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Producción de inóculo para el cultivo del hongo comestible conocido como “tío azul” ( Lactarius
Índigo)

Juan Antonio Godoy Escamilla

MATRICULA: ES202109229

División de Ciencias de la Salud Biológicas y Ambientales, Universidad abierta y a distancia de

México.

Ing. En Biotecnología

Fundamentos de investigación

Grupo: BI-BFIN-2202-B2-003

Unidad V: Análisis de datos y el informe de resultados

Actividad 2: Mi proyecto de investigación 4

30 de Noviembre del 2022

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ÍNDICE.

Pag.

1. Planteamiento del problema ................................................................................. 3

2. Pregunta principal de la investigación ……………………………………………………….3
3. Marco teórico ………………………………………………………………………………………4
3.1 Lactarius Índigo en la sociedad mexicana………………………………………………4
3.2 Propiedades nutricionales y medicinales conocidas………………………………….5
3.3 Descripción de la especie…………………………………………………………………..5
3.4 Métodos de inoculación y reproducción de hongos en ambientes controlados..6
4. Objetivos ……………………………………………………………………………………………7
4.1 Objetivo general………………………………………………………………………………7
4.2 Objetivos específicos………………………………………………………………………..7
5. Alcance ……………………………………………………………………………………………. 8
6. Carácter de la investigación – Metodología………………………………………………… 8
6.1 Metodología……………………………………………………………………………………9
7. Justificación ……………………………………………………………………………………….10
8. Resultados………………………………………………………………………………………….10
9. Conclusión………………………………………………………………………………………….13
10. Lista de referencias ……………………………………………………………………………...15
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1. Planteamiento del problema.

En México se tienen identificados al menos 200 especies de hongos comestibles, la gran

mayoría de estas han sido aprovechadas por los seres humanos que habitan y habitaron el
territorio nacional mediante la recolección dependiente del temporal. El “Tio azul” (nombre
común con el que se le identifica al hongo en algunas zonas del estado de Hidalgo y Puebla) es
un hongo comestible del genero Lactarius, cuya distribución en México se ha reportado en
Chiapas, Colima, Estado de México, Guerrero, Hidalgo, Jalisco, Michoacán, Oaxaca, Puebla,
Querétaro, Tabasco Tlaxcala y Veracruz.

Según datos de la precipitación media histórica por entidad federativa obtenidos del Servicio
Meteorológico Nacional, durante el lapso transcurrido entre 2010 y 2020, en los estados de las
regiones centro-sur y oriente, en donde se ha reportado la distribución del Lactarius Índigo
(Hidalgo, Puebla, Tlaxcala, Veracruz, y Estado de México), se ha identificado una disminución
en el promedio anual de volumen de precipitación, siendo los más afectados los estados de
México e Hidalgo, con una disminución del 3% y 4% respectivamente. De mantenerse la
tendencia negativa en estas regiones, la deficiencia en captación de agua, generará
eventualmente una degradación del suelo y con ello una posible disminución en la población
del “Tio azul” entre otras especies de hongos silvestres comestibles de la región, puesto que
estos requieren de humedad abundante en el sustrato para la germinación de sus esporas.

El Hongo azul o “tío azul”, es regularmente comercializado en los tianguis y mercados

tradicionales durante la temporada de lluvias en los poblados y ciudades cercanas a las
regiones de su distribución natural. La escases en la aparición de este hongo comestible en su
hábitat, implicaría a su vez un aumento en la complejidad de su recolección, y por ende un
déficit en la oferta del producto en el mercado y un incremento en su valor agregado.

La situación previamente descrita, sitúa al hongo Lactarius Índigo, no solo como un agente
ecológico, sino también, como un producto de consumo humano, cuya escases o eventual
desaparición, implicaría problemáticas de carácter ambiental, ecológico y socio-económico que
pueden ser prevenidos y atendidos con perspectiva interdisciplinaria a través de la
biotecnología.

2. Pregunta principal de la investigación: ¿Es posible la producción de un inóculo base para

el cultivo comercial de Lactarius Índigo?

Ante la problemática potencial previamente abordada, surge el cuestionamiento sobre la

posibilidad del cultivo del hongo comestible conocido como “Tío azul” en ambiente controlado,
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en afán de garantizar su productividad. Existen tres procesos involucrados en el cultivo de

hongos comestibles: la producción de la semilla o inóculo, la producción de hongos frescos y el
manejo poscosecha (procesamiento). En este procedimiento, la preparación de inóculo
constituye la base para el cultivo de cualquier tipo de hongo, siendo este un desarrollo masivo
del hongo en un sustrato determinado, a través de un procedimiento de laboratorio
microbiológico con características específicas para cada especie.

3. Marco teórico

3.1 Lactarius indigo en la sociedad mexicana.

La recolección de hongos silvestres en México es una práctica que data desde tiempos
prehispánicos. Estudiar las implicaciones sociales en el proceso de su recolección y
comercialización implica abordar elementos de una relación ancestral que se ha construido
entre diferentes grupos humanos y los hongos, misma que es objeto de estudio de la
etnomicología. Desde este punto de vista podemos identificar a Lactarius índigo como una de
las especies comestibles silvestres más consumida y relevante en zonas templadas de México
(Garibay-Orijel y Ruan-Soto, 2014). El hongo azul, tío azul o trompa azul (como se le conoce
en distintas partes de México) es una de las especies más demandada en los mercados o
tianguis tradicionales del Centro de México, Oaxaca y algunas zonas de Chiapas. En Jalisco el
consumo de esta especie ha sido introducido por los eventos micoturísticos que se realizan en
la zona.

Uno de los aspectos más importantes para el reconocimiento de esta especie es el color azul
índigo que presenta, mismo que es también la característica más emblemática del mismo para
la mayoría de las comunidades que lo consumen. Esto se ve reflejado, en los nombres que se le
han dado a lo largo de la historia, por ejemplo, en comunidades Nahuas del centro del país, se
le conoce como Matlalitzle, haciendo referencia a su coloración azul, ya que matlalectic hace
evidente el tono azulado que posee un hematoma en el cuerpo, e iztic es el adjetivo que se
utiliza para frío y que complementa su nombre tradicional, esto último debido a que muchas de
estas comunidades consideran a este y otros hongos comestibles silvestres de la temporada de
lluvias como un alimento frio. Los hongos fríos se suelen consumir acompañados por un trago
de licor para evitar dolores de estómago al consumirlos, ya que debido a esta “frialdad” se
considera que varias especies no son comestibles cuando están crudas y que deben estar muy
bien fritas para no ser tóxicas.

En algunas comunidades, como lo es Acambay en el Estado de México, lo consideran tóxico por

su coloración azul, además lo relacionan con intoxicaciones gastrointestinales, esta
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característica ha sido utilizada por los pobladores con fines medicinales al usarlo como laxante
consumiéndolo en concentraciones bajas (Estrada Torres y Aroche,1987).

3.2 Propiedades nutricionales y medicinales conocidas

Actualmente se tienen identificados al menos 371 taxones de hongos silvestres que son
consumidos en el territorio mexicano, y existen diversos estudios sobre sus propiedades
alimenticias y medicinales. Aunque su uso medicinal no ha sido estudiado a profundidad,
algunas comunidades los utilizan, registrándose hasta el momento más de 120 taxones para la
medicina tradicional (Guzmán, 1994; Bautista-González y Moreno-Fuentes, 2014).

La composición nutricional de los hongos comestibles silvestres es diferente a las de los

alimentos animales y vegetales convencionales, ya que, taxonómicamente, estos pertenecen a
un reino distinto. En promedio los hongos comestibles silvestres contienen 90 % de agua y 10 %
de materia seca, de los cuales entre el 27 y el 48 % son de proteína, aproximadamente 60 %
corresponde a carbohidratos, y del 2 al 8 % son lípidos, entre los cuales destaca el ácido
linoleico. El alto contenido proteico, sustenta la creencia popular de que los hongos son un
sustituto efectivo de la carne. Aunque no todos los hongos silvestres contienen gran cantidad
de proteínas, en el caso de Lactarius Indigo, la materia seca está compuesta por,
aproximadamente, 32.5% de proteínas, 10.30% de grasas libres (de las cuales 47% son
insaturadas), 45% de fibra dietaría y 12% de cenizas (minerales indigestibles totales). El
porcentaje proteico identificado en la composición de L. Indigo, es mayor que el de alimentos
importantes como trigo y leche en polvo.

Así también, la aplicación médica de ciertos compuestos de L. Indigo se continua valorando a

través de diversos estudios, es un hecho que los macromicetos producen metabolitos
secundarios como los compuestos fenólicos, los pigmentos carotenoides y el ergosterol que
reducen el riesgo de contraer enfermedades, especialmente cáncer o trastornos
cardiovasculares. Además de dichas características propias de todos los macromicetos, diversos
estudios han encontrado que, metabolitos secundarios o sustancias provenientes de los
basidiocarpos de L. indigo , en extractos acuosos, presentan efectos contra cepas de bacterias
con importancia para la salud humana como Eschericia coli, Pseudomona
aeruginosa, Enterobacter cloacae, Staphylococcus y Salmonella entérica , esto debido a los
compuestos sesquiterpénicos que poseen. Asimismo, se ha demostrado, como se mencionó
anteriormente, que L. Indigo muestra actividad antiproliferativa contra células cancerosas
(MCF7) debido a terpenoides y polifenoles, mismos que le proveen de propiedades
antiinflamatorias.
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3.3 Descripción de la especie

L. indigo se desarrolla a partir de un nódulo, que se forma dentro de un micelio subterráneo,

este está compuesto por una masa de células fúngicas filiformes llamadas hifas que constituyen
la mayor parte del organismo. En condiciones ambientales apropiadas de temperatura,
humedad y disponibilidad de nutrientes, se forman las estructuras reproductivas visibles
conocidas como carpóforos, cuerpos fructíferos o setas, el píleo (sombrero) de estos, mide
entre 5 y 15 cm de diámetro, es inicialmente convexo y luego desarrolla una concavidad
central; con la edad, esta concavidad se vuelve más pronunciada, adquiriendo una especie de
forma de embudo a medida que el borde de la tapa se levanta hacia arriba. El margen del
sombrero se enrolla hacia adentro cuando es joven, pero se desenrolla y eleva a medida que
madura. La superficie del píleo es azul índigo cuando está fresca, pero se desvanece a un azul
grisáceo o plateado más pálido, a veces con manchas verdosas. A menudo es zonado: marcado
con líneas concéntricas que forman zonas alternas pálidas y más oscuras, y el sombrero puede
tener manchas azul oscuro, especialmente hacia el borde. Los sombreros jóvenes son
pegajosos al tacto. Al envejecer, el píleo presenta látex azul índigo a verde oscuro, asociado a
la deshidratación del esporoma. Las láminas adnatas, decurrentes de color azul índigo o más
pálido, se vuelven verdes al maltrato. La esporada es de color crema.

El estípite por otro lado, mide de 20 a 80 mm de largo x 1 a 25 mm de espesor. Es

regularmente de color azul índigo pero a menudo con un brillo grisáceo cuando es joven, es
viscoso cuando está húmedo, se quiebra como gis y puede llegar a ser hueco en algunas
partes. La superficie es escrobiculada, las hendiduras generalmente son más brillantes.

Al microscopio, sus esporas son elipsoides a subglobosas, ornamentadas formando un retículo

completo o roto, con prominencias de 0.4-0.5 µ de altura en la unión de las líneas, las líneas
de conexión moderadamente gruesas, la ornamentación completamente cubierta con material
amiloide.

Existen dos variedades para este hongo Lactarius índigo  var. indigo y  L.

indigo var. diminutivus en América.

3.4 Métodos de inoculación y reproducción de hongos en ambientes controlados.

El método principal de propagación de los hongos es a través de esporas. La capa de células

fértiles que producen las esporas (himenio) se encuentra en los carpóforos o setas en una zona
que se denomina Himenóforo, aquí se encuentran las laminillas inferiores del píleo. L. índigo
es un basidiomiceto, es decir que las laminillas de su himenóforo, están compuestas en su
recubrimiento exterior por unas células llamadas basidios, en donde se forman las esporas.
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La obtención de esporas se puede generar por distintos métodos, en algunos se requiere de la

extracción del carpóforo o seta (con precaución de no dañar el micelio), y en otros se extraen
las esporas directamente de una muestra de sustrato.

Para el primer caso, la seta se puede batir con agua destilada y colar para obtener una
disolución rica en esporas, misma que tendrá que utilizarse de manera casi inmediata. Por otro
lado, para una extracción más pura y con posibilidad de almacenamiento, se puede obtener
una esporada sobre una superficie estéril a través del píleo aislado y con el himenóforo
mirando hacia la superficie receptora, en un proceso que tarda alrededor de 48 horas hasta
obtener una esporada con cientos o miles de millones de esporas que pueden ser almacenadas
para su posterior uso.

En el caso de la extracción de esporas directamente del sustrato, existen el método tradicional

descripto por Gerdemann & Nicolson (1963) , el método descripto por Herrera et al. (1994) que
utiliza pirofosfato de sodio y licuadora (PL) y el método de agua y licuadora (AL). Al someter
estos metodos a evaluación, diversos estudios identifican una mayor cantidad de esporas
obtenidas a partir del método AL (desagregación mecánica de las partículas del suelo), mientras
que para suelos arcillosos, el método PL (desagregación química con pirofosfato de sodio y uso
de licuadora) resulta importante para la recuperación de esporas del orden Glomales.

Ahora bien, para la producción del inóculo es necesario primero obtener la cepa (población de
microorganismos de una sola especie) del hongo , esto se consigue a través de aislamiento
vegetativo, mismo que deberá realizarse en distintos medios de cultivo y bajo distintas
condiciones (pH, temperatura, densidad del medio de cultivo, etc.), en afán de obtener datos
sobre velocidad de crecimiento y producción de biomasa, para posteriormente inocular con el
micelio que mejores indicadores de crecimiento obtenga durante el proceso de cultivo, en el
sustrato con las características mejor adaptadas para la penetración de las hifas del micelio y
bajo las condiciones ambientales que mejores resultados hayan dado durante el cultivo en Petri.

4. Objetivos.
4.1 Objetivo general.

El presente proyecto de investigación pretende generar un acercamiento teórico a un

modelo de preparación del inóculo para el cultivo comercial del hongo silvestre
comestible comúnmente conocido como “Tio Azul” u “Hongo azul”, en base a esto,
determinar la viabilidad de un procedimiento funcional para la obtención de cepas y la
preparación de este inóculo para el cultivo de los hongos de la especie Lactarius Índigo,
y de ser el caso, sugerir un sistema de cultivo en base a este modelo.
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4.2 Objetivos específicos.

 Documentar las propiedades funcionales del consumo humano del hongo

silvestre conocido como “tío azul”
 Describir los medios de cultivo y condiciones ambientales óptimas para el desarrollo
satisfactorio de distintas cepas del hongo Lactarius Índigo.
 Encontrar el o los sistemas de cultivo que tengan las mejores probabilidades de
generar mayor velocidad de crecimiento y producción de biomasa.
 De ser el caso, proponer un sistema de cultivo preliminar en base a los datos
recabados.

5. Alcance

Considerando la información obtenida previamente, y buscando dar seguimiento a los

lineamientos delimitados por los objetivos también expuestos, vamos a determinar el alcance
de esta investigación como correlacional. Ahora bien, cabe mencionar que, en su mayoría, este
trabajo aborda una fase descriptiva de la investigación debido a las múltiples limitantes de un
estudio netamente teórico, por lo que al trabajar sobre el enfoque cuantitativo se aplican
fundamentalmente análisis de datos de tendencia central y dispersión obtenidos de diversos
estudios, con un enfoque igualmente cuantitativo o mixto de enfoque cuantitativo dominante,
referentes a la identificación de cepas, desarrollo, reproducción, sustrato para inoculación,
velocidad de crecimiento, producción de biomasa y cualquier dato que sea de utilidad para la
identificación de metodologías viables de producción de inóculo para el cultivo del hongo
comestible Lactarius Índigo. Por otra parte para el enfoque cualitativo, se abordan estudios de
tipo fenomenológicos o narrativos constructivistas, que pretendan conseguir la mayor cantidad
representaciones subjetivas que emergen alrededor del hongo L. Índigo como fenómeno social
en diversos grupos humanos del centro, sur y occidente de México, en donde este hongo
silvestre se posiciona como un elemento importante para la economía, la alimentación, y en
general para los usos y costumbres de estas comunidades.

Posterior a esta etapa descriptiva, se pretende generar un marco comparativo entre los datos
recabados en los distintos estudios sobre producción de inóculo, ya sea para el caso de L.
Índigo, o de otros basidiomicetos análogos que nos puedan acercar a uno o más esquemas de
reproducción, inoculación y cultivo teóricamente viables.

6. Carácter de la investigación
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El presente estudio se lleva a cabo a través de un esquema de investigación mixto de enfoque

dominante cuantitativo, a nivel cuantitativo se fundamenta principalmente en estudios
cuantitativos sobre la obtención de cepas y la producción de inóculo de hongos comestibles
silvestres nativos del centro de México, en estos, se experimenta a través del aislamiento
vegetativo de cepas de estos hongos silvestres, en distintos medios de cultivo, obteniendo una
muestra probabilística de la cual se consiguen y analizan datos de velocidad de crecimiento y
producción de biomasa,  en relación a los distintos tipos de sustrato, y otros factores
ambientales que pudiesen significar un indicador que muestre cambios sobre el desarrollo de
los hongos estudiados. Cabe mencionar que no se hallaron estudios científicamente validados
sobre la producción inocular o el cultivo de la especie L. Índigo específicamente, pero se hace
referencia a los estudios morfológicos, químicos y biológicos que hay sobre este, para
correlacionar los resultados obtenidos respecto a producción de inoculo de otras especies,
siempre y cuando compartan al menos 3 de las siguientes características con L. Índigo: Hábitat
natural en México, estructura productora de esporas (basidio en L. Índigo), porcentaje de agua,
porcentaje de proteínas en masa drenada y temporada de recolección.

Por otra parte, el presente trabajo se basa también en reportes de carácter etnográfico, más
precisamente, etnomicológico. Es decir que se hace referencia recurrentemente a datos
obtenidos e interpretados por la vía cualitativa, tratándose principalmente sobre la relación
histórico/cultural de los grupos humanos y los hongos silvestres comestibles en México. Este
enfoque nos permite dilucidar distintas formas sociales de percepción, que a su vez conllevan a
diferentes usos alimenticios y medicinales dotados por las sociedades humanas. 

Es por ello que este trabajo de investigación se apoya en la etnomicología para referenciar el
marco teórico y estructurar la justificación, aunque aplica únicamente la información obtenida a
través de estudios de carácter cuantitativo, para relacionar las variables planteadas, y así
apuntar a conclusiones basadas en evidencia probabilística. 

6.1 Metodología

Para la realización de esta investigación se recabaron datos, que fueron obtenidos a partir de
las siguientes fuentes: Un proyecto de grado sobre determinación de un sustrato eficiente para
el cultivo de Lentinula Edodes (Chirivi Carreño, 2018), un documento de investigación sobre la
actividad antibacteriana y citotóxica de extractos del basidiocarpo del hongo comestible L.
índigo (Ochoa Zarzosa; Vázquez Garcidueñas, Robinson Fuentes; Vázquez Marrufo, 2011), una
investigación sobre obtención de cepas y producción de inóculo de cinco especies de hongos
silvestres comestibles de alta montaña en el centro de México (Arana Gabriel; Burrola Aguilar;
Garibay Orijel; Franco Maass, 2014) y una publicación sobre la composición química
aproximada de algunos hongos silvestres comestibles de Querétaro, México (León Guzmán;
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Silva; López, 1997). Dichos datos se agruparon en 2 distribuciones estadísticas principales de la

siguiente manera:

1. Medios de cultivo óptimos para el crecimiento y producción de biomasa en Psathyrella

spadicea, Floccularia aff. luteovirens, Clitocybe squamulosa, Flammulina mexicana y
Lyophyllum aff. Shimeji
2. Condiciones ambientales más empleadas en el cultivo de basidiomicetos silvestres de
climas templados húmedos y fríos en el centro de México.

A partir de los datos obtenidos y ordenados, se analizaron medidas de tendencia central y de

dispersión, con el objeto de identificar los sustratos y condiciones más viables para la
producción del inoculo de L. Índigo y su cultivo en ambientes controlados.

7. Justificación

Actualmente, la necesidad de establecer nuevos modelos de producción agrícola en ambientes

controlados para alimentos cuya cosecha ha sido tradicionalmente generada únicamente por
medio de recolección, es cada vez más grande debido a la crisis alimentaria mundial, los
efectos negativos del cambio climático, la constante degradación de los suelos, la
contaminación gradual de los cuerpos de agua y la revolución nutricional de los recientemente
denominados súper alimentos.

Considerando los factores previamente mencionados, podemos aseverar, que la determinación

de un modelo teórico de preparación de inóculo para el cultivo de hongos silvestres
comestibles como lo son los de la especie Lactarius Índigo, significaría un primer paso para la
estructuración de un sistema de cultivo práctico de los hongos comestibles mexicanos, ya sea
para su comercialización en masa, o bien, para el autoconsumo del productor o la
autosuficiencia alimentaria de las comunidades originalmente recolectoras.

Apuntar hacia la producción en masa, no solo conseguiría atender una mayor demanda del
“hongo azul” como bien de consumo al introducirlo a una cadena de producción más compleja
y de mayor alcance, sino que también, un sistema de cultivo estandarizado funcionaria como
un modelo de conservación preventivo ante una posible disminución de la población silvestre
de esta especie debido a los efectos del cambio climático en su hábitat natural y del mismo
modo abriría la puerta a la documentación concreta de sus propiedades nutricionales y
medicinales.

Reconocer la diversidad en las tradiciones ancestrales de alimentación en nuestro país, nos

acerca también a conocer a profundidad y así también perfeccionar los procesos de producción
agrícola que históricamente han sido aplicados, y generar conocimiento científico verificable
sobre estos alimentos en busca de adecuar estos sistemas a las necesidades actuales. En este
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sentido, la biotecnología deberá cumplir un papel fundamental para la innovación tecnológica

y la investigación en el ámbito alimenticio.

8. Resultados.

A través del presente proyecto de investigación hemos obtenido distintos datos de utilidad para
alcanzar los objetivos generales y específicos en que se basa este estudio. Una vez que se
recabaron los datos sobre medios de cultivo (sustratos) más eficientes en cuanto a crecimiento
y producción de biomasa en Psathyrella spadicea, Floccularia aff. luteovirens, Clitocybe
squamulosa, Flammulina mexicana y Lyophyllum aff. Shimeji y Condiciones ambientales más
empleadas en el cultivo de basidiomicetos silvestres de climas templados húmedos y fríos en el
centro de México, a partir de las fuentes citadas en el apartado de metodología, hemos
obtenido los siguientes resultados:

ESPECIE DE Medios de cultivo óptimos para crecimiento y producción de

BASIDIOMICETO biomasa

  PDA/PDA-PL EMA AM TE
Psathyrella spadicea X      
 12
CONDICIONES AMBIENTALES
OPTIMAS PARA CRECIMIENTO
TEMPERATURA (°C)
12
TEMPERATURA (°C) pH 10
18 5.5 8
6
4
25 4.8
2
0
18 6.1 0 2 4 6 8 10 12
18 5.7
18 5.5

18 ND
PH
  28 ND 7
6
MEDIA 20.43 5.52 5
MODA 18 5.5 4
3
MEDIANA 18 5.5
2
VARIANZA 17.95 0.22 1
DESVIACIÓN 0
1 2 3 4 5
ESTANDAR 4.24 0.47

fuente: Autor,2022; basado   Burrola Aguilar;XGaribay Orijel; Franco Maass,

X  
Floccularia aff. en los datos obtenidos en Arana Gabriel;
luteovirens 2014 y Chirivi Carreño, 2018.

X      
Clitocybe squamulosa
Flammulina mexicana X X X  
Cantidad de especies en que el medio de cultivo fue  consi-
Lentinula Endodes     X
derado optimo para crecimiento
X
y producción
X
de biomasa
X  
Lyophyllum aff. shimeji

Los
PDA/PDA-PL EMA AM TE
medios de cultivo (sustratos) PDA/PDA-PL, EMA, AM y TE, se refieren a los sustratos que
mejores resultados obtuvieron en los estudios revisados, y su composición es la siguiente:

fuente: Autor,2022; basado en los datos obtenidos en Arana Gabriel; Burrola Aguilar; Garibay Orijel; Franco Maass, 2014 y Chirivi Carreño, 2018.
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PDA/PDA-PL(Agar papa dextrosa-peptona y levadura): 39 g de PDA-BD BioxonMR, 2 g de

extracto de levadura BD Bioxon MR y 1g de peptona de gelatina BD Bioxon MR (Formulación en
g·litro-1 de agua destilada).

EMA (extracto de malta): 31.9 g de MEA-BD Difco MR, 2 g de extracto de levadura BD Bioxon MR y
1 g de peptona de gelatina BD Bioxon MR (Formulación en g·litro-1 de agua destilada).

AM (Agar maíz): 15 g de agar agar HYCELMR , 15 g de harina de maíz MASECA®, 2 g de extracto

de levadura BD BioxonMR y 1 g de peptona de gelatina BD Bioxon MR (Formulación en g·litro-1 de
agua destilada).

TE: 80% en peso de pulpa de café, por 20% en peso de vaina de arveja.

Cabe mencionar que de las especies de basidiomicetos revisadas, que son endémicas de
México, las que mejor desarrollo tuvieron desde el cultivo in vitro, fueron L. aff. shimeji. y F.
mexicana. Para L. aff. Shimeji la mejor relación velocidad de crecimiento/índice de biomasa fue
obtenida a una temperatura de 25°C en el medio de cultivo PDA-PL, y para F. mexicana el mejor
resultado se obtuvo tanto en el medio de cultivo PDA-PL como en EMA.

9. Conclusiones.

Tras haber analizado los datos obtenidos en el presente proyecto de investigación, se puede
confirmar la importancia de L. Índigo en sus múltiples usos tradicionales alimenticios
identificados para diversas comunidades del centro de México, y añadido esto hemos
identificado usos potenciales para los ámbitos de la medicina y la nutrición, basados en
estudios sobre su composición (León Guzmán; Silva; López, 1997) y su actividad antibacteriana
y citotóxica (Ochoa Zarzosa; Vázquez Garcidueñas, Robinson Fuentes; Vázquez Marrufo, 2011).
Todo esto pone a L. Índigo como una especie con un alto potencial para fomentar el desarrollo
social, económico, científico y alimentario de las comunidades que tradicionalmente lo han
aprovechado, y quizás incluso de todo el país, al tratarse una especie comestible que,
ciertamente fomenta el llamado micoturismo, y por ello, si logra conseguir mayor demanda,
puede ser producida en masa a través de cultivos en ambientes controlados en el futuro.

Puntualizada la importancia y el potencial de esta especie, y en base en la información recabada

en el presente estudio, podemos llegar a sugerir un modelo preliminar para la obtención de
cepas de L. Índigo y la producción de un inóculo como base para su posterior cultivo en
ambientes controlados.

En este sentido retomando los resultados obtenidos vamos a determinar las condiciones
ambientales y los medios de cultivo con mayor probabilidad para el cultivo exitoso de cepas de
L. Índigo en ambiente controlado, preferiblemente en laboratorio:
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Como se menciona anteriormente, un proyecto de producción de inóculo, deberá de producirse

en laboratorio, para poder tener mayor control sobre las condiciones del experimento, y así
apuntar a resultados más fiables, en este sentido, se recomienda obtener las esporas originales
por medio de la producción de una esporada en laboratorio. Como se comentó en el cuerpo del
presente trabajo, para un basidiomiceto, esto se consigue a través del píleo aislado sobre una
superficie estéril y con el himenóforo mirando hacia esta superficie receptora, este es un
proceso que tarda alrededor de 48 horas, resultando finalmente en la obtención de cientos o
miles de millones de esporas que pueden ser almacenadas para su posterior uso.

Una vez obtenidas las esporas, debemos definir las condiciones ambientales generales para el
aislamiento de cepas in vitro. En este sentido, recordemos que la temperatura óptima media
para el crecimiento de los basidiomicetos estudiados fue de 20.43°C, aunque debemos resaltar
que el dato más frecuente en este sentido fue el de 18°C, por lo que fijaremos como sugerencia
para temperatura de cultivo de L. Índigo un rango de 18-20°C

Los datos obtenidos respecto al pH óptimo para el cultivo son más limitados, pero a su vez son
menos dispersos, como podemos notar por su desviación estándar, permitiendo que las tres
medidas de tendencia central aplicadas arrojen un resultado muy similar. En base a lo anterior,
podemos sugerir el pH de 5.5 como base inicial para el cultivo experimental de L. Índigo.

Ahora bien, el medio de cultivo más exitoso para el crecimiento miceliar en los casos análogos
estudiados, fue sin duda el de Agar papa dextrosa-peptona y levadura (PDA/PDA-PL), sin
embargo entre los mejores resultados de producción de biomasa y velocidad de crecimiento,
también destacan el medio de cultivo de extracto de malta (EMA) y el de Agar de maíz (AM), por
lo que la sugerencia para iniciar un proyecto de producción de inóculo para el hongo L. Índigo
seria experimentar con estos tres medios de cultivo para la obtención de cepas y así mismo
buscar otros medios de cultivo de características físicas y químicas similares, cuya obtención
sea menos complicada para el productor tradicional o más económica para el prospecto a
productor en masa, aunque esta determinación se encuentra fuera del alcance de este estudio.

Para finalizar es importante mencionar, que para todos los casos el mejor modelo de cultivo e
inoculación solo se obtendrá a través de un estudio experimental en laboratorio y la intención
de este proyecto de investigación, ante las limitantes de un estudio 100% teórico, es
simplemente sugerir las variables iniciales para otro proyecto de investigación, cuyos alcances y
resultados deberán ser más completos y fiables.
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Lista de referencias:

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edible mushroom Lactarius indigo (Schw.) Fr. (Russulaceae). African Journal of Pharmacy
and Pharmacology, 5(2), 281-288. https://doi.org/10.5897/ajpp10.032
 CHIRIVÍ CARREÑO, C. A. (2018). DETERMINACIÓN DE UN SUSTRATO EFICIENTE PARA EL
CULTIVO DE ii SHIITAKE (LENTINULA EDODES) A PARTIR DE UNA MEZCLA DE RESIDUOS
DE PRODUCCIÓN DE CAFÉ Y VAINA DE ARVEJA (PISUM SATIVA) EN EL
LABORATORIO (INGENIERO AMBIENTAL). UNIVERSIDAD PONTIFICIA BOLIVARIANA.
 Contreras Cortés, L. E. U., Vásquez García, A. & Ruán Soto, F. (2018). Etnomicología y
venta de hongos en un mercado del Noroeste del estado de Puebla, México. Scientia
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