Está en la página 1de 8

Machine Translated by Google

Química  de  los  alimentos  368  (2022)  130831

Listas  de  contenidos  disponibles  en  ScienceDirect

Química  de  Alimentos

página  de  inicio  de  la  revista:  www.elsevier.com/locate/foodchem

Efecto  antimicrobiano  de  la  nanoemulsión  de  aceite  esencial  de  laurel  sobre  los  patógenos  transmitidos  por  

los  alimentos  y  las  bacterias  que  deterioran  el  pescado
¨ ¨
a
Yesim  Ozogûl , Nariman  El  Abed  b,* fatih  ozogul a
,
a Departamento  de  Tecnología  de  Procesamiento  de  Mariscos,  Facultad  de  Pesca,  Universidad  de  Cukurova,  Adana,  Turquía
b Laboratorio  de  Ingeniería  de  Proteínas  y  Moléculas  Bioactivas  (LIP­MB),  Instituto  Nacional  de  Ciencias  Aplicadas  y  Tecnología  (INSAT),  Universidad  de  Cartago,  Túnez,
Túnez

INFORMACIÓN  DEL  ARTÍCULO RESUMEN

Palabras  clave: Esta  investigación  tuvo  como  objetivo  aplicar  la  nanotecnología  para  la  nanoformulación  del  aceite  esencial  (EO)  de  Laurus  nobilis  mediante  el  
Nanoemulsión
método  de  emulsificación  ultrasónica  y  la  caracterización  de  la  nanoforma:  tamaño  de  partícula,  viscosidad,  índice  de  polidispersidad,  estabilidad  
Actividad  antimicrobiana termodinámica  y  tensión  superficial.  La  actividad  antimicrobiana  de  la  nanoemulsión  de  aceite  esencial  de  laurel  (LEON)  y  el  aceite  esencial  de  
aceite  esencial  de  laurel
laurel  también  se  investigó  frente  a  un  panel  de  diez  patógenos  transmitidos  por  los  alimentos  y  bacterias  que  deterioran  el  pescado.  El  análisis  
Patógenos  transmitidos  por  los  alimentos
GC­MS  de  EO  reveló  que  el  1,8­cineol  era  el  principal  compuesto  volátil.  De  acuerdo  con  los  resultados  de  la  difusión  en  disco,  LEON  fue  más  
Bacterias  que  deterioran  el  pescado
efectivo  contra  bacterias  patógenas  Gram­positivas  de  Staphylococcus  aureus  y  Entero  coccus  faecalis  que  EO.  El  aceite  de  laurel  demostró  un  
mayor  efecto  inhibidor  contra  las  bacterias  que  deterioran  el  pescado  (6,19  a  18,5  mm).  Los  valores  de  CIM  de  LEON  y  AE  de  laurel  oscilaron  
entre  6,25  y  >25  mg/ml  y  entre  1,56  y  >25  mg/ml,  respectivamente.  La  nanoemulsión  y  el  aceite  exhibieron  la  mejor  actividad  bactericida  contra  
Pseudomonas  luteola.
Por  lo  tanto,  LEON  puede  desarrollarse  como  un  agente  antimicrobiano  natural  en  la  industria  alimentaria.

1.  Introducción ¨ et  al.,  2020).  
Reconocido  como  seguro  (GRAS)  por  la  FDA  (EL  ABED  et  al.,  2014;  Ozogul  
Los  aceites  esenciales  poseen  propiedades  antimicrobianas  debido  a  su  compleja  mezcla  
Los  pescados  son  alimentos  perecederos  y  tienen  una  vida  útil  limitada,  y  comienzan   de  compuestos  bioactivos.  Por  este  motivo,  se  han  utilizado  ampliamente  como  
a  perder  calidad  inmediatamente  después  de  la  recolección.  Por  lo  tanto,  es  esencial   bioconservadores  
¨ de  alimentos  en  la  industria  alimentaria  (EL  ABED  et  al.,  2014;  Ozogul  
emplear  métodos  de  conservación  apropiados  para  prolongar  la  vida  útil  y  preservar  la   et  al.,  2017;  Matos  
como  
et  al.,  
a2ntiséptico  
019).  Las  
eh  ojas  
insecticida  
de  Laurus  
y  para  
nobilis  
tratar  
se  
síntomas  
utilizan  tradicionalmente  
gastrointestinales.  
calidad  del  pescado.  En  los  últimos  años,  las  nanoemulsiones  se  han  vuelto  populares  y   Los  aceites  esenciales  (AE)  de  L.  nobilis  tienen  actividades  antimicrobianas  contra  los  
también  se  consideran  un  vehículo  ideal  para  la  entrega  de  sustancias  lipofílicas  debido   patógenos  transmitidos  por  los  alimentos  (Ozogul  et  al.,  2015;  Pilar­Santamarina  et  al.,  
a  su  alta  biodisponibilidad  y  estabilidad  cinética,  comodidad  de  preparación,  tamaño  de   ¨ útil  de  frescas  
2016).  Por  lo  tanto,  se  descubrió  que  LEO  puede  prolongar  la  vida   salchichas  
y  carne  
partícula  pequeño,  etc.  (McClements,  2011).  Las  nanoemulsiones  son  bien  conocidas   de  res  (Vilela  et  al.,  2016).  Las  investigaciones  fitoquímicas  de  LEO  revelaron  la  presencia  
como  antimicrobianos  de  autoconservación,  ya  que  tienen  agua  retenida  en  su  estructura   de  monoterpeno  1,8­cineol  como  compuesto  bioactivo  comúnmente  predominante  
y,  por  lo  tanto,  no  hay  agua  disponible  para  los  microorganismos  (Al­Adham,  Khali,  Al­ (Merghni  et  al.,  2016).
Hmoud,  Kierans  y  Collier,  2000).  También  ha  habido  un  interés  creciente  en  la  aplicación  
de  conservantes  de  alimentos  naturales  con  propiedades  antimicrobianas.  Estos  
antimicrobianos  naturales  a  menudo  se  consideran  seguros  en  comparación  con  los   A  pesar  de  las  propiedades  biológicas  reconocidas  de  los  aceites  esenciales,  estos  
antimicrobianos  sintéticos,  que  generalmente  son  aceptados  por  los  consumidores  y  se   compuestos  son  inestables,  lo  que  limita  su  aplicación  e  incorporación  en  productos  
ha  demostrado  que  son  efectivos  contra  los  patógenos.  Los  aceites  esenciales  (AE)   alimenticios  y  bebidas.  La  nanotecnología  es  una  de  las  tecnologías  emergentes  que  
derivados  de  plantas  se  encuentran  entre  los  conservantes  naturales. tiene  una  gran  atención  en  los  sectores  alimentarios  debido  a  su  aplicación  en  el  dominio  
de  los  nanoantimicrobianos  para  mejorar  la  seguridad  alimentaria  (King,  Osmond­McLeod,  
Los  aceites  esenciales  son  extractos  aromáticos  volátiles  de  materiales  vegetales  y  generalmente Duffy,  2018).  En  este  contexto,  el

Abreviaturas:  EO,  aceite  esencial;  GC­MS,  cromatografía  de  gases­espectrometría  de  masas;  GRAS,  Generalmente  Reconocido  como  Seguro;  L.  nobilis,  Laurus  nobilis;  LEO,  aceite  esencial  de  Laurel  (Laurus  
nobilis) ;  LEÓN,  nanoemulsión  de  EO  de  laurel  (Laurus  nobilis) ;  CBM,  Concentración  Bactericida  Mínima;  MIC,  Concentración  Mínima  Inhibitoria;  NE,  Nanoemulsión;  PDI,  índice  de  polidispersidad.

*  Autor  correspondiente.
Dirección  de  correo  electrónico:  elabed_nariman@yahoo.fr  (N.  El  Abed).

https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2021.130831  Recibido  el  21  
de  enero  de  2021;  Recibido  en  forma  revisada  el  3  de  agosto  de  2021;  Aceptado  el  7  de  agosto  de  2021  Disponible  en  línea  
el  11  de  agosto  de  2021  0308­8146/©  2021  Elsevier  Ltd.  Todos  los  derechos  reservados.
Machine Translated by Google

Y.  O¨ zogul  et  al. Química  de  los  alimentos  368  (2022)  130831

Las  técnicas  de  nanoencapsulación  podrían  considerarse  como  una  forma  de  proteger   propagación  de  todos  los  cultivos  bacterianos.
los  AE  encapsulados  contra  los  mecanismos  de  degradación  (Garzoli  et  al.,  2020).  La  
nanoemulsión  (NE)  es  una  de  estas  técnicas  utilizadas  para  la  entrega  de  OE.  Las   2.2.  Material  vegetal
formulaciones  de  NE  se  producen  esencialmente  mediante  enfoques  de  alta  o  baja  
energía.  Las  técnicas  de  alta  energía  son  los  procedimientos  más  aplicados  para  la   La  especie  vegetal  de  laurel  (Laurus  nobilis)  se  compró  a  una  empresa  nacional  
formulación  de  nanoemulsiones  de  EO,  como  la  ultrasonicación,  la  homogeneización  a   (BIOMESI  Bioagrotechnology  R&D)  ubicada  en  Adana,  Turquía.  Su  edad  media  es  de  
alta  presión  y  la  agitación  de  alto  cizallamiento. unos  10  años  y  se  ha  utilizado  a  los  7  días  de  la  recolección.
De  hecho,  la  emulsificación  ultrasónica  se  considera  un  método  de  formulación  de  
establos  NE  altamente  efectivo  y  ecológico  (Donsi  &  Ferrari,  2016).  NE  son  sistemas  
isotrópicos  termodinámicamente  estables,  con  dos  líquidos  no  miscibles,  como  aceite  y   2.3.  Preparación  del  aceite  esencial
agua,  y  estabilizados  por  una  película  
¨ interfacial  de  moléculas  de  surfactante  (Ozogul  et  
¨
al.,  2016;  Ozogul  et  al.,  2020).  Esta  técnica  
W)  
pouede  
  agua  
ser  
en  
eamulsiones  
ceite  (W/O).  
dun  
e  E
apceite  
s  
rocedimiento  
conocido  
en  agua  
como  
(O/ Las  hojas  secas  de  laurel  (10  kg)  con  un  contenido  de  humedad  del  7%  se  sometieron  
sobresaliente  debido  a  su  preparación  simple,  tamaño  de  partícula  pequeño  y  sus  altas   a  un  proceso  de  hidrodestilación  utilizando  un  aparato  Clevenger  tipo  industrial  durante  4  
estabilidades  fisicoquímicas  y  termodinámicas.  Además,  podría  aumentar  la   h,  según  el  proceso  descrito  en  la  Farmacopea  Europea  6.0  (2008)  vigente.  A  continuación,  
biodisponibilidad  de  las  sustancias  activas  encapsuladas  (Ozogul  et  al.,  2017;  Zhang  et   el  EO  recogido  se  secó  sobre  sulfato  de  sodio  anhidro  (Na2SO4),  se  filtró  y  se  almacenó  
al.,  2017). en  nevera  a  +4  ◦C  en  la  oscuridad  para  su  posterior  análisis  y  uso.
¨

Por  lo  tanto,  NE  se  usa  a  menudo  para  extender  la  vida  útil  de  los  productos  alimenticios  
debido  a  su  actividad  antimicrobiana  contra  los  microorganismos  de  deterioro.  Debido  a   2.4.  Composición  química  del  aceite  esencial  de  laurel  mediante  el  uso  (GC­MS)
su  pequeño  tamaño  de  gota,  la  NE  intensifica  los  mecanismos  de  absorción  pasiva  de  las  
células,  por  lo  tanto,  reduce  las  resistencias  a  la  transferencia  de  masa  y  mejora  la   La  caracterización  de  la  composición  química  de  LEO  se  realizó  mediante  
capacidad  antimicrobiana  (Prakash  et  al.,  2019;  Patrignani  et  al.,  2020). cromatografía  de  gases­espectrometría  de  masas  (GC­MS),  que  consistió  en  un  
Los  propósitos  del  estudio  actual  son  investigar  la  composición  química  de  LEO  por   cromatógrafo  de  gases  capilar  Perkin  Elmer  Clarus  500  (Waltham,  MA,  EE.  UU.),  
GC­MS,  sintetizar  nanoemulsiones  basadas  en  LEO  por  emulsificación  ultrasónica  y   inmediatamente  acoplado  al  sistema  de  espectrómetro  de  masas  (Perkin  Elmer  Clarus ).  
evaluar  sus  características  fisicoquímicas  y  su  actividad  antimicrobiana  contra  patógenos   El  análisis  se  llevó  a  cabo  en  una  columna  capilar  de  sílice  fundida  no  polar  SGE  (60  m  ×  
transmitidos  por  alimentos  y  bacterias  que  deterioran  el  pescado  y  comparar  con  el  de   0,25  mm,  ID­BPX5,  0,25  µm,  Perkin  Elmer,  Shelton,  CT,  EE.  UU.).  Para  la  detección  por  
LEO  puro. GC­MS,  la  temperatura  del  programa  del  horno  se  programó  a  60  ◦C  durante  10  min,  
luego  se  aumentó  a  250  ◦C  a  razón  de  4  ◦C/min  y  la  temperatura  final  se  mantuvo  durante  
2.  Materiales  y  métodos 10  min.  Las  temperaturas  del  inyector  y  del  detector  se  fijaron  en  220  ◦C;  Se  aplicó  helio  
como  gas  portador  a  un  caudal  de  1,5  ml/min.  Se  inyectó  un  µL  de  aceite  diluido  en  
2.1.  Aislamiento  e  identificación  de  cepas  bacterianas hexano  en  modo  splitless.  La  temperatura  de  la  fuente  de  iones  se  ajustó  a  230  ◦C  con  
una  energía  de  ionización  de  electrones  de  70  eV.  El  rango  de  masa  de  escaneo  cambió  
Las  bacterias  del  deterioro  utilizadas  en  este  trabajo  se  aislaron  de  pescado  en  mal   de  40  a  550  y  la  temperatura  de  la  línea  de  interfaz  se  mantuvo  en  250  ◦C.  La  identificación  
estado.  La  anchoa  fresca  (Engraulis  encrasicolus),  la  caballa  (Scomber  scomb  rus)  y  la   de  compuestos  de  LEO  se  basó  en  la  comparación  de  sus  espectros  de  masas  con  los  
sardina  (Sardinella  aurita )  se  compraron  en  un  mercado  local  de  pescado.  El  pescado  se   datos  informados  en  las  bibliotecas  NIST­MS  y  WILEY­MS  o  los  publicados  en  la  literatura.
evisceró,  descabeza  y  fileteó  inmediatamente.
Posteriormente  se  almacenaron  a  4  ◦C  hasta  su  deterioro.  Cuando  comenzó  a  
desarrollarse  un  mal  olor  en  el  pescado  después  de  2  semanas,  las  muestras  se  usaron  
para  el  aislamiento  de  las  bacterias  del  deterioro,  que  eran  Photobacterium  dam  selae,  
Enterococcus  faecalis,  Vibrio  vulnificus,  Proteus  mirabilis,  Serratia  liquefaciens  y   2.5.  Preparación  de  nanoemulsión  de  EO  de  laurel
Pseudomonas  luteola.  Brevemente,  las  muestras  (10  g)  de  músculos  de  pescado  en  mal  
estado  se  pesaron  en  bolsas  de  estómago  filtradas  (Fisher  Scientific,  Nepean,  ON,   La  nanoemulsión  a  base  de  LEO  (aceite  en  agua)  fue  preparada  por  un  proceso  de  
Canadá)  en  condiciones  asépticas,  luego  se  agregaron  90  ml  de  solución  salina  estéril.   alta  energía:  emulsificación  ultrasónica,  según  el  método  reportado  por  Ozogul  et  al.  
¨
Posteriormente,  las  muestras  se  homogeneizaron  bien  mediante  un  Stomacher  (IUL,   (2017),  con  modificaciones  
usando  
menores.  
una  Lfase  
a  nanoemulsión  
de  aceite  que  
de  
constituye  
aceite  en  
eal  gua  
11  %
se  
  dp
e  
reparó  
la  
Barcelona,  España)  durante  3  min.  Además,  se  preparó  una  dilución  decimal  para  las   nanoemulsión  total  y  la  fase  de  agua  constituye  el  89  %  de  la  nanoemulsión  total.  La  
muestras  de  trabajo,  posteriormente,  se  pipetearon  0,1  ml  de  cada  rango  de  dilución  de   nanoemulsión  se  preparó  mezclando  AE  de  laurel  con  Tween  80  (Sigma  Aldrich,  
recuento  apropiado  en  agar  de  recuento  de  placas  y,  a  continuación,  se  esparcieron   Taufkirchen,  Alemania)  y  agua  en  una  proporción  de  10:1:89  p/p.  Luego,  las  emulsiones  
uniformemente  sobre  la  superficie  de  la  placa  de  agar  sólido. se  homogeneizaron  utilizando  un  homogeneizador  ultrasónico  (Optic  Ivymen  System  
Los  experimentos  se  realizaron  por  triplicado.  Posteriormente,  las  placas  se  incubaron  a   CY­500,  Barcelona,  España)  durante  15  min  a  72  amplitudes.  La  potencia  (W)  del  
30  ◦C  durante  2  días.  Cada  una  de  las  colonias  bacterianas  seleccionadas  se  rayó   homogeneizador  ultrasónico  fue  de  500  y  la  frecuencia  de  los  ultrasonidos  emitidos  fue  
individualmente  varias  veces  en  la  placa  de  agar  usando  un  asa  estéril  para  obtener   de  20  KHz.  La  entrada  de  energía  se  proporcionó  mediante  un  sonotrodo  que  contenía  
colonias  puras,  luego  se  reconocieron  como  se  explica  en  las  instrucciones  del  fabricante   un  convertidor  piezoeléctrico  con  una  sonda  de  aleación  de  titanio  de  ¼  de  pulgada  (5,6  
para  el  sistema  de  tiras  API  20E  y  API  20NE  (BioMereux,  Francia).  La  tira  inoculada  se   mm  de  diámetro  (Ø)  y  60  mm  de  altura).  Durante  este  proceso,  el  calor  generado  por  la  
incubó  a  37  ◦C  durante  16­24  h,  después  de  que  la  reacción  de  color  se  marcara  como   emulsión  se  controló  utilizando  hielo  alrededor  del  vaso  de  precipitados.
positiva  o  negativa.
El  resultado  alcanzado  fue  examinado  por  el  software  APILAB  PLUS  (Bio  Mereux).  Se  
aplicó  la  reacción  en  cadena  de  la  polimerasa  (PCR)  con  cebadores  (8F  y  519R)  dirigidos  
al  gen  16S  rRNA  para  la  detección  e  identificación  de  cepas  bacterianas  aisladas  de   2.6.  Caracterización  de  propiedades  fisicoquímicas  de  nanoemulsión  EO
pescado  en  mal  estado.  Se  secuenció  una  banda  de  PCR  seleccionada  de  cada  uno  de  
los  aislados. El  índice  de  polidispersión  (PDI)  y  el  tamaño  medio  de  partícula  de  la  gota  de  NE  se  
Las  cepas  bacterianas  patógenas  transmitidas  por  los  alimentos  de  Staphylococcus   determinaron  mediante  un  analizador  de  tamaño  de  partícula  de  difracción  láser  a  25  ◦C  
¨
aureus  (ATCC  29213),  Enterococcus  faecalis  (ATCC  29212),  Salmonella  paratyphi  A   (Mastersizer  2000  Malvern,  Reino  Unido)  según  lo  informado  por  Ozogul  et  al.  (2020).
(NCTC13)  y  Klebsiella  pneumoniae  (ATCC  700603)  se  adquirieron  de  la  American  Type   Su  estabilidad  termodinámica  se  llevó  a  cabo  según  la  metodología  de  Shafiq  et  al.  
Culture  Collection  (Rockville,  MD,  EE.  UU.) ,  y  de  la  Colección  Nacional  de  Cultivos  Tipo   (2007).  La  viscosidad  NE  se  determinó  utilizando  un  reómetro  ARES  (Malvern  Panalytical  
(Londres,  Reino  Unido).  Se  utilizó  caldo  nutritivo  (Merck  1.05443.0500,  Darmstadt,   Ltd,  Malvern,  Reino  Unido)  a  temperatura  ambiente.  La  estabilidad  se  determinó  utilizando  
Alemania)  para  la una  centrífuga  (a  2000  ×  g  para

2
Machine Translated by Google

Y.  O¨ zogul  et  al. Química  de  los  alimentos  368  (2022)  130831

30  min)  a  4  y  45  ◦C.  Este  procedimiento  se  repitió  6  veces  durante  48  h. ml.  Posteriormente,  se  añadió  la  suspensión  de  inóculo  (1  mL)  de  cada  cepa  bacteriana  
Posteriormente,  los  tubos  se  mantuvieron  a  21­25  ◦C.  Los  NE  se  mantuvieron  estables   a  cada  tubo  que  contenía  NE  o  EO  y  MHB.  Como  control  positivo  se  utilizó  un  tubo  
hasta  2  semanas.  El  índice  de  refracción  se  estimó  con  un  refractómetro  Abbetype   que  contenía  MHB  y  suspensión  bacteriana  sin  emulsiones  ni  EO,  mientras  que  el  
(Schmidt  +  Haensch  ATR  W2,  Berlín,  Alemania). tubo  que  contenía  nano  emulsión  o  EO  o  Tween  80  con  suspensión  bacteriana  se  
utilizó  como  control  negativo.  Posteriormente,  los  tubos  se  incubaron  a  37  ◦C  durante  
2.7.  Cribado  antimicrobiano 18­24  h  y  bajo  agitación  vigorosa.  A  continuación,  se  analizaron  los  tubos  para  
comprobar  que  no  había  crecimiento  bacteriano  visible.  Los  valores  de  MIC  se  
Se  aplicó  el  método  de  difusión  de  disco  de  papel  para  determinar  los  efectos   definieron  como  la  concentración  de  muestra  más  baja  que  inhibía  el  crecimiento  
antimicrobianos  de  la  nanoemulsión  de  aceite  en  agua  de  laurel  y  LEO  puro  contra   visible  del  microorganismo  analizado.  Para  la  determinación  de  la  concentración  
seis  bacterias  de  deterioro  del  pescado  y  cuatro  bacterias  patógenas  transmitidas  por   mínima  bactericida  (MBC)  se  llevó  a  cabo  subcultivando  el  contenido  de  los  tubos  de  
los  alimentos,  y  luego  la  comparación  entre  sus  actividades  (Yazgan  et  al.,  2019). ),   MIC  en  Mueller  Hinton  Agar  (MHA)  en  condiciones  apropiadas.  La  concentración  
con  ligeras  modificaciones.  Brevemente,  se  esparcieron  100  µL  de  suspensión   mínima  de  las  muestras,  donde  no  se  mostró  crecimiento  después  de  24  h  de  
bacteriana  a  una  concentración  de  108  CFU/mL  sobre  la  superficie  del  medio  de  agar   incubación,  se  consideró  como  MBC.
sólido  en  placas  de  Petri.  Se  impregnaron  individualmente  discos  de  papel  de  filtro  
estériles  (6  mm  de  diámetro)  con  cincuenta  microlitros  de  nanoemulsiones  sin  diluir  y  
LEO,  luego  se  dejaron  secar  los  discos  en  una  placa  de  Petri  estéril  abierta  en  un   2.9.  análisis  estadístico
gabinete  biológico  de  flujo  laminar  vertical.  Posteriormente,  se  colocaron  cuatro  discos  
de  papel  que  contenían  NE  y  EO  en  las  placas  de  agar  nutritivo  inoculadas,  por   Todos  los  experimentos  se  realizaron  por  triplicado  y  los  resultados  obtenidos  de  
separado.  Se  usaron  antibióticos  de  tetraciclina  (30  µg/mL),  estreptomicina  (10  µg/mL)   las  tres  mediciones  se  informaron  como  valor  promedio  y  desviación  estándar.  La  
y  neomicina  (5  µg/mL)  como  controles  positivos  y  se  usó  Tween  80  como  control   significación  de  las  diferencias  (P  <  0,05)  se  determinó  mediante  la  prueba  de  
negativo.  Luego,  las  placas  se  incubaron  a  37  ±  1  ◦C  durante  18  a  24  h  y  los  diámetros   comparación  múltiple  de  Duncan  con  SPSS  versión  19.0  para  Windows  (SPSS  Inc.,  
de  las  zonas  de  inhibición  alrededor  de  los  cuatro  discos  se  midieron  en  milímetros. Chicago,  IL.  192  EE.  UU.).

3.  Resultados  y  discusión
2.8.  Determinación  de  la  concentración  mínima  inhibitoria  (MIC)  y  mínima  
bactericida  (MBC) 3.1.  Composición  química  del  aceite  esencial  de  laurel

Las  actividades  bacteriostáticas  y  bactericidas  de  la  nanoemulsión  a  base  de  LEO   Los  componentes  de  LEO  identificados  se  dan  en  la  Fig.  1.  El  análisis  GC­MS  de  
y  LEO  puro  frente  a  seis  bacterias  del  deterioro  del  pescado  y  cuatro  bacterias   los  componentes  volátiles  de  los  compuestos  de  EO  permitió  la  identificación  de  11  
patógenas  transmitidas  por  los  alimentos  se  determinaron  mediante  métodos  de   compuestos  que  representan  el  89,16  %  del  aceite  total.  Los  principales  componentes  
dilución  en  caldo  según  Yazgan  et  al.  (2019). detectados  en  LEO  fueron  1,8­cineol  (29,58  %),  α­ter  pinil  acetato  (18,08  %),  α­
Las  cepas  microbianas  se  cultivaron  durante  la  noche  a  37  ◦C  en  caldo  nutritivo,   terpineol  (11,78  %)  y  terpineno­4­ol  (10,32  %).  Los  demás  componentes  identificados  
con  agitación.  Luego,  la  concentración  final  de  las  suspensiones  microbianas  se  ajustó   fueron  menores,  oscilaron  entre  1,32  %  y  4,60  %.  La  composición  química  del  LEO  
a  1,0  ×  106  CFU/mL,  lo  que  se  confirmó  mediante  conteos  viables.  Se  agregaron   mostró  que  es  rico  en  monoterpenos  oxigenados  con  un  porcentaje  de  71.08  %.  Los  
alícuotas  de  un  mililitro  de  LEON  y  LEO  puro  por  separado  al  primer  tubo  de  cada   hidrocarburos  monoterpénicos  representaron  alrededor  del  10,76  %  del  EO,  siendo  
serie  y  luego  se  diluyeron  dos  veces  en  serie  con  Mueller  Hinton  Broth  (MHB)  para   sus  principales  componentes  el  p­cimeno  (3,81  %)  y  el  α­pineno  (2,65  %).
alcanzar  concentraciones  definitivas  de  50,  25,  12.5,  6.25,  3.125 ,  1,56,  0,78,  0,39  y  
0,19  mg/ Los  otros  compuestos  eran  fenilpropanoides,  que  representaban  al  menos

Fig.  1.  Composición  química  (%)  del  aceite  esencial  aislado  de  Laurus  nobilis.

3
Machine Translated by Google

¨ Química  de  los  alimentos  368  (2022)  130831
Y.  Ozogul  et  al.

alrededor  del  7,32%,  siendo  sus  principales  componentes  el  metil  eugenol  (4,60%).  Los   et  al.,  2017).  Además,  LEON  exhibió  buena  estabilidad  durante  15  días  de  almacenamiento,  a  
resultados  del  análisis  de  la  composición  química  de  LEO  también  están  de  acuerdo  con   temperatura  ambiente.
¨
estudios  previos  (Ozogul  et  al.,  2015;  Snuossi  et  al.,  2016;  Caputo  et  
que  
al.,  e2l  
017),  
1,8­Cineol  
que  demostraron  
era  el   El  PDI  de  LEON  se  muestra  en  la  Fig.  2.  El  valor  del  PDI  se  puede  describir  como  la  
principal  compuesto  de  este  AE  con  porcentajes  de  29,60  %,  56  %  y  31,9  %,  respectivamente.   distribución  del  tamaño  de  las  partículas  de  las  gotas.  Con  frecuencia,  los  valores  de  PDI  se  
Por  otro  lado,  otro  trabajo  de  investigación  anterior  demostró  que  el  LEO  poseía  eucaliptol  como   extienden  desde  0,0  (gotitas  uniformes)  hasta  1,0  (muestra  con  poblaciones  de  varios  tamaños  
compuesto  mayoritario  con  un  porcentaje  del  54,38%  (Wang  et  al.,  2019).  Estas  diferencias  en   de  gotas).  Un  valor  pequeño  de  PDI  representa  una  distribución  de  tamaño  de  partícula  
la  composición  del  EO  podrían  ser  consecuencia  de  varios  factores,  por  ejemplo,  la  ubicación   estrecha.  El  valor  de  PDI  se  encontró  en  0,336  para  LEO  en  el  estudio  actual.
geográfica,  las  condiciones  ambientales,  la  edad  de  la  planta,  la  etapa  de  desarrollo,  la  parte   De  hecho,  el  valor  de  PDI  obtenido  depende  de  las  concentraciones  de  surfactante  y  la  cantidad  
de  la  planta,  el  período  de  cosecha  y  el  método  de  extracción  (EL  ABED  et  al.,  2014;  Ozogul  et   de  fase  acuosa  utilizada  para  el  desarrollo  de  la  nanoemulsión,  y  también  del  impacto  de  la  
al.,  2017). emulsificación  ultrasónica  (Chu  et  al.,  2020).

¨
3.3.  Actividad  antimicrobiana

En  este  estudio  de  investigación,  las  actividades  antimicrobianas  de  LEO  basado  en  
3.2.  Propiedades  fisicoquímicas  de  la  nanoemulsión nanoemulsión  y  LEO  puro  contra  los  patógenos  transmitidos  por  los  alimentos  y  las  bacterias  
que  deterioran  el  pescado  se  evaluaron  cualitativa  y  cuantitativamente  mediante  una  prueba  de  
Las  propiedades  físicas  de  la  nanoemulsión  basada  en  LEO  se  presentan  en  la  Tabla  1.  El   difusión  en  disco  y  luego  mediante  ensayos  MIC  y  MBC.  En  general,  los  aceites  esenciales  
diámetro  medio  de  las  gotas  (promedios  Z)  de  las  nanoemulsiones  preparadas  con  Tween  80   poseían  propiedades  antimicrobianas  significativas  contra  una  amplia  gama  de  microorganismos  
(1  p/p  %)  se  encontró  en  aproximadamente  247,52  nm. que  deterioran  los  alimentos  (EL  ABED  et  al.,  2014).  De  hecho,  sus  contenidos  fitoquímicos  
¨
Sin  embargo,  un  estudio  de  investigación  anterior  (Ozogul  et  al.,  2017)  encontró  un  tamaño  de   podrían  presentar  la  capacidad  de  interactuar  con  los  lípidos  en  la  membrana  celular  bacteriana,  
gota  para  LEON  en  el  rango  de  66,02  nm.  Otro  trabajo  de  investigación  demostró  que  el  tamaño   por  lo  tanto,  perturbaron  las  estructuras  celulares  fundamentales  e  interrumpieron  las  
hidrodinámico  de  las  gotas  de  emulsión  de  LEO  varió  entre  239,5  y  357,0  nm,  según  la  influencia   condiciones  de  homeostasis  de  la  célula  microbiana.
de  la  concentración  y  composición  del  aceite  (Reis  et  al.,  2019).  En  general,  la  nanoemulsión   Por  lo  tanto,  estas  sustancias  podrían  generar  la  muerte  celular  bacteriana  debido  a  la  fuga  de  
podría  depender  de  la  concentración  de  surfactante,  que  se  correlaciona  indirectamente  con  la   su  contenido  celular  (Yazgan  et  al.,  2019).  Mientras  que  la  NE  podría  considerarse  como  un  
exposición  externa  del  tamaño  de  la  gota  y  también  podría  depender  de  la  tensión  interfacial   sistema  eficaz  para  que  los  AE  mejoren  su  estabilidad  fisicoquímica  y  superen  su  volatilización,  
aceite/agua  (Sundararajan  et  al.,  2018).  También  depende  de  las  fuerzas  de  cizallamiento  y  la   por  lo  que  también  podrían  interactuar  con  las  células  microbianas  y,  posteriormente,  conducir  
turbulencia  generada  por  el  homogeneizador  ultrasónico  (Mehmood  et  al.,  2017).  Al  comparar   a  su  destrucción  (Yazgan  et  al.,  2019;  Matos  et  al.,  2019). .
nuestros  hallazgos  con  otros  estudios  de  investigación,  la  nanoemulsión  basada  en  LEO  
probada  en  este  trabajo  reveló  un  aumento  en  el  tamaño  de  sus  gotas  (247,52  nm)  en  
comparación  con  el  encontrado  en  el  estudio  de  Ozogul  et  al.  (2017)  (66,02  nm),  según  las   3.3.1.  Actividad  antimicrobiana  contra  bacterias  patógenas  transmitidas  por  alimentos
concentraciones  de  Tween  80  disminuyeron  del  3  al  1  %  (p/p). El  efecto  inhibidor  antimicrobiano  de  LEO  puro  y  su  NE  se  probó  frente  a  cuatro  cepas  
¨
bacterianas  transmitidas  por  los  alimentos,  pertenecientes  tanto  a  bacterias  Gram­negativas  
como  Gram­positivas,  en  particular  Salmonella  paratyphi  A,  Klebsi  ella  pneumoniae,  bacterias  
Además,  la  aplicación  de  Tween  80  como  surfactante  no  iónico  en  la  preparación  de  emulsiones   Gram­negativas  características  y  Staphylo  coccus  aureus .  y  Enterococcus  faecalis,  bacterias  
de  aceite  en  agua  fue  favorable  debido  a  su  balance  hidrofílico­lipofílico  (HLB)  (Chu  et  al.,   Gram­positivas  representadas.  Los  resultados  obtenidos  con  el  método  de  difusión  en  disco  
2020).  Además,  en  comparación  con  los  tensioactivos  basados  en  polímeros,  el  Tween  80,   contra  las  bacterias  transmitidas  por  los  alimentos  se  muestran  en  la  Tabla  2.  Los  datos  
como  tensioactivo  de  molécula  pequeña,  fue  más  eficaz  para  adsorberse  en  la  superficie  de  las   obtenidos  con  el  ensayo  del  halo  de  inhibición  indicaron  estadísticamente  que  LEON  ejercía  
gotas  (Chu  et  al.,  2020). una  mayor  actividad  antibacteriana  contra  S.  aureus  con  halos  que  exhibían  diámetros  de  15  ±  
0,91  mm  en  comparación  con  al  LEO  puro  (10,75  ±  0,25)  (P  <  0,05).
Por  otro  lado,  la  viscosidad  es  un  parámetro  crucial  utilizado  en  la  caracterización  
fisicoquímica  de  nanoemulsiones.  Este  parámetro  podría  afectar  la  estabilidad  de  las  partículas   Además,  el  LEON  exhibió  una  mayor  actividad  antibacteriana  contra  E.  faecalis,  con  un  diámetro  
y  la  estabilidad  a  largo  plazo  de  la  emulsión  (Richa  &  Choudhury,  2020).  Además,  la  viscosidad   de  zona  de  11,25  ±  0,50  mm  que  el  LEO  puro,  pero  no  hubo  diferencia  significativa  (P  ≥  0,05).  
depende  en  gran  medida  de  las  composiciones  de  los  tensioactivos,  los  componentes  del  aceite   Por  otro  lado,  los  resultados  de  LEO  puro  mostraron  que  este  tiene  actividad  antimicrobiana  
y  el  agua  de  la  emulsión,  así  como  de  sus  concentraciones  (Che  Marzuki  et  al.,  2019).  La   contra  todas  las  cepas  probadas,  particularmente  contra  Salmonella  paratyphi  A,  dando  zonas  
determinación  de  la  viscosidad  valida  si  el  sistema  es  una  emulsión  O/W  o  W/O.  La  baja   de  inhibición  entre  10,50  ±  0,25  y  27,88  ±  0,63  mm.
viscosidad  de  los  sistemas  revela  que  es  de  tipo  O/W.  Por  el  contrario,  una  viscosidad  alta  
indica  que  se  trata  de  agua  en  el  sistema  tipo  aceite  (Yazgan  et  al.,  2019).  En  nuestro  estudio   Este  efecto  antimicrobiano  obtenido  con  el  LEO  puro  frente  a  E.  faecalis  y  S.  aureus  estaba  de  
de  investigación,  la  viscosidad  se  encontró  en  1,48  cP.  La  viscosidad  tiene  un  efecto  importante   acuerdo  con  lo  publicado  por  Fidan  et  al.
sobre  la  estabilidad  física  de  las  nanoemulsiones.  Por  lo  tanto,  la  viscosidad  de  la  nanoemulsión   (2019).  Sin  embargo,  nuestros  hallazgos  indicaron  que  el  espectro  antimicrobiano  de  LEO  
LEO  estudiada  en  esta  investigación  mejora  la  estabilidad  de  la  emulsión. contra  Klebsiella  pneumoniae  fue  significativamente  mayor  que  el  obtenido  por  Mehani  et  al.  
(2019),  quienes  reportaron  zona  de  diámetro  de  inhibición  inferior  a  8  mm.  De  igual  forma,  los  
datos  obtenidos  en  este  trabajo  de  investigación  demostraron  que  LEO  presentó  una  mayor  
En  cuanto  a  la  tensión  superficial  de  la  nanoemulsión  a  base  de  laurel  EO  se  encontró  en   actividad  antimicrobiana  frente  a  las  cepas  bacterianas  de  Klebsiella  pneumoniae  y  Salmonella  
el  rango  de  32.75  N/m.  Investigaciones  anteriores  informaron  que  LEON  tiene  datos  similares  
¨ paratyphi  A  en  comparación  con  el  estudio  previo  de  Ozogul  et  al.  (2015).  Además,  el  estudio  
sobre  la  tensión  superficial  (33,37  N/m)  (Ozogul ¨
de  Ouibrahim  et  al.  (2013)  informaron  que  el  LEO  tiene  Salmonella  
menor  actividad  
OMA  
c0ontra  
4  en  S
comparación  
almonella  sp  y  
con  nuestros  resultados.
Tabla  1
Propiedades  fisicoquímicas  de  la  nanoemulsión  a  base  de  aceite  esencial  de  laurel. Sin  embargo,  Cherrat  et  al.  (2014)  revelaron  mayores  actividades  antimicrobianas  de  LEO  

Aceite  esencial significar Tensión  


contra  Staphylococcus  aureus  CECT  976  y  Enterococcus  faecium  CECT  4932,  con  un  diámetro  
Viscosidad   Estabilidad  
(cP) termodinámica Tamaño  de   superficial  (N/ de  zona  de  inhibición  de  37,7  ±  1,8  y  24,0  ±  1  mm,  respectivamente.  Asimismo,  Ozogul  et  al.  
¨
gota  (nm) m) (2015)  obtuvieron  un  mayor  diámetro  de  zona  de  Enterococcus  
inhibición  de  1f1  
aecalis  
±  0.28  
AyTCC  
  11.25  
29,212  
±  1.06  
y  mm  en  
Staphylococcus  aureus  ATCC  29213.  De  hecho,  estas  diversidades  en  las  sensibilidades  de  
Laurel 1.48 ++ 247.52 32.75
(Laurus   las  bacterias  hacia  los  AE  se  deben  a  variaciones  en  su  composición  química.  Debido  a  que  la  
nobilis) composición  fitoquímica  de  los  aceites  esenciales  era  generalmente  variable

++  explica  la  buena  estabilidad  termodinámica.  Nanoemulsificación,  +  separación  de  
fases  en  1  semana,  ++  estable  hasta  2  semanas.

4
Machine Translated by Google

Y.  O¨zogul  et  al. Química  de  los  alimentos  368  (2022)  130831

Fig.  2.  La  distribución  del  tamaño  de  partícula  de  la  nanoemulsión  de  aceite  esencial  de  laurel.

Tabla  2  
Actividad  antimicrobiana  del  aceite  esencial  de  laurel  y  su  nanoemulsión  frente  a  bacterias  patógenas  transmitidas  por  alimentos  por  método  de  difusión  en  disco.

Bacterias  patógenas  transmitidas  por  los  alimentos Método  de  difusión  por  disco  (DD)(1)  (mm)

aceite  esencial  de  laurel Nanoemulsión  de  laurel entre  80 Tetraciclina(2) estreptomicina(3) neomicina(4)

Staphylococcus  aureus  ATCC  29.213 10,75  ±  0,25c   15,00  ±  0,91b   R 20,38  ±  0,63a   15,13  ±  0,63b  R   19,75  ±  0,50a


Enterococcus  faecalis  ATCC  29.212 10,50  ±  0,58c   11,25  ±  0,50c R 30,50  ±  0,41a   16,50  ±  0,91d 6,25  ±  0,29c  
Salmonella  paratyphi  A 27,88  ±  0,63a R R 23,38  ±  0,75b 21,00  ±  0,71c
NCTC13
Klebsiella  pneumoniae  ATCC  700.603 17,25  ±  0,65c 7,75  ±  0,65  d R 27,00  ±  0,91a 10,75  ±  0,50 24,00  ±  0,82b

R:  resistente,  el  valor  representa  la  media  ±  SD.
Diferentes  superíndices  (a–e)  en  la  misma  columna  corresponden  a  una  diferencia  significativa  (P  <  0,05).
(1)
(DD)  Método  de  difusión  en  disco.  Zona  de  inhibición  en  diámetro  alrededor  de  los  discos  impregnados  con  50  µL  de  nanoemulsión  a  base  de  AE  de  laurel  y  AE  de  laurel.  Él
Se  incluye  el  diámetro  (6  mm)  del  disco.
(2)
tetraciclina  (30  µg/mL);  (3)  estreptomicina  (10  µg/mL);  (4)  Neomicina  (5  µg/mL).

según  su  origen  geográfico.  Además,  estas  diferencias  de  resultados  en  las  actividades   (15,13  ±  0,63  mm)  al  de  la  estreptomicina  (no  activa).  Además,  el  LEO  puro  tiene  mayor  
antimicrobianas  de  LEO  podrían  estar  asociadas  con  la  variedad  en  los  niveles  de  sus   actividad  antibacteriana  frente  a  Salmonella  para  typhi  A  que  todos  los  antibióticos  utilizados  
componentes  mayoritarios  y  menores,  y  también  relacionadas  con  una  influencia  sinérgica   (P  <  0,05);  y  también  mostró  un  mayor  efecto  antibacteriano  contra  Klebsiella  pneumoniae,  
entre  todos  los  componentes;  y  relacionado  también  con  los  diferentes  microorganismos   Salmonella  paratyphi  y  Enterococcus  faecalis  en  comparación  con  la  estreptomicina.  En  el  
ensayados. presente  estudio,  la  tetraciclina  y  la  neomicina  exhibieron  una  fuerte  actividad  antimicrobiana  
Por  otro  lado,  las  zonas  de  inhibición  de  LEON  frente  a  bacterias  Gram  positivas   contra  todas  las  bacterias  patógenas  transmitidas  por  los  alimentos  analizadas,  excepto  Sal  
fueron  significativamente  (P  <  0,05)  mayores  que  las  frente  a  bacterias  Gram  negativas.  En   monella  paratyphi  A.  El  Tween  80  utilizado  como  control  negativo  en  este  trabajo  no  reveló  
general,  ha  sido  informado  por  el  estudio  previo  de  Zhang  et  al.  (2017)  que  las   actividad  antimicrobiana  contra  las  bacterias  analizadas.  bacteria  patogénica.
nanoemulsiones  que  utilizan  EO  como  agentes  activos  han  exhibido  excelentes  actividades  
antimicrobianas  contra  una  variedad  de  diversos  microorganismos.  Como  puede  verse  en  
la  Tabla  2,  el  NE  ensayado  resultó  activo  contra  todas  las  cepas  bacterianas,  excepto  
Salmonella  paratyphi  A,  y  el  tamaño  de  su  halo  de  inhibición  varió  de  7,75  ±  0,65  a  15  ±   3.3.2.  Actividad  antimicrobiana  contra  bacterias  aisladas  del  deterioro  del  pescado
0,91  mm.  Según  nuestro  conocimiento,  no  hay  datos  en  la  literatura  sobre  la  actividad   Se  investigaron  las  actividades  antimicrobianas  de  la  nanoemulsión  y  del  AE  puro  en  
antibacteriana  de  la  nanoemulsión  basada  en  LEO  mediante  el  uso  de  un  ensayo  de   bacterias  aisladas  de  peces  de  Photobacterium  damselae,  Enterococcus  faecalis,  Vibrio  
inhibición.  Por  primera  vez,  esta  investigación  experimental  investigó  la  actividad   vulnificus,  Proteus  mirabilis,  Serratia  liquefa  ciens  y  Pseudomonas  luteola,  por  la  presencia  
antimicrobiana  de  LEON  contra  diversos  microbios.  En  general,  la  eficacia  antimicrobiana   o  ausencia  de  zonas  de  inhibición  utilizando  el  método  de  difusión  en  disco  ( Tabla  3).  Los  
de  las  nanoemulsiones  a  base  de  AE  dependía  considerablemente  de  sus  características   resultados  tanto  de  la  nanoemulsión  como  del  LEO  mostraron  una  eficacia  antimicrobiana  
fisicoquímicas,  como  la  formulación  y  el  tamaño  de  la  emulsión;  también  en  componentes   significativamente  mayor  (P  <  0,05)  contra  las  bacterias  probadas.  Estos  datos  se  
de  EO  y  cepas  microbianas  probadas  (Donsi  &  Ferrari,  2016;  Ozogul  et  al.,  2020). compararon  con  los  respectivos  antibióticos  utilizados  como  controles  positivos.  A  partir  de  
los  datos  de  la  Tabla  3 ,  se  puede  percibir  que  la  bacteria  E.  faecalis  exhibió  una  fuerte  
¨ resistencia  contra  EO  y  NE,  mientras  que  la  mayor  actividad  inhibidora  se  observó  contra  
Además,  los  datos  de  las  muestras  de  prueba  se  compararon  con  los  de  los  antibióticos   V.  vulnificus  con  LEO  puro,  con  un  halo  de  inhibición  de  18,5  ±  0,41  mm.  En  comparación  
(tetraciclina,  estreptomicina  y  neomicina)  utilizados  como  controles  positivos  en  este  estudio   con  estudios  previos,  varios  AE  exhibieron  un  alto  grado  de  anti­Vibrio  spp.  actividad.  De  
actual.  Así,  el  LEON  tiene  una  mayor  actividad  antimicrobiana  frente  a  Enterococcus  faecalis   hecho,  estos  extractos  volátiles  podrían  controlar  el  crecimiento  de  varias  especies  
en  comparación  con  el  antibiótico  estreptomicina,  que  no  demostró  ningún  halo  de  inhibición. patógenas  de  Vibrio ,  incluido  Vibrio  vulnificus  (Hajlaoui  et  al.,  2010).  La  muestra  NE  produjo  
actividades  antimicrobianas  contra  todas  las  bacterias  de  deterioro  estudiadas,  excepto
Además,  el  potencial  antimicrobiano  obtenido  de  la  nanoemulsión  a  base  de  EO  frente  a  
Staphylococcus  aureus  mostró  una  mayor  actividad  inhibitoria

5
Machine Translated by Google

¨ Química  de  los  alimentos  368  (2022)  130831
Y.  Ozogul  et  al.

Cuadro  3  
Actividad  antimicrobiana  del  aceite  esencial  de  laurel  y  su  nanoemulsión  frente  a  las  bacterias  del  deterioro  del  pescado  por  el  método  de  difusión  en  disco.

Pescado  aislado  Bacterias  de  deterioro Método  de  difusión  por  disco  (DD)(1)  (mm)

aceite  esencial  de  laurel Nanoemulsión  de  laurel entre  80 Tetraciclina(2) estreptomicina(3) neomicina(4)

Fotobacterium  damselae 14,50  ±  0,41d   13,50  ±  0,71e  R   R 29,00  ±  0,82a   19,13  ±  0,48c   22,13  ±  0,85b  


enterococo  faecalis 6,19  ±  0,55c   15,00  ±  0,82e   R 17,00  ±  0,70b   18,88  ±  0,75a   6,00  ±  0,41c  
Vibrio  vulnificus 18,50  ±  0,41d   8,00  ±  0,41d  7,25   R 28,50  ±  0,57a   22,00  ±  0,58c  R   25,00  ±  0,41b  
Proteus  mirabilis 15,50  ±  0,71c   ±  0,50d  7,25  ±   R 18,13  ±  0,47b   24,25  ±  0,50a   21,25  ±  0,65a  
Serratia  liquefaciens 16,75  ±  0,65c   0,65e R 16,75  ±  0,86c   22,38  ±  0,25a 22,25  ±  0,96b  
Pseudomonas  luteola 12,25  ±  0,50d 18,88  ±  0,47c 21,25  ±  0,65b
R
R:  resistente,  el  valor  representa  la  media  ±  SD.
Diferentes  superíndices  (a–e)  en  la  misma  columna  corresponden  a  una  diferencia  significativa  (P  <  0,05).
(1)
(DD)  Método  de  difusión  en  disco.  Zona  de  inhibición  en  diámetro  alrededor  de  los  discos  impregnados  con  50  µL  de  nanoemulsión  a  base  de  AE  de  laurel  y  AE  de  laurel.  Él
Se  incluye  el  diámetro  (6  mm)  del  disco.
(2)
tetraciclina  (30  µg/mL);  (3)  estreptomicina  (10  µg/mL);  (4)  Neomicina  (5  µg/mL).

para  la  cepa  E.  faecalis ,  y  el  tamaño  de  su  halo  de  inhibición  oscila  entre  7,25   3.3.3.  Concentración  inhibitoria  mínima  (MIC)  y  concentración  bactericida  
y  15  mm.  Además,  el  mayor  efecto  inhibitorio  de  la  NE  se  observó  frente  a  V.   mínima  (MBC)
vulnificus,  con  un  halo  de  inhibición  de  15  ±  0,82  mm.  En  este  contexto,  la   Para  confirmar  los  datos  obtenidos  de  las  propiedades  antimicrobianas  del  
nanoemulsión  reveló  un  efecto  antimicrobiano  similar  contra  las  dos  cepas  de   LEO  puro  probado  y  su  nanoforma,  se  determinaron  MIC  y  MBC  contra  
S.  liquefaciens  y  P.  luteola,  con  una  zona  de  diámetro  de  7,25  mm.  La   patógenos  transmitidos  por  los  alimentos  y  bacterias  aisladas  del  deterioro  del  
nanoemulsión  basada  en  LEO  exhibió  un  fuerte  efecto  inhibidor  en  comparación   pescado  (Tabla  4).  Los  resultados  de  los  valores  de  MIC  para  NE  y  EO  contra  
con  el  antibiótico  de  control  de  estreptomicina  para  la  cepa  de  P.  mirabilis .   todas  las  bacterias  analizadas  variaron  de  6,25  mg/mL  a  >  25  mg/mL  y  de  1,56  
Todos  los  antibióticos  produjeron  una  zona  de  inhibición  significativamente  más   mg/mL  a  >  25  mg/mL,  respectivamente.  Como  se  muestra  en  la  Tabla  4,  los  
alta  (P  <  0,05)  hacia  todas  las  cepas  de  deterioro,  excepto  P.  mirabilis. valores  de  MBC  para  NE  y  EO  oscilaron  entre  12,5  mg/ml  y  >  25  mg/ml  y  entre  
Además,  hasta  donde  sabemos,  no  hay  estudios  publicados  que  hayan  evaluado   6,25  mg/ml  y  >  25  mg/ml,  respectivamente.  De  acuerdo  con  nuestros  hallazgos,  
la  actividad  de  inhibición  de  LEON  contra  estas  bacterias  aisladas  del  deterioro   la  actividad  antimicrobiana  de  NE  pudo  detectarse  contra  Pseudomonas  luteola,  
del  pescado.  En  general,  el  potencial  antimicrobiano  de  la  nanoemulsión  de  EO   Serratia  liquefaciens  y  Salmonella  paratyphi  A,  que  mostró  una  mayor  sensibilidad  
dependía  del  contenido  fitoquímico  del  EO  utilizado  en  la  nanoemulsión,  el  tipo   con  MIC  a  6,25  mg/mL.  La  nanoemulsión  también  presentó  una  actividad  
de  microorganismos.  Además,  la  formulación  de  la  emulsión,  el  tamaño  de  las   bacteriostática  moderada  contra  algunas  bacterias  patógenas  probadas  y  
gotas  y  la  viscosidad  son  determinantes  esenciales  del  rendimiento  de  las   aisladas  de  peces  de  K.  pneumoniae,  E.  faecalis,  P.  damselae  y  P.  mirabilis,  
nanopartículas;  lo  que  puede  explicar  el  menor  nivel  de  actividad  antibacteriana   con  un  valor  de  MIC  de  25  mg/mL.
del  LEON  formulado  en  este  estudio  en  comparación  con  el  LEO  puro  (Yazgan   Sin  embargo,  S.  aureus,  E.  faecalis  y  V.  vulnificus  fueron  más  resistentes  a  
¨
et  al.,  2019;  Ozogul   et  al.,  2020). LEON  con  un  valor  MIC  correspondiente  >  25  mg/mL.  La  actividad  antimicrobiana  
Por  otro  lado,  el  LEO  puro  muestra  actividad  antimicrobiana  contra  todas  las   de  S.  liquefaciens  y  P.  mirabilis  reveló  que  LEON  mejoró  significativamente  el  
cepas  de  deterioro  probadas,  con  diámetros  correspondientes  que  varían  entre   efecto  bacteriostático  de  los  compuestos  encapsulados  en  comparación  con  los  
6,19  ±  0,55  y  18,5  ±  0,41  mm.  Nuestros  hallazgos  demostraron  que  los  efectos   no  encapsulados.  Los  resultados  del  presente  estudio  indicaron  que  el  mayor  
inhibitorios  de  la  LEO  fueron  mayores  que  los  obtenidos  por  Ben  nadja  et  al.   efecto  bactericida  de  la  NE  se  observó  contra  Pseudomonas  luteola,  con  un  
(2013),  quienes  reportaron  un  valor  de  11,9  mm  para  Proteus  sp. valor  de  MBC  de  12,5  mg/mL,  mientras  que  esta  muestra  no  tuvo  gran  actividad  
Sin  embargo,  su  trabajo  demostró  un  mayor  diámetro  del  halo  de  inhibición  (23,6   bactericida  contra
mm)  frente  a  Pseudomonas  aeruginosa  en  comparación  con  el  obtenido  en  
nuestro  estudio  sobre  cepas  de  Pseudomonas  luteola .  Caputo  et  al.  (2017)  
Tabla  4  
afirmaron  que  LEO  exhibió  una  actividad  inhibitoria  contra  Pseudomonas  
Determinación  de  MIC  y  CBM  del  aceite  esencial  de  laurel  y  su  nanoemulsión  sobre  los  
aeruginosa  con  una  concentración  de  aceite  de  0,4  µL/mL.  Ouibrahim  et  al.  
microorganismos  ensayados.
(2013)  reportaron  que  LEO  presentó  mayores  actividades  antimicrobianas  para  
E.  faecalis  ATCC  29,212  y  Proteus  mirabilis,  con  diámetros  de  inhibición  de  12.5   Patógeno  transmitido  por  los   Laurel laurel  puro entre  80
alimentos  y  bacterias  aisladas   nanoemulsión aceite  esencial
y  16.25  mm,  respectivamente.  Los  mismos  autores  también  informaron  que  
del  deterioro  del  pescado
dicho  AE  tiene  un  efecto  de  inhibición  menor  contra  Serratia  marceseus  (16,5   MICRÓFONO CMB MICRÓFONO CMB MICRÓFONO CMB

mm)  en  comparación  con  nuestros  resultados  sobre  Serratia  liquefaciens  (16,75   (mg/ (mg/ (mg/ (mg/ (mg/ (mg/


mL) mL) mL) mL) mL) mL)
mm).  Este  aceite  ha  sido  el  más  aplicado  como  agente  antimicrobiano  en  
>25 >25 12.50 >25 >25 >25
pescados  y  mariscos.  Además,  estas  diferencias  en  los  hallazgos  en  la  actividad   Staphylococcus  
aureus  ATCC
antimicrobiana  de  EO  probado  podrían  atribuirse  a  las  propiedades  fitoquímicas,  
29,213
las  diferentes  bacterias  de  deterioro  probadas.  Además,  la  considerable  actividad   25 >25 25 >25 >25 >25
enterococo  faecalis
inhibidora  posiblemente  se  deba  al  efecto  sinérgico  de  los  principales  compuestos   ATCC  29,212
de  L.  nobilis,  como  el  1,8­cineol,  el  α­terpinil  acetato,  el  α­terpineol  y  el   Salmonella  paratyphi 6.25 25 3.13 12.50 >25 >25
A
terpineno­4­ol.
NCTC13
Los  hallazgos  del  presente  estudio  demostraron  que  los  efectos  de  inhibición   25 >25 12.50 >25 >25 >25
Klebsiella  pneumoniae
del  EO  puro  fueron  significativamente  (P  <  0,05)  más  débiles  en  comparación   ATCC  700,603
con  los  de  todos  los  antibióticos  utilizados,  excepto  P.  mirabilus.  Un  estudio   fotobacteria 25 >25 12.50 >25 >25 >25

anterior  reveló  actividades  antimicrobianas  significativas  con  todos  los  antibióticos   doncellas
enterococo  faecalis >25 >25 >25 >25 >25 >25
probados  contra  V.  vulnificus  (Yazgan  et  al.,  2019).  Los  resultados  también  
Vibrio  vulnificus >25 >25   >25   >25   >25   >25  
indicaron  que  los  antibióticos  de  tetraciclina,  estreptomicina  y  neomicina  como   Proteus  mirabilis 25 >25   ≥25   >25   >25   >25  
referencias  exhibieron  significativamente  (P  <  0,05)  actividades  antimicrobianas,   Serratia  liquefaciens 6.25   >25   25   25   >25   >25  
con  zonas  de  inhibición  correspondientes  de  16,75–29  mm;  0,0–24,25  mm  y   Pseudomonas  luteola 6.25 12,50 1,56 6,25 >25 >25

6,25–25  mm,  respectivamente. MIC:  concentración  inhibitoria  mínima;  valores  dados  en  mg/mL.
CBM:  concentración  bactericida  mínima;  valores  dados  en  mg/mL.

6
Machine Translated by Google

Y.  O¨zogul  et  al. Química  de  los  alimentos  368  (2022)  130831

las  otras  bacterias  y  los  valores  de  MBC  son  >  25  mg/mL.  No  hay  ninguna   4.  Conclusión
investigación  publicada  previamente  en  la  literatura  relacionada  con  la  actividad  
antimicrobiana  de  LEON  mediante  el  uso  de  los  ensayos  MIC  y  MBC.  En  general,   En  este  estudio  actual,  los  resultados  mostraron  que  las  propiedades  
la  aplicación  de  la  técnica  de  nanoadministración,  incluidas  las  nanoemulsiones  de   fisicoquímicas  de  la  nanoemulsión  de  EO  de  laurel  están  influenciadas  por  el  efecto  
aceite  en  agua,  podría  mejorar  las  actividades  antimicrobianas  de  los  compuestos   del  surfactante,  la  concentración  y  composición  de  LEO,  y  el  impacto  de  la  
bioactivos  hidrofóbicos.  Así,  esta  estrategia  podría  ensamblar  los  compuestos   emulsificación  ultrasónica  para  la  preparación  de  NE,  que  posteriormente  tienen  
activos  de  EO  en  gotas  de  tamaño  nanométrico,  con  una  mejora  en  el  área   consecuencias  significativas  en  su  actividad  antimicrobiana. .  Por  lo  tanto,  LEON  
superficial  por  unidad  de  masa  de  las  nanoemulsiones  (Gar  zoli  et  al.,  2020).  Sin   exhibió  actividad  antimicrobiana  contra  las  bacterias  patógenas  Gram­positivas  de  
embargo,  trabajos  previos  revelaron  que  el  efecto  de  las  nanoemulsiones  en  la   S.  aureus  y  E.  faecalis  en  comparación  con  LEO  puro  (P  <  0,05).
mejora  de  las  actividades  antimicrobianas  no  era  constante.  Entonces,  la  posible   Los  resultados  también  demostraron  que  la  nanoemulsión  basada  en  LEO  tiene  
explicación  de  eso  es  el  impacto  del  emulsionante  en  la  reducción  de  la  interacción   actividades  bacteriostáticas  y  bactericidas  contra  las  bacterias  patógenas  de  los  
de  los  aceites  esenciales  encapsulados  con  los  microorganismos,  lo  que  reduce  su   alimentos  de  S.  paratyphi  A  y  las  bacterias  del  deterioro  del  pescado  aisladas  de  P.  
penetración  en  las  células  microbianas  y,  posteriormente,  disminuye  su  actividad   luteola,  mientras  que  tiene  una  actividad  bacteriostática  sobre  S.  liquefaciens  como  
(Ziani  et  al.,  2011). cepas  del  deterioro  del  pescado . .  El  AE  puro  también  tiene  grandes  efectos  
Por  otro  lado,  el  LEO  puro  mostró  una  actividad  bacteriostática  más  efectiva   bacteriostáticos  contra  bacterias  patógenas  y  bacterias  aisladas  de  peces  de  S.  
contra  bacterias  patógenas  que  bacterias  aisladas  de  peces,  con  valores  de  MIC   aureus,  K.  pneumoniea,  S.  paratyphi  A,  P.  damselae  y  P.  luteola.  Además,  el  LEO  
que  oscilaron  entre  3,13  mg/mL  y  25  mg/mL.  S.  paratyphi  A  fue  más  sensible  al  LEO   puro  tiene  un  efecto  bactericida  sobre  S.  paratyphi  A  y  P.  luteola.  Además,  la  
puro  que  otras  cepas  de  patógenos  transmitidos  por  los  alimentos. nanoemulsión  basada  en  LEO  podría  tener  el  potencial  de  ser  explotada  como  un  
Sin  embargo,  el  microbio  más  sensible  entre  las  bacterias  de  deterioro  hacia  el  LEO   agente  conservante  antimicrobiano  de  alimentos  naturales  contra  los  patógenos  
se  detectó  con  Pseudomonas  luteola,  con  un  valor  de  MIC  de  1,56  mg/mL.  Entre  las   transmitidos  por  los  alimentos  y  las  bacterias  de  deterioro.  Para  determinar  el  
bacterias  aisladas  analizadas,  tanto  P.  damselae  como  P.  luteola  fueron  las  más   mecanismo  de  acción  de  LEO  en  su  forma  nano  como  compuestos  bioactivos  contra  
susceptibles  a  la  LEO  pura.  La  actividad  bacteriostática  de  LEO  contra  las  bacterias   varios  microbios,  se  necesitan  más  investigaciones  sobre  productos  alimenticios  y  pescado.
que  deterioran  el  pescado  varió  de  1,25  mg/mL  a  >  25  mg/mL  (Tabla  4).  Los  
resultados  de  este  estudio  demostraron  que  el  efecto  bactericida  contra  bacterias   Declaración  de  contribución  de  autoría  CRediT
aisladas  del  deterioro  del  pescado  de  P.  luteola  mostró  un  valor  de  MBC  de  6,25  mg/
¨
mL.  El  valor  de  MIC  para  el  LEO  contra  S.  aureus  fue  superior  al  informado  por   Yesim  Ozogul: Conceptualización,  Metodología,  Investigación,  Análisis  
Merghni  et  al.  (2016),  quienes  encontraron  un  valor  de  MIC  (31.25  mg/mL)  para  S.   formal.  Nariman  El  Abed:  Escritura  ­  borrador  original,  Escritura  ­  revisión  y  edición.  
¨
aureus  ATCC  6538.  Sin  embargo,  Caputo  et  al.  (2017)  encontraron  que  LEO  exhibió   Fatih  Ozogul:  Supervisión,  Redacción  ­  revisión  y  edición.
una  mayor  actividad  bacteriostática  contra  S.  aureus  DSM25693  y  P.  aeruginosa  
ATCC  50071,  con  un  valor  de  MIC  (0,4  mg/mL)  en  comparación  con  nuestros  datos  
sobre  S.  aureus  ATCC  29,213  y  P.  luteola.  Además,  se  informó  que  LEO  presentó   Declaración  de  interés  en  competencia
diferentes  actividades  antiestafilocócicas  con  valores  de  MIC  que  variaron  de  3,91  a  
62,50  mg/mL  frente  a  varias  cepas  de  Staphylococcus  (Merghni  et  al.,  2016).  Estos   Los  autores  declaran  que  no  tienen  intereses  financieros  en  competencia  
resultados  demostraron  que  la  variación  cualitativa  y  cuantitativa  entre  los   conocidos  ni  relaciones  personales  que  pudieran  haber  parecido  influir  en  el  trabajo  
fitoquímicos  de  LEO  de  diferentes  regiones  podría  influir  en  su  actividad   informado  en  este  documento.
antimicrobiana.  Además,  puede  explicarse  por  la  variabilidad  del  quimiotipo  y  las  
concentraciones  de  los  AE,  la  dosis  y  la  cepa  del  microorganismo  diana  (EL  ABED   Agradecimientos
et  al.,  2014).
Este  proyecto  fue  financiado  por  los  Proyectos  de  Investigación  Científica  de  la  
Generalmente,  es  difícil  relacionar  las  actividades  antimicrobianas  de  los  AE   Universidad  de  Cukurova.
con  un  compuesto  específico  debido  a  su  complejidad  y  variabilidad;  sin  embargo,  
algunos  trabajos  anteriores  reportaron  que  existe  una  relación  entre  la  composición   Referencias
química  de  los  componentes  más  abundantes  en  el  AE  y  la  actividad  antimicrobiana  
(EL  ABED  et  al.,  2014).  En  el  presente  trabajo,  LEO  estudió  y  demostró  que  el  1,8­ Almadiy,  AA,  Nenaah,  GE,  Al  Assiuty,  AB,  Moussa,  EA  y  Mira,  NM  (2016).
Composición  química  y  actividad  antibacteriana  de  aceites  esenciales  y  fracciones  principales  de  cuatro  
cineol  es  el  compuesto  principal.  Se  informó  que  el  1,8­cineol  era  responsable  de  la  
especies  de  Achillea  y  sus  nanoemulsiones  contra  bacterias  transmitidas  por  los  alimentos.  LWT  Food  
actividad  antimicrobiana  eficaz  de  los  aceites  esenciales.  Además,  este  compuesto   Science  and  Technology,  69,  529–537.  https://doi.org/10.1016/j.  lwt.2016.02.009.
exhibió  actividad  antibacteriana  contra  bacterias  patógenas  Gram­negativas  al  
Al­Adham,  ISI,  Khalil,  E.,  Al­Hmoud,  ND,  Kierans,  M.  y  Collier,  PJ  (2000).
provocar  la  ruptura  de  la  membrana  celular  (Ojeda­Sana  et  al.,  2013).
Las  microemulsiones  son  sistemas  activos  en  la  membrana,  antimicrobianos  y  autoconservantes.
Revista  de  Microbiología  Aplicada,  89(1),  32–39.  https://doi.org/10.1046/j.1365­2672.2000.01078.x .
Además,  se  informó  que  los  alcoholes  terpénicos  exhibieron  actividad  antibacteriana,  
Bennadja,  S.,  Tlili­Ait­Kaki,  Y.,  Djahoudi,  A.,  Hadef,  Y.  y  Chefrour,  A.  (2013).  Actividad  antibiótica  del  aceite  
particularmente  en  S.  aureus  (Kuhn  et  al.,  2019).  Como  el  α­terpineol  y  el  terpineno­4­
esencial  de  Laurel  (Laurus  nobilis  L.)  sobre  ocho  cepas  bacterianas.
ol  se  detectaron  en  LEO,  estas  sustancias  podrían  inducir  la  fuga  de  iones  K+   Revista  de  Ciencias  de  la  Vida,  8,  814–819.  https://doi.org/10.17265/1934­7391/  2013.08.005.
bacterianos ,  por  lo  tanto,  pueden  causar  daños  celulares.  Los  compuestos  
Caputo,  L.,  Nazzaro,  F.,  Souza,  L.,  Aliberti,  L.,  De  Martino,  L.,  Fratianni,  F.,  …  De  Feo,  V.
monoterpénicos  de  los  aceites  vegetales  tienen  una  actividad  antimicrobiana  debido  
(2017).  Laurus  nobilis:  Composición  del  aceite  esencial  y  sus  actividades  biológicas.
a  su  característica  lipofílica,  que  conduce  a  la  acumulación  y  ruptura  de  las   Moléculas,  22(6),  930.  https://doi.org/10.3390/molecules22060930.
membranas  celulares.  Así,  estos  compuestos  podrían  producir  fugas  de  elementos   Che  Marzuki,  NH,  Wahab,  RA  y  Abdul  Hamid,  M.  (2019).  Una  visión  general  de  la  nanoemulsión:  

celulares,  además,  modificación  de  fosfolípidos  y  ácidos  grasos  que  conducen  al   Conceptos  de  desarrollo  y  aplicaciones  cosmecéuticas.
Biotecnología  y  equipo  biotecnológico,  33(1),  779–797.  https://doi.org/10.1080/  13102818.2019.1620124.
agotamiento  energético,  con  ello,  a  las  alteraciones  en  la  síntesis  de  ADN  y  ARN,  y  
destrucción  de  la  translocación  de  proteínas  (Almadiy  et  al.,  2016). ). Cherrat,  L.,  Espina,  L.,  Bakkali,  M.,  García­Gonzalo,  D.,  Pag´an,  R.,  &  Laglaoui,  A.  (2014).
Composición  química  y  propiedades  antioxidantes  de  los  aceites  esenciales  de  Laurus  nobilis  L.  y  
Myrtus  communis  L.  de  Marruecos  y  evaluación  de  su  actividad  antimicrobiana  actuando  solos  o  en  
Los  sistemas  de  administración  basados  en  nanoemulsiones  de  aceites  
procesos  combinados  para  la  conservación  de  alimentos.  Revista  de  la  ciencia  de  la  alimentación  y  la  
terpénicos  o  aceites  esenciales  revelaron  una  alta  actividad  antimicrobiana  de  los   agricultura,  94(6),  1197–1204.  https://doi.org/10.1002/jsfa.6397 .
compuestos  bioactivos  encapsulados.  De  hecho,  los  aceites  terpénicos  en  materiales  
Chu,  Y.,  Gao,  CC,  Liu,  X.,  Zhang,  Ni,  Xu,  T.,  Feng,  X.,  …  Tang,  X.  (2020).  Mejora  de  la  calidad  de  
de  nanopartículas  podrían  adquirir  propiedades  innovadoras  y  biológicas,  como  
almacenamiento  de  fresas  mediante  recubrimientos  de  pululano  incorporados  con  nanoemulsión  de  
biodegradabilidad,  permeabilidad,  estabilidad  térmica,  solubilidad,  rigidez  y   aceite  esencial  de  canela.  LWT­Food  Science  and  Technology,  122,  109054.  https://doi.org/10.1016/
cristalinidad  (Almadiy  et  al.,  2016). j.lwt.2020.109054 .

7
Machine Translated by Google

Y.  O¨zogul  et  al. Química  de  los  alimentos  368  (2022)  130831

Donsi,  F.  y  Ferrari,  G.  (2016).  Nanoemulsiones  de  aceites  esenciales  como  agentes  antimicrobianos  en   sobre  las  bacterias  del  deterioro  del  pescado  y  los  patógenos  transmitidos  por  los  alimentos.  Food  
alimentos.  Revista  de  Biotecnología,  233,  106–120.  https://doi.org/10.1016/j.  jbiotec.2016.07.005. ¨ Bioscience,  36,  100635.  https://doi.org/10.1016/j.fbio.2020.100635.
¨
Ozogul,  Y.,  Kuley,  E.,  Ucar,  Y.  y  Ozogul,  F.  (2015).  
Impactos  antimicrobianos  de  los  aceites  esenciales  en  los  
El  Abed,  N.,  Kaabi,  B.,  Smaali,  MI,  Chabbouh,  M.,  Habibi,  K.,  Mejri,  M.,  …  Ben  Hadj  Ahmed,  S.  (2014).   patógenos  transmitidos  por  los  alimentos.  Patentes  recientes  sobre  alimentos,  nutrición  y  agricultura,  7,  53–
Composición  química,  actividades  antioxidantes  y  antimicrobianas  del  aceite  esencial  de  Thymus  capitata   61.
¨ ˙ ¨ ¨
con  su  efecto  conservante  contra  Listeria  monocytogenes  inoculado  en  carne  picada  de  res.  Artículo  de   Ozogul,  Y.,  Yuvka,  I.,  Ucar,  Y.,  Durmus,  M.,  Kosker,  ̈  AR,  Oz,  M.,  &  Ozogul,  F.  (2017).
medicina  alternativa  y  complementaria  basada  en  la  evidencia,  ID,  2014,  1–11.  https://doi.org/ Evaluación  de  los  efectos  de  la  nanoemulsión  a  base  de  aceites  esenciales  de  hierbas  (romero,  laurel,  
10.1155/2014/152487. tomillo  y  salvia)  sobre  la  calidad  sensorial,  química  y  microbiológica  de  filetes  de  trucha  arcoíris  
Farmacopea  Europea  6.0.  (2008).  Determinación  de  aceites  esenciales  en  medicamentos  a  base  de  hierbas, (Oncorhynchus  mykiss)  durante  el  almacenamiento  en  hielo.  LWT­Food  Science  and  Technology,  75,  677–
2.8.12,  2. 684.  https://doi.org/10.1016/j.lwt.2016.10.009.
Fidan,  H.,  Stefanova,  G.,  Kostova,  I.,  Stankov,  S.,  Damyanova,  S.,  Stoyanova,  A.  y Patrignani,  F.,  Siroli,  L.,  Braschi,  G.  y  Lanciotti,  R.  (2020).  Uso  combinado  de  nanoemulsiones  basadas  en  
Zheljazkov,  VD  (2019).  Composición  química  y  actividad  antimicrobiana  de  los  aceites  esenciales  de  Laurus   antimicrobianos  naturales  y  homogeneización  a  ultra  alta  presión  para  aumentar  la  seguridad  y  la  vida  
nobilis  L.  de  bulgaria.  Moléculas,  24,  804.  https://doi.org/10.3390/moleculas24040804 . útil  del  jugo  de  manzana.  Control  de  Alimentos,  111,  107051.  https://doi.  org/10.1016/j.foodcont.2019.107051.

Garzoli,  S.,  Petralito,  S.,  Ovidi,  E.,  Turchetti,  G.,  Laghezza  Masci,  V.,  Tiezzi,  A.,  … Pilar­Santamarina,  M.,  Roselló,  J.,  Gimenez,  S.,  &  Blazquez,  MA  (2016).  Comercial  Laurus  nobilis  L.  y  Syzygium  
Paolicelli,  P.  (2020).  Aceite  esencial  e  hidrolato  de  lavandula  x  intermedia :  Evaluación  de  la  composición   aromaticum  L.  Merr.  &  Perry  contra  hongos  fitopatógenos  poscosecha  en  arroz.  LWT­Food  Science  and  
química  y  actividad  antibacteriana  antes  y  después  de  la  formulación  en  nanoemulsión.  Cultivos  y  Productos   Technology,  65,  325–332.  https://doi.org/10.1016/j.lwt.2015.08.040.
Industriales,  145,  112068.  https://doi.org/10.1016/  j.indcrop.2019.112068.
Prakash,  A.,  Vadivel,  V.,  Rubini,  D.  y  Nithyanand,  P.  (2019).  Antibacteriano  y
Hajlaoui,  H.,  Mighri,  H.,  Noumi,  E.,  Snoussi,  M.,  Trabelsi,  N.,  Ksouri,  R.  y  Bakhrouf,  A. actividades  antibiofilm  de  nanoemulsiones  de  linalool  contra  Salmonella  Typhimurium.
(2010).  Composición  química  y  actividades  biológicas  del  aceite  esencial  tunecino  de  Cuminum   Biociencia  alimentaria,  28,  57–65.  https://doi.org/10.1016/j.fbio.2019.01.018.
Cyminum  L.:  Alta  eficacia  contra  Vibrio  spp.  presiones.  Química  y  toxicología  alimentaria,  48,  2186– Reis,  PMCL,  Nat´alia  Mezzomo,  N.,  Aguiar,  GPS,  Senna,  EMTL,  Hense,  H.,  &  Ferreira,  SRS  (2019).  Emulsión  
2192.  https://doi.org/10.1016/j.  fct.2010.05.044. asistida  por  ultrasonido  de  aceite  esencial  de  hojas  de  laurel  (Laurus  nobilis  L.)  encapsulado  por  SFEE.  
Revista  de  fluidos  supercríticos,  147,  284–292.  https://doi.org/10.1016/j.supflu.2018.11.018.
King,  T.,  Osmond­McLeod,  MJ  y  Duffy,  LL  (2018).  Nanotecnología  en  el  sector  alimentario  y  posibles  
aplicaciones  para  la  industria  avícola.  Trends  Food  Science  &  Technology,  72,  62–73.  https://doi.org/ Richa,  R.  y  Choudhury,  AR  (2020).  Exploración  de  polisacáridos  basados
10.1016/j.tifs.2017.11.015. nanoemulsiones  para  la  estabilización  y  atrapamiento  de  la  curcumina.  Internacional.  Revista  de  
Kuhn,  D.,  Ziem,  R.,  Scheibel,  T.,  Buhl,  B.,  Vettorello,  G.,  Pacheco,  LA,  …  Hoehne,  L. macromoléculas  biológicas,  156,  1287–1296.  https://doi.org/10.1016/j.  ijbiomac.2019.11.167.
(2019).  Actividad  antibiopelícula  del  aceite  esencial  de  Campomanesia  aurea  O.  Berg  frente  a  
microorganismos  causantes  de  enfermedades  transmitidas  por  alimentos.  LWT­Ciencia  y  tecnología   Shafiq,  S.,  Faiyaz,  S.,  Sushma,  T.,  Ahmad,  FJ,  Khar,  RK  y  Ali,  M.  (2007).  Diseño  y  desarrollo  de  una  formulación  
de  los  alimentos,  108,  247–248.  https://doi.org/10.1016/j.lwt.2019.03.079. de  nanoemulsión  de  ramipril  en  agua  oral:  evaluación  in  vitro  e  in  vivo .  Revista  de  Nanotecnología  
Matos,  SP,  Lucca,  LG  y  Koeste,  LS  (2019).  Aceites  esenciales  en  sistemas  nanoestructurados:  Desafíos  en   Biomédica,  3,  28–44.  https://doi.org/  10.1166/jbn.2007.008.
preparación  y  métodos  analíticos.  Talanta,  195,  204–214.  https://doi.org/10.1016/j.talanta.2018.11.029 .
Snuossi,  M.,  Trabelsi,  N.,  Ben  Taleb,  S.,  Dehmeni,  A.,  Flamini,  G.  y  De  Feo,  V.  (2016).
McClements,  DJ  (2011).  Nanoemulsiones  comestibles:  fabricación,  propiedades  y  desempeño  funcional.  Materia   Aceites  Esenciales  de  Laurus  nobilis,  Zingiber  officinale  y  Anethum  graveolens :  Composición,  actividad  
blanda,  7(6),  2297–2316.  https://doi.org/10.1039/C0SM00549E. antioxidante  y  antibacteriana  frente  a  bacterias  aisladas  de  pescados  y  mariscos.  Moléculas,  21,  1414.  
Mehani,  M.,  Goumni,  Z.,  Salhi,  A.,  Salhi,  N.,  Segni,  L.,  Terzi,  V.  y  Morcia,  C.  (2018). https://doi.org/10.3390/molecules21101414.
Laurus  nobilis  L.  y  el  estudio  de  su  actividad  biológica  in  vitro.  Fitoterapia,  17,  259–264.  https://doi.org/ Sundararajan,  B.,  Moola,  AK,  Vivek,  K.  y  Kumar,  BDR  (2018).  Formulación  de
10.3166/phyto­2018­0084. nanoemulsión  de  aceite  esencial  de  hojas  de  Ocimum  basilicum  L.  y  sus  actividades  antibacteriana,  
Mehmood,  T.,  Ahmad,  A.,  Ahmed,  N.  y  Ahmed,  Z.  (2017).  Optimización  del  aceite  de  oliva antioxidante  y  larvicida  (Culex  quinquefasciatus).  Patogénesis  microbiana,  125,  475–485.  https://doi.org/
Nanoemulsiones  basadas  en  O/W  preparadas  mediante  homogeneización  ultrasónica:  un  enfoque  de   10.1016/j.micpath.2018.10.017.
´
metodología  de  superficie  de  respuesta.  Química  de  los  alimentos,  229,  790–796.  https://doi.org/10.1016/ G.,  
Vilela,  J.,  Martins,  D.,  Monteiro­Silva,  F.,  Gonzalez­Aguilar,  Almeida,  JMMM,  &   Jos´e  De  
Cristina  
j.foodchem.2017.03.023 . Saraiva,  C.  (2016).  Efecto  antimicrobiano  de  los  aceites  esenciales  de  Laurus  nobilis  L.  y  Rosmarinus  
Merghni,  A.,  Marzouki,  H.,  Hentati,  H.,  Aouni,  M.  y  Mastouri,  M.  (2016).  Actividades  antibacterianas  y  antibiofilm   officinallis  L.  sobre  la  vida  de  anaquel  de  carne  picada  “Maronesa”  almacenada  bajo  diferentes  condiciones  
del  aceite  esencial  de  Laurus  nobilis  L.  contra  cepas  de  Staphylococcus  aureus  asociadas  con  infecciones   de  empaque.  Envasado  de  alimentos  y  vida  útil,  8,  71–80.  https://doi.org/10.1016/j.fpsl.2016.04.002.
orales.  Pathologie  Biologie,  64(1),  29–34.  https://doi.org/10.1016/j.patbio.2015.10.003.
Wang,  Y.,  Zhang,  L.­T.,  Feng,  Y.­X.,  Zhang,  D.,  Guo,  S.­S.,  Pang,  X.,  …  Du,  S.­S.  (2019).
Ojeda­Sana,  AM,  van  Baren,  CM,  Elechosa,  MA,  Ju´  arez,  MA,  &  Moreno,  S.  (2013). Evaluación  comparativa  de  la  composición  química  y  bioactividades  de  los  aceites  esenciales  de  cuatro  
Nuevos  conocimientos  sobre  las  actividades  antibacterianas  y  antioxidantes  de  los  aceites  esenciales  de   plantas  de  especias  (Lauraceae)  contra  insectos  de  productos  almacenados.  Cultivos  y  Productos  
romero  y  sus  principales  componentes.  Control  de  Alimentos,  31(1),  189–195.  https://doi.org/10.1016/ Industriales,  140,  111640.  https://doi.org/10.1016/j.indcrop.2019.111640.
j.foodcont.2012.09.022 . Yazgan,  H.,  Ozogul,  Y.  y  Kuley,  E.  (2019).  Influencia  antimicrobiana  del  aceite  esencial  de  limón  nanoemulsionado  
Ouibrahim,  A.,  Tlili­Ait­kaki,  Y.,  Bennadja,  S.,  Amrouni,  S.,  Djahoudi,  AG  y y  el  aceite  esencial  de  limón  puro  sobre  los  patógenos  transmitidos  por  los  alimentos  y  las  bacterias  que  
Djebar,  MR  (2013).  Evaluación  de  la  actividad  antibacteriana  de  Laurus  nobilis  L.,  Rosmarinus   deterioran  el  pescado.  Revista  internacional  de  microbiología  alimentaria,  306,  108266.  https://doi.org/
officinalis  L.  y  Ocimum  basilicum  L.  del  noreste  de  Argelia.  Revista  Africana  de  Investigación  en  Microbiología,   10.1016/j.ijfoodmicro.2019.108266 .
7(42),  4968–4973.  https://doi.org/10.5897/AJMR10.5897/AJMR2012.2390 . Zhang,  S.,  Zhang,  M.,  Fang,  Z.  y  Liu,  Y.  (2017).  Preparación  y  caracterización  de  nanoemulsiones  de  aceite  
¨ ¨ esencial  de  clavo  de  olor/canela.  LWT­Ciencia  y  tecnología  de  los  alimentos,  75,  316–322.  https://doi.org/
Ozogul,  Y.,  Durmus,  M.,  Ucar,  Y.,  Ozogul,  F.  y  Regensteın,  JM  (2016).  Estudio  comparativo  de  nanoemulsiones   10.1016/j.lwt.2016.08.046.
a  base  de  aceites  comerciales  (aceites  de  girasol,  canola,  maíz,  oliva,  soja  y  avellana):  efecto  sobre  la   Ziani,  K.,  Chang,  Y.,  McLandsborough,  L.  y  McClements,  DJ  (2011).  Influencia  de  la  carga  de  surfactante  en  
calidad  microbiana,  sensorial  y  química  de  la  lubina  de  cultivo  refrigerada.  Ciencia  innovadora  de  los   la  eficacia  antimicrobiana  de  las  nanoemulsiones  de  aceite  de  tomillo  estabilizadas  con  surfactante.  
alimentos  y  tecnologías  emergentes,  33,  422–430.  https://doi.org/10.1016/j.ifset.2015.12.018. Revista  de  agricultura  y  química  alimentaria,  59(11),  6247–6255.  https://doi.org/10.1021/jf200450m.

˘Akyol,  I.,  Durmus,  M.,  Ucar,  Y.,  Regenstein,  JM  y  Kos¨¸ker,  A.  Rıza.  (2020).  
Ozogul,  Y.,  Kuley  Boga,  E.,  
Actividad  antimicrobiana  de  nanoemulsiones  de  aceite  esencial  de  tomillo

También podría gustarte