"ps://genegews.com
 52
www.frings.com
53
54
55
56
57