Diseo de Bio-reactores

Introduccin
Fermentacin e Ingeniera Metablica
Cultivo Continuo Perfectamente
Agitado
Cultivo Continuo
Los bio-reactores operan en forma continua en
algunas industrias son:
Produccin de levaduras para panaderas
Tratamiento de RILes
Conversiones con enzimas (cuando la enzima
es barata).
Produccin de catabolitos y metabolitos
Cultivo Continuo
Existen diferentes modos de operar fermentadores
continuo:
Quimostato (Perfectamente agitado, CSTR, RPA)
Si el biorreactor est bien mezclado, la corriente de
producto que sale del bio-reactor posee la misma
composicin que el lquido presente en el interior del
reactor.

Flujo Pistn
Hay un frente de reaccin que avanza a lo largo del
reactor.
Caractersticas del Quimostato

Se le llam Quimostato dado que la composicin
qumica y biolgica del medio se mantiene constante,
para ello se debe controlar:
El volumen del lquido en el reactor se mantiene
constante, ajustando los flujos de entrada y salida al
mismo valor.
El pH del medio mediante la adicin de cido o base.
Generalmente se adiciona cido.
El suministro continuo de O
2
( o aire), en el caso de
sistemas aerbicos.
Un nivel de agitacin adecuado que garantice la
homogeneidad del sistema.
Caractersticas del Quimostato (cont..)

La temperatura, para que se produzca el
crecimiento ptimo de los m.o. deseados ( y la
produccin de producto deseado).
El nivel de espuma.
Un cultivo continuo puede durar das hasta
meses.
El primer experimento se llev a cabo en 1949
por Monod.
Los principales componentes de un
cultivo continuo son:

Reactor de volumen constante
Sistema de alimentacin de medio y salida de
producto.
Tanque estril de medio (entrada y salida)
Control de pH, T, OD (Oxgeno disuelto)
Sistema de aireacin y agitacin.
Fig. 1 Tpico Fermentador
Alimentacin
Salida
Ventajas del cultivo continuo
Se pueden producir grandes cantidades de producto.
Incremento de la productividad
Dependiendo del producto se pueden llegar a cientos de
metros cbicos, sobretodo si el proceso es anaerbico.
Hay una constante salida de productos que se pueden
recuperar desde el sistema.
Se puede minimizar lo que es represin catablica por
medio de crecimiento bajo condiciones de carbono
limitantes.
Desventajas del cultivo continuo
Hay peligro de contaminacin
Hay peligro de prdida de estabilidad de la cepa,
sobretodo en recombinantes.
Cuando se utiliza:
1. Catabolitos directos producidos desde la fuente de
carbono
Muchos productos industriales son de este tipo.
Productos terminales de oxidacin
Etanol* cido Lctico*
cido Actico Acido Ctrico
Metano cido Glutmica
Acetona Butanol

2. Enzimas y otros productos
Cuando se utiliza (cont..):
3.- Metabolitos secundarios
En cultivos batch hay productos tales como antibiticos y
toxinas, que no se encuentran relacionadas con el crecimiento, y
que frecuentemente no se producen hasta despus que el
crecimiento ha cesado o ha sido restringido.

En cultivo continuo muchos metabolitos secundarios son
producidos en forma paralela con el crecimiento y con
velocidades mayores o iguales a las observadas en cultivo batch.

Cuando el crecimiento ha sido restringido las clulas son
capaces de iniciar las sntesis de produccin de este tipo de
metabolitos. A su vez, el estudio de estos metabolitos sirve para
evaluar que sucede bajo condiciones de medioambiente
controlado.


Dimensionamiento del bio-reactor

El dimensionamiento de un biorreactor no slo
implica el volumen del bioreactor, sino que la
potencia que se le debe entregar a los agitadores y
sopladores.
Para determinar el volumen del bioreactor es
necesario plantear los balances de masa:
1. Balance de masa total o global
2. Balance de Biomasa, x
3. Balance de sustrato, s
4. Balance de producto de inters, p
Fe
So
Xo
Po
e

Fs
S
X
P
s


S
X
P

V


Fe y Fs: Flujos
Volumtricos de entrada y
salida

so,xo y po: Concentracin de
sustrato, biomasa y producto a
la entrada.

s,x y p: Concentracin de
sustrato, biomasa y producto a
la salida y al interior del
fermentador o bioreactor.


Dimensionamiento del biorreactor

El dimensionamiento de un biorreactor no slo implica el volumen del bioreactor, sino que la potencia que se le debe entregar a los agitadores y
sopladores.

Para determinar el volumen del bioreactor es necesario plantear los balances de masa:


1. Balance de masa total o global
2. Balance de Biomasa, x
3. Balance de sustrato, s
4. Balance de producto de inters, p (PROPUESTO)

De estos balance solo 3 son independientes.













Balance de masa global

Masa de Entrada Masa de Salida = Acumulacin de Masa



(1)
dt
V d
F F
s
s s e e
) (
=

0 =

dt
V d
s

Fe y Fs: Flujos Volumtricos de

entrada y salida

so,xo y po: Concentracin de
sustrato, biomasa y producto a la
entrada.

s,x y p: Concentracin de
sustrato, biomasa y producto a la
salida y al interior del
fermentador o bioreactor.

F
e
s
o
x
o
p
o
F
s
s
x

p

donde
e
y
s
: Densidad de entrada y salida

Supuestos

Las densidades se mantienen constantes:
e
=
s

El sistema opera en estado estacionario, entonces
No hay acumulacin.


Con esto

Fe = Fs = F (2)
BBalance de Biomasa
CClulas entran Clulas salen + Crecimiento celular Muerte celular = Acumulacin (3)








:Velocidad de Crecimiento de los m.o [hr
-1
] o: Velocidad de muerte de los m.o [hr
-1
]

Supuestos:
- Alimentacin estril, x
o
=0

- Volumen constante, V = cte, entonces

- Estado estacionario, no hay acumulacin.
-
Con esto


dt
dx
V
dt
dV
x
dt
V x d
V x V x x F x F
o
+ =

= +

) (
o
0 =
dt
dx
0 =
dt
dV
0 0 0
) (
= + = + =

= +

V x
dt
dx
V
dt
dV
x
dt
V x d
V x V x x F x F
o
o

Supuestos adicionales
Tasa de muerte inferior a la de crecimiento, o<<



Reordenando

0 = +

V x V x x F o
0 = +

V x x F
F x = x V
F= V
Dividiendo por V
F/V=
Luego

Se define:
Velocidad de Dilucin, Volmenes de reactor que pasan por hora [t
-1
]

D = F/V

Donde D es el inverso al tiempo de residencia, luego
F/V=D=
Entonces
D=
La velocidad de crecimiento se puede controlar segn el
flujo de alimentacin.
Balance de Nutriente limitante

Sustrato entran Sustrato salen - Sustrato consumido crecimiento Sustrato
utilizado mantencin Formacin de producto = Acumulacin







m
s[
g/g hr
-1
]: Coeficiente de mantencin

y
x/s
[gr clula/gr sustrato] : Conversin (yield) de clulas referidas a nutriente consumido.

Yy
p/s
[gr producto /gr sustrato] : Conversin de producto producido referidos a nutriente
consumido.

q
p
[gr producto/gr clula hr
-1
] : Velocidad especfica de formacin de producto.





dt
V s d
Y
V x q
V x m
Y
V x
s F s F
s p
s p
s
s x
s
s o
) (
/ /

p x p p
m Y q + =
/





Supuestos:
Requerimientos para mantencin es relativamente menor que los requerimientos en
crecimiento, m x << x/ Y
x/s


La formacin de productos es bastante baja y se puede despreciar q
P
/Y
p/s
x << x/ Y
x/s

Estado estacionario,







0
) (
= + =

dt
ds
V
dt
dV
s
dt
V s d
0
/
=


s x
s
s o
Y
V x
s F s F

dt
V s d
Y
V x q
V x m
Y
V x
s F s F
s p
s p
s
s x
s
s o
) (
/ /

0
/
=


s x
s
s o
Y
V x
s F s F

s x
s
s o
Y
x
s s D
/
) ( *

) (
/
s s Y x
o s x
=
0
/
=

s x
s
s o
Y
x
s
V
F
s
V
F
s x
s
s o
Y
x
s s
V
F
/
) (

Dividiendo por V
Reagrupando
Reemplazando
Aplicando que D =
Modelo de crecimiento
Modelo de Monod



Donde
Ks es la constate de saturacin.

max:
Velocidad Mxima de crecimiento de los m.o [hr
-1
]

Anlogamente se puede plantear para sistemas continuos,

si = D, entonces




D
c
: Velocidad de dilucin crtica. Es la velocidad mxima a la cual se puede operar, siempre se debe
trabajar bajo este valor. D
C =

max



En cultivo continuo la concentracin de sustrato a la salida del fermentador es:







s Ks
s
+
=
max

s Ks
s Dc
D
+
=
*
D D
K D
s
C
s

=
Cintico Tipo Monod
0
0.2
0.4
0.6
0 5 10 15 20 25 30 35 40
Concentracin de Sustrato, S [g/l]
v
e
l
o
c
i
d
a
d

d
e

C
r
e
c
i
m
i
e
n
t
o
,

u

[
h
r
-
1
]
!! Ecuacin muy importante
que siempre se olvida !!
Balance de Producto
Producto entran Producto salen + Producto producido =
Acumulacin



Supuesto que no hay consumo de producto
.





dt
V p d
V x q p F p F
p o
) (
= +

q
p
[gr producto/gr clula hora] : Velocidad especfica de formacin de producto.




m
p
[hr
-1
]: : Velocidad especfica o Coeficiente de formacin de producto debido a la
mantencin.

Y
p/x
[gr producto /gr sustrato] : Rendimiento o Conversin de producto producido
referidos a biomasa.

Productividad
Tanto la productividad como el yield son parmetros clsicos para evaluar fermentaciones.

La productividad refleja la cantidad de biomasa que se produce por unidad de tiempo.

Productividad = D* x [ gr/lt hr]

El mximo de productividad se obtiene cuando
D = D
ptimo
) (
/
s s Y x
o s x
=
D D
K D
s
C
s

=
Ejemplo 1

Se tiene un fermentador para producir biomasa. El volumen del reactor es de
0.5m
3
. El sistema est siendo operado de tal modo que el fermentador slo se
produce el crecimiento de biomasa.
La concentracin de sustrato en la alimentacin es de 10 kg/m
3
.
Los parmetros cinticos y de recuperacin son:
Y
x/s
= 0.5 kg/kg K
s
= 1.0 kg/m
3

max
= 0.12 hr
-1
m
s
= 0.025 kg/kg hr


Asumiendo que la sntesis de producto es despreciable. Determine:

1. Concentracin de biomasa a la salida del fermentador, si se sabe que la
conversin de sustrato en este fermentador es del 40%.
2. Es significativo el trmino de mantencin y por qu?
Determinacin de las condiciones de
mxima productividad
0
2
4
6
8
10
12
0 0.5 1
Tasa de Dilucin
B
i
o
m
a
s
a
/
P
r
o
d
u
c
t
i
v
i
d
a
d
0
5
10
15
20
25
S
u
s
t
r
a
t
o
Biomasa Productividad Sustrato
X,S, Productividad (P) en funcin de D
P = D * x
PRODUCTIVIDAD DE UN QUIMOSTATO
X,S, Productividad (P) en funcin de D
P = D * x
Las lneas rectas tienen que
tienen igual pendiente tienen
igual Productividad
X,S, Productividad en funcin del Tiempo
de Retencin, t = 1/D
PRODUCTIVIDAD DE UN QUIMOSTATO (cont..)
P = x / t

Punto A y Punto B
tienen igual
productividad
B A
F
V
F
V
<
Si el Volumen es constante
B A
t t <
F
A
> F
B
, pero x
A
< x
B
En B se tiene mayor concentracin pero bajo flujo.
A es un punto Inestable dado que se encuentra muy cerca
de t
critico,
pequeas variaciones en el tiempo pueden
producir variaciones en la concentracin
Se tiene un punto ptimo en el
cual la productividad es
mxima, luego dicho punto
tiene la mxima pendiente
posible es tangencial al la
curva de Biomasa, x y se puede
calcular despejando D, desde la
ecuacin:

s
c

0
) dad Productivi (
=
dD
d
( )
0 =

dD
x D d
Resolviendo se tiene:
Si se define:
s
o S
K
s K +
= u
) 1 (
max

=
u
u
t
optima
) 1 ( +
=
u
o
optima
s
s
) 1 (
/
+

=
u
u
s x o
optima
Y s
x
Las coordenadas del punto
C
s
c

(

+
=
o
C ptima
S Ks
Ks
D D 1
Concentraciones en las
condiciones ptimas:
Ejemplo 2
Se tiene un microorganismo que sigue una
cintica del tipo Monod, donde la velocidad
de crecimiento se describe como:
Con los siguientes parmetros

max
= 0,7 hr
-1
K
s
= 5 g/l Y
x/s
= 0,65

El flujo de alimentacin es de 500 l/hr con 85 g/l de sustrato.

Si se utilizan un fermentador que opera en forma continua y
perfectamente agitada,
1. Qu tamao debe se este reactor si opera en forma ptima?
2. Cul es la conversin de sustrato?
3. Cul es la concentracin de biomasa a la salida?