Células madre

Carlos Saavedra Herrera

Origen y Concepto
• Desde descubrimiento de la clonación y la terapia génica, el término
“célula madre” ha tomado gran importancia
• 1916: Danchakoff describe una célula precursora de otras
en la médula ósea (Sabin 1922; Maximow 1924)
• Concepto:
• Células clonales
• Capacidad de dividirse (autorreplicarse) por períodos
indefinidos
• Bajo condiciones apropiadas o señales correctas del
microambiente puede diferenciarse a otros linajes
con características y funciones especializadas
Clasificación
• Presentes en organismos multicelulares
• Dos tipos principales en mamíferos:
a) Células madre embrionarias: aisladas de la masa
celular interna del blastocisto
• Son Pluripotentes (pueden formar diferentes tipos celulares)
b) Células madre del adulto: presentes en tejidos
diferenciados (p. ej. Médula ósea)
• Son Multipotentes Capacidad restringida de formar distintos tipos celulares

• Células madres de la MCI expresan genes distintivos: oct4, Sox2, y

Nanog
Células pluripotentes Embrión trilaminar

Inhibición de:
Oct4
Sox2 Activación de:
Nanog Pax6 y Sox1  ectodermo.
Gata4 y Brachyury (T)  mesodermo.
Gata6, Foxa2 y Sox17  endodermo.
Formas de obtención

• Células madre embrionarias • Células madre del adulto

a) Embriones no utilizados en • Médula ósea – sangre periférica
procedimientos de FIV • Ligamento periodontal – Pulpa
dentaria
b) Embriones creados a partir de • Piel
células somáticas por técnicas de
transfección • Tejido adiposo
• Membranas sinoviales
c) Líneas de CME preexistentes, • Músculo esquelético
obtenidas por cultivos celulares.
• Córnea
• Tejido conjuntivo
• Hígado
• Conductos pancreáticos
• Tejido gastrointestinal
• Pulmón
Clasificación
• Otros tipos principales en mamíferos:
a) Células madre embrionarias
b) Células madre del adulto
c) Células madre germinales: obtenidas de la cresta germinal
d) Células madre pluripotenciales inducidas: Transfección de Oct3/4, Sox2,
Klf4, y c-Myc con vectores virales
e) Células madre tumorales
Clasificación
• Según el origen
• Embrionarias
• Fetales
• Amnióticas
• De sangre de cordón umbilical
• Adultas
• Células adultas reprogramadas (células madre pluripotentes
inducidas [iPSC]).
• Tumorales
Células madre del adulto
• Presentes en tejidos que se regeneran rápidamente:
• Médula ósea
• Folículos pilosos
• Epitelio de la mucosa intestinal
• Puede haber nidos de células madre en otros tejidos:
• Sistema nervioso central
• Retina
• Inducción de des-diferenciación (iPSC)
• Células epiteliales
• Fibroblastos
Clasificación
• Según su capacidad de diferenciación
Clasificación
• Según la capacidad de diferenciación:
a) Totipotenciales: desde el cigoto hasta
las descendientes de las dos primeras
divisiones.

b) Pluripotenciales: proceden de la Masa

Celular Interna, pueden diferenciarse
en las 3 líneas germinales
Clasificación
• Según la capacidad de diferenciación:
c) Multipotenciales: Rango limitado (una capa embrionaria)
de linajes de células diferenciadas de
acuerdo a su localización
Ej: CM nerviosas: pueden generar tres
tipos celulares: neuronas,
oligodendrocitos y astrocitos.

d) Unipotenciales: pueden generar un

solo tipo de célula específica (cél. Precursoras)
Ej: CM de pericondrio, solo dará origen a condrocitos
 • Las CM Embrionarias pueden mantenerse
en cultivos en forma indefinida mientras
crecen en capas de fibroblastos y con la
adición de LIF (leukemia inhibitory factor)
• Luego se diferencian espontáneamente
• Su trasplante a tejidos adultos puede formar teratomas o
teratocarcinomas.

• CM somática o adulta típicamente es unipotencial

• CM hematopoyéticas sin embargo puede diferenciarse en diversos
tejidos: endotelio, músculo cardíaco, músculo estriado, hepatocitos,
neuronas, piel e intestino (Versatilidad).
Características de las Células Madre
1. División celular simétrica y asimétrica.
2. Autorrenovación.
3. Pluripotencialidad.
4. Estrategias citoprotectoras.
5. Inmunogenicidad.
Características de las Células Madre
1. División celular simétrica y asimétrica.
• Mantiene constante la población de CM
• Puede llega a incremento peligroso en el
(Vertical)
número de CM: letalidad, expansión y
lesiones similar a la de los tumores
• Disminuye gradualmente la población de
CM
(Horizontal) • Aparecen tanto células diferenciadas
como CM a partir de una CM original
Características de las Células Madre
2. Autorrenovación.
• Las CM tienen sus telómeros mucho más largos que cualquier otro
tejido embrionario.
• Mayor actividad de la telomerasa.
• Telómeros de células madre pluripotentes inducidas aumentan su
longitud después de su reprogramación nuclear, hasta alcanzar la
longitud de los telómeros de una CME.
• Actividad de la telomerasa también aumentada en células
cancerosas
Características de las Células Madre
3. Pluripotencialidad.
• Capacidad de generar diversos tejidos embrionarios, líneas
germinales, o en otro tipo de célula.
• Tres factores de transcripción reguladores de la pluripotencialidad:
1) Proteína de unión octamérica-4 (Oct-4): proteína de unión al ADN que se
expresa exclusivamente durante las etapas tempranas del desarrollo
embrionario
2) SRY-box que contiene el gen 2 (Sox-2): colabora con oct-4 activando fgf-
4 , un gen expresado en células de la Masa Celular Interna y
posteriormente en distintos tejidos embrionarios.
3) Homeobox nanog (Nanog): si no se expresan células de la MCI quedan
atrapadas en estado prepluripotente, no viable.
Características de las Células Madre
4. Estrategias citoprotectoras.
• Muchas células han adquirido la habilidad de resistir
agentes citotóxicos mediante un sistema de detoxificación
basado en enzimas o por su habilidad de exportar
rápidamente xenobióticos nocivos, propiedad compartida
por las CM
Características de las Células Madre
5. Inmunogenicidad.
• Respuesta inmune de las CME es baja en comparación
con las CMA alogénicas
• Baja expresión de moléculas del complejo mayor de
histocompatibilidad I (MHC I) y falta de expresión de
MHC II
Aplicaciones de las células madre en medicina
• Su principal aplicación aprovechando su potencial de
diferenciación es en regeneración de tejidos destruidos o
dañados para restablecer su función (medicina regenerativa).
• Varias estrategias:
• Terapias celulares derivadas de células autólogas: escasa: 1/106 células de
Médula ósea y 1/104 en células de cordón umbilical
• Terapias celulares derivadas de líneas celulares obtenidas de una variedad de
CM: MO, cordón umbilical, CME, CM de tejidos y órganos de animales
genéticamente modificados.
• Transdiferenciación de fibroblastos en neuronas y miocardiocitos con
combinaciones específicas de Factores de transcripción
Aplicaciones de las células madre en medicina
• Estudios en diabetes mellitus, enfermedades cardiovasculares,
apoplejía, enfermedad de Parkinson, Alzheimer, artrosis degenerativa,
esclerosis múltiple, esclerosis lateral amiotrófica, enfermedad de
Crohn, osteogénesis imperfecta, distrofia muscular, degeneración
macular, lesión de médula espinal, y enfermedades malignas de
células sanguíneas.
• En la actualidad, uno de los principales peligros de la terapia con CM
es la posibilidad de inducción de tumores; en estos casos se ha
sugerido que la posibilidad de desarrollar tumores depende del
número de células aplicadas.
Aplicaciones de las células madre en medicina
• Mecanismo de acción
• No se conocen bien los mecanismos:
• Transdiferenciación celular
• Fusión de células
• Efecto autocrino/paracrino de diferentes citocinas con acciones específicas
(factores de crecimiento, etc).
• Reclutamiento de otras células madre o progenitoras
• Efecto antinflamatorio
• Inhibición de apoptosis
• Incremento de vascularización del tejido dañado
• Citoprotección y estimulación de células sanas
Aplicaciones de las células madre en medicina
• Vehículo terapéutico para terapia genética en enfermedades
monogénicas, o como vehículo de terapias antitumorales o
antiangiogénicas.

• iPSC tienen potencial de modelo humano para el desarrollo

de fármacos y pruebas de toxicidad.
Ventajas y desventajas del uso de células madre

Embrionarias
• Ventajas • Desventajas
• Crecimiento indefinido en cultivo • Interrumpe desarrollo de embrión
• Pueden formar cualquier tejido • Procedencia alogénica
• Dificultad para derivar líneas
celulares específicas
• Potencial teratogénico
Ventajas y desventajas del uso de células madre

Adultas
• Ventajas • Desventajas
• Procedencia autóloga • Autorrenovación limitada
• Uso potencial para transferencia • Manipulación más difícil y costosa
génica
• “Escasos” problemas éticos
• Múltiples fuentes potenciales
• Potencial de clonación terapéutica