14

CAPÍTULO
División celular
EN BUSCA DE LA INMORTALIDAD

Cada dos meses todas las células de la superficie del cuer-

po se eliminan y se reemplazan por otras. El revestimiento
epitelial del intestino delgado se renueva a un ritmo aún más
rápido, sustituyéndose por completo en el lapso de tres a cin-
co días. Al igual que la mayoría de las células de nuestro
cuerpo, estas células epiteliales son terminales o posmitóti-
cas, lo que significa que ya no se dividirán para dar lugar a
nuevas células. A medida que envejecen y se deterioran por
el desgaste se reemplazan continuamente a través del traba-
jo de las células madre (como se describe en el capítulo 1).
Por el contrario, otras células en el cuerpo son demasiado
longevas y no parecen ser reemplazadas en absoluto, inclui-
das algunas poblaciones neuronales.
Al parecer algunos organismos no poseen la capacidad
de regenerar nuevas células, y nacen con todas las células
que siempre tendrán. Esto incluye el organismo modelo
Caenorhabditis elegans, donde se ha mapeado el papel y la
ubicación de cada una de las 959 células del gusano adulto.
Por el contrario, otros organismos parecen tener células
madre muy activas, dando lugar a una capacidad impresio-
nante para regenerar extremidades, o incluso secciones más
grandes de su cuerpo. Los tritones, por ejemplo, son bien
conocidos por su capacidad para regenerar miembros com-
pletos. Los grupos de células madre se activan en el sitio de
(continúa) Las células divisorias en un planario adulto se resaltan en na-
ranja/rojo; los núcleos celulares son de color azul. Las células
en división se derivan todas de una única célula madre pluripo-
tente. Estas poblaciones activas de células madre proporcionan
Planaria con notables capacidades regenerativas.
Fuente: D Wagner, et al. Science 2011 mayo 13;(332). Portada.

BOSQUEJO DEL CAPÍTULO

14.1 El ciclo celular
14.2 Regulación del ciclo celular
14.3 VÍAS EXPERIMENTALES:
El descubrimiento y caracteriza-
ción del MPF
14.4 Control del ciclo celular: el pa-
pel de las proteínas cinasas
14.5 Control del ciclo celular: puntos
de control, inhibidores de la
Cdk y respuestas celulares
14.6 Descripción general de la fase 14.13 Las etapas de la meiosis
M: mitosis y citocinesis 14.14 PERSPECTIVA HUMANA:
14.7 Profase La no disyunción meiótica y sus
14.8 Prometafase consecuencias
14.9 Metafase 14.15 Recombinación genética duran-
14.10 Anafase te la meiosis
14.11 Telofase y citocinesis
14.12 Descripción general de la meio-
sis
 540 la herida y se someten a una serie de divisiones y diferencia- viejos y la formación de tejido nuevo para reformar lo que se
ciones para dar lugar a tejido nuevo como piel, músculo y va- ha perdido. Se cree que el blastema “sabe” qué construir ba-
sos sanguíneos. sado en un complejo sistema de señales e interacciones, que
Tal vez la habilidad regenerativa más notable pertenece a en la actualidad no se comprende bien.
CAPÍTULO 14 • División celular

los pequeños platelmintos del género Planaria. Como se ha Al igual que las células madre, las cancerosas también son
demostrado en numerosos laboratorios de enseñanza de todo conocidas por su capacidad de sufrir de manera acelerada nu-
el mundo, un planario se puede cortar en rodajas y dividir en merosas divisiones, lo cual trae consigo consecuencias nefas-
pequeños cubos, cada uno de los cuales eventualmente for- tas. Comprender los mecanismos de división celular, y cómo
mará un gusano completo. La investigación ha demostrado se regula el ciclo celular, es clave para aprovechar potencial-
que una masa de células madre, llamada blastema, migra a los mente el poder de la terapéutica regenerativa, así como para
sitios de la lesión y coordina la destrucción de los tejidos más mantener el cáncer bajo control.

este capítulo. La mitosis conduce a la producción de células que

14.1 El ciclo celular son genéticamente idénticas a las de su antecesora, mientras que
la meiosis conduce a la producción de células con la mitad del
El proceso por el cual las células nuevas surgen de otras células
contenido genético de la célula madre. La mitosis sirve como base
vivas se llama división celular. Para un organismo multicelular
para producir nuevas células, la meiosis como base para producir
como un ser humano o el roble, incontables divisiones de un ci-
nuevos organismos que se reproducen sexualmente. Juntos, estos
goto unicelular producen un organismo de asombrosa compleji-
dos tipos de división celular forman los eslabones de la cadena
dad y organización celular. La división celular no se detiene con
entre los padres y sus descendientes, y en un sentido más amplio,
la formación del organismo maduro, sino que continúa en ciertos
entre las especies vivas y las formas de vida eucarióticas más an-
tejidos durante toda la vida. Millones de células que residen en la
tiguas presentes en la Tierra.
médula de sus huesos o en el revestimiento de su tracto intestinal
se están dividiendo en este momento. Esta enorme producción
Fases del ciclo celular
de células es necesaria para reemplazar las células que han enve-
jecido o muerto. En una población de células en división, ya sea dentro del cuerpo
Aunque la división celular ocurre en todos los organismos, o en una placa de cultivo, cada célula pasa por una serie de etapas
tiene lugar de manera muy diferente en procariotas y eucariotas. definidas, que constituyen el ciclo celular (FIGURA 14-1). Este se
Restringiremos la discusión a la versión eucariótica. Dos tipos puede dividir en dos fases principales, basadas en actividades ce-
distintos de división de células eucarióticas serán discutidos en lulares fácilmente visibles con un microscopio óptico: fase M e

Interfase

G1: S:
la célula crece y duplicación de
lleva a cabo un DNA y duplicación
metabolismo normal; de cromosomas
organelos duplicados

s G :
oossi si la célula crece
2
M iitt
y se prepara para
la mitosis
s
esi
cin
Cito e
lo fas
Te
afase
e
as

e
as
af
An

taf

et

Profase
Me

Prom

FIGURA 14-1 Una visión general del ciclo de células eucarióticas. Este diagrama del
ciclo celular indica las etapas a través de las cuales una célula pasa de una división a
la siguiente. El ciclo celular se divide en dos fases principales: fase M e interfase. La
fase M incluye los eventos sucesivos de mitosis y citocinesis. La interfase se divide en
Mi las fases G1, S y G2, siendo la fase S equivalente al periodo de síntesis de DNA. La di-
((MF tosis visión de la interfase en tres fases separadas, basadas en el momento de la síntesis
aps
heaM
se) ) del DNA, fue propuesta por primera vez en 1953 por Alma Howard y Stephen Pelc del
Hammersmith Hospital, Londres, sobre la base de sus experimentos con células de
meristemas vegetales.
interfase. La fase M incluye 1) el proceso de mitosis, durante el
cual los cromosomas duplicados se separan en dos núcleos (cario-
cinesis) y 2) la citocinesis, durante la cual la célula completa se
divide en dos células hijas. La interfase, el periodo entre las di-
visiones celulares, es un momento en que la célula crece y se in-
volucra en diversas actividades metabólicas. Mientras que la fase
M por lo general dura alrededor de una hora, en los mamíferos la
interfase puede extenderse durante días, semanas o más, en de-
pendencia del tipo de célula y las condiciones.
Aunque la fase M es el periodo en el que el contenido de una
célula se divide realmente, se producen numerosas preparaciones
para una próxima mitosis durante la interfase, incluida la replica-
ción del DNA de la célula. Uno podría suponer que una célula se
involucra en la replicación durante la interfase. Sin embargo, los
estudios a principios de la década de 1950 sobre los cultivos asin-
crónicos (es decir, los cultivos cuyas células se distribuyen al azar
a lo largo del ciclo celular) mostraron que ese no es el caso. Como
se describe en el capítulo 13, la replicación del DNA se puede
3
controlar mediante la incorporación de [ H]timidina en el DNA
3
recién sintetizado. Si se administra [ H]timidina a un cultivo de
células durante un periodo corto (p. ej., 30 minutos) y se fija una
muestra de la población celular, se seca en un portaobjetos y se
examina mediante autorradiografía, se encuentra que solo una
fracción de las células tiene núcleos radiactivos. Entre las células
que se dedicaron a la mitosis en el momento de la fijación (como
lo demuestran sus cromosomas compactados), no se encontró que
alguna tuviera un núcleo marcado radiactivamente. Estas células
mitóticas tienen cromosomas no marcados porque no participa-
ron en la replicación del DNA durante el periodo de marcado.
Si se permite que el marcaje continúe durante una o dos horas
antes de que se muestreen las células, todavía no hay células con
cromosomas mitóticos marcados (FIGURA 14-2). Podemos con-
cluir a partir de estos resultados que existe un tiempo definido
entre el final de la síntesis del DNA y el comienzo de la fase M.
Este periodo se denomina G2 (por segundo gap). La duración del
G2 se revela cuando uno continúa tomando muestras de células
del cultivo hasta que se observan cromosomas mitóticos marca-
dos. Las primeras células cuyos cromosomas mitóticos están mar-
cados deben haber estado en las últimas etapas de la síntesis de
3
DNA al comienzo de la incubación con [ H]timidina. El tiempo
transcurrido entre el inicio del periodo de marcado y la aparición
de células con figuras mitóticas rotuladas corresponde a la dura-
ción del G2.
100
Porcentaje de mitosis marcadas
80
60
40
20
5 10 15 20
Horas después de la adición de
FIGURA 14-2 Resultados experimentales que demuestran que la replica-
ción ocurre durante un periodo definido del ciclo celular. Células HeLa
se cultivaron durante 30 minutos en un medio que contenía [3H]timidina y
luego se incubaron (rastrearon) varias veces en un medio sin marcar antes
de fijarse y prepararse para la autorradiografía. Cada placa de cultivo se
analizó en busca de células que estaban en mitosis en el momento en que
se fijaron, y el porcentaje de aquellas células mitóticas cuyos cromosomas
se marcaron se graficó como se muestra.
Fuente: Tomada de un estudio de R. Baserga y F. Wiebel.
La replicación del DNA ocurre durante el periodo del ciclo 541
celular denominado fase S. La fase S es también el periodo en
que la célula sintetiza las histonas adicionales, que se necesitarán
a medida que la célula duplica el número de nucleosomas en sus
14.1 • El ciclo celular
cromosomas (véase figura 13-23). La longitud de la fase S puede
determinarse directamente. En un cultivo asincrónico, el porcen-
taje de células involucradas en una actividad particular es una
medida aproximada del porcentaje de tiempo que esta actividad
ocupa en las vidas de las células. Por tanto, si conocemos la dura-
ción de todo el ciclo celular, la longitud de la fase S se puede
calcular directamente a partir del porcentaje de las células cuyos
núcleos se marcan radiactivamente durante un pulso breve con
3
[ H]timidina. De forma similar, la longitud de la fase M se puede
calcular a partir del porcentaje de células en la población que se
considera participan en la mitosis o la citocinesis. Cuando se su-
man los periodos de G2 + S + M, es evidente que hay un lapso
adicional en el ciclo de la célula aún por contabilizar. Esta otra
fase, denominada G1 (por primer gap), es el periodo posterior a
la mitosis que precede la síntesis del DNA.
Ciclos celulares in vivo
Una de las propiedades que distingue varios tipos de células den-
tro de una planta o animal multicelular es su capacidad de crecer
y dividirse. Podemos reconocer tres amplias categorías de células:
1. Células como las neuronas, las células musculares o los gló-
bulos rojos, que son altamente especializadas y carecen de la
capacidad de dividirse. Una vez que estas células se han dife-
renciado, permanecen en ese estado hasta que mueren.
2. Células que normalmente no se dividen, pero que pueden in-
ducirse a comenzar la síntesis del DNA y dividirse cuando se
les administra un estímulo apropiado. En este grupo se inclu-
yen las células hepáticas, que pueden ser inducidas a la proli-
feración mediante la extirpación quirúrgica de parte del híga-
do; y los linfocitos, mediante interacción con un antígeno
apropiado.
3. Células que normalmente poseen un nivel relativamente alto
de actividad mitótica. En esta categoría se incluyen las células
madre de diversos tejidos adultos, como las células madre he-
matopoyéticas que producen glóbulos rojos y blancos (figura
17-6), y las células madre en la base de numerosos epitelios
que recubren las cavidades corporales y la superficie del cuer-
po (figura 7-1). Las células relativamente no especializadas de
los meristemas apicales, localizados cerca de las puntas de las
raíces y los tallos de las plantas, también exhiben una división
celular rápida y continua. Las células madre tienen una pro-
piedad importante que no comparten la mayoría de las célu-
las; son capaces de dividirse asimétricamente. Una división
celular asimétrica es aquella en la que las dos células hijas
tienen diferentes tamaños, componentes o destinos. La divi-
sión asimétrica de una célula madre produce una célula hija
que sigue siendo una célula madre no comprometida como su
progenitora, y otra célula hija que se ha convertido en una
célula diferenciada de ese tejido. En otras palabras, las divisio-
nes asimétricas permiten que las células madre participen
tanto en la autorrenovación como en la formación de células
25 30
diferenciadas de tejidos. Algunos tipos de células que no son
madres también pueden participar en divisiones celulares asi-
3H-timidina
métricas por la formación de ovocitos y cuerpos polares, co-
mo se ilustra en la figura 14-41b).
Los ciclos celulares pueden variar desde intervalos tan cortos
de 30 minutos en un embrión de rana en división, cuyos ciclos
celulares carecen tanto de fases G1 y G2, hasta varios meses en
tejidos de crecimiento lento como el hígado de los mamíferos. Se
dice que muchas células en el cuerpo están inactivas, lo que signi-
fica que están en un estado que no las llevará a una próxima di-
visión celular, aunque conservan la capacidad de dividirse si las
 542 condiciones cambian. Con algunas excepciones notables, las cé-
lulas que han dejado de dividirse se detienen en una etapa ante-
rior al inicio de la síntesis del DNA. Las células inactivas a menu-
do se describen como que se encuentran en el estado G0, para
CAPÍTULO 14 • División celular
diferenciarlas de las típicas células de fase G1 que pueden entrar
pronto en la fase S. Una célula debe recibir una señal promotora
del crecimiento para pasar de G0 a la fase G1, y así reingresar al
ciclo celular.
REPASO
1. ¿Qué es el ciclo celular? ¿Cuáles son sus etapas? ¿Cómo varía
el ciclo celular entre diferentes tipos de células?
2. Describa cómo la [3H]timidina y la autorradiografía se pueden
usar para determinar la duración de los diversos periodos del
ciclo celular.
14.2 Regulación del ciclo celular
El estudio del ciclo celular no solo es importante en la biología
celular básica, sino que también tiene enormes implicaciones
prácticas en la lucha contra el cáncer, una enfermedad que resul-
ta de una falla en la capacidad de una célula para regular su pro-
pia división. En 1970 una serie de experimentos de fusión celular
llevados a cabo por Potu Rao y Robert Johnson, de la Universidad
de Colorado, ayudaron a abrir la puerta a la comprensión de có-
mo se regula el ciclo celular.
Rao y Johnson querían saber si el citoplasma de las células
contiene factores reguladores que afectan las actividades del ciclo
celular. Ellos abordaron la cuestión fusionando células de mamífe-
ros que se encontraban en diferentes etapas del ciclo celular. En
un experimento fusionaron células mitóticas con células en otras
etapas del ciclo. La célula mitótica siempre indujo la compactación
de la cromatina en el núcleo de la célula no mitótica (FIGURA 14-3).
Si se fusionaban una fase G1 y una fase M, la cromatina del núcleo
de la fase G1 se sometía a una compactación cromosómica prematura
para formar un conjunto de cromosomas alargados (figura 14-3a).
Cromosomas
mitóticos
Cromosomas
G1
Cromosomas
mitóticos
a) b)
FIGURA 14-3 Demostración experimental de que las células contienen factores que estimulan la entrada a la mitosis. Las fotografías muestran los re-
sultados de la fusión de una célula HeLa de fase M con una célula PtK2 de rata canguro que había estado en a) fase G1, b) fase S o c) fase G2 en el mo-
mento de la fusión celular. Como se describe en el texto, la cromatina de las células PtK2 de fase G1 y fase G2 sufre una compactación prematura, mientras
que en la célula de fase S se pulveriza. Las cromátidas alargadas de la célula de fase G2 en c) se duplican en comparación con las de la célula G1 en a).
Fuente: De Karl Sperling y Potu N. Rao. Humangenetik 1974;23:237. Con permiso de Springer Science + Business Media.
Si se fusionaban una fase G2 y una fase M, los cromosomas G2
también se sometían a compactación cromosómica prematura, pe-
ro a diferencia de los núcleos G1, los cromosomas G2 compactados
se duplicaron visiblemente, lo que refleja el hecho de que la repli-
cación ya se había producido (figura 14-3c). Si una célula mitótica
se fusionaba con una célula de fase S, la cromatina en fase S tam-
bién se compactaba (figura 14-3b). Sin embargo, la replicación del
DNA es bastante sensible al daño, por lo que la compactación en
el núcleo de la fase S condujo a la formación de fragmentos cro-
mosómicos “pulverizados” más que a los cromosomas compactos
intactos. Los resultados de estos experimentos sugirieron que el
citoplasma de una célula mitótica contenía factores difusibles que
podrían inducir mitosis en una célula no mitótica (es decir, en in-
terfase). Este hallazgo sugirió que la transición de G2 a M estaba
bajo control positivo; es decir, la transición fue inducida por la
presencia de algún agente estimulador.
Si bien los experimentos de fusión celular revelaron la existen-
cia de factores que regulaban el ciclo celular, no proporcionaron
información sobre las propiedades bioquímicas de estos factores.
Los conocimientos sobre la naturaleza de los agentes que promue-
ven la entrada de una célula en la mitosis (o meiosis) se obtuvieron
por primera vez en una serie de experimentos con ovocitos y em-
briones tempranos de ranas e invertebrados. Estos experimentos
se describen en “Vías experimentales” en la sección 14.3. Para re-
sumir, se demostró que la entrada de una célula en la fase M es
iniciada por una proteína llamada factor promotor de la maduración
(MPF, maturation-promoting factor). El MPF consta de dos subuni-
dades: 1) una subunidad con actividad de cinasa que transfiere
grupos de fosfato del ATP a residuos específicos de serina y treo-
nina de sustratos proteicos específicos y 2) una subunidad regula-
dora llamada ciclina. El término ciclina se acuñó porque la concen-
tración de esta proteína reguladora aumenta y disminuye en un
patrón predecible con cada ciclo celular (FIGURA 14-4). Cuando la
concentración de ciclina es baja, la cinasa carece de la subunidad
ciclina, y como resultado está inactiva. Cuando la concentración
de ciclina aumenta, la cinasa se activa, lo que hace que la célula
entre en la fase M. Estos resultados sugieren que 1) la progresión
de las células hacia la mitosis depende de una enzima cuya única
Cromosomas
mitóticos
Fragmentos de
cromosomas
pulverizados
Cromosomas G2
c)
 Mitosis Mitosis Mitosis
Interfase Interfase Interfase
Actividad
MPF
Ciclina
actividad es fosforilar otras proteínas, y 2) la actividad de esta en-
zima está controlada por una subunidad cuya concentración varía
desde una etapa del ciclo celular a otro.
14.3  VÍAS EXPERIMENTALES
El descubrimiento y la caracterización del MPF
Cuando un ovocito anfibio se acerca al final de la ovogénesis,
el núcleo grande (llamado vesícula germinal) se mueve hacia
la periferia de la célula. En pasos posteriores la envoltura nu-
clear se desensambla, los cromosomas compactados se alinean
a lo largo de una placa de metafase cerca de un extremo (el
polo animal) del ovocito, y la célula experimenta la primera di-
visión meiótica para producir un gran ovocito secundario y un
pequeño cuerpo polar. Los procesos de descomposición de las
vesículas germinales y la primera división meiótica se conocen
como maduración, y se pueden inducir en ovocitos totalmente
desarrollados mediante el tratamiento con la hormona esteroi-
dea progesterona. El primer signo de maduración en el ovocito
anfibio tratado con hormona se observa de 13 a 18 horas tras el
tratamiento con progesterona, a medida que la vesícula germinal
se mueve cerca de la superficie del ovocito. Pronto le sigue la
rotura de la vesícula germinal, y el ovocito alcanza la metafase
de la segunda división meiótica alrededor de 36 horas después
del tratamiento con hormonas. La progesterona induce la madu-
ración solo si se aplica al medio externo que rodea al ovocito; si
la hormona se inyecta en el ovocito, este no muestra respuesta.1
Al parecer la hormona actúa en la superficie celular para desen-
FIGURA 1 Cambio de la actividad del factor promotor
de la maduración en el citoplasma de los ovocitos de
Rana pipiens durante el curso de la maduración y el
desarrollo temprano. Ordenada: el cociente de la fre-
cuencia de maduración inducida y el volumen de cito-
plasma inyectado. Cuanto mayor es el cociente, más
eficaz es el citoplasma. nL, nanolitros de citoplasma in-
yectado. Abscisa: edad de los donantes (horas des-
pués de la administración de progesterona).
Fuente: Por Masui y CL Markert. Journal Exp Zoology
1971;177:142. Reimpresa con permiso de John Wiley &
Sons Publishers, Inc.
FIGURA 14-4 Fluctuación de los niveles de ciclina y MPF durante el ciclo celular. Este 543
dibujo muestra los cambios cíclicos que ocurren durante el desarrollo temprano de la
rana, cuando las divisiones mitóticas ocurren rápida y sincrónicamente en todas las
células del embrión. El trazado superior muestra la alternancia entre periodos de mi-
tosis e interfase, el trazado medio muestra los cambios cíclicos en la actividad del
14.3 • Vías experimentales
MPF cinasa, y el trazado inferior muestra los cambios cíclicos en las concentraciones
de ciclinas que controlan la actividad relativa del MPF cinasa.
Fuente: De AW Murray y MW Kirschner. Science 1989;246:616; copyright 1989, AAAS.
Alto Science by Moses King, reproducida con permiso de la American Association for the
Advancement of Science en el formato de reutilización en un libro/libro de texto a tra-
vés del Centro de Autorización de Derechos de Autor.
Bajo
Alto
REPASO
1. ¿Cuál es el efecto de fusionar una célula de fase G1 con una
Bajo en M, y de fusionar una célula de fase G2 o S con una en M?
2. ¿Cómo varía la actividad del MPF durante todo el ciclo celular?
¿Cómo se correlaciona esto con la concentración de ciclinas?
¿Cómo afecta la concentración de ciclina la actividad del MPF?
cadenar cambios secundarios en el citoplasma del ovocito, que
conducen a la descomposición de las vesículas germinales y a
los otros cambios asociados con la maduración.
Para obtener más información sobre la naturaleza del cam-
bio citoplasmático responsable de desencadenar la maduración,
Yoshio Masui de la Universidad de Toronto, y Clement Markert de
la Universidad de Yale, comenzaron una serie de experimentos
en los que eliminaron el citoplasma de ovocitos de rana aisla-
dos en diversas etapas después del tratamiento con progestero-
na, e inyectaron 40-60 nanolitros (nL) del citoplasma del donante
en ovocitos inmaduros, completamente desarrollados, que no
habían sido tratados con la hormona.2 Descubrieron que el ci-
toplasma tomado de los ovocitos durante las primeras 12 horas
después del tratamiento con progesterona tuvo poco o ningún
efecto en los ovocitos receptores. Después de este periodo, sin
embargo, el citoplasma ganó la capacidad de inducir la madu-
ración en el ovocito receptor. El citoplasma del ovocito donante
tuvo efectividad máxima casi 20 horas después del tratamien-
to con progesterona, y su efectividad disminuyó a las 40 horas
(FIGURA 1). Sin embargo, el citoplasma tomado de los embriones
tempranos continuó mostrando cierta capacidad para inducir la
%/nL
2.5 17-24 ni por ovocito
29-33
35-44
2.0
50-51 huevo no
55-63 fertilizado
1.5 110-120
4-128
1.0 2-células células
0.5
0
10 20 30 40 50 60
HORAS
(continúa)
 544 maduración de los ovocitos. Masui y Markert se refirieron a la(s)
sustancia(s) citoplásmica(s) que inducen la maduración en los
ovocitos receptores como “factor promotor de la maduración”,
que devino en MPF.
Como se asumió que el MPF estaba involucrado específica-
CAPÍTULO 14 • División celular
mente en activar la maduración de ovocitos, al principio se prestó
relativamente poco interés a la sustancia o a su posible mecanis-
mo de acción. Más tarde, en 1978, William Wasserman y Dennis
Smith de la Universidad de Purdue publicaron un informe sobre
el comportamiento del MPF durante el desarrollo temprano de
anfibios.3 Se había asumido que la actividad del MPF presente en
los embriones tempranos era simplemente un residuo de activi-
dad que había estado presente en el ovocito. Pero Wasserman y
Smith descubrieron que la actividad del MPF experimenta fluctua-
ciones relevantes en la división de los huevos, que se correlacio-
nan con los cambios en el ciclo celular. Se encontró, por ejemplo,
que el citoplasma tomado de la división de huevos de rana dentro
de 30-60 minutos después de la fertilización contiene poca o nin-
guna actividad detectable del MPF, como se demostró mediante
la inyección en ovocitos inmaduros (FIGURA 2). Sin embargo, si
el citoplasma se toma de un óvulo 90 minutos después de la fer-
tilización, se puede mostrar otra vez la actividad del MPF. Esta al-
canza un pico 120 minutos después de la fertilización, y comienza
a disminuir de nuevo a los 150 minutos (figura 2). En el momento
en que los huevos experimentan su primera citocinesis, a los 180
minutos, no se detecta actividad en ellos. Luego, a medida que
se inicia el segundo ciclo de división, de nuevo reaparece la ac-
tividad del MPF, alcanzando un pico 225 minutos después de la
fertilización, hasta disminuir a un nivel muy bajo. Se encontraron
resultados similares en los huevos de Xenopus, excepto que las
fluctuaciones en la actividad del MPF ocurren más rápidamente
que en el de Rana, y se correlacionan con una mayor velocidad
de división en el embrión temprano del Xenopus. Por tanto, la
actividad del MPF desaparece y reaparece, en ambas especies
de anfibios, en una escala de tiempo que se correlaciona con la
duración del ciclo celular. En ambas especies el pico de actividad
del MPF corresponde al instante de la ruptura de la membrana
nuclear y la entrada de las células en la mitosis. Estos hallazgos
100
% RESPUESTA DEL DESTINATARIO
1o. 2o.
80
60
40
20
60 120 180 240
TIEMPO DE POSFERTILIZACIÓN (min)
FIGURA 2 Reciclaje de la actividad MPF en huevos fertilizados de R. pi-
piens. Ordenada: porcentaje de receptores de ovocitos sometidos a
descomposición de vesículas germinales en respuesta a 80 nanolitros
de citoplasma de huevos fertilizados. Abscisa: tiempo después de la fer-
tilización cuando se analizó el citoplasma del huevo Rana para determi-
nar la actividad del MPF. Las flechas indican el tiempo de las divisiones.
Fuente: WJ Wasserman y LD Smith. Journal Cell Biology 1978;78:R 15.
The Journal of Cell Biology por el Rockefeller Institute; American
Society for Cell Biology Copyright 1978. Reproducida con permiso de
Rockefeller University Press en el formato de republicación de un libro
de texto vía Copyright Clearance Center.  USA 1979;76:2801.
sugieren que el MPF hace más que controlar el tiempo de madu-
ración de los ovocitos, y de hecho puede desempeñar un papel
clave en la regulación del ciclo celular de las células en división.
En apariencia, alrededor de este mismo periodo, la actividad
del MPF no se limita a los huevos de anfibios y ovocitos, sino que
está presente en una amplia variedad de organismos. Se encontró,
por ejemplo, que las células de mamíferos que crecen en cultivo
también poseen actividad de MPF, como se demostró mediante
la capacidad de los extractos de células de mamífero para in-
ducir la descomposición de vesículas germinales cuando se
inyectan en ovocitos anfibios.4 La actividad del MPF de las célu-
las de mamífero fluctúa con el ciclo celular, como lo hace al dividir
los huevos de anfibios. Los extractos de células HeLa cultivadas,
preparadas a partir de células G1 tempranas, G1 tardías, o de fase
S, carecen de actividad MPF (FIGURA 3). El MPF aparece en el G2
temprano, tiene un aumento enérgico en el G2 tardío y alcanza el
pico en la mitosis.
Otro elemento de la maquinaria que regula el ciclo celular
se descubrió en estudios sobre embriones de erizo de mar. Los
huevos de ese animal han sido un tema recurrente en los estu-
dios de división celular, debido a que las divisiones mitóticas que
siguen a la fertilización ocurren con rapidez y están separadas
por intervalos altamente predecibles. Si los huevos de esa espe-
cie se fecundan en agua de mar que contiene un inhibidor de
la síntesis de proteínas, los huevos no se someten a la primera
división mitótica, deteniéndose en una etapa anterior a la com-
pactación cromosómica y a la ruptura de la envoltura nuclear.
De manera similar, cada una de las divisiones mitóticas subsi-
guientes también se pueden bloquear si se agrega un inhibidor
de la síntesis de proteínas al medio, en un instante muy anterior
a que ocurra la división normalmente. Este hallazgo ha sugerido
que una o más proteínas se deben sintetizar durante cada uno
de los primeros ciclos celulares si se produce la división mitó-
tica subsiguiente. Pero los primeros estudios sobre la división
de huevos de erizo de mar no revelaron la aparición de nuevas
especies de proteínas durante este periodo.
100
% GVBD por 228 ng de proteína
75
50
25
0
300 E L E M L
G1 S G2 Mitosis G1
Fase de ciclo celular
FIGURA 3 Actividad promotora de la maduración de extractos de
células HeLa durante diferentes etapas del ciclo celular. Debido a
que 228 ng de proteína mitótica indujeron la descomposición de ve-
sículas germinales (GVBD, germinal vesicle breakdown) en 100% de
los casos, el porcentaje de actividad para otras fases del ciclo celular
se normalizó a esa cantidad de proteína. E (early): temprano; M (mid):
medio y L (late): tardío.
Fuente: PS Sunkara, DA Wright y PN Rao. Proc Natl Acad Science
 En 1983 Tim Hunt y sus colegas del Laboratorio de Biología
Marina en Woods Hole informaron sobre varias proteínas que
se sintetizan en huevos de erizo de mar fertilizados, pero no en
huevos no fertilizados.5 Para estudiar estas proteínas aún más,
incubaron huevos fertilizados en agua de mar que contenía [35S]
metionina y retiraron muestras a intervalos de 10 minutos, co-
menzando a los 16 minutos después de la fertilización. Se prepa-
raron extractos de proteína no procesada a partir de las mues-
tras, se sometieron a electroforesis en gel de poliacrilamida, y
las proteínas marcadas se localizaron mediante autorradiografía.
Varias bandas prominentes fueron marcadas en geles a partir
de extractos de huevos fertilizados, que no eran evidentes en
extractos comparables hechos de huevos no fertilizados. Una de
las bandas que apareció fuertemente marcada en etapas tem-
pranas después de la fertilización desapareció prácticamente del
gel 85 minutos después de la fertilización, lo que sugiere que la
proteína se había degradado de manera selectiva. Esta misma
banda luego reapareció en geles de huevos muestreados en
tiempos posteriores, y desapareció una vez más en una muestra
tomada 127 minutos después de la fertilización. Las fluctuaciones
en la cantidad de esta proteína se representan gráficamente en
la FIGURA 4 (banda de proteína A) junto con el índice de divi-
sión, que indica el transcurso del tiempo de las dos primeras
divisiones celulares. La degradación de la proteína ocurre casi al
mismo tiempo que las células transitan por la primera y segunda
divisiones. Se encontró una proteína similar en los huevos de la
almeja, otro invertebrado cuyos huevos han sido ampliamente
estudiados. Hunt y colegas nombraron a la proteína “ciclina”, y
notaron el paralelo sorprendente en el comportamiento de las
fluctuaciones en los niveles de ciclina en su investigación con
la actividad del MPF en los estudios anteriores. Estudios poste-
riores mostraron que había dos ciclinas diferentes –A y B– que
se degradan en diferentes momentos durante el ciclo celular. La
ciclina A se degrada durante un periodo de 5-6 minutos, que
comienza justo antes de la transición de metafase-anafase, y la
Intensidad de las bandas A (
75
B
Índice de división
50
A Progesterona
25
)yB(
)
0 1 2 horas
FIGURA 4 Correlación del nivel de ciclina con el ciclo de división celu-
lar. Se fertilizó una suspensión de huevos y, después de 6 minutos, se
añadió [35S]metionina. Se tomaron muestras para el análisis mediante
electroforesis en gel a intervalos de 10 minutos, comenzando 16 minu-
tos después de la fertilización. La autorradiografía del gel electroforéti-
co se escaneó para determinar la densidad de la marca, y los datos se
representaron gráficamente como se muestra. La proteína A, que varía
de acuerdo con el ciclo celular y se llama ciclina, se muestra como
círculos sólidos. La proteína B (que no debe confundirse con ciclina B),
que no muestra fluctuación del ciclo celular, se traza como triángulos
sólidos. El porcentaje de células que experimentan división en un perio-
do dado se da como el índice de división (cuadrados abiertos).
Fuente: T Evans, et al. Cell 1983;33:391. Cell by Cell Press. Reproducida
con permiso de Cell Press en el formato de reutilización en un libro/li-
bro de texto a través del Copyright Clearance Center.
ciclina B se degrada unos minutos después de esta transición. 545
Estas investigaciones proporcionaron la primera indicación de la
importancia de la proteólisis controlada (p. 578) en la regulación
de una actividad celular importante.
El primer vínculo claro entre la ciclina y el MPF fue demos-
14.3 • Vías experimentales
trado por Joan Ruderman y sus colegas en el Laboratorio de
Biología Marina de Woods Hole.6 En estos estudios un mRNA
que codifica la ciclina A se transcribió in vitro, a partir de un
fragmento de DNA clonado que contenía la secuencia de co-
dificación de la ciclina A completa. La identidad de este mRNA
se verificó traduciéndolo in vitro y descubriendo que codificaba
auténtica ciclina A de almeja. Cuando se inyectó el mRNA de
ciclina sintética en ovocitos de Xenopus, las células sufrieron la
descomposición de las vesículas germinales y la compactación
cromosómica, en un lapso no muy diferente al inducido por el
tratamiento con progesterona (FIGURA 5). Estos resultados su-
gieren que el aumento de la ciclina A, que se produce durante la
meiosis y la mitosis, tiene un papel directo en la promoción de
la entrada en la fase M. La cantidad de ciclina A cae rápidamente
y se debe resintetizar antes de la próxima división o las células
no pueden volver a entrar en la fase M.
Pero, ¿cuál es la relación entre las ciclinas y el MPF? Una de
las dificultades para responder esta pregunta ha sido que se han
tomado como objeto de estudio organismos diversos. El MPF
se había investigado principalmente en anfibios, y las ciclinas en
erizos de mar y almejas. La evidencia indica que los ovocitos de
rana contienen un grupo de moléculas preMPF inactivas, que se
convierten en MPF activas
​​ durante la meiosis I. La ciclina, por otro
lado, está ausente de los ovocitos de almeja, pero aparece poco
después de la fertilización. Ruderman consideró la posibilidad
de que la ciclina A sea un activador del MPF. Sobre este tema
volveremos más adelante.
Mientras tanto, otra línea de investigación se inició para
purificar y caracterizar la sustancia responsable de la actividad
MPF. En 1980 Michael Wu y John Gerhart de la Universidad de
100
80
60
GVBD (%)
40
25 ng RNA
5 ng RNA
20
2.5 ng RNA
5 10 15 20 25
Horas
FIGURA 5 Cinética de la activación de ovocitos de Xenopus por proges-
terona y mRNA de ciclina A. Los ovocitos grandes inmaduros se aislaron
a partir de fragmentos de ovarios y se incubaron con progesterona o se
microinyectaron con cantidades variables de mRNA de ciclina A. A las
3-4 horas después de la inyección los ovocitos obviamente dañados se
eliminaron (de 2-4 por grupo de partida de 20) y a los restantes (que re-
presentan el valor de 100%) se les permitió desarrollarse. La rotura de la
vesícula germinal (GVBD) y la activación de los ovocitos se mostraron
por la formación de una mancha blanca en la región del polo animal y se
confirmaron por disección de los ovocitos.
Fuente: De KI Swenson, KM Farrell y JV Ruderman. Cell 1986;47:865.
Cell por Cell Press. Reproducida con permiso de Cell Press en el formato
de reutilización en un libro/libro de texto a través de Copyright
Clearance Center.
(continúa)
 546 California, Berkeley, lograron la purificación del MPF unas 20-30
veces precipitando la proteína en sulfato de amonio, y sometien-
do el material redisuelto a cromatografía en columna. Además de
estimular la maduración de los ovocitos, las inyecciones del MPF
parcialmente purificadas estimularon la incorporación de 32P en
CAPÍTULO 14 • División celular
las proteínas del ovocito anfibio.7 Cuando las preparaciones del
MPF parcialmente purificadas se incubaron con [32P]ATP in vi-
tro, las proteínas presentes en la muestra se fosforilaron, lo que
sugiere que el MPF indujo la maduración al actuar como una
proteína cinasa.
El MPF se purificó en 1988 mediante una serie de seis pa-
sos cromatográficos sucesivos.8 La actividad del MPF en estas
preparaciones purificadas se asociaba en forma consistente con
dos polipéptidos, uno que tenía una masa molecular de 32 kDa
y el otro de 45 kDa. La preparación purificada del MPF poseía un
alto nivel de actividad de proteína cinasa, como se determinó por
la incorporación de la radiactividad del [32P] ATP en las proteínas.
Cuando la preparación purificada fue incubada en presencia de
[32P]ATP, el polipéptido de 45 kDa quedó marcado.
Hacia finales de la década de 1980 los esfuerzos para des-
cubrir el papel de las ciclinas y el MPF se habían comenzado a
fusionar con otra línea de investigación, que Paul Nurse y sus
colegas de la Universidad de Oxford estaban llevando a cabo so-
bre la fisión de levadura.9 Se había demostrado que la levadura
producía una proteína cinasa con un peso molecular de 34 kDa,
cuya actividad se requería para que estas células ingresaran a la
fase M (discutida en la sección 14.4). La proteína de levadura se
llamó p34cdc2 o simplemente cdc2. La primera evidencia de un
vínculo entre la cdc2 y el MPF se produjo como resultado de una
colaboración entre los grupos de investigación de levadura y an-
fibios.10, 11 Recordemos del estudio anterior que se descubrió que
el MPF contiene proteínas de 32 y 45 kDa. Se demostró que los
anticuerpos formados contra la cdc2 de la levadura de fermenta-
ción reaccionan específicamente con el componente de 32 kDa
del MPF, aislado de huevos de Xenopus. Estos hallazgos indican
que este componente del MPF es un homólogo de la levadura
cinasa de 34 kDa, y por tanto que la maquinaria que controla el
ciclo celular en levaduras y vertebrados contiene componentes
conservados evolutivamente.
Un estudio similar que utilizó anticuerpos contra la cdc2 de
levadura demostró que la proteína homóloga en vertebrados no
fluctúa durante el ciclo celular.12 Esto respalda la propuesta de
que la proteína cinasa de 32 kDa en células de vertebrados de-
pende de otra proteína. Se pronosticaba que el modulador sería
la ciclina, que aumenta de concentración durante cada ciclo celu-
lar y luego se destruye a medida que las células entran en anafa-
se. Esta propuesta fue verificada tras una serie de estudios en los
que el MPF se purificó de anfibios, almejas y estrellas de mar y se
analizó su composición polipeptídica.13-15 En todos estos casos se
demostró que el MPF activo presente en las células animales de
fase M es un complejo que consta de dos tipos de subunidades:
1) una subunidad de 32 kDa que contiene el sitio activo de proteí-
na cinasa y es homóloga a la proteína cinasa cdc2 de levadura,
y 2) una subunidad mayor (45 kDa) identificada como una ciclina,
cuya presencia se requiere para la actividad de la cinasa. Los es-
tudios descritos en estas “Vías experimentales” proporcionaron
14.4 Control del ciclo celular: el papel
de las proteínas cinasas
En las últimas dos décadas un gran número de laboratorios se
han centrado en las enzimas tipo MPF, llamadas cinasas depen-
dientes de ciclinas (Cdk, cyclin-dependent kinases). Se ha encon-
trado que las Cdk no solo están involucradas en la fase M, sino
que son las agentes clave que orquestan las actividades a lo largo
del ciclo celular. Las Cdk llevan a cabo esta función mediante la
fosforilación de una gran variedad de proteínas. Cada evento de
fosforilación ocurre en un punto apropiado durante el ciclo celu-
una visión uniforme de la regulación del ciclo celular en todos los
organismos eucarióticos. Además, establecen el escenario para
el análisis de los numerosos factores que controlan la actividad
del MPF (cdc2) en diversos puntos durante los ciclos de células
de levadura y mamíferos, que se han convertido en el foco de
atención en los últimos años. Muchos de los hallazgos más im-
portantes de estos estudios recientes se discuten en la primera
sección de este capítulo.
Referencias
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oocytes in the induction of maturation. Dev Biol 1971;25:233-
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the product of a Xenopus homolog of the fission yeast cell
cycle control gene cdc2 1. Cell 1988;54:433-439.
11. Dunphy WG, et al. The Xenopus cdc2 protein is a component
of MPF, a cytoplasmic regulator of mitosis. Cell 1988;54:423-
431.
12. Labbe JC, et al. Activation at M-phase of a protein kinase
encoded by a starfish homologue of the cell cycle control
gene cdc2. Nature 1988;335:251-254.
13. Labbe JC, et al. MPF from starfish oocytes at first meiotic meta-
phase is a heterodimer containing one molecule of cdc2 and
one molecule of cyclin B. EMBO J 1989;8:3053-3058.
14. Draetta G, et al. cdc2 protein kinase is complexed with both
cyclin A and B: Evidence for proteolytic inactivation of MPF.
Cell 1989;56:829-838.
15. Gautier J, et al. Cyclin is a component of maturation-promoting
factor from Xenopus. Cell 1990;60:487-494.
lar, estimulando o inhibiendo de ese modo un proceso celular
particular involucrado en la división celular. Las células de leva-
dura han sido particularmente útiles en estudios del ciclo celular,
debido en parte a la disponibilidad de mutantes sensibles a la
temperatura, cuyas proteínas anormales afectan a diversos proce-
sos del ciclo celular. Como se discutió en la página 516, los mu-
tantes sensibles a la temperatura se pueden cultivar de una ma-
nera relativamente normal a una temperatura inferior (permisiva),
y luego cambiarse a una temperatura más alta (restrictiva) para
estudiar el efecto del producto del gen mutante.
Los investigadores que estudian el control genético del ciclo
celular se han centrado en dos especies alejadas de levadura, la
levadura en gemación Saccharomyces cerevisiae, que se reproduce
mediante la formación de yemas en un extremo de la célula (véa-
se figura 1-18b), y la levadura con fisión Schizosaccharomyces pom-
be, que se reproduce alargándose y luego dividiéndose en dos
células de igual tamaño (véase figura 14-6). La base molecular de
la regulación del ciclo celular se ha conservado notablemente a lo
largo de la evolución de los eucariotas. Una vez que se ha identi-
ficado un gen implicado en el control del ciclo celular en una de
las dos especies de levadura se buscan homólogos, y por lo gene-
ral se encuentran en los genomas de eucariotas superiores, inclui-
dos los humanos. Mediante la combinación de análisis genéticos,
bioquímicos y de células vivas, los investigadores han adquirido
una comprensión integral de las principales actividades que per-
miten que una célula crezca y se reproduzca en un plato de culti-
vo de laboratorio. La investigación sobre el control genético del
ciclo celular en la levadura comenzó en la década de 1970 en dos
laboratorios, inicialmente el de Leland Hartwell en la Universidad
de Washington, trabajando en brotes de levadura, y con posterio-
ridad en el de Paul Nurse, en la Universidad de Oxford, trabajan-
do en levadura con fisión. Ambos laboratorios identificaron un
gen que, cuando muta, provoca que el crecimiento de las células
a temperatura elevada se detenga en ciertos puntos del ciclo celu-
lar. El producto de este gen, que se denominó cdc2 en la levadura
con fisión (y CDC28 en la levadura en gemación), al final se en-
contró que era homólogo a la subunidad catalítica del MPF; en
otras palabras, era una cinasa dependiente de ciclina. La investi-
gación posterior en levaduras, así como en muchas células de
diferentes vertebrados, ha respaldado el concepto de que la pro-
gresión de una célula eucariota a lo largo de su ciclo celular está
regulada en distintas etapas. Una de las etapas principales de
regulación ocurre cerca del final de G1, y otra cerca del final de
G2. Estas etapas representan puntos en el ciclo celular en el que
una célula se compromete a comenzar un evento crucial, ya sea
iniciando la replicación o ingresando a la mitosis. de ciclina provoca el movimiento de un bucle flexible de la cade-
Comenzaremos nuestra discusión con la levadura con fisión,
que tiene el ciclo celular menos complejo. En esta especie la mis-
ma Cdk (cdc2) es responsable del paso a través de ambos puntos
de compromiso, aunque en asociación con diferentes ciclinas. En
la FIGURA 14-5 se muestra una representación simplificada de la
regulación del ciclo celular en la levadura con fisión. El primer
punto de transición, que se llama COMIENZO, se produce a fina-
Ciclinas Ciclinas
G1/S mitóticas
G1 S G2 M debemos analizar la actividad de otras tres enzimas reguladoras;
COMIENZO
Cinasa cdc2 Cinasa cdc2
Ciclinas
Ciclinas
G1/S mitóticas
FIGURA 14-5 Un modelo simplificado para la regulación del ciclo celular
en la fisión de levadura. El ciclo celular se controla principalmente en dos
puntos, el COMIENZO y la transición G2-M. El paso de una célula a través
de estas dos coyunturas críticas (puntas de flecha violeta) requiere de la
activación de la misma cdc2 cinasa por diferentes clases de ciclinas, ya sea
la G1/S o ciclinas mitóticas. Una tercera transición importante ocurre al final
de la mitosis, y se activa por una disminución rápida en la concentración de
ciclinas mitóticas. (Nota: cdc2 también se conoce como Cdk1).
les del G1. Una vez que una célula ha pasado el COMIENZO, se 547
compromete irrevocablemente a replicar su DNA, y en última ins-
1
tancia, a completar el ciclo celular. El paso a través del COMIENZO
requiere la activación de la cdc2 por una o más ciclinas G1/S, cuyos
14.4 • Control del ciclo celular: el papel de las proteínas cinasas
niveles aumentan durante la última G1 (figura 14-5).
El paso del G2 a la mitosis requiere la activación de la cdc2 por
un grupo diferente de ciclinas —las ciclinas mitóticas—. Las Cdk que
contienen una ciclina mitótica (p. ej., el MPF descrito en la sección
14.3) que fosforilan los sustratos requeridos para que la célula en-
tre en la mitosis. Entre los sustratos se incluyen las proteínas nece-
sarias para los cambios dinámicos en la organización de los cromo-
somas y el citoesqueleto, que caracterizan el cambio de la interfase
a la mitosis. Las células hacen un tercer compromiso durante la
mitad de la mitosis, que determina si completarán la división celu-
lar y volverán a ingresar al G1 del siguiente ciclo. La salida de la
mitosis y la entrada en el G1 depende de una disminución rápida
en la actividad de la Cdk, que resulta de una caída en la concentra-
ción de las ciclinas mitóticas (figura 14-5), un evento que se discu-
tirá en la sección 14.10 junto con otras actividades mitóticas.
Las cinasas dependientes de ciclina a menudo se describen
como el “conductor” que guía el ciclo celular a través de sus diver-
sas etapas. Las actividades de estas enzimas están reguladas por
una variedad de “frenos” y “aceleradores” que operan en combi-
nación entre sí.
Enlace de la ciclina
Como se indica en la figura 14-5, los niveles de ciclinas particula-
res aumentan con el tiempo. Cuando una ciclina alcanza una con-
centración suficiente en la célula, se une a la subunidad catalítica
de una Cdk, causando un cambio importante en la conformación
del sitio activo de la enzima. Las estructuras de cristalografía de
rayos X de diversos complejos de ciclina-Cdk indican que la unión
na de polipéptidos Cdk lejos de la apertura del sitio activo, per-
mitiendo que la Cdk fosforile sus sustratos proteicos.
Fosforilación/desfosforilación de la Cdk
Ya hemos visto en otros capítulos que muchos eventos que tienen
lugar en una célula están regulados por la adición y eliminación de
grupos fosfato en las proteínas. Esto mismo es cierto para los
eventos que conducen al inicio de la mitosis. Podemos ver en la
figura 14-5 que el nivel de ciclinas mitóticas se eleva a través de S
y G2. Las ciclinas mitóticas presentes en una célula de levadura
durante este periodo se unen a la Cdk para formar un complejo de
ciclina-Cdk, pero el complejo muestra poca evidencia de actividad
cinasa. Después, tarde en el G2, la ciclina-Cdk se activa y se inicia
la mitosis. Para comprender este cambio en la actividad de la Cdk,
dos cinasas y una fosfatasa. Veremos brevemente los eventos que
ocurren en la levadura con fisión (FIGURA 14-6a). El papel de estas
enzimas en el ciclo de levadura con fisión, que se ilustra en la fi-
gura 14-6b), se reveló a través de una combinación de análisis ge-
néticos y bioquímicos. En el paso 1, una de las cinasas llamada
CAK (cinasa activadora de Cdk) fosforila un residuo crítico de
treonina (Thr 161 de cdc2 en la figura 14.6b). La fosforilación
de este residuo es necesaria, pero no suficiente para que la Cdk
esté activa. Una segunda proteína cinasa mostrada en el paso 1,
llamada Wee1, fosforila un residuo de tirosina clave en la bolsa de
unión al ATP de la enzima (Tyr 15 de cdc2 en la figura 14-6b). Si
1
Las células de mamífero pasan por un punto comparable durante el G1,
denominado punto de restricción, momento en el que se comprometen con
la replicación del DNA y el completamiento de la mitosis finalmente. Antes
del punto de restricción, si las células de mamífero van a progresar en el ciclo
celular, requieren de la presencia de factores de crecimiento en su medio de
cultivo. Después de pasar el punto de restricción, estas mismas células con-
tinuarán durante el resto del ciclo celular sin estimulación externa.
 548 1 2 Mitosis 3
Interfase (G2) Interfase (G1)
Thr161– P Tyr15– P Thr161– P
CAK
CAPÍTULO 14 • División celular

Wee1 Cdc25
cdc2 cdc2 cdc2 cdc2
cinasa cinasa cinasa cinasa

Ciclina Ciclina Célula con fisión Ciclina Células con fisión de

Inactivo Inactivo
de levadura G2 levadura posmitóticas
Inactivo Activo Ciclina
b)
a) Degradación
1 Tipo natural
FIGURA 14-6 La progresión a través del ciclo celular de la levadura con fi-
G2 M
sión requiere de la fosforilación y desfosforilación de los residuos críticos de
cdc2. a) Micrografía electrónica de barrido coloreada de células de levadura
con fisión de tipo natural. b) Durante el G2, la cdc2 cinasa interactúa con una
2 wee1–
ciclina mitótica, pero permanece inactiva como resultado de la fosforilación de G2 M
un residuo clave de tirosina (Tyr 15 en la levadura con fisión) por la Wee1 (paso
1). Una cinasa separada, llamada CAK, transfiere un fosfato a otro residuo (Thr
161), que se requiere más adelante para la actividad cdc2 cinasa en el ciclo ce-
lular. Cuando la célula alcanza un tamaño crítico se activa una enzima llamada 3 cdc25–
Cdc25 fosfatasa, que elimina el fosfato inhibidor en el residuo Tyr 15. La activa-
ción resultante de la cdc2 cinasa conduce a la célula a la mitosis (paso 2). Al fi-
nal de la mitosis (paso 3), el grupo estimulante de fosfato se elimina de Thr 161
por otra fosfatasa. La ciclina libre se degrada luego, y la célula comienza otro
c)
ciclo. (La Cdk mitótica en células de mamífero está fosforilada y desfosforilada
de manera similar). c) La identificación de la Wee1 cinasa y la Cdc25 fosfatasa se realizó mediante el estudio de mutantes que se comportaron como se
muestra en esta figura. La línea 1 muestra las etapas G2 y M de una célula de tipo natural. La línea 2 muestra el efecto de un gen mutante wee1; la célula se
divide prematuramente, formando células pequeñas (wee). La línea 3 muestra el efecto de un gen cdc25 mutante; la célula no se divide, sino que continúa
creciendo. La flecha roja marca el momento en que la temperatura aumenta para inactivar la proteína mutante.
Fuente: a) Steve Gschmeissner/Photo Researchers, Inc. b) Según TR Coleman y WG Dunphy. Curr Opin Cell Biol 1994;76:877. Current Opinion in Cell
Biology de Elsevier Ltd. Reproducida con permiso de Elsevier Ltd en el formato de reutilización en un libro/libro de texto a través del Centro de autoriza-
ción de derechos de autor.

este residuo se fosforila, la enzima estará inactiva, con indepen-
dencia del estado de fosforilación de cualquier otro residuo. En
otras palabras, el efecto de la Wee1 anula el efecto de la CAK,
manteniendo la Cdk en un estado inactivo. La línea 2 de la figura
14-6c) muestra el fenotipo de las células con un gen mutante weel.
Estos mutantes no pueden mantener la Cdk en un estado inactivo,
y se dividen en una etapa temprana del ciclo celular produciendo
células más pequeñas, de ahí el nombre “wee” (pequeñitas). En las
células normales (tipo nativo), la Wee1 mantiene inactiva la Cdk
hasta el final del G2. Más tarde, al final del G2, el fosfato inhibidor
en Tyr 15 es eliminado por la tercera enzima, una fosfatasa llama-
da Cdc25 (paso 2, figura 14-6b). La eliminación de este fosfato
cambia las moléculas de ciclina-Cdk almacenadas al estado activo,
lo que le permite fosforilar los sustratos clave y conducir la célula
de levadura a la mitosis. La línea 3 de la figura 14-6c) muestra el
fenotipo de las células con un gen cdc25 mutante. Estos mutantes
no pueden eliminar el fosfato inhibidor de la Cdk, y no pueden
ingresar a la mitosis. El equilibrio entre las actividades de la Wee1
cinasa y la Cdc25 fosfatasa, que normalmente determina si la célu-
la permanecerá en el G2 o progresará hacia la mitosis, está regula-
do por otras cinasas y fosfatasas. Como veremos en breve, estas
vías pueden impedir que la célula ingrese a la mitosis en condicio-
nes que puedan conducir a una división celular anormal.
Inhibidores de la Cdk mitosis y entre en un nuevo ciclo celular (sección 14.10).
La actividad de la Cdk puede ser bloqueada por una variedad de
inhibidores. En los brotes de levadura, por ejemplo, una proteína
llamada Sic1 actúa como un inhibidor de la Cdk durante el G1. La
degradación de la Sic1 permite que la ciclina-Cdk presente en la
célula inicie la replicación del DNA. El papel de los inhibidores
de Cdk en las células de mamífero se discute en la página 552.
Proteólisis controlada ejemplo, una de las principales ciclinas mitóticas en células ani-
En las figuras 14-4 y 14-5 se ve que las concentraciones de ciclina
oscilan durante cada ciclo celular, lo que conduce a cambios en la
actividad de las Cdk. Las células regulan la concentración de cicli-
nas y otras proteínas clave del ciclo celular, ajustando tanto la ve-
locidad de síntesis como la velocidad de destrucción de la molécu-
la en diferentes puntos del ciclo celular. La degradación se logra
por medio de la ruta ubiquitina-proteosoma descrita en la sección
12.21. A diferencia de otros mecanismos que controlan la actividad
Cdk, la degradación es un evento irreversible que ayuda a condu-
cir el ciclo celular en una sola dirección. La regulación del ciclo
celular requiere dos clases de complejos multisubunidad (comple-
jos SCF y APC) que funcionan como ligasas de ubiquitina. Estos
complejos reconocen las proteínas a ser degradadas y las unen a
una cadena de poliubiquitina, que asegura su destrucción en un
proteosoma. El complejo SCF está activo desde el final del G1 has-
ta la mitosis temprana (véase figura 14-26a) y media la destrucción
de las ciclinas G1/S, los inhibidores de Cdk y otras proteínas del
ciclo celular. Estas proteínas se convierten en objetivos para un
SCF después de que son fosforiladas por las proteínas cinasas (es
decir, Cdk) que regulan el ciclo celular. Las mutaciones que inhi-
ben a los SCF de la proteólisis mediadora de proteínas clave, como
las ciclinas G1/S o el inhibidor de Cdk Sic1 antes mencionado,
pueden evitar que las células entren en la fase S y repliquen su
DNA. El complejo APC actúa en la mitosis y degrada una cantidad
de proteínas mitóticas clave, incluidas las ciclinas mitóticas. La des-
trucción de las ciclinas mitóticas permite que una célula salga de la
Localización subcelular
Las células contienen varios compartimientos diferentes donde
las moléculas reguladoras se pueden unir o separar de las proteí-
nas con las que interactúan. La localización subcelular es un fenó-
meno dinámico, en el que los reguladores del ciclo celular se
mueven a diferentes compartimientos en etapas diversas. Por
males (ciclina B1) se desplaza entre el núcleo y el citoplasma has-
ta el G2, cuando se acumula en el núcleo justo antes del inicio de
la mitosis (FIGURA 14-7). Según una propuesta, la acumulación
nuclear de ciclina B1 se ve facilitada por la fosforilación de uno o si la acumulación nuclear de la ciclina está bloqueada, las células 549
más residuos de serina que residen en su señal de exportación no inician la división celular.
nuclear (NES, nuclear export signal, p. 462). En este modelo la fos- Como se vio antes, las proteínas y los procesos que controlan
forilación bloquea la posterior exportación de la ciclina de vuelta el ciclo celular están notablemente conservados entre los eucario-

14.4 • Control del ciclo celular: el papel de las proteínas cinasas

al citoplasma. De acuerdo con una propuesta alternativa, la cicli-
na B1-Cdk1 estimula su propia translocación en el núcleo, me-
diante la fosforilación y activación de componentes de la maqui-
naria de importación nuclear. Con independencia del mecanismo,
a) b)
FIGURA 14-7 Demostración experimental de localización subcelular
durante el ciclo celular. Micrografías de una célula HeLa viva que se ha
inyectado con ciclina B1 unida a la proteína fluorescente verde (p. 260).
La célula que se muestra en a) está en la fase G2 de su ciclo celular, y la
ciclina B1 marcada con fluorescencia se localiza casi por completo en el
citoplasma. La micrografía en b) muestra la célula en profase de la mito-
sis, y la ciclina B1 marcada se concentra en el núcleo de la célula. La ba-
se de este cambio en la localización se analiza en el texto.
Fuente: Paul Clute y Jonathan Pines. Nature Cell Biol 1999;1:83.
Reimpresa con permiso de Macmillan Publishers Limited.
tas. Como en la levadura, las sucesivas oleadas de síntesis y de-
gradación de diferentes ciclinas desempeñan un papel clave en la
conducción de células de mamífero de una etapa a la siguiente. A
diferencia de las células de levadura, que tienen una sola Cdk, las
células de mamíferos producen varias versiones de esta proteína
cinasa. Diversos complejos de Cdk-ciclina se dirigen a diferentes
grupos de sustratos, en distintos puntos dentro del ciclo celular.
El emparejamiento entre ciclinas individuales y Cdk es específi-
co, y solo se encuentran ciertas combinaciones (FIGURA 14-8a).
En las células de mamíferos, por ejemplo, la actividad de un com-
plejo de ciclina E-Cdk2 conduce a la célula a la fase S, mientras
que la actividad de un complejo de ciclina B1-Cdk1 (el MPF de
mamífero) conduce a la célula a la mitosis. Las Cdk no siempre
estimulan las actividades, sino que también pueden inhibir even-
tos inapropiados. Por ejemplo, la actividad de la ciclina B1-Cdk1
durante el G2 evita que una célula vuelva a replicar el DNA que
ya se ha replicado antes en el ciclo celular (p. 527). Esto ayuda a
garantizar que cada región del genoma se replique una vez, y
solo una, por ciclo celular.
El desempeño de los diversos complejos de ciclina-Cdk mos-
trados en la figura 14-8a) han sido determinados por una amplia
gama de estudios bioquímicos, llevados a cabo en células de ma-
míferos durante más de tres décadas. En los últimos años el des-
empeño de estas proteínas se ha reexaminado en ratones con blo-
queo génico, con algunos resultados sorprendentes (figura 14-8b).
Como se esperaba, el fenotipo de un ratón con bloqueo génico

Precursores
Ciclina Sin división
hematopoyéticos
celular (embrión
B/A + Cdk1 M de dos células)
y cardiomiocitos Precursores
reducidos hematopoyéticos
G2 reducidos
Cardiomiocitos
Cdk1–/– reducidos
G1 Cdk2+/+
+/+
Cdk4
Cdk6+/+ Cdk1+/+
Ciclina Cdk2 –/– Esterilidad
S D' + Cdk4 Cdk4
–/– masculina
Cdk6 –/– +/+ y femenina
Ciclina Cdk6 Cdk1
A + Cdk2 Cdk2+/+
Cdk4 –/–
Cdk6 –/– Cdk1+/+
Cdk2 –/–
Cdk4 –/–
Ciclina Cdk6+/+ Cdk1+/+
E + Cdk2 Cdk2 –/–
Cdk4+/+
a) Cdk6 –/–

E1.5 E12.5 E16.5 PO Adulto

b)

FIGURA 14-8 Ciclina-Cdk en el ciclo celular de mamíferos. a) Combinaciones entre diversas ciclinas y cinasas dependientes de ciclina en diferentes eta-
pas en el ciclo celular de mamíferos. La actividad de Cdk durante el G1 temprano es muy baja, lo que promueve la formación de complejos de prerreplica-
ción en los orígenes de la replicación (véase figura 13-20). A mediados del G1, la actividad de la Cdk es evidente debido a la asociación de las Cdk4 y
Cdk6 con las ciclinas de tipo D (D1, D2 y D3). Entre los sustratos de estas Cdk se encuentra una proteína reguladora importante llamada pRb (sección
16.3, figura 16-12). La fosforilación de la pRb conduce a la transcripción de varios genes, incluidos los que codifican las ciclinas E y A, la Cdk1 y las proteí-
nas implicadas en la replicación. La transición G1-S, que incluye el inicio de la replicación, está dirigida por la actividad de los complejos ciclina E-Cdk2 y
ciclina A-Cdk2. La transición de G2 a M y el paso a M temprana se debe a la actividad secuencial de los complejos ciclina A-Cdk1 y ciclina B1-Cdk1, que
fosforilan sustratos tan diversos como proteínas citoesqueléticas, histonas y proteínas de la envoltura nuclear. (La Cdk1 cinasa de mamíferos es equivalen-
te a la cdc2 cinasa de levadura con fisión, y su inhibición y activación son similares a las indicadas en la figura 14-6). b) Los efectos de la deleción de ge-
nes que codifican varias Cdk sobre el desarrollo del ratón (mostrados en rojo). De las cuatro Cdk primarias de mamíferos, solo la Cdk1 es muy necesaria
para la división celular. Los embriones que solo expresan la Cdk1 mueren durante el curso del desarrollo embrionario. Los ratones que expresan tanto la
Cdk1 como la Cdk4 se desarrollan en adultos que son estériles, debido a defectos en los ciclos de células meióticas. E (embryonic day number): número
de día embrionario; P (postnatal day number): número de día posnatal.
Fuente: a) CJ Sherr. Cell 1993;73:1060; Cell for Cell Press. Reproducida con permiso de Cell Press en el formato de reutilización en un libro/libro de texto
a través de Copyright Clearance Center. HA Coller. Nature Revs Mol Cell Biol 2007;8:667. Nature Reviews Molecular Cell Biology por el Nature Publishing
Group. Reproducido con permiso de Nature Publishing Group en el formato de reutilización en un libro/libro de texto vía Copyright Clearance Center; b)
Malumbers y Barbacid. Nat Revs Cancer 2009;9:160, fig. 2. Nature Reviews Cancer by Nature Publishing Group. Reproducida con el permiso de Nature
Publishing Group en el formato de reutilización en un libro/libro de texto a través del Copyright Clearance Center.
 550 particular depende del gen que se ha eliminado. Los ratones que
no pueden sintetizar Cdk1, ciclina B1, ciclinas E1 y E2 o ciclina A2
mueren como embriones tempranos, lo que sugiere que las proteí-
nas codificadas por estos genes son esenciales para un ciclo celular
CAPÍTULO 14 • División celular
normal. Por el contrario, un embrión de ratón que carece de los
genes que codifican todas las otras Cdk del ciclo celular (es decir,
Cdk 2, 4 y 6) es capaz de desarrollar una etapa con órganos com-
pletamente formados, aunque el animal no sobrevive al nacimien-
to (figura 14-8b). Las células tomadas de tales embriones son capa-
ces de proliferar en un cultivo, aunque más lentamente que las
células normales. Este hallazgo indica que, como en la levadura, la
Cdk1 es la única Cdk requerida para guiar una célula de mamífero
a través de todas las etapas del ciclo celular. En otras palabras,
aunque las otras Cdk normalmente se expresan en momentos es-
pecíficos durante el ciclo celular de mamíferos, la Cdk1 puede
“cubrir” su ausencia, asegurando que todos los sustratos requeri-
dos sean fosforilados en cada etapa del ciclo celular. Este es un
caso clásico de redundancia, en el cual una proteína puede llevar a
cabo funciones que normalmente no realizaría. Aun así, la ausen-
cia de una de estas ciclinas o Cdk “no esenciales” usualmente da
como resultado anormalidades distintivas del ciclo celular, al me-
nos en ciertos tipos de células. Los ratones que carecen de un gen
para la ciclina D1, por ejemplo, son más pequeños que los anima-
les de control, lo que se debe a una reducción en el nivel de divi-
sión celular en todo el cuerpo. Además, los animales deficientes
en ciclina D1 muestran una particular falta de proliferación celular
durante el desarrollo de la retina. Los ratones que carecen de
Cdk4 se desarrollan sin células productoras de insulina en el pán-
creas. Los ratones que carecen de Cdk2 parecen desarrollarse nor-
malmente, pero exhiben defectos específicos durante la meiosis
(figura 14-8b), lo que refuerza las importantes diferencias en la
regulación de las divisiones mitótica y meiótica.
REPASO
1. ¿Cuáles son las funciones respectivas de la CAK, Wee1 y
Cdc25 en el control de la actividad de la Cdk en las células
con fisión de levadura? ¿Cuál es el efecto de las mutaciones
en los genes wee1 o cdc25 en estas células?
14.5 Control del ciclo celular:
puntos de control, inhibidores Cdk
y respuestas celulares
La ataxia-telangiectasia (AT, ataxia-telangiectasia) es un trastorno
hereditario recesivo caracterizado por una serie de síntomas di-
versos, incluido un riesgo mucho mayor de ciertos tipos de cán-
2
cer. A finales de la década de 1960, tras la muerte de varios indi-
viduos sometidos a radioterapia, se descubrió que los pacientes
con AT son muy sensibles a la radiación ionizante (p. 531).
También lo son las células de estos pacientes, que carecen de una
respuesta protectora crucial que se encuentra en las células nor-
males. Cuando estas se someten a tratamientos que dañan el
DNA, como la radiación ionizante o las drogas que alteran el
DNA, su progreso a lo largo del ciclo celular se detiene mientras
se repara el daño. Por ejemplo, si se irradia una célula normal
durante la fase G1 del ciclo celular, se retrasa la progresión a la
fase S. De forma similar, las células irradiadas en la fase S retra-
san más la síntesis del DNA, mientras que las células irradiadas
en el G2 retrasan la entrada en la mitosis. se repara el DNA dañado por la UV (figura 13-25). La ATR
2 fosforila y activa un punto de control cinasa, llamado Chk1
Otros síntomas de la enfermedad incluyen la postura inestable (ataxia),
resultante de la degeneración de las células nerviosas en el cerebelo, vasos
sanguíneos dilatados en forma permanente en la cara y en otros lugares
(telangiectasia), susceptibilidad a la infección, y células con un número
anormalmente alto de aberraciones cromosómicas. La base de los primeros
dos síntomas aún no se ha determinado. be la actividad fosfatasa de la Cdc25 y evita que se reimporte
Los estudios de este tipo llevados a cabo en levaduras dieron
lugar al concepto formulado por Leland Hartwell y Ted Weinert
en 1988 de que las células poseen puntos de control como parte
de su ciclo celular. Los puntos de control son mecanismos de vi-
gilancia que detienen el progreso del ciclo celular si 1) se daña
alguno de los DNA cromosómicos o 2) ciertos procesos críticos
no han sido completados de forma apropiada, como la replica-
ción del DNA durante la fase S o el alineamiento cromosómico
durante la fase M. Los puntos de control aseguran que cada uno
de los diversos eventos que componen el ciclo celular ocurra de
manera precisa y en el orden correcto. Muchas de las funciones
de la maquinaria punto de control no tienen ningún rol en los
eventos normales del ciclo celular, y solo se activan cuando apa-
rece una anomalía. De hecho, los genes que codifican varias pro-
teínas de punto de control se identificaron por primera vez en
células de levadura mutantes, que continuaron su progreso a lo
largo del ciclo celular a pesar de sufrir daños en el DNA —u otras
anomalías— que causaron defectos graves.
Los puntos de control se activan durante todo el ciclo celular
mediante un sistema de sensores que reconocen el daño en el
DNA o las anormalidades celulares. Si un sensor detecta la pre-
sencia de un defecto, desencadena una respuesta que detiene
temporalmente el progreso del ciclo celular. La célula puede usar
el retraso para reparar el daño o corregir el defecto, en lugar de
continuar hacia la siguiente etapa. Esto es muy importante por-
que las células de mamíferos que sufren división con daño gené-
tico corren el riesgo de transformarse en una célula cancerosa. Si
el DNA se daña irreparablemente, el mecanismo de punto de
control puede transmitir una señal que conduce ya sea 1) a la
muerte de la célula o 2) a su conversión a un estado de detención
permanente del ciclo celular (conocido como senescencia).
Hemos visto en numerosas partes de este texto, cómo el estu-
dio de una extraña enfermedad humana ha llevado a un descubri-
miento de importancia básica en la biología celular y molecular.
La respuesta al daño del DNA de la célula proporciona otro ejem-
plo de este camino al descubrimiento. El gen responsable de la
ataxia-telangiectasia (el gen ATM) codifica una proteína cinasa
(serina/treonina cinasa) que se activa por ciertas lesiones del
DNA, particularmente las roturas de la doble hebra (p. 534).
Resulta sorprendente que la presencia de una sola ruptura en una
de las moléculas de DNA de la célula sea suficiente para causar
una rápida y gran activación de las moléculas de ATM, lo que
provoca la detención del ciclo celular. Una proteína cinasa relacio-
nada, llamada ATR, también se activa por roturas del DNA y
otros tipos de lesiones, incluidas las resultantes de la replicación
incompleta del DNA o la radiación UV. Tanto la ATM como la
ATR son parte de múltiples complejos proteicos capaces de unir-
se a la cromatina que contiene DNA dañado. Una vez vinculadas,
la ATM y la ATR pueden fosforilar una notable variedad de pro-
teínas que participan en los puntos de control del ciclo celular y
en la reparación del DNA.
¿Cómo detiene una célula su progreso de una etapa del ciclo
celular al siguiente? Examinaremos brevemente dos vías bien es-
tudiadas, que están disponibles para las células de mamíferos
para detener su ciclo celular en respuesta al daño en el DNA.
1. Si una célula que se prepara para ingresar a la mitosis es so-
metida a irradiación UV, la ATR cinasa se activa y la célula se
detiene en el G2. Se cree que las moléculas de ATR cinasa
se reclutan en sitios de DNA monocatenario recubierto de
proteína (paso 1, FIGURA 14-9) como las presentes, mientras
(paso 2), que a su vez fosforila la Cdc25 en un residuo de se-
rina particular (paso 3), convirtiendo a la molécula Cdc25 en
objetivo para una proteína especial adaptadora que se une
a la Cdc25 en el citoplasma (pasos 4,5). Esta interacción inhi-
FIGURA 14-9 Modelos para el mecanismo de acción de dos puntos de Núcleo 551
Radiación Radiación
comprobación de daños del DNA. La ATM y ATR son proteínas cinasas
que se activan después de tipos específicos de daño en el DNA. Cada
ultravioleta ionizante
una de estas proteínas actúa a través de puntos de referencia, que seña-
lan vías que conducen a la detención del ciclo celular. La ATM se activa

14.5 • Control del ciclo celular: puntos de control, inhibidores Cdk y respuestas celulares
Complejo Complejo MRN
en respuesta a las roturas de doble hebra, que son detectadas por el 1 a
complejo de proteína MRN (paso a). La ATR, por otro lado, se activa con ssDNA- proteína
DNA recubierto de proteína (paso 1) que se forma cuando las horquillas
de replicación se estancan, o el DNA se repara después de varios
tipos de daños. En la vía G2 mostrada aquí, la ATR fosforila y activa el pun-
to de control cinasa Chk1 (paso 2), que fosforila e inactiva la fosfatasa ATR
ATM
Cdc25 (paso 3), que normalmente se desplaza entre el núcleo y el cito-
plasma (paso 4). Una vez fosforilada, la Cdc25 está unida por una proteína Inactivo G2
adaptadora en el citoplasma (paso 5), y no puede ser reimportada en el Chk1
G1 Chk2 Inactivo
núcleo, lo que deja a la Cdk en su estado fosforilado inactivado (paso 6).
1
En la vía G mostrada aquí, la ATM fosforila y activa el punto de control ci- 2 P P b
nasa Chk2 (paso b), que fosforila el p53 (paso c). La p53 es normalmente Activo Chk1 Chk2 Activo
de vida muy corta, pero la fosforilación de la Chk2 estabiliza la proteína, lo
que mejora su capacidad para activar la transcripción p21 (paso d). Una
vez transcrito y traducido (paso e), el factor p21 inhibe de forma directa la Cdc25 p53 Inestable
Cdk (paso f). Muchas otras proteínas, incluidas las enzimas modificadoras 3 c
de histonas, los complejos de remodelación de la cromatina y las varian- Cdc25 p53 Estable
tes de histonas participan en la mediación de la respuesta al daño del P P
DNA, pero no se discuten.
Fuente: Véase Curr Opin Cell Biol 2009;21:245; Nature Revs Mol Cell Biol 4 6
2009;10:243; Nature Cell Biol 2011;13:1161; y Genes Develop 2011;25:409. d
Inactivo
Cdk P p21 gen DNA
P
p53
en el núcleo. Como se discutió en la página 547, la Cdc25 nor- DETENCIÓN DEL
malmente realiza un papel clave en la transición G2/M me- CICLO CELULAR p21 Activo
Cdc25 Cdk
e
diante la eliminación de los fosfatos inhibidores de la Cdk1. 5 P mRNA f Inactivo
p21
Por tanto, la ausencia de la Cdc25 del núcleo deja la Cdk en un Citoplasma Cdk
p21
estado inactivo (paso 6) y la célula se detiene en G2. Proteína DETENCIÓN DEL
2. El daño al DNA también conduce a la síntesis de proteínas adaptadora CICLO CELULAR
que inhiben directamente el complejo Cdk-ciclina que impul- (14–3–3σ)
sa el ciclo celular. Por ejemplo, las células expuestas a radia-
ción ionizante en G1 sintetizan una proteína llamada p21 (ma-
sa molecular 21 kDa) que inhibe la actividad cinasa de la Cdk c), que conduce a la transcripción y traducción del gen p21
del G1. Esto evita que las células fosforilen los sustratos clave (paso f) y posterior inhibición de la Cdk (paso f). Alrededor
y entren en la fase S. La ATM está involucrada en este meca- de 50% de todos los tumores humanos muestran evidencia de
nismo de punto de control. En esta respuesta particular de mutaciones en el gen que codifica el p53, lo que refleja su
daño al DNA, las rupturas en el DNA que son causadas por la importancia en el control del crecimiento celular. El papel del
radiación ionizante sirven como sitios para el reclutamiento p53 se discute en detalle en el capítulo 16.
de un complejo proteico denominado MRN (paso a, figura
14-9). Este se puede considerar como un sensor de roturas del El p21 es solo uno de por lo menos siete inhibidores conoci-
DNA. El MRN recluta y activa la ATM, que fosforila y activa dos de la Cdk. La interacción entre un inhibidor de Cdk relacio-
otra cinasa de punto de control llamada Chk2 (paso b). La nado (p27) y uno de los complejos de Cdk-ciclina se muestra en
Chk2 a su vez fosforila un factor de transcripción (p53) (paso la FIGURA 14-10a). En este modelo estructural la molécula p27 se

p27

CDK2 CYCA
a) b) c)

FIGURA 14-10 El p27: un inhibidor de Cdk que detiene la progresión del ciclo celular. a) Estructura tridimensional de un complejo entre el p27 y la cicli-
na A-Cdk2. La interacción con el p27 altera la conformación de la subunidad catalítica Cdk, inhibiendo su actividad de proteína cinasa. b) Un par de her-
manos de camada a las 12 semanas de edad. Además de poseer diferentes genes para el color del pelaje, el ratón con pelaje oscuro ha sido modificado
genéticamente para que carezca de ambas copias del gen p27 (denotadas p27-/-), lo que explica su mayor tamaño. c) Comparación de las glándulas del
-/-
timo de un ratón normal (izquierda) y un ratón p27 (derecha). La glándula del ratón p27 con bloqueo génico es mucho más grande, a causa de un mayor
número de células.
Fuente: a) Alicia A Russo, et al. Nature 1996;382:327, fig. 2a. Cortesía de Nikola Pavletich, Instituto Médico Howard Hughes; reimpreso con permiso de
Macmillan Publishers Limited; b) Keiko Nakayama, et al. Cortesía de Kei-ichi Nakayama. Cell 1996;85:710-711; con permiso de Elsevier; c) de Keiko
Nakayama, et al. Cortesía de Kei-ichi Nakayama. Cell 1996;85:710-711; con permiso de Elsevier.
 552 cubre a sí misma mediante ambas subunidades del complejo cicli-
na A-Cdk2, cambiando la conformación de la subunidad catalíti-
ca e inhibiendo su actividad de cinasa. En muchas células la p27
se debe fosforilar, y luego degradarse, antes de que se produzca
CAPÍTULO 14 • División celular
la progresión a la fase S.
Los inhibidores de la Cdk, como el p21 y p27, son también
activos en la diferenciación celular. Justo antes de que las células
comiencen a diferenciarse, ya sea en células intestinales, hepáti-
cas, sanguíneas o de otro tipo, por lo general se retiran del ciclo
celular y dejan de dividirse. Se cree que los inhibidores de la Cdk
permiten o inducen directamente la retirada del ciclo celular. Del
mismo modo que las funciones de las Cdk y ciclinas específicas
se han estudiado en ratones con bloqueo génico, también se han
estudiado sus inhibidores. Los que carecen del gen p27 muestran
un fenotipo distintivo: son más grandes de lo normal (figura 14-
10b) y ciertos órganos, como el timo y el bazo, contienen un nú-
mero significativamente mayor de células que las de un animal
normal (figura 14-10c). En los ratones normales las células de es-
tos órganos particulares sintetizan niveles relativamente altos de
p27, y se presume que la ausencia de esta proteína en los anima-
les con el p27 deficiente permite que las células se dividan mu-
chas veces más antes de diferenciarse.
REPASO
1. ¿Qué se entiende por punto de control del ciclo celular? ¿Cuál
es su importancia? ¿Cómo detiene una célula su progreso en
uno de estos puntos de control?
14.6 Descripción general de la
fase M: mitosis y citocinesis
Mientras que nuestra comprensión de la regulación del ciclo ce-
lular descansa en gran medida en estudios genéticos en la levadu-
ra, nuestro conocimiento de la fase M se basa en más de un siglo
de investigación microscópica y bioquímica en animales y plan-
tas. El nombre “mitosis” proviene de la palabra griega mitos, que
significa “hebra”. El nombre fue acuñado en 1882 por el biólogo
alemán Walther Flemming para describir los cromosomas filifor-
mes que misteriosamente aparecían en las células animales, jus-
to antes de dividirse en dos. La belleza y la precisión de la divi-
sión celular se aprecian al observar un video del proceso, hecho
con técnica time-lapsed, en lugar de leerlo en un libro de texto (p.
ej., www.bio.unc.edu/faculty/salmon/lab/mitosis/mitosismovies.
html).
La mitosis es un proceso de división nuclear en el que las mo-
léculas de DNA replicadas de cada cromosoma se reparten con
exactitud en dos núcleos. La mitosis suele ir acompañada de cito-
cinesis, un proceso mediante el cual una célula en división se di-
vide en dos, dividiendo el citoplasma en dos paquetes celulares.
Las dos células hijas que resultan de la mitosis y la citocinesis
poseen un contenido genético idéntico entre sí y la célula madre
de la cual surgieron. La mitosis, por tanto, mantiene el núme-
ro de cromosomas y genera nuevas células para el crecimiento y
mantenimiento de un organismo. La mitosis puede tener lugar
tanto en células haploides como diploides. Las células mitóticas
haploides se encuentran en hongos, gametofitos de plantas y al-
gunos animales (incluidas las abejas machos, conocidas como
zánganos). La mitosis es una etapa del ciclo celular donde la cé-
lula desvía virtualmente toda su energía a una sola actividad: la
segregación de cromosomas. Como resultado, la mayoría de las
actividades metabólicas de la célula, incluida la transcripción y la
traducción, se reducen durante la mitosis, y la célula se vuelve
relativamente insensible a los estímulos externos.
Hemos visto en capítulos anteriores cuánto se puede apren-
der sobre los factores responsables de un proceso particular al
estudiarlo fuera de una célula viva (p. 263). Nuestra comprensión
de la bioquímica de la mitosis ha sido auxiliada por el uso de ex-
tractos preparados a partir de huevos de rana. Estos contienen
arsenales de todos los materiales necesarios para apoyar la mito-
sis (histonas, tubulina, etc.). Cuando se añade cromatina o nú-
cleos enteros al extracto de huevo, la cromatina se compacta en
cromosomas mitóticos, que se segregan mediante un huso mitó-
tico que se ensambla de manera espontánea dentro de la mezcla
libre de células. En muchos experimentos el desempeño de una
proteína particular en la mitosis se puede estudiar eliminando
esa proteína del extracto de huevo, mediante la adición de un
anticuerpo (inmunoagotamiento) y determinando si el proceso
puede continuar en ausencia de esa sustancia (véase figura 14-21
para un ejemplo).
La mitosis por lo general se divide en cinco etapas (FIGU-
RA 14-11), profase, prometafase, metafase, anafase y telofase, cada
una caracterizada por una particular serie de eventos. Tenga en
cuenta que cada una de estas etapas representa un segmento de
un proceso continuo; la división de la mitosis en fases arbitrarias
se hace solo para el debate y la experimentación.
REPASO
1. ¿Qué ocurre durante la etapa mitótica del ciclo celular? ¿Qué
sucede durante la citocinesis?
14.7 Profase
Durante la primera etapa de la mitosis, la profase, los cromoso-
mas duplicados se preparan para la separación y se ensambla la
maquinaria mitótica.
Formación del cromosoma mitótico
El núcleo de una célula interfásica contiene enormes longitudes
de fibras de cromatina. El estado extendido de la cromatina inter-
fásica es ideal para los procesos de transcripción y replicación,
pero no para la segregación en dos células hijas. Antes de segre-
gar sus cromosomas, una célula los convierte en estructuras mu-
cho más cortas y gruesas mediante un notable proceso de com-
pactación cromosómica (o condensación cromosómica), que
se produce durante la profase temprana (figuras 14-11 y 14-12).
Como se describe en la página 467, la cromatina de una célu-
la interfásica está organizada en fibras de casi 30 nm de diámetro.
Aunque existe polémica sobre este tema, se cree que los cromo-
somas mitóticos se han formado a partir de similares tipos de fi-
bras, como se observa en el examen por microscopía electrónica
en los cromosomas completos aislados a partir de células mitóti-
cas (FIGURA 14-13a). De acuerdo con este punto de vista, la com-
pactación cromosómica no altera la naturaleza de la fibra de cro-
matina, sino la forma en que se empaqueta. El tratamiento de los
cromosomas mitóticos con soluciones que solubilizan las histo-
nas, y la mayoría de las proteínas no histónicas, revela una arma-
zón estructural o andamiaje que conserva la forma básica del
cromosoma intacto (figura 14-13b). Los lazos de DNA están uni-
dos en su base a las proteínas no histónicas que forman este an-
damiaje cromosómico (se muestra con mayor aumento en la figu-
ra 12-15).
 553
Profase
1. El material cromosómico se condensa para
formar cromosomas mitóticos compactos.
Se ve que los cromosomas están

14.7 • Profase
compuestos de dos cromátidas unidas
juntas en el centrómero.

2. Se desensambla el citoesqueleto y
se ensambla el huso mitótico.

3. Complejo de Golgi y fragmento de retículo

endoplásmico (ER, endoplasmic reticulum).
La envoltura nuclear se dispersa.

Prometafase
1. Los microtúbulos cromosómicos se unen a
los cinetocoros de los cromosomas.

2. Los cromosomas se mueven al ecuador

del huso.

Metafase

1. Los cromosomas están alineados a lo largo

de la placa metafásica, unidos por
microtúbulos cromosómicos a ambos polos.

Anafase

1. Los centrómeros se dividen, y las

cromátidas se separan.

2. Los cromosomas se mueven a los polos

opuestos del huso.

3. Los polos del huso se separan.

Telofase

1. Los cromosomas se agrupan en los polos

opuestos del huso.

2. Los cromosomas se dispersan.

3. La envoltura nuclear se ensambla alrededor

de los cúmulos de cromosomas.

4. El complejo de Golgi y el ER se reforman.

5. Células hijas formadas por citocinesis.

FIGURA 14-11 Las etapas de la mitosis en una célula animal (dibujos a la izquierda) y una célula vegetal (fotos a la derecha).
Fuente: Micrografías cortesía de Andrew Bajer.
 554
CAPÍTULO 14 • División celular

FIGURA 14-12 Morfología de la profase nuclear. Sección óptica-luminosa

a través de dos núcleos de células de ratón en la profase, registrada con
microscopía de iluminación de superresolución 3D-estructurada (3D-SIM,
structured illumination microscopy). Los cromosomas condensados se ​​
muestran en rojo, la envoltura nuclear en azul y los microtúbulos en verde.
La barra de escala es de 5 mm. a)
Fuente: Cortesía de Lothar Schermelleh.

La investigación sobre la compactación cromosómica se ha

centrado en un abundante complejo multiproteico llamado con-
densina. Las proteínas de la condensina se descubrieron incuban-
do núcleos en extractos de huevo de rana e identificando aquellas
proteínas que se asociaban con los cromosomas y se compacta-
ban. La eliminación de la condensina de los extractos evitó la DNA
compactación cromosómica normal. ¿Cómo es que la condensina
es capaz de inducir cambios tan drásticos en la arquitectura de la
cromatina? Hay muy pocos datos disponibles de estudios in vivo
para responder a esta pregunta, aunque existe mucha especula- Andamio
ción al respecto.
El DNA superenrollado ocupa un volumen mucho más pe-
queño que el DNA relajado (véase figura 10-13), y los estudios
sugieren que el DNA superenrollado desempeña un papel clave
en la compactación de una fibra de cromatina en el pequeño vo-
lumen ocupado por un cromosoma mitótico. En presencia de una
topoisomerasa y ATP, la condensina es capaz de unirse al DNA in
vitro y enrollar el DNA en rizos superplegados positivamente. b)
Este hallazgo encaja muy bien con la observación de que la com-
pactación cromosómica en la profase requiere de la topoisomera- FIGURA 14-13 El cromosoma mitótico. a) Microfotografía electrónica de
sa II, que junto con la condensina está presente como parte del una preparación de montaje total de un cromosoma mitótico humano. La
andamiaje mitótico de cromosomas (figura 14-13b). En la figura estructura se ve compuesta por una fibra nudosa de 30 nm de diámetro,
14-14 se muestra un modelo especulativo para la acción de la con- la cual es similar a la que se encuentra en los cromosomas de interfase.
b) Aspecto de un cromosoma mitótico después de que las histonas y la
densina. La condensina se activa al inicio de la mitosis por la mayoría de las proteínas no histónicas han sido eliminadas. Las proteínas
fosforilación de varias de sus subunidades por la Cdk-ciclina, res- residuales forman un andamio del cual se observa que emergen lazos de
ponsable de conducir las células del G2 a la mitosis. Así, la con- DNA (estos se muestran más claramente en la figura 12-15).
densina es uno de los objetivos a través de los cuales los Cdk Fuente: a) Cortesía de Gunther F Bahr, Instituto de Física de las Fuerzas
pueden iniciar actividades de ciclo celular. La estructura de la Armadas, Washington, DC b) De James R Paulson y Ulrich K Laemmli. Cell
subunidad de una molécula de condensina en forma de V se 1977;12:820, con el permiso de Elsevier.
muestra en el recuadro derecho de la FIGURA 14-14.
Como resultado de la compactación, los cromosomas de una la cohesina mantiene las dos cromátidas hermanas unidas conti-
célula mitótica aparecen como estructuras diferenciadas, simila- nuamente a través del G2 y la mitosis, cuando se separan. Como
res a varillas. El examen detallado de los cromosomas mitóticos se indica en los recuadros de la figura 14-14, la condensina y la
revela que cada uno de ellos está compuesto por dos cromátidas cohesina tienen una organización estructural similar. Varios ex-
“hermanas” de imagen especular (figura 14-13a). Las cromátidas perimentos apoyan la hipótesis de que el anillo de cohesina rodea
hermanas son resultado de la replicación en la interfase previa. dos moléculas de DNA hermanas, como se muestra en las partes
Previo a la replicación, el DNA de cada cromosoma interfási- izquierda y derecha de la figura 14-14.
co se asocia en sitios a lo largo de su longitud con un complejo En los vertebrados, la cohesina se libera de los cromosomas
multiproteico llamado cohesina (figura 14-14). Tras la replicación en dos etapas diferentes. La mayor parte de la cohesina se elimina
 555
Scc3
Scc1
FIGURA 14-14 Modelo para las funciones de la condensina y la cohe-
sina en la formación de cromosomas mitóticos. Justo después de la
replicación, las hélices de DNA de un par de cromátidas hermanas se

14.7 • Profase
mantendrían asociadas por moléculas de cohesina que rodeaban las Smc3 Smc4
hélices de DNA hermanas, como se muestra a la izquierda del dibujo.
A medida que la célula entre en la mitosis, comenzaría el proceso de Smc2
compactación asistido por las moléculas de condensina, como se Smc1
muestra en la parte derecha del dibujo. En este modelo se muestra có-
mo la condensación provoca la compactación cromosómica, formando
arcos alrededor de bucles superenrollados de DNA dentro de la cro-
matina. Las moléculas de cohesina continuarían uniendo el DNA de las Cohesina Condensina
cromátidas hermanas. Se propone (pero no se muestra en este dibujo)
que las interacciones cooperativas entre las moléculas de condensina
organizarían los lazos superenrollados en bobinas más grandes, que
luego se doblarían en una fibra cromosómica mitótica. Las inserciones Cohesina
superior izquierda y derecha muestran la estructura de la subunidad de
un complejo de cohesina y condensina, respectivamente. Ambos com-
plejos están construidos alrededor de un par de subunidades SMC.
Cada uno de los polipéptidos SMC se pliega sobre sí mismo para for-
mar una tira enrollada antiparalela, muy elongada, con un dominio glo-
Condensina
bular ATP-enlazante, donde los terminales N y C se unen. La cohesina
y la condensina también tienen dos o tres subunidades no SMC que
completan la estructura en forma de anillo de estas proteínas. Interfase Profase

de los brazos de los cromosomas a medida que se compactan
durante la profase. La disociación es inducida por la fosforilación
de las proteínas asociadas a la cohesina por dos enzimas mitóticas
importantes, llamadas cinasa tipo Polo y Aurora B cinasa. Las
cohesinas asociadas se retiran luego de los brazos del cromosoma
mediante la acción de la proteína WAPL. A raíz de este evento,
las cromátidas de cada cromosoma mitótico se sujetan relativa-
mente desligadas a lo largo de sus brazos extendidos, pero mucho
más apretadas en sus centrómeros [figura 14-13a) y FIGURA 14-15].
La cohesina permanece en los centrómeros, debido a la presencia
allí de una fosfatasa que elimina los grupos fosfato añadidos a la
proteína por las cinasas. La liberación de la cohesina desde los
centrómeros normalmente se retrasa hasta la anafase, como se
describe en la página 562, y está mediada por la proteína separa-
sa. Si la fosfatasa se inactiva mediante el experimento, las cromá-
tidas hermanas se separan prematuramente una de la otra antes
de la anafase.
Centrómeros y cinetocoros
El punto de referencia más notable de un cromosoma mitótico es
una indentación o constricción primaria que marca la posición del
centrómero (figura 14-13a). El centrómero es la residencia de se-
cuencias de DNA muy repetidas (véase figura 10-20), que sirven

a) b)

FIGURA 14-15 Cada cromosoma mitótico está compuesto por un par de cromátidas hermanas conectadas entre sí por el complejo de proteína cohe-
sina. a) Micrografía electrónica de barrido coloreada de varios cromosomas en metafase, que muestra las cromátidas idénticas emparejadas asociadas de
forma suelta a lo largo de su longitud y unidas estrechamente en el centrómero. Las cromátidas no se separan entre sí hasta la anafase. b) Microfotografía
de fluorescencia de un cromosoma metafásico en una célula humana cultivada. El DNA está teñido de azul, los cinetocoros son verdes y la cohesina es
roja. En esta etapa de la mitosis la cohesina se ha perdido de los brazos de las cromátidas hermanas, pero permanece concentrada en los centrómeros,
donde las dos hermanas están estrechamente unidas.
Fuente: a) Andrew Syred/Photo Researchers, Inc; b) por S Hauf y Jan-Michael Peters. Nature Cell Biol 2001;3:E17, fig. 1c. Reimpresa con permiso de
Macmillan Publishers Limited.
 556 como sitios de unión para proteínas específicas. El examen de las
secciones a través de un cromosoma mitótico revela la presencia
de una estructura proteinácea parecida a un botón, llamada cine-
tocoro, en la superficie externa del centrómero de cada cromáti-
CAPÍTULO 14 • División celular
tes de una máquina compleja de microtamaño llamada huso mi-
tótico. Se piensa que la rápida dispersión del citoesqueleto en la
interfase se logra mediante la inactivación de proteínas que esta-
bilizan los microtúbulos (p. ej., proteínas asociadas a microtúbu-

da (FIGURA 14-16a, b). La mayoría de las más de 100 proteínas
que componen el cinetocoro se ensamblan en el centrómero du-
rante la profase temprana. Se piensa que las proteínas cinetoco-
ras se reclutan en el centrómero debido a la presencia allí de los
nuevos nucleosomas que contienen la variante de histonas
CENP-A (p. 477). Como se explicará en breve, el cinetocoro fun-
ciona como 1) el sitio de fijación del cromosoma a los microtúbu-
los dinámicos del huso mitótico (como en la figura 14-30), 2) la
residencia de varias proteínas motoras implicadas en la motilidad
cromosómica (figura 14-16c) y 3) un componente clave en la ruta
de señalización de un punto de control mitótico importante (véa-
se figura 14-31).
Formación del huso mitótico mienza en el núcleo al inicio de la fase S, cada centríolo del cen-
Discutimos en el capítulo 9 cómo el ensamblaje de microtúbulos
en las células animales es iniciado por una estructura especial
organizadora de microtúbulos, el centrosoma (sección 9.5).
Mientras una célula progresa más allá de G2 y hacia la mitosis, los
microtúbulos del citoesqueleto transitan por una dispersión gene-
ralizada, en preparación para su reensamblaje como componen-
los o MAP, microtubule-associated proteins) y la activación de pro-
teínas que desestabilizan estos polímeros.
Para comprender la formación del huso mitótico es necesario
examinar primero el ciclo del centrosoma, a medida que progresa
de acuerdo con el ciclo celular (FIGURA 14-17a). Cuando una cé-
lula animal sale de la mitosis, el citoplasma contiene un solo cen-
trosoma que contiene dos centríolos, los cuales se encuentran en
ángulo recto entre sí. Incluso, antes de que se haya completado la
citocinesis, los dos centríolos de cada célula hija pierden su aso-
ciación cercana entre sí (se dice que “se desacoplan”). Este evento
es desencadenado por la enzima separasa, que se activa tarde en
la mitosis (p. 562) y divide un enlace proteico que mantiene jun-
tos a los centríolos. Luego, cuando la replicación del DNA co-
trosoma inicia su “replicación” en el citoplasma. El proceso
comienza con la aparición de un pequeño procentríolo al lado de
cada centríolo preexistente (materno) y orientado en ángulo recto
con él (figura 14-17b). La elongación subsiguiente de los microtú-
bulos convierte cada procentríolo en un centríolo hijo de tamaño
completo. Al comienzo de la mitosis el centro se divide en dos
centrosomas adyacentes, cada uno de los cuales contiene un par

Enlace externo de los

microtúbulos cinetocoros
Actividad motora de
microtúbulos Extremo (+) de microtúbulos donde se
Cinetocoro añaden o pierden subunidades
Microtúbulo
Placa externa cinetocoro
Heterocromatina Ndc80
pericentrométrica

Microtúbulos

Heterocromatina
centromérica
+ _
Cinetocoro interno
Replicación de centrómero
Interfaz cromatina formación
de cinetocoro
Placa interna Corona fibrosa Microtúbulo CENP-E Dineína
0.2 Em Interzona Placa Despolimerasa Fibra de corona
a) b) externa

Crecimiento Contracción
c)

FIGURA 14-16 El cinetocoro. a) Micrografía electrónica de una sección a través de uno de los cinetocoros de un cromosoma en metafase de mamífero,
que muestra su estructura de tres capas (trilaminar). Se puede ver que los microtúbulos del huso mitótico terminan en el cinetocoro. b) Representación
esquemática del cinetocoro, que contiene una placa interna y externa densa en electrones, separada por una interzona ligeramente teñida. Las funciones
propuestas de las placas interiores y exteriores se indican en la parte a). La placa interna contiene una variedad de proteínas unidas a la heterocromatina
centromérica del cromosoma. Asociada con la placa externa está la corona fibrosa, que se une a las proteínas motoras implicadas en el movimiento cro-
mosómico. c) Un modelo esquemático que muestra una disposición propuesta de varias de las proteínas encontradas en la superficie externa del cineto-
coro. Entre las proteínas motoras asociadas con el cinetocoro, la dineína citoplásmica se mueve hacia el extremo negativo de un microtúbulo, mientras
que la CENP-E se mueve hacia el extremo positivo. Estos motores también pueden desempeñar un papel en el anclaje de los microtúbulos al cinetocoro.
La proteína etiquetada como “despolimerasa” es un miembro de la superfamilia de cinesinas, que funciona en la despolimerización de los microtúbulos
más que en la motilidad. En este dibujo las despolimerasas están en un estado inactivo (los microtúbulos no se despolimerizan). La Ndc80 es un comple-
jo de proteínas que consiste en cuatro subunidades de proteínas diferentes, que forman una molécula en forma de bastón de 57 nm de longitud, que se
extiende hacia afuera del cuerpo del cinetocoro. Los dominios globulares en cualquier extremo del complejo median la unión al microtúbulo y al cineto-
coro. Estas fibrillas Ndc80 han sido implicadas como acopladoras del cinetocoro en el extremo positivo de un microtúbulo dinámico.
Fuente: a) Don W Cleveland, UCSD, et al. Cell 2003;112:408, fig. 1c, con permiso de Elsevier. Imagen cortesía de Kevin Sullivan.
 557

14.7 • Profase
Fase temprana G1 Fase S

b)

Mitosis
a)

FIGURA 14-17 El ciclo del centrosoma de una célula animal. a)

Durante el G1 el centrosoma contiene un solo par de centríolos, que ya
no están asociados tan apretadamente como lo fueron durante la mito-
sis. Durante la fase S los procentríolos hijo se forman adyacentes a
centríolos maternos, de modo que dos pares de centríolos se hacen vi-
sibles dentro del centrosoma (véase b). Los procentríolos hijos conti-
núan alargándose durante la fase G2, y al comienzo de la mitosis, el
centrosoma se divide, y cada par de centríolos se convierte en parte c)
de su propio centrosoma. A medida que se separan, los centrosomas
organizan las fibras de los microtúbulos que forman el huso mitótico. b)
Se ve que el centrosoma de esta célula contiene dos centríolos madre,
cada uno con un procentro descendente asociado (flechas). c)
Microfotografía de fluorescencia de un eje normal en metafase tempra-
na, teñida para los microtúbulos (verde), cromosomas (azul) y proteína
cinetocoro (rojo). d ) Esta célula de cáncer de mama de ratón contiene
más que el complemento normal de dos centrosomas (rojo), y ha en-
samblado un aparato de eje multipolar (verde). Los centrosomas adicio-
nales conducen a una mala segregación cromosómica y a un número
anormal de cromosomas (azul), que son característicos de las células
malignas.
Fuente: a) DR Kellogg, et al. Reproducida con permiso de la Annual
Review of Biochemistry 1994;(63); copyright 1994, Annual Review of
Biochemistry by Annual Reviews. Reproducida con permiso de Annual
Reviews en formato de republicación en un libro mediante copyright; b)
de Jerome B Rattner y Stephanie G Phillips. J Cell Biol 1973;57:363, fig.
4. Reproducida con permiso de Rockefeller University Press; c) cortesía
de Jason Stumpff; d) cortesía de Thea Goepfert y WR Brinkley, Baylor
College of Medicine, Houston, Tx. d)

de centríolos padre e hijo. Es normal que el inicio de la duplica-
ción del centrosoma en la transición G1-S se desencadene por la
fosforilación de una proteína centrosómica por la Cdk2, el mismo
agente responsable del inicio de la replicación del DNA (figura
14-8). La duplicación del centrosoma es un proceso controlado
estrictamente para que cada centríolo madre produzca solo un
centríolo hijo durante cada ciclo celular. La formación de centrío-
los adicionales puede conducir a una división celular anormal, y
puede contribuir al desarrollo del cáncer (figura 14-17c).
La primera etapa en la formación del huso mitótico en una
célula animal típica es la aparición de microtúbulos en una dispo-
sición astral de “estallido” o áster alrededor de cada centrosoma,
durante la fase temprana de la profase (FIGURA 14-18). Como se
discutió en el capítulo 9, los microtúbulos crecen por adición de
subunidades a sus extremos (+), mientras que sus extremos (–)
permanecen asociados con el material pericentriolar (PCM, peri-
centriolar material) del centrosoma (p. 321). Se piensa que la fos-
forilación de las proteínas del PCM por la cinasa de tipo Polo
desempeña un papel clave en la estimulación de la nucleación de
los microtúbulos del huso durante la profase. El proceso de for-
mación del áster es seguido por la separación de los centrosomas
entre sí, y su posterior movimiento alrededor del núcleo hacia los
extremos opuestos de la célula. La separación del centrosoma es-
tá impulsada por proteínas motoras asociadas a los microtúbulos
adyacentes. A medida que los centrosomas se separan, los micro-
túbulos que se extienden entre ellos aumentan en número y se
alargan (figura 14-18). Eventualmente los dos centrosomas llegan
a puntos opuestos entre sí, estableciendo así los dos polos de un
huso bipolar mitótico (como en la figura 14-17a). Tras la mitosis un
centrosoma se distribuye a cada célula hija.
Varios tipos diferentes de células animales (incluidas las del
embrión temprano de ratón) carecen de centrosomas, así como
las células de las plantas superiores; sin embargo, todas estas cé-
lulas construyen un huso mitótico bipolar y realizan una mitosis
relativamente típica. Husos mitóticos funcionales pueden incluso
formarse en células mutantes de Drosophila que carecen de cen-
 558
Astral Microtúbulos
FIGURA 14-18 Formación del huso mitótico. Durante la profase, a medi- astrales
da que los cromosomas comienzan a condensarse, los centrosomas se
CAPÍTULO 14 • División celular

separan unos de otros mientras organizan los haces de microtúbulos que

forman el huso mitótico. Esta micrografía muestra una célula pulmonar de
tritón cultivada en la profase temprana que se ha teñido con anticuerpos
fluorescentes contra la tubulina, que revela la distribución de los microtú-
bulos de la célula (verde). Se observa que los microtúbulos del huso en
desarrollo se originan como ásteres de dos sitios dentro de la célula. Centrosoma
Estos sitios corresponden a las ubicaciones de los dos centrosomas que
se mueven hacia los polos opuestos en esta etapa de la profase. Los cen-
trosomas están situados por encima del núcleo celular, que aparece como
una región oscura no teñida.
Fuente: Jennifer Waters, Richard W Cole y Conly L Rieder. J Cell Biol
1993;122:364, fig. 2. Reeditado con permiso de Rockefeller University
Press. Cortesía de Conly L Rieder.

trosomas, o en células de mamíferos en las que se ha retirado membranas nucleares— se desmontan en procesos separados.
experimentalmente el centrosoma. En todos esos casos los micro- Sin embargo, todos estos procesos se deben iniciar por la fosfo-
túbulos del huso mitótico se nuclean cerca de los cromosomas, en rilación de sustratos clave mediante cinasas mitóticas, particular-
lugar de hacerlo en los polos donde normalmente residirían los mente la ciclina B-Cdk1. Los complejos de poro nuclear se des-
centrosomas. Entonces, una vez que se han polimerizado, los ex- ensamblan a medida que las interacciones entre el subcomplejo
tremos (–) de los microtúbulos se unen (es decir, se enfocan) en de nucleoporina se interrumpen y los subcomplejos se disocian
cada polo del huso mediante la actividad de las proteínas motoras en el medio circundante. La lámina nuclear se desintegra por la
(FIGURA 14-19). Este tipo de experimentos sugieren que las célu- despolimerización de los filamentos laminares. La integridad de
las poseen, en lo fundamental, dos mecanismos diferentes para las membranas nucleares se rompe primero mecánicamente, a
lograr el mismo resultado: centrosoma-dependiente y centroso- medida que se rasgan agujeros en la envoltura nuclear por las
ma-independiente. Estudios recientes han indicado que ambas moléculas de dineína citoplásmica asociadas con la membrana
vías para la formación del huso operan simultáneamente en la externa. El destino posterior de la porción membranosa de la
misma célula, y que incluso las células con centrosomas funciona- envoltura nuclear ha sido objeto de controversia. Según la visión
les nuclean una fracción significativa de sus microtúbulos de hu- clásica, las membranas nucleares se fragmentan en una pobla-
so en los cromosomas. ción de pequeñas vesículas que se dispersan por toda la célula
mitótica. Alternativamente, las membranas de la envoltura nu-
La disolución de la envoltura nuclear y la clear se pueden absorber en las membranas del ER.
partición de los organelos citoplásmicos Algunos de los organelos membranosos del citoplasma per-
manecen relativamente intactos a través de la mitosis; estos inclu-
En la mayoría de las células eucarióticas el huso mitótico se en- yen las mitocondrias, lisosomas y peroxisomas, así como los clo-
sambla en el citoplasma, y los cromosomas se compactan en el roplastos de la célula vegetal. En los últimos años se ha generado
nucleoplasma. La interacción entre el huso y los cromosomas se un debate considerable sobre el mecanismo por el cual el comple-
hace posible por la ruptura de la envoltura nuclear al final de la jo de Golgi y el retículo endoplásmico se dividen durante la mito-
profase. Los tres componentes principales de la envoltura nu- sis. Según un punto de vista, el contenido del complejo de Golgi
clear —los complejos de poro nuclear, la lámina nuclear y las se incorpora en el ER durante la profase, y deja de existir breve-
mente como un organelo diferenciado. Según un punto de vista
alternativo, la membrana de Golgi se fragmenta para formar una
población diferenciada de pequeñas vesículas que se encuentran
+ + repartidas entre las células hijas. Un tercer punto de vista, basado
+ + en lo esencial en estudios en algas y protistas, considera todo el
+
+ complejo de Golgi dividido en dos partes, y cada célula hija recibe
+
_ la mitad de la estructura original. En última instancia, podemos
+ aprender que los diferentes tipos de organismos de células utili-
_ zan distintos mecanismos de herencia de Golgi. Nuestras ideas
Proteína
+
sobre el destino del ER también han cambiado. Estudios recientes
motora _ en células de mamíferos cultivadas, vivas, sugieren que la red ER
_ permanece relativamente intacta durante la mitosis. Este punto
_
+ de vista desafía los primeros estudios, realizados mayormente so-
FIGURA 14-19 Formación de un polo de huso en ausencia de centroso- bre huevos y embriones, que sugirieron que el ER experimenta
mas. En este modelo cada proteína motora tiene múltiples cabezas, que una extensa fragmentación durante la profase.
están unidas a diferentes microtúbulos. El movimiento de estas proteínas
motoras provoca que los extremos menos de los microtúbulos converjan
para formar un polo diferenciado del huso. Se cree que este tipo de me-
canismo facilita la formación de polos de huso en ausencia de centroso- REPASO
mas, pero también puede desempeñar un papel cuando los centrosomas
están presentes. 1. ¿De qué forma los eventos de la profase mitótica preparan las
Fuente: AA Hyman y E Karsenti. Cell 1996;84:406; con permiso de Cell
cromátidas para una separación posterior en la anafase?
Press. Cell by Cell Press. Reproducida con permiso de Cell Press en el for- 2. ¿Cuáles son algunas de las actividades del cinetocoro durante
mato de reutilización en un libro/libro de texto vía Copyright Clearance la mitosis?
Center.
 559
14.8 Prometafase
La disolución de la envoltura nuclear marca el inicio de la segun-
da fase de la mitosis, la prometafase, durante la cual se comple-

14.8 • Prometafase
ta el ensamblaje del huso mitótico, y los cromosomas se mueven
a su posición en el centro de la célula. La siguiente discusión
proporciona una imagen generalizada de los pasos de la prome-
tafase; se han reportado muchas variaciones en estos eventos.
Al comienzo de la prometafase los cromosomas compactados
se dispersan por el espacio que era la región nuclear (FIGU-
RA 14-20a). A medida que los microtúbulos del huso penetran en
la región central de la célula, los extremos libres (+) de los micro-
túbulos se ven crecer y contraerse de forma dinámica, como si
estuvieran “buscando” un cromosoma. No es seguro si la búsque-
da es completamente aleatoria, ya que la evidencia sugiere que
los microtúbulos pueden crecer preferentemente hacia un sitio
que contiene cromatina. Esos microtúbulos que entran en contac-
to con un cinetocoro son “capturados” y estabilizados. a)
Un cinetocoro por lo general hace contacto inicial con la pa-
red lateral de un microtúbulo en lugar de con su extremo (paso 1,
figura 14-20b). Una vez que se produce el contacto inicial, algunos
cromosomas se mueven activamente a lo largo de la pared del
microtúbulo, impulsados ​​por proteínas motoras ubicadas en el
cinetocoro. Sin embargo, pronto el cinetocoro tiende a asociarse
de manera estable con el extremo (+) de uno o más microtúbulos
del huso de uno de sus polos (paso 2). Un cromosoma que se une Adjunto sintélico 4
(sin tensión) Tensión aplicada
a los microtúbulos de un solo polo del huso representa una etapa
por microtúbulos
intermedia inestable en el curso de la prometafase. Eventualmente,
el cinetocoro sin unir en la cromátida hermana captura sus pro-
pios microtúbulos del polo opuesto del huso (paso 3). 3a

La evidencia reciente ha demostrado que los microtúbulos

también pueden ser nucleados a través de una vía basada en la Cromosoma
cromatina. Estos microtúbulos crecen desde el cromosoma me- biorientado
3 (bajo tensión)
diante la incorporación de subunidades de tubulina proximales a
la cromatina, y una vez ensamblados se incorporan al huso mitó-
tico. La nucleación de microtúbulos a partir de sus lados también
se ha observado recientemente. Todos estos mecanismos contri- 1
buyen a la alta densidad de microtúbulos dentro del huso, lo que
ayuda a asegurar que las dos cromátidas hermanas de cada cro- 2

mosoma mitótico finalmente se conecten por sus cinetocoros a

los microtúbulos que se extienden desde los polos opuestos. Las
observaciones en las células vivas indican que los cromosomas
prometafase asociados con los microtúbulos del huso no se mue-
ven directamente al centro del huso, sino más bien oscilan ade-
lante y atrás tanto en la dirección polo como en la antipolo. En
última instancia, los cromosomas de una célula de prometafase se
mueven mediante un proceso denominado congresión hacia el
centro del huso mitótico, a medio camino entre los polos (paso 4,
figura 14-20b). Las fuerzas requeridas para los movimientos cro-
mosómicos durante la prometafase son generadas por las proteí-
nas motoras asociadas con ambos; los cinetocoros y los brazos de
los cromosomas [representados en la figura 14-33a) y discutidos
en la sección anterior]. La FIGURA 14-21 muestra las consecuen-
cias de una deficiencia de la proteína motora acromosómica, cuya
actividad empuja al cromosoma lejos de los polos.
La dinámica de los microtúbulos también realiza un papel
clave para facilitar los movimientos cromosómicos durante la
prometafase. A medida que los cromosomas convergen hacia el
centro del huso mitótico, se acortan los microtúbulos más largos
unidos a un cinetocoro, mientras que los microtúbulos más cor-
tos unidos al cinetocoro hermano se alargan. Se cree que estos
cambios en la longitud de los microtúbulos se rigen por diferen-
cias en la fuerza de tracción (tensión) en los dos cinetocoros her-
manos.
Cromosoma
monoorientado
(sin tensión)
b)
FIGURA 14-20 Prometafase a) Microfotografía de fluorescencia de una
célula cultivada de pulmón del anfibio newt en la etapa de prometafase
temprana de la mitosis, justo después de que se ha roto la envoltura nu-
clear. Los microtúbulos del huso mitótico ahora pueden interactuar con los
cromosomas. El huso mitótico aparece en verde después del marcaje con
un anticuerpo monoclonal contra la tubulina, mientras que los cromoso-
mas aparecen en azul después del marcaje con un tinte fluorescente. b)
Vista esquemática de algunas de las etapas sucesivas de las interaccio-
nes entre microtúbulos de los cromosomas durante la prometafase. En el
paso 1, un cinetocoro ha hecho contacto con la pared lateral de un micro-
túbulo y es capaz de utilizar motores unidos a cinetocoros para deslizarse
en cualquier dirección a lo largo del microtúbulo. En el paso 2, un cromo-
soma se ha unido al extremo + de un microtúbulo de un polo del huso
(una adición sobrefinal que forma un cromosoma monoorientado). En el
paso 3, el cromosoma se ha adjuntado en una orientación sobrefinal de
los microtúbulos de ambos polos (formando un cromosoma bioorientado).
En el paso 4, el cromosoma biorientado se ha movido al centro de la célu-
la y se convertirá en parte de la placa metafásica. Los cromosomas en es-
ta etapa están bajo tensión (como lo indica el espacio entre las cromáti-
das) debido a las fuerzas de tracción contrarias, ejercidas por los
microtúbulos de los polos opuestos. El cromosoma en el paso 3a tiene
ambos cinetocoros unidos a microtúbulos del mismo polo del huso. Esta
conexión sintélica anormal se trata en la página 566.
Fuente: a) Cortesía de Alexey Khodjakov, Wadsworth Center, NY.
 560
CAPÍTULO 14 • División celular
a)
FIGURA 14-21 La consecuencia de la falta de una proteína motora en la
alineación del cromosoma durante la prometafase. La micrografía supe-
rior muestra un huso mitótico que se ha ensamblado en un extracto com-
pleto de huevo de rana. La micrografía inferior muestra un huso mitótico
que se ha ensamblado en un extracto de huevo de rana que se ha agota-
do de una proteína relacionada con una cinesina particular llamada Kid,
que está presente a lo largo de los brazos de los cromosomas de la pro-
metafase. En ausencia de esta proteína motora, los cromosomas fracasan
en alinearse en el centro del huso, y en su lugar se encuentran estirados
a lo largo de los microtúbulos y agrupados cerca de los polos.
Normalmente la Kid proporciona la fuerza para alejar a los cromosomas
de los polos (véase figura 14-33a).
Fuente: Celia Antonio, et al. Cell 2000;4(102), portada; con permiso de
Elsevier. Cortesía de Isabelle Vernos.
El acortamiento y alargamiento de los microtúbulos se produ-
ce, en lo esencial, por la pérdida o ganancia de las subunidades
en el extremo (+) del microtúbulo (FIGURA 14-22). Es de destacar
que esta actividad dinámica ocurre mientras que el extremo (+)
de cada microtúbulo permanece unido a un cinetocoro.
Eventualmente cada cromosoma se mueve en una posición a
lo largo de un plano en el centro del huso, de modo que los mi-
crotúbulos de cada polo son equivalentes en longitud. El movi-
miento de un cromosoma errático, desde un sitio periférico cerca
de uno de los polos al centro del huso mitótico durante la prome-
tafase, se muestra en la serie de fotos en la FIGURA 14-23.
REPASO
1. Describa el movimiento de los cromosomas durante la prome-
tafase. ¿Qué fuerzas causan este movimiento?
Adición
rápida de Pérdida
Despolime- subunidades rápida de Despolime-
rización tubulina subunidades rización
tubulina
lenta lenta
Polo Polo
Cinetocoros
Despolimerización Despolimerización
lenta lenta
Polimerización Polimerización
lenta lenta
Polo Polo
FIGURA 14-22 Comportamiento de los microtúbulos durante la forma-
ción de la placa metafásica. Al inicio el cromosoma está conectado a mi-
crotúbulos de polos opuestos, que pueden ser muy diferentes en longi-
tud. A medida que continúa la prometafase, este desequilibrio se corrige
como resultado del acortamiento de los microtúbulos de un polo, debido
a la pérdida rápida de subunidades de tubulina en el cinetocoro, y al alar-
gamiento de los microtúbulos del polo opuesto a causa de la rápida adi-
ción de subunidades de tubulina en el cinetocoro. Estos cambios se su-
perponen sobre una polimerización y una despolimerización mucho más
lentas, aparentes en el dibujo inferior, que ocurren continuamente durante
la prometafase y la metafase, lo que hace que las subunidades del micro-
túbulo se muevan hacia los polos en un proceso conocido como flujo de
microtúbulos.
14.9 Metafase
Una vez que todos los cromosomas se alinean en el ecuador del
huso —con una cromátida de cada cromosoma conectada por su
cinetocoro a los microtúbulos de un polo, y su cromátida herma-
na conectada por su cinetocoro a los microtúbulos del polo
opuesto— la célula ha alcanzado la metafase (FIGURA 14-24). El
plano de alineación de los cromosomas en la metafase se denomi-
na placa metafásica. El huso mitótico de la célula en metafase con-
tiene una matriz altamente organizada de microtúbulos, ideal
para la tarea de separar las cromátidas duplicadas situadas en el
centro de la célula. De forma funcional y espacial, los microtúbu-
los del eje metafásico de una célula animal se pueden dividir en
tres grupos (figura 14-24):
1. Microtúbulos astrales, que se irradian hacia afuera desde el
centrosoma hacia la región fuera del cuerpo del huso. Ayudan
a ubicar el aparato de huso en la célula y pueden ayudar a
determinar el plano de la citocinesis.
2. Microtúbulos cromosómicos (del cinetocoro) que se extienden
entre el centrosoma y los cinetocoros de los cromosomas. En
las células de mamíferos, cada cinetocoro está unido a un haz
de 20-30 microtúbulos que forma una fibra de huso (o fibra k).
Durante la metafase, los microtúbulos cromosómicos ejercen
una fuerza de tracción sobre los cinetocoros. Como resultado,
 los cromosomas se mantienen en el plano ecuatorial median- coro, y causan oscilaciones de los cromosomas situados en la 561
te una contienda entre las fuerzas de tracción ejercidas por las placa metafásica. Durante la anafase se requieren los microtú-
fibras del huso cromosómico desde los polos opuestos. Estas bulos cromosómicos para el movimiento de los cromosomas
fuerzas de tracción generan deformaciones dentro del cineto- hacia los polos.

14.9 • Metafase
A B C

D E F

FIGURA 14-23 La contienda de un cromosoma durante la prometafase y su movimiento hacia la placa metafásica. Esta serie de fotografías tomadas
de una grabación de video muestra los movimientos de los cromosomas de una célula pulmonar newt por un periodo de 100 segundos durante la prome-
tafase. Aunque la mayoría de los cromosomas de la célula estaban casi alineados en la placa metafásica al comienzo de la secuencia, uno de los cromo-
somas (flecha) había fracasado en unirse a las fibras del huso de ambos polos. El cromosoma indeciso se ha unido a las fibras del huso de los polos
opuestos en B, y luego se mueve hacia el ecuador del huso con velocidad variable, hasta que alcanza una posición estable en F. La posición de un polo
está indicada por la punta de flecha en A.
Fuente: Stephen P Alexander y Conly L Rieder. J Cell Biol 1991;113:807, fig. 1. Reproducida con permiso de Rockefeller University Press. Cortesía de Conly
L Rieder.

Microtúbulos de huso astral Microtúbulos de huso astral

Centríolo Cromosomas Centríolo

Pericentriolar material Fibras de huso cromosómicas (cinetocoro) Microtúbulos de huso polar Material pericentriolar

FIGURA 14-24 El huso mitótico de una célula animal. Cada polo del huso contiene un par de centríolos, rodeados por material amorfo pericentriolar, don-
de los microtúbulos están nucleados. Son evidentes tres tipos de microtúbulos de huso —microtúbulos de huso astrales, cromosómicos y polares— y sus
funciones se describen en el texto. Todos los microtúbulos del huso, que pueden ser miles, tienen sus extremos (–) apuntando hacia el centrosoma.
Aunque no se muestra aquí, los husos también pueden contener microtúbulos más cortos que no hacen contacto con un cinetocoro o con un polo de
huso.
 562 3. Microtúbulos polares (o interpolares) que se extienden desde el
centrosoma más allá de los cromosomas. Los microtúbulos
polares de un centrosoma se superponen con sus contrapar-
tes del centro opuesto. Los microtúbulos polares forman un
CAPÍTULO 14 • División celular
cesto estructural que mantiene la integridad mecánica del
huso.
Cuando uno observa con atención películas o videos de la
mitosis, la metafase aparece como una etapa durante la cual
la célula hace una pausa durante un breve tiempo, como si to-
das las actividades mitóticas se detuvieran repentinamente. Sin
embargo, el análisis experimental revela que la metafase es un
periodo donde ocurren eventos importantes.
Aunque no hay un cambio obvio en la longitud de los micro-
túbulos cromosómicos mientras los cromosomas se alinean en la
placa metafásica, los estudios que usan tubulina marcada por
fluorescencia indican que los microtúbulos existen en un estado
altamente dinámico (véase video de asesoría experimental de este
capítulo: “Microscopía fluorescente de las células vivas para aprender
más sobre la microscopía fluorescente”). Las subunidades se pier-
den rápidamente y se añaden a los extremos positivos de los mi-
crotúbulos cromosómicos, aunque estos extremos están unidos al
cinetocoro. Por tanto, el cinetocoro no actúa como una tapa al
final de los microtúbulos, bloqueando la entrada o salida de las
subunidades terminales, sino que es el sitio de actividad dinámi-
ca. Debido a que se agregan más subunidades al extremo positivo
que las que se pierden, hay una adición neta de subunidades al
cinetocoro. Mientras tanto, los extremos negativos de los micro-
túbulos experimentan una pérdida de energía, y así las subunida-
des se mueven a lo largo de los microtúbulos cromosómicos des-
de el cinetocoro hacia el polo. Este flujo hacia el polo de las
Flujo de tubulina Flujo de tubulina
Flujo de tubulina Flujo de tubulina
FIGURA 14-25 Flujo de tubulina a través de los microtúbulos del huso
mitótico en la metafase. Aunque los microtúbulos aparecen estacionarios
en esta etapa, la inyección de subunidades de tubulina marcadas con
fluorescencia indica que los componentes del huso están en un estado di-
námico de flujo. Las subunidades se incorporan preferentemente en los
cinetocoros de los microtúbulos cromosómicos y en los extremos ecuato-
riales de los microtúbulos polares, y se pierden preferentemente desde
los extremos negativos de los microtúbulos en la región de los polos. Las
subunidades de tubulina se mueven a través de los microtúbulos del huso
metafásico a una velocidad de aproximadamente 1 μm/min.
subunidades de tubulina en un huso mitótico está indicado en el
experimento ilustrado en la FIGURA 14-25. La pérdida de las su-
bunidades de tubulina en los polos probablemente se debe a un
miembro de la familia de proteínas motoras cinesina-13, cuya
función es promover la despolimerización de los microtúbulos en
vez del movimiento (p. 317).
REPASO
1. Describa el desempeño de los microtúbulos astrales, cineto-
coros y polares en el huso mitótico.
14.10 Anafase
La anafase comienza cuando las cromátidas hermanas de cada
cromosoma se separan y comienzan su movimiento hacia los po-
los opuestos.
El papel de la proteólisis en la
progresión a través de la mitosis
Hemos visto lo importante que resulta que las actividades especí-
ficas tengan lugar en su orden apropiado durante todo el ciclo
celular. Este ordenamiento depende en gran medida de la des-
trucción selectiva de las proteínas reguladoras del ciclo celular en
instantes precisos del ciclo. Antes se señaló que dos complejos
multiproteicos distintos, el SCF y el APC, agregan ubiquitina a
proteínas en diferentes etapas del ciclo celular, haciéndolas un
objetivo para la destrucción por un proteosoma. Los periodos du-
rante el ciclo celular en los que los complejos SCF y APC están
activos se muestran en la FIGURA 14-26a). Como se ilustra en la
figura, el SCF actúa principalmente durante la interfase. Por el
contrario, el complejo promotor de anafase, o APC (anaphase promo-
ting complex), desempeña un papel clave en la regulación de los
eventos que ocurren durante la mitosis. El APC contiene cerca de
una docena de subunidades centrales, además de una “proteína
adaptadora” que desempeña un papel clave en la determinación
de cuáles proteínas sirven como sustrato del APC. Dos versiones
alternativas de esta proteína adaptadora —Cdc20 y Cdh1— deter-
minan la selección del sustrato durante la mitosis. Los complejos
APC que contienen uno u otro de estos adaptadores se conocen
dc20
como APCC y APCCdh1 (figura 14-26a).
dc20
El APCC se activa antes de la metafase (figura 14-26a) y
ubiquitina, un inhibidor clave de la anafase llamado securina, de-
nominado así porque asegura la unión entre las cromátidas her-
manas. La ubiquitinación y destrucción de la securina al final
de la metafase libera una proteasa activa llamada separasa. En-
tonces la separasa divide la subunidad Scc1 de la molécula de
cohesina que mantiene juntas las cromátidas hermanas (figura
14-26b). La división de la cohesina activa la separación de las cro-
mátidas hermanas para marcar el inicio de la anafase. El apoyo
experimental para el papel de la cohesina en el mantenimiento de
la unión de cromátidas hermanas proviene de estudios en los que
se han inyectado enzimas proteolíticas en células que se habían
detenido en la metafase. La división de la cohesina por tales en-
zimas conduce rápidamente a la separación de cromátidas, y a su
movimiento tipo anafase hacia los polos.
Casi al final de la mitosis, la Cdc20 está inactiva y el adapta-
dor alterno Cdh1 toma el control de la selección del sustrato del
APC (figura 14-26a). Cuando el Cdh1 se asocia con el APC, la
enzima finaliza la ubiquitinación de la ciclina B que se inició con
dc20
el APCC . La destrucción de la ciclina conduce a una caída
precipitada de la actividad de la Cdk mitótica (ciclina B-Cdk1) y a
la progresión de la célula fuera de la mitosis a la fase G1 del si-
guiente ciclo celular. La importancia de la degradación de proteí-
nas en la regulación de los eventos de mitosis y la reentrada de
células en el G1 se revela mejor con el uso de inhibidores (FI- dades normales y continuará a través de la mitosis y la citocinesis. 563
GURA 14-27). Si se previene la destrucción de la ciclina B con un La finalización de la mitosis requiere claramente el cese de la ac-
inhibidor del proteosoma, las células permanecen detenidas en tividad de la Cdk1 (ya sea por la destrucción normal de su activa-
una etapa tardía de la mitosis. Si dichas células que se detienen dor de ciclina o por inhibición experimental). Quizás el hallazgo

14.10 • Anafase
en la mitosis se tratan posteriormente con un compuesto que in- más sorprendente de todos se obtiene cuando las células inhibi-
hibe la actividad cinasa de la Cdk1, la célula volverá a sus activi- das por proteosomas e inhibidas por Cdk1, que ya han salido de

Actividades APC
Cdh1 APC
SCF/APC

SAC Cdh-1
SCF Cdc20
APCCdc20
Pro Meta Ana Telo Time
Fase del
ciclo
G1 S G2 M Securina Ciclinas mitóticas
celular

Estado del
cromosoma Cohesina
G1
Metafase Anafase
a) b)

FIGURA 14-26 Actividades del SCF y APC durante el ciclo celular. El SCF y el APC son complejos multisubunidad que ubiquitinan sustratos, lo que lleva a
su destrucción por proteosomas. a) El SCF es activo principalmente durante la interfase, mientras que el APC (complejo promotor de anafase) está activo
durante la mitosis y el G1. Se indican dos versiones diferentes del APC. Estos dos APC difieren en que contienen una proteína adaptadora Cdc20 o Cdh1,
Cdc20
que altera los sustratos reconocidos por la APC. El APC está activo temprano en la mitosis, en un momento en que la Cdh1 se inhibe por la fosforila-
Cdh1
ción mediada por la Cdk1. Cuando la actividad de la Cdk1 cae bruscamente en la mitosis, se activa la Cdh1, lo que lleva a la activación del APC . La eti-
Cdc20
queta SAC significa punto de control del conjunto del huso, que se trata en la página 566. El SAC evita que APC active la anafase hasta que todos
Cdc20
los cromosomas estén alineados correctamente en la placa metafásica. b) El APC es responsable de la destrucción de proteínas como la securina,
Cdh1
que inhiben la anafase. La destrucción de estos sustratos promueve la transición metafase-anafase. La APC es responsable de unir con ubiquitina pro-
teínas, como las ciclinas mitóticas, que inhiben la salida de la mitosis. La destrucción de estos sustratos promueve la transición mitosis-G1. La actividad del
Cdh1
APC durante el G1 temprano ayuda a mantener la baja actividad de la ciclina-Cdk (figura 14-8) requerida para ensamblar los complejos de prerreplica-
ción en los orígenes de la replicación (figura 13-20). (Aunque no se discute aquí, la activación de fosfatasas que eliminan los grupos fosfato agregados
por la Cdk1 también desempeña un papel importante en la conducción de los eventos que ocurren durante las últimas etapas de la mitosis y la reinser-
ción en G1; véase Nature Revs Mol Cell Biol 2011;12:469).
Fuente: a) J-M Peters. Curr Opin Cell Biol 1998;10:762; Copyright 1998. Current Opinion in Cell Biology de Elsevier Ltd. Reproducida con permiso de
Elsevier Ltd en el formato de reutilización en un libro/libro de texto vía Copyright Clearance Center. Véase también Nature Revs Mol Cell Biol 2006;7:650.

FIGURA 14-27 Demostración experimental de la importancia de la proteólisis en la salida irreversible de una célula de la mitosis. Esta ilustración
muestra cuadros del video de una célula que había sido detenida en mitosis por la presencia de un inhibidor del proteosoma (MG132). En el momento 0
un inhibidor de Cdk1 (flavopiridol) se añadió al medio, lo que provocó que la célula completara la mitosis e iniciara la citocinesis. A los 25 minutos, la célu-
la se lavó libre del inhibidor de Cdk1. Debido a que la célula todavía contenía ciclina B (que normalmente habría sido destruida por los proteosomas), la
célula volvió a entrar en la mitosis y progresó a la metafase observada en los últimos cinco cuadros del video. La fila superior muestra imágenes de con-
traste de fase de la célula en varios instantes, y la fila inferior muestra las correspondientes micrografías de fluorescencia con los tiempos indicados. El vi-
deo 3, del cual se tomaron estos fotogramas, se puede ver aquí: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1513549/bin/NIHMS10478-supplement-
Video003.mov. La barra en la imagen inferior derecha es igual a 10 μm.
Fuente: Tamara A Potapova, et al. Nature 2006;440:954 © 2006. Reimpresa con permiso de Macmillan Publishers Limited. Cortesía de Gary J Gorbsky.
 564 la mitosis, se lavan libres del inhibidor de Cdk1 (figura 14-27).
Tales células, que ahora contienen tanto ciclina B como Cdk1 ac-
tivo, en realidad progresan en la dirección inversa y regresan ha-
cia la mitosis. Esta inversión se caracteriza por la compactación
CAPÍTULO 14 • División celular
tocoros) de los microtúbulos cromosómicos durante la anafase
(figura 14-28b). Las subunidades también se pierden de los extre-
mos (–) de estos microtúbulos, como resultado del continuo flujo
hacia el polo de las subunidades de tubulina que se producen

de los cromosomas, la rotura de la envoltura nuclear, el ensambla-
je de un huso mitótico y el movimiento de los cromosomas de
vuelta a la placa metafásica, como se muestra en la figura 14-27.
Todos estos eventos se desencadenan por la reactivación inapro-
piada de la actividad de la Cdk1 mediante la eliminación de su
inhibidor. Esta búsqueda ilustra de forma espectacular la impor-
tancia de la proteólisis para mover el ciclo celular normal en una
dirección única e irreversible.
Los eventos de la anafase
Todos los cromosomas de la placa metafásica se dividen en sincro-
nía al inicio de la anafase, y las cromátidas (ahora denominadas
cromosomas porque ya no están unidas a sus hermanas) inician su
migración hacia los polos (véase figura 14-11). Como cada cromo-
soma se mueve durante la anafase, su centrómero se ve en su bor-
de de ataque con los brazos del cromosoma detrás (FIGURA 14-28a).
El movimiento de los cromosomas hacia los polos opuestos es muy
lento en comparación con otros tipos de movimientos celulares,
aproximadamente 1 μm por minuto, un valor calculado en una
investigación de mitosis que equivale a un viaje desde Carolina del
Norte a Italia que demoraría casi 14 millones de años. La baja ve-
locidad del movimiento cromosómico asegura que los cromoso-
mas se segreguen con precisión y sin enredarse. Las fuerzas que
se cree que potencian el movimiento cromosómico durante la ana-
fase se discuten en la siguiente sección.
El movimiento hacia los polos de los cromosomas se acompa-
ña de un acortamiento obvio de los microtúbulos cromosómicos.
Se ha apreciado durante mucho tiempo que las subunidades de
tubulina se pierden a partir de los extremos (+) (basados en
​​ cine-
durante la prometafase y metafase (figuras 14-22 y 14-25). La
principal diferencia en la dinámica de los microtúbulos entre la
metafase y la anafase es que las subunidades se agregan a los
extremos (+) de los microtúbulos durante la metafase, mantenien-
do constante la longitud de las fibras cromosómicas (figura 14-
25), mientras que las subunidades se pierden de los extremos (–)
durante la anafase, lo que produce un acortamiento de las fibras
cromosómicas (figura 14-28b). Se cree que este cambio en el com-
portamiento en los extremos (+) de los microtúbulos se desenca-
dena por la pérdida de tensión sobre los cinetocoros tras la sepa-
ración de las cromátidas hermanas.
El movimiento de los cromosomas hacia los polos se conoce
como anafase A, para distinguirlo de un movimiento separado
—pero simultáneo— llamado anafase B, en el que los dos polos
del huso se separan más. El alargamiento del huso mitótico du-
rante la anafase B se acompaña de la adición neta de subunidades
de tubulina a los extremos (+) de los microtúbulos polares. Por
tanto, las subunidades se pueden agregar con preferencia a los
microtúbulos polares, y eliminarse de los microtúbulos cromosó-
micos al mismo tiempo, en diferentes regiones del mismo eje mi-
tótico (figura 14-28b).
Fuerzas requeridas para los movimientos
de los cromosomas en la anafase
A principios de la década de 1960 Shinya Inoué, del Laboratorio
de Biología Marina en Woods Hole, propuso que la despolimeriza-
ción de los microtúbulos cromosómicos durante la anafase no era
una simple consecuencia del movimiento cromosómico, sino la
causa de ello. Inoué sugirió que la despolimerización de los micro-

Comienza la anafase

a)

FIGURA 14-28 El huso mitótico y los cromosomas en la anafase. a)

Microfotografía de fluorescencia de una célula en anafase tardía,
que muestra los brazos altamente compactados de los cromosomas
en esta etapa. Se ve que los brazos se arrastran detrás, mientras los
cinetocoros guían el camino hacia los polos respectivos. Las fibras
del huso cromosómico en esta etapa de anafase tardía son extrema- b) La anafase continúa
damente cortas, y son menos evidentes entre los bordes anteriores
de los cromosomas y los polos. Los microtúbulos del huso polar son
visibles en la interzona entre los cromosomas separadores. Se cree que los movimientos relativos de los microtúbulos polares son responsables de cau-
sar la separación de los polos que ocurren durante la anafase B. b) La dinámica de los microtúbulos durante la anafase. Las subunidades de tubulina se
pierden desde ambos extremos de los microtúbulos cromosómicos, lo que produce un acortamiento de las fibras cromosómicas y el movimiento de los
cromosomas hacia los polos durante la anafase A. Mientras tanto, las subunidades de tubulina se agregan a los extremos de los microtúbulos polares,
que también se deslizan uno sobre otro, lo que conduce a la separación de los polos durante la anafase B.
Fuente: a) Nasser Rusan, UNC Chapel Hill, 2005 Olympus Bioscapes Competition.
 565
a 0 b 51 c 75

14.10 • Anafase
FIGURA 14-29 Demostración experimental de que la despolimerización de microtúbulos puede mover los cromosomas unidos in vitro. La estructura
en la parte inferior izquierda es el remanente de un protozoo lisado. En presencia de tubulina, los cuerpos basales en la superficie del protozoo se usa-
ron como sitios para el inicio de los microtúbulos, que crecían hacia afuera en el medio. Una vez que se formaron los microtúbulos, se introdujeron cro-
mosomas mitóticos condensados en la cámara, y se les permitió unirse a los extremos de los microtúbulos. La flecha muestra un cromosoma unido al ex-
tremo de un haz de microtúbulos. La concentración de tubulina soluble dentro de la cámara se disminuyó por dilución, lo que provocó la
despolimerización de los microtúbulos. Como se muestra en esta secuencia de video, la contracción de los microtúbulos fue acompañada por el movi-
miento del cromosoma adjunto. La barra es igual a 5 μm.
Fuente: Martine Coue, Vivian A Lombillo, y J Richard Mcintosh. J Cell Biol 1991;112:1169, fig. 3. Reproducida con permiso de Rockefeller University Press.

túbulos que comprende una fibra de huso podría generar suficien-
te fuerza mecánica para tirar de un cromosoma hacia adelante.
El primer soporte experimental para el modelo de la fuerza de
desensamblaje provino de estudios donde los cromosomas expe-
rimentaron un movimiento considerable como resultado de la
despolimerización de los microtúbulos adheridos. Un ejemplo de
uno de estos experimentos se muestra en la FIGURA 14-29. En
este caso, el movimiento de un cromosoma unido a microtúbulos
(flecha) ocurre in vitro, después de la dilución del medio. La dilu-
ción reduce la concentración de tubulina soluble, que a su vez
promueve la despolimerización de los microtúbulos. Este tipo de
experimentos, así como los estudios de medición directa de la
fuerza, indican que la despolimerización de microtúbulos por sí
sola puede generar fuerza suficiente para atraer a los cromosomas
a través de una célula.
La FIGURA 14-30 representa un modelo de los eventos pro-
puestos a ocurrir durante el movimiento cromosómico en la ana-
fase en una célula de vertebrado. Como se indica en la figura 14-
28b, los microtúbulos que comprenden las fibras del huso
cromosómico experimentan durante la anafase una despolimeri-
zación en ambos extremos (+) y (–). Estas actividades combinadas
guían el movimiento de los cromosomas hacia el polo. La despo-
limerización en los extremos de los microtúbulos (–) sirve para
transportar los cromosomas hacia los polos, debido al flujo hacia
los polos que recuerda a una persona que viaja en una banda
sinfín o estera de aeropuerto. La despolimerización en los extre-
mos de los microtúbulos (+) causa que el túbulo se enrolle mien-
tras aún arrastra los cromosomas. Algunas células dependen más
del flujo hacia adelante, otras dependen más de la despolimeriza-
ción del extremo (+). Los estudios de células animales en la ana-
fase han revelado que tanto el extremo (+) como el final de las
fibras cromosómicas son sitios en los que se localizan las cinesi-
nas despolimerizantes (miembros de la familia cinesina-13, p.
567). Estas despolimerasas están indicadas en los extremos

Complejo Ndc80
Polo de huso

Microtúbulo de Flujo de microtúbulos

fibra cromosómica hacia el polo

Despolimerasa Despolimerasa

Placa exterior de cinetocoro

FIGURA 14-30 Mecanismo propuesto para el movimiento de cromosomas durante la anafase en células animales. En el modelo representado aquí el
movimiento cromosómico hacia los polos se lleva a cabo mediante una combinación de flujo hacia los polos —que mueve el cuerpo de cada microtúbulo
hacia uno de los polos— y la despolimerización simultánea del microtúbulo en ambos extremos. Las cinesinas despolimerizantes de la familia cinesina-13
se han localizado en los extremos (+) (cinetocoro) y – (polar) de los microtúbulos cromosómicos, y se postula que son responsables de la despolimeriza-
ción en sus sitios respectivos. En este modelo el complejo de proteína Ndc80, de la placa de cinetocoro externo, actúa como el dispositivo que acopla la
despolimerización de microtúbulos a la segregación cromosómica. La fuerza requerida para el movimiento del cromosoma la proporciona la liberación de
energía de tensión, a medida que el microtúbulo se despolimeriza. La energía liberada es utilizada por los extremos rizados de los protofilamentos despo-
limerizantes para desviar el movimiento de las cabezas unidas del complejo Ndc80 (flecha negra discontinua) hacia el extremo (–) del microtúbulo. Las
proteínas motoras del cinetocoro, como la dineína citoplásmica, también pueden tener un papel generador de fuerzas en el movimiento cromosómico du-
rante la anafase.
 566 opuestos de los microtúbulos de la figura 14-30. Si cualquiera de
estas “despolimerasas” de los microtúbulos se inhibe, la segrega-
ción cromosómica durante la fase anafásica se altera, al menos
parcialmente. Estos hallazgos sugieren que la despolimerización
CAPÍTULO 14 • División celular
mediada por la cinesina ATP-dependiente forma la base para la
segregación cromosómica durante la mitosis.
Una de las preguntas de mayor interés en el campo de la mi-
tosis es el mecanismo mediante el cual los cinetocoros se pueden
aferrar a los finales (+) de los microtúbulos que están perdiendo
subunidades de tubulina. Durante la mitosis se forma un comple-
jo molecular —conocido como la red KMN— en el cinetocoro su-
perior de cada cromosoma. Un componente estructural clave de
la red KMN es un complejo de proteínas conocido como Ndc80;
los complejos Ndc80 están presentes como fibrillas moleculares
que se extienden para formar enlaces relativamente débiles con
un microtúbulo unido justo detrás de su extremo (+). Se estima
que cada microtúbulo se pone en contacto, a su alrededor, con
unas seis a nueve de estas ataduras Ndc80. Varios estudios sugie-
ren que, como se indica en la figura 14-30, las cabezas terminales
de los complejos Ndc80 pueden viajar a lo largo del microtúbulo
hacia su extremo (–), empujadas por los protofilamentos rizados
de la punta de desmontaje. Como resultado, el cromosoma unido
se mueve hacia el polo del huso, mientras es remolcado por la
fibra cromosómica que se contrae.
El punto de control de ensamblaje del huso
Como se discutió en la sección 14.5, las células poseen mecanis-
mos de punto de control que monitorean el estado de los eventos
durante el ciclo celular. Uno de estos puntos de verificación opera
en la transición entre metafase y anafase. El punto de control
del ensamblaje del huso (SAC, spindle assembly checkpoint), co-
mo se le llama, se revela mejor cuando un cromosoma no se ali-
nea correctamente en la placa de la metafase. Cuando esto suce-
de, el mecanismo del punto de control demora el inicio de la
anafase hasta que el cromosoma mal colocado haya asumido su
posición adecuada a lo largo del ecuador del huso. Si una célula
no fuera capaz de posponer la segregación cromosómica, elevaría
en gran medida el riesgo de que las células hijas reciban un nú-
mero anormal de cromosomas (aneuploidía). Esta expectativa se
ha confirmado con la identificación de una serie de niños con
deficiencias heredadas en una de las proteínas del punto de con-
trol del huso. Estos individuos presentan un desorden (denomi-
nado MVA), que se caracteriza por un alto porcentaje de células
aneuploides y un gran aumento del riesgo de desarrollar cáncer.
¿Cómo determina la célula si todos los cromosomas están ali-
neados correctamente en la placa de la metafase? Consideremos
un cromosoma que solo está unido a los microtúbulos de un polo
del huso, que es probablemente la circunstancia del cromosoma
indeciso indicado por la flecha en la figura 14-23a). A través de un
mecanismo que todavía no se conoce bien, los cinetocoros no
ensamblados enlazan un complejo de proteínas que median el
punto de control del ensamblaje del huso. La presencia de estas
proteínas en un cinetocoro no ensamblado envía una señal de “es-
pera” a la maquinaria del ciclo celular, que impide que la célula
continúe la anafase. Una vez que el cromosoma indeciso se adhie-
re a las fibras del huso en ambos polos, y se alinea adecuadamen-
te en la placa metafásica, el complejo de señalización abandona el
cinetocoro, lo que apaga la señal de “espera” y permite que la
célula progrese a la anafase. complejo de proteína móvil que reside en el centrómero durante
La FIGURA 14-31 muestra el huso mitótico de una célula que
se detiene antes de la metafase, debido a un único cromosoma
desalineado. A diferencia de todos los otros cinetocoros en esta
célula, se ve que solo el cromosoma no alineado aún contiene
proteína Mad2, un componente clave del complejo de punto de
control del ensamblaje del huso. Los estudios han demostrado
que la Mad2 puede cambiar entre dos conformaciones: un estado
inactivo (cerrado) y otro activo (abierto). Durante la entrada mitó-
FIGURA 14-31 El punto de control del ensamblaje del huso. Micrografía
de fluorescencia de una célula de mamífero en prometafase tardía, marca-
da con anticuerpos contra la proteína de punto de control del huso Mad2
(rosa) y tubulina de los microtúbulos (verde). Los cromosomas aparecen
azules. Solo se ve que uno de los cromosomas de esta célula contiene
Mad2, y este cromosoma aún no se ha alineado en la placa de la metafa-
se. La presencia de Mad2 en el cinetocoro de este cromosoma es sufi-
ciente para prevenir la iniciación de la anafase.
Fuente: Jennifer Waters, Rey-Huei Chen, Andrew W Murray y ED Salmon.
J Cell Biol 1998;(141), cubierta núm. 5; reproducido con permiso de
Rockefeller University Press.
tica, la Mad2 inactiva se recluta para los cinetocoros a través de
su interacción con la Mad1. La unión a la Mad1 en el cinetocoro
hace que la Mad2 cambie a su conformación activa y comience a
reclutar, activar y liberar moléculas de Mad2 adicionales. Mientras
se encuentra en la conformación activa, la Mad2 es capaz de unir-
se a la APC-activadora Cdc20. Durante el periodo en que la
Cdc20 está unida a la Mad2, los complejos de APC no serían ca-
paces de ubiquitinar el inhibidor anafásico, conservando así to-
das las cromátidas hermanas unidas entre sí por su “pegamento”
cohesina. Cuando el cinetocoro se une a un microtúbulo, el com-
plejo Mad1-Mad2 es echado fuera del cinetocoro, cesando el con-
tinuo reclutamiento y activación de la Mad2.
Está bien establecido que el punto de control del ensamblaje
del huso se activa por la presencia de un cinetocoro no conecta-
do, pero existen otras anomalías cromosómicas que surgen du-
rante la progresión a la metafase que también requieren medidas
correctivas. Por ejemplo, en ocasiones los dos cinetocoros de las
cromátidas hermanas se unirán a los microtúbulos del mismo po-
lo del huso, una condición conocida como un adjunto sintélico
(paso 3a, figura 14-20b). Si no se corrige, un adjunto sintélico es
muy probable que conduzca al movimiento de ambas cromátidas
hermanas a una de las células hijas, dejando a la otra hija despro-
vista de este cromosoma. Es posible que la célula sea alertada de
la presencia de un cromosoma con un adjunto sintélico por la
falta de tensión en los cinetocoros del cromosoma. La tensión se
desarrolla normalmente cuando las cromátidas hermanas son
arrastradas por los microtúbulos desde los polos opuestos del hu-
so (pasos 3-4, figura 14-20b).
Las células pueden corregir los adjuntos sintélicos (y otros ti-
pos de conexiones anormales de microtúbulos) mediante la ac-
ción de una enzima llamada Aurora B cinasa, que es parte de un
la prometafase y la metafase. Entre los sustratos de la Aurora B
cinasa se encuentran varias de las proteínas que se cree que están
implicadas en la unión cinetocoro-microtúbulo, que incluyen
miembros del complejo Ndc80 y la cinesina despolimerasa de la
figura 14-30. Los estudios sugieren que las moléculas de Aurora B
cinasa de un cromosoma unido incorrectamente fosforilan estos
sustratos proteicos, lo que desestabiliza la unión de los microtú-
bulos a ambos cinetocoros. Una vez liberados de sus enlaces, los
cinetocoros de cada cromátida hermana tienen una nueva opor-
tunidad de unirse a los microtúbulos de los polos opuestos del
huso. La inhibición de la Aurora B cinasa, en las células o los ex-
tractos, conduce a la desalineación y la mala segregación de los
cromosomas (véase figura 18-51).
REPASO
1. Describa los eventos que ocurren en una célula durante la
prometafase y durante la anafase.
2. Describa las similitudes y diferencias en la dinámica de los mi-
crotúbulos entre la metafase y la anafase. ¿Cómo se relacio-
nan las diferencias con los movimientos A y B de la anafase?
14.11 Telofase y citocinesis
A medida que los cromosomas se acercan a sus respectivos polos
tienden a acumularse en una masa, lo que marca el comienzo de
la etapa final de la mitosis o telofase (FIGURAS 14-11 y 14-32).
Durante la telofase las células hijas regresan a la condición de
interfase: el huso mitótico se desensambla, la envoltura nuclear se
Surco
(citocinesis)
Envoltura
nuclear
reformándose
FIGURA 14-32 Telofase. Microfotografía electrónica de una sección a tra-
vés de un linfocito humano en la telofase.
Fuente: David M Phillips/Photo Researchers, Inc.
reforma, y los cromosomas se dispersan más y más, hasta que 567
desaparecen de la vista bajo el microscopio. La verdadera parti-
ción del citoplasma en dos células hijas se produce por un proce-
so que se discutirá en breve. Sin embargo, echemos un vistazo
14.11 • Telofase y citocinesis
atrás en primer lugar, y consideremos las proteínas motoras im-
plicadas en varios de los principales movimientos cromosómicos
que tienen lugar durante la mitosis.
Proteínas motoras necesarias para
los movimientos mitóticos
La mitosis se caracteriza por los amplios movimientos de las es-
tructuras celulares. La profase está acompañada por el movimien-
to de los polos del huso a los extremos opuestos de la célula, la
prometafase por el movimiento de los cromosomas al ecuador del
huso, la anafase A por el movimiento de los cromosomas desde
el ecuador del huso hasta sus polos, y la anafase B por la elonga-
ción del huso. Durante la última década se ha identificado una
variedad de diversos motores moleculares, en diferentes ubicacio-
nes de células mitóticas de especies muy diversas. Los motores
implicados en los movimientos mitóticos son principalmente mo-
tores de microtúbulos, que incluyen un número de diferentes
proteínas relacionadas con la cinesina y la dineína citoplásmica.
Algunos de los motores se mueven hacia el extremo (+) del micro-
túbulo, otros hacia el extremo (–). Como se discutió con anterio-
ridad, un grupo de cinesinas no se mueve a ninguna parte, pero
promueve la polimerización de los microtúbulos. Las proteínas
motoras se han localizado en los polos del huso, a lo largo de las
fibras del huso, y dentro de ambos: cinetocoros y brazos de cro-
mosomas. Aunque aún no se pueden extraer conclusiones firmes
sobre las funciones de las proteínas motoras específicas, se sugie-
re una representación general de las funciones de estas moléculas
(FIGURA 14-33):
●● Es probable que las proteínas motoras localizadas a lo largo de
los microtúbulos polares contribuyan manteniendo los polos
separados (figura 14-33a, b).
●● Es probable que las proteínas motoras residentes en los cro-
mosomas sean importantes en los movimientos de los cromo-
somas durante la prometafase (figura 14-33a), en el manteni-
miento de los cromosomas en la placa metafásica (figura
14-33b) y en la separación de los cromosomas durante la ana-
fase (figura 14-33c).
●● Es probable que las proteínas motoras situadas a lo largo de
los microtúbulos polares, superpuestos en la región del ecua-
dor del huso, sean responsables de entrecruzar microtúbulos
antiparalelos y de deslizar uno sobre otro, alargando así el
huso durante la anafase B (figura 14-33c).
Citocinesis
La mitosis logra la segregación de cromosomas duplicados en los
núcleos hijos, pero la célula se divide en dos células hijas median-
te un proceso separado llamado citocinesis. El primer indicio de
citocinesis en la mayoría de las células animales aparece durante
la anafase como una indentación de la superficie celular, en una
banda estrecha alrededor de la célula. A medida que pasa el tiem-
po, la indentación se profundiza para formar un surco que se
mueve hacia adentro, hacia el centro de la célula. El plano del
surco se encuentra en el mismo plano ocupado previamente por
los cromosomas de la placa metafásica, de modo que los dos con-
juntos de cromosomas se dividen finalmente en células diferentes
(como en la figura 14-32). A medida que una célula se convierte
en dos células, se administra una membrana plasmática adicional
a la superficie de la célula, a través de vesículas citoplásmicas que
se fusionan con el surco de división que avanza. En sus últimas
etapas el surco que avanza pasa a través de los remanentes apre-
tados de la porción central del huso mitótico, que forma un puen-
 568 + te citoplásmico entre las células hijas llamado cuerpo central
+ + 3 (FIGURA 14-34a). El paso final de la citocinesis se llama abscisión,
2
+ cuando las superficies del surco de división se fusionan entre sí,
+ + +
dividiendo la célula en dos (figura 14-34b). La abscisión requiere
CAPÍTULO 14 • División celular

la acción de los complejos ESCR —las mismas proteínas responsa-

– bles de separar las vesículas intraluminales que se forman dentro
– –– – –
+ de los endosomas— (p. 301).
–– – – Nuestro concepto actual del mecanismo responsable de la ci-
tocinesis proviene de una propuesta hecha por Douglas Marsland
+ en la década de 1950 conocida como la teoría del anillo contráctil
+ (FIGURA 14-35a). Marsland propuso que la fuerza requerida para
+ +
1 dividir una célula se genera en una banda delgada de citoplasma
contráctil ubicada en la corteza, justo debajo de la membrana plas-
a)
mática del surco. El examen microscópico de la corteza debajo del
+ surco de una célula en corte revela la presencia de un gran núme-
+ + ro de filamentos de actina (figuras 14-35b y 14-36a). Estos filamen-
+ tos ramificados se ensamblan en la corteza celular mediante la
+ acción de una proteína formina (p. 352), que también puede an-
5 – –
–
–– –– –
clar los filamentos a la membrana plasmática que los recubre.
– Intercalados entre los filamentos de actina hay filamentos bi-
– –
– – – polares cortos de miosina, los cuales están compuestos de miosi-
+
na II, como se evidencia por su unión de anticuerpos antimiosina
+
+
+ +
4
b)

7
+ +
+ +
+ + Cuerpo
–
–
– – – central
6 –
– –– – –
–– –
+ +
6

+
+
+ +
c)

FIGURA 14-33 Actividad propuesta de las proteínas motoras durante la

mitosis. a) Prometafase. Las dos mitades del huso mitótico se separan
una de la otra de los polos opuestos, debido a la acción de los motores a)
bipolares (cuatro cabezas) dirigidos al extremo (miembros de la familia ci-
nesina-5). Estos motores se pueden unir por sus cabezas a microtúbulos
antiparalelos de polos opuestos y hacer que se deslicen (paso 1). (Los mo-
tores adicionales asociados con los centrosomas y la corteza no se mues-
tran). Mientras tanto, los cromosomas se han unido a los microtúbulos cro-
mosómicos, y se pueden ver oscilando adelante y atrás a lo largo de los
microtúbulos. En última instancia, los cromosomas se mueven al centro
del eje, a medio camino entre los polos. Los movimientos de los cromoso-
mas hacia el polo están mediados por motores dirigidos al extremo (–) (es
decir, dineína citoplásmica) que residen en el cinetocoro (paso 2). Los mo-
vimientos cromosómicos alejados de los polos están mediados por moto-
res dirigidos a los extremos (es decir, cinesinas) que residen en el cineto-
coro, y especialmente a lo largo de los brazos del cromosoma (paso 3)
(véase figura 14-21). b) Metafase. Las dos mitades del huso mantienen su
separación como resultado de la actividad motora continua dirigida al ex-
tremo (+), asociada con los microtúbulos polares (paso 4). También se sos-
pecha que la actividad motora asociada con el paso 4 promueve el flujo
de subunidades dentro de estos microtúbulos, como se muestra en la fi-
gura 14-25. Se piensa que los cromosomas se mantienen en el plano
ecuatorial mediante la actividad equilibrada de las proteínas motoras que
residen en el cinetocoro, dirigidas al extremo (+) y al extremo (–) (paso 5). b)
c) Anafase. Se cree que el movimiento de los cromosomas hacia los polos
requiere de la actividad de las despolimerasas de cinesina que catalizan FIGURA 14-34 Citocinesis a) Estas células cultivadas de mamíferos están
la despolimerización en los extremos (+) y (–) de los microtúbulos (paso 6). en el último paso de la citocinesis, llamada abscisión, en la cual el surco
La separación de los polos (anafase B) se piensa que es el resultado de la de evacuación atraviesa el cuerpo central, un delgado puente citoplásmi-
actividad continua de los motores bipolares orientados a los extremos de co que se empaqueta con restos de la porción central del huso mitótico.
los microtúbulos polares (paso 7). Los microtúbulos son verdes, la actina es roja y el DNA es azul. b) Este
Fuente: KE Sawin y JM Scholey. Trends Cell Biol 1991;1:122. Trendsin Cell huevo fertilizado de erizo de mar acaba de ser dividido en dos células por
Biology by Elsevier Ltd. Reproducida con permiso de Elsevier Ltd en el for- citocinesis.
mato de reutilización en un libro/libro de texto a través del Copyright Fuente: a) Ahna R Skop, et al. Science 2004;305:61, fig. 1a. Reproducida
Clearance Center. con permiso de AAAS. b) Cortesía de Tryggve Gustafson.
 Filamento
de actina
Filamento de
miosina bipolar
Anillo contráctil
Surco de división
Células hijas
a)
b)
FIGURA 14-35 La formación y operación del anillo contráctil durante la
citocinesis. a) Los filamentos de actina se ensamblan en un anillo en el
ecuador celular. La contracción del anillo, que requiere la acción de la
miosina, causa la formación de un surco que divide la célula en dos. b)
Micrografía confocal fluorescente de un espermatocito de mosca someti-
do a citocinesis al final de la primera división meiótica. Los filamentos de
actina, que se han teñido con la toxina de hongos faloidina, se ven con-
centrados en una banda ecuatorial circular dentro del surco de división.
Fuente: b) Daniel Saul, et al. J Cell Science 2004;117:3893, cubierta núm.
17, cortesía de Julie A Brill, con el permiso de Company of Biologists Ltd. Shinya Inoué. J Cell Biol 1982;94:167, fig. 1. Reproducida con permiso de
http://jcs.biologists.org/content/117/17.cover-expansion
II (FIGURA 14-36b). La importancia de la miosina II en la citocine- 569
sis es evidente por el hecho de que 1) los anticuerpos antimiosina
II causan el cese rápido de la citocinesis cuando se inyectan en
una célula en división (figura 14-36c) y 2) las células que carecen
14.11 • Telofase y citocinesis
de un gen funcional de miosina II llevan a cabo la división nuclear
por mitosis, pero no se pueden dividir normalmente en células
hijas. El ensamblaje de la maquinaria contráctil de actina-miosina
en el plano del futuro surco de división está orquestado por una
proteína G llamada RhoA. En su estado de unión al guanosín
trifosfato GTP la RhoA activa una cascada de eventos, que condu-
cen tanto al ensamblaje de los filamentos de actina como a la ac-
tivación de la actividad motora de la miosina II. Si la RhoA se
agota de las células, o se inactiva, fracasa el desarrollo del surco
de división.
Surco
Surco
a) b)
c)
FIGURA 14-36 Demostración experimental de la importancia de la mio-
sina en la citocinesis. a, b) Localización de la actina y la miosina II en una
Dictyostelium ameba durante la citocinesis, como se demostró mediante
inmunofluorescencia de doble tinción. a) Los filamentos de actina (rojo) se
encuentran tanto en el surco de evacuación como en la periferia de la cé-
lula, donde desempeñan un papel clave en el movimiento celular (sección
9.10). b) La miosina II (verde) se localiza en la línea de división, donde for-
ma parte de un anillo contráctil que abarca el ecuador. c) Un huevo de es-
trella de mar que había sido microinyectado con un anticuerpo contra
miosina de estrella de mar, como se observó bajo luz polarizada (lo que
hace que los husos mitóticos aparezcan más brillantes o más oscuros que
el fondo, debido a la presencia de microtúbulos orientados). Mientras que
la citocinesis ha sido completamente suprimida por los anticuerpos, la mi-
tosis (como lo revelan los husos mitóticos) no se ve afectada.
Fuente: a-b) Cortesía de Yoshio Fukui; c) Daniel P Kiehart, Issei Mabuchi y
Rockefeller University Press.
 570 El mecanismo generador de fuerza que opera durante la cito-
cinesis se cree que es similar a la contracción basada en la actina
y la miosina de las células musculares. De hecho, el surco de cito-
cinesis de una eucariota unicelular primitiva es el probable ante-
CAPÍTULO 14 • División celular

cesor evolutivo de la maquinaria contráctil de las células muscu-

lares animales. Mientras que el deslizamiento de los filamentos
de actina de una célula muscular provoca el acortamiento de la
fibra muscular, el deslizamiento de los filamentos del anillo con-
tráctil tira de la corteza y de la membrana plasmática adjunta
hacia el centro de la célula. Como resultado, el anillo contráctil
contrae la región ecuatorial de la célula, de manera similar a
cuando se tira de las asas de una bolsa de cordón y la abertura se
estrecha.
Por lo general se acepta que la posición del surco de división
está determinada por la posición del eje mitótico anafásico, que a)
induce la activación de la RhoA en un anillo estrecho dentro de
la corteza. Sin embargo, ha habido un debate considerable en
cuanto a cómo se selecciona esta zona particular dentro de la
corteza. Los primeros estudios pioneros en huevos marinos de
invertebrados por Ray Rappaport, del Union College en Nueva
York, mostraron que el anillo contráctil se forma en un plano a
medio camino de los polos de huso, aun si uno de los polos es
desplazado por una microaguja insertada en la célula. Un ejemplo
de la relación entre la posición del plano de división y los polos
del huso se muestra en el experimento de la FIGURA 14-37. Estos
estudios sugieren que el sitio del ensamblaje actina-filamento, y
así el plano de citocinesis, está determinado por una señal que
emana de los polos del huso. Se piensa que la señal viaja de los
polos de huso a la corteza celular a lo largo de los microtúbulos
astrales. Cuando la distancia entre los polos y la corteza se modi- b)
fica experimentalmente, la duración de la citocinesis se puede
alterar espectacularmente (figura 14-37). Los estudios recientes
sugieren que la actividad observada por Rappaport puede ser rea-
lizada por un complejo de proteínas conocido como centralspind-
lin. El centralspindlin, que incluye una proteína tipo cinesina y un
activador de la RhoA, se localiza al final de los terminales (+) de
los microtúbulos antiparalelos en el cuerpo central del huso, don-
de entonces se piensa que activa la RhoA para iniciar la forma-
ción del surco de división.
También se ha observado que un segundo complejo de seña-
les, conocido como el complejo cromosómico de pasajeros (CPC,
chromosomal passenger complex), se acumula en el cuerpo central
del huso, e igualmente se piensa que regula la formación del sur- c)
co de división. Un miembro clave del CPC es la cinasa Aurora B,
FIGURA 14-37 El sitio de la formación del plano de división y el instante
que se discutió previamente como ejecutora de un papel regula- en el cual ocurre la división depende de la posición del huso mitótico.
dor importante en los adjuntos cinetocoro-microtúbulo y otros a) A este huevo de equinodermo se le permitió dividirse una vez para for-
eventos mitóticos (p. 566). La actividad de la aurora B cinasa en mar un embrión bicelular. Entonces, una vez que el huso mitótico apare-
el cuerpo central parece regular el tiempo de abscisión, aseguran- ció en cada una de las dos células, una de ellas se hizo entrar en una mi-
do que la división de la membrana no ocurre si los cromosomas cropipeta, haciendo que asumiera una forma cilíndrica. Los dos puntos
están presentes en el cuerpo central, y también ha sido implicada oscuros en cada célula son los polos del huso que se formaron antes de
la segunda división de cada célula. b) Nueve minutos más tarde, la célula
en regular la descondensación de la cromatina que sigue a la mi- cilíndrica ha completado la división, mientras la célula esférica todavía no
tosis. ha comenzado a dividirse. Estas fotos indican que 1) el plano de división
se forma entre los polos de huso, con independencia de su posición, y 2)
Citocinesis en células vegetales: la división ocurre más rápido en la célula cilíndrica. La barra es igual a 80
mm. c) Estos resultados se pueden explicar suponiendo que 1) el plano de
formación de la placa celular división (barra marrón) se forma donde los microtúbulos astrales se sola-
Las células vegetales, que están encerradas en una relativamente pan, y 2) la división ocurre antes en la célula cilíndrica porque la distancia
de los polos (esferas azules) al sitio de la división se reduce, acortando
inextensible pared celular, se someten a citocinesis por un meca- así el tiempo que le toma a la señal de división alcanzar la superficie.
nismo muy distinto. A diferencia de las células animales, que se
Fuente: a-b) Charles B Shuster y David R Burgess. J Cell Biol
estrechan por un surco que avanza hacia dentro desde la superfi- 1999;146:987, fig. 5. Reproducida con permiso de Rockefeller University
cie externa de la célula externa, las células vegetales deben cons- Press.
truir una pared extracelular dentro de una célula viva. La forma-
ción de la pared comienza en el centro de la célula y crece hacia
afuera, a encontrar las paredes laterales existentes. La formación
de una nueva célula comienza con la construcción de un precur- animal, el plano no está determinado por la posición del huso, ni
sor más simple, llamado la placa celular. se determina más tarde en la mitosis. Más bien la orientación de
El plano en el cual se forma la placa celular es perpendicular ambos, placa celular y huso mitótico, lo determina un cinturón
al eje del huso mitótico, pero a diferencia del caso de la célula de microtúbulos corticales —la cinta de preprofase— que se forma
en el G2 tardío (véase figura 9-15). Aunque la cinta de preprofase
se desintegra al llegar a la prometafase, deja una impresión invi-
sible que determina el futuro sitio de división. La primera señal
de la formación de la placa celular se ve en la anafase tardía,
cuando aparece el fragmoplasto en el centro de la célula en divi-
sión. El fragmoplasto consiste en racimos de microtúbulos inter-
digitados, orientados de forma perpendicular a la futura placa
(figura 9-15), junto a filamentos de actina, vesículas membrano-
sas y material denso en electrones. Los microtúbulos de los frag-
moplastos, que provienen de remanentes del huso mitótico, sir-
ven de vía para el movimiento de pequeñas vesículas secretoras
derivadas del Golgi en la región. Las vesículas se alinean a lo
largo de un plano entre los núcleos hija (FIGURA 14-38a). Las
micrografías de electrones de células de tabaco congeladas han
revelado con rapidez los pasos en que las vesículas derivadas de
la Golgi se reorganizan en la placa celular. Para comenzar el pro-
ceso (paso 1, figura 14-38b), las vesículas envían túbulos como
dedos que contactan y se fusionan con vesículas vecinas, para
formar una red tubular interconectada en el centro de la célula
(paso 2). Entonces, vesículas adicionales se dirigen a lo largo de
los microtúbulos hacia los bordes laterales de la red. Las vesículas
recién llegadas continúan el proceso de formación y fusión de
túbulos, que extiende la red hacia afuera (paso 2). Eventualmente
el borde guía de la red de crecimiento entra en contacto con la
membrana de plasma parental en la frontera de la célula (paso 3).
Al final, la red tubular pierde sus gaps citoplásmicos y madura en
una partición continua y aplanada. Las membranas de la red tu-
bular se convierten en las membranas plasmáticas de las dos cé-
a)
FIGURA 14-38 La formación de una placa celular entre dos núcleos de
plantas hijas durante la citocinesis. a) Una micrografía electrónica de ba-
jo aumento que muestra la formación de la placa celular entre las futuras
células hijas. Las vesículas secretorias derivadas de los complejos de
Golgi cercanos se han alineado a lo largo del plano ecuatorial (flecha), y
están comenzando a fusionarse entre sí. La membrana de las vesículas
forma las membranas plasmáticas de las dos células hijas, y el contenido
de las vesículas proporcionará el material que forma la placa celular que
separa las células. b) Pasos en la formación de la placa celular como se
describe en el texto. celular
Fuente: a) David Phillips/Photo Researchers, Inc; b) AL Samuels, TH
Giddings, Jr, y LA Staehelin. Journal Cell Biology 1995;130:1354. The
Journal of Cell Biology de Rockefeller Institute; American Society for Cell
Biology. Copyright 1995, reproducida con autorización de Rockefeller
University Press en el formato de republicación en un libro de texto vía
Copyright Clearance Center.
lulas hijas adyacentes, mientras que los productos secretorios que 571
se han transportado dentro de las vesículas contribuyen a la placa
celular intermedia. Una vez que se completa la placa celular, se
agregan celulosa y otros materiales para producir la pared celular
14.12 • Descripción general de la meiosis
madura.
REPASO
1. ¿Qué tipos de mecanismos de generación de fuerza podrían
ser responsables del movimiento cromosómico durante la fase
anafásica?
2. Contraste los eventos que ocurren durante la citocinesis en
células típicas vegetales y animales.
14.12 Descripción general de la meiosis
La producción de hijos por reproducción sexual incluye la unión
de dos células, cada una con un conjunto haploide de cromoso-
mas. Como se discutió en el capítulo 10, la duplicación del núme-
ro de cromosomas en la fecundación se compensa por una reduc-
ción equivalente en el número de cromosomas, en una etapa
anterior a la formación de los gametos. Esto se logra mediante la
meiosis, un término acuñado en 1905 que proviene de la palabra
griega que significa “reducción”. La meiosis asegura la produc-
ción de una fase haploide en el ciclo de vida, y la fertilización
asegura una fase diploide. Sin meiosis el número de cromosomas
+ Microtúbulo
_ Vesícula
2
Membrana
plasmática
Pared
parental
3
b)
 572 se duplicaría con cada generación, y no sería posible la reproduc-
ción sexual.
Para comparar los eventos de la mitosis y la meiosis, debemos Interfase
examinar el destino de las cromátidas. Antes de la mitosis y la
CAPÍTULO 14 • División celular

meiosis, las células diploides G2 contienen pares de cromosomas

homólogos, y cada cromosoma consta de dos cromátidas. Durante
la mitosis las cromátidas de cada cromosoma se dividen, y se se-
paran en dos núcleos hijos en una sola división. Como resultado,
las células producidas por mitosis contienen pares de cromoso-
mas homólogos, y son genéticamente idénticas a sus padres. En Profase l
cambio, durante la meiosis las cuatro cromátidas de un par de
cromosomas homólogos replicados se distribuyen entre cuatro
núcleos hijas. La meiosis cumple esta función al incorporar dos
divisiones secuenciales, sin un campo intermedio de replicación
del DNA (FIGURA 14-39). En la primera división meiótica cada
cromosoma (que consta de dos cromátidas) se separa de su homó-
logo. Como resultado, cada célula hija contiene solo un miembro
de cada par de cromosomas homólogos. Para que esto suceda los Metafase l
cromosomas homólogos se emparejan durante la profase de la
primera división meiótica (profase I, figura 14-39) mediante un
elaborado proceso que no tiene contrapartida en la mitosis. Como
están emparejados, los cromosomas homólogos participan en un
proceso de recombinación genética, que produce cromosomas
con nuevas combinaciones de alelos maternos y paternos (véase
metafase I, figura 14-39). En la segunda división meiótica las dos Anafase l
cromátidas de cada cromosoma se separan una de la otra (anafase
II, figura 14-39).
Una revisión de varias eucariotas revela marcadas diferencias
con respecto a la etapa dentro del ciclo de vida en el que ocurre
la meiosis, y en la duración de la fase haploide. Sobre estas bases
se pueden identificar los tres grupos siguientes (figura 14-40): Telofase l

1. Meiosis gamética o terminal. En este grupo, que incluye a

todos los animales multicelulares y muchos protistas, las divi-
siones meióticas están estrechamente vinculadas a la forma-
ción de los gametos (FIGURA 14-40, izquierda). En los verte- Profase ll
brados masculinos (FIGURA 14-41a), por ejemplo, la meiosis
ocurre justo antes de la diferenciación de los espermatozoi-
des. Las espermatogonias que se comprometen a someterse a la
meiosis se convierten en espermatocitos primarios, que luego
experimentan las dos divisiones de la meiosis para producir
cuatro espermátidas relativamente indiferenciadas. Cada es- Metafase ll
permátida experimenta una diferenciación compleja para
convertirse en una célula de esperma altamente especializada
(espermatozoide). En los vertebrados hembras (figura 14-41b),
la ovogonia se convierte en ovocitos primarios, que luego entran
en una profase meiótica muy extendida. Durante esta profase
Anafase ll
el ovocito primario crece, y se llena de yema y otros materia-
les. Solamente después de completada la diferenciación del
ovocito (es decir, que el ovocito ha alcanzado en esencia el
mismo estado que cuando se fertiliza) ocurren las divisiones
meióticas. Es típico que los huevos de vertebrados se fecun-
dan en una etapa antes de la finalización de la meiosis (por lo Telofase ll
general en la metafase II). La meiosis se completa después de
la fertilización, mientras que el esperma reside en el citoplas-
ma del huevo.
2. Meiosis cigótica o inicial. En este grupo, que incluye solo
protistas y hongos, las divisiones meióticas ocurren justo des- 4
pués de la fertilización para producir esporas haploides (figu- Células
ra 14-40, derecha). Las esporas se dividen por mitosis para haploides
producir una generación adulta haploide. En consecuencia,
la etapa diploide del ciclo de vida se limita a un periodo bre- FIGURA 14-39 Las etapas de la meiosis.
ve después de la fecundación, cuando el individuo sigue sien-
do un cigoto.
3. Meiosis en esporas o intermedia. En este grupo, que incluye vida con la unión de un gameto masculino (el grano de polen)
plantas y algunas algas, las divisiones meióticas tienen lugar y un gameto femenino (el huevo), el cigoto diploide sufre mi-
en una etapa no relacionada con la formación o fertilización tosis y se desarrolla en un diploide esporófito. En alguna
de gametos (figura 14-40, centro). Si comenzamos el ciclo de etapa del desarrollo del esporófito ocurre la esporogénesis (que
 Gamético Espórico Cigótico 573
o o o
Espermatogonia
terminal intermedio inicial
Gametos (n) Mitosis

14.12 • Descripción general de la meiosis

Cigoto (2n)

Crecimiento
Meiosis

Divisiones Espermatocito primario

meióticas
Generación
Animal Esporófito

Meiosis
diploide (2n) (2n)
(2n) Espermatocitos secundarios

Espermatogénesis
Espermátidas

Diferenciación

Meiosis
Cuatro
células de
esperma

Esporas (n)

Gameto- Generación
a)
(n) fito (n) haploide
(n)

Ovogonia Mitosis

Meiosis
Crecimiento y diferenciación

Ovocito
primario

Gametos (n)
Ovocito
secundario

FIGURA 14-40 Una comparación de tres grupos principales de organis-

Ovogénesis

mos en función de la etapa dentro del ciclo de vida en que se produce

la meiosis y la duración de la fase haploide.
Meiosis

Fuente: Wilson Edmund B. The Cell in Development and Heredity, copyri-

ght 1987. Reproducida con permiso de Taylor & Francis Group Llc-Books
en formato libro de texto a través del Copyright Clearance Center.
incluye la meiosis), y produce esporas que germinan directa-
mente en un gametófito haploide. El gametófito puede ser
una etapa independiente o, como en el caso de las plantas de
vivero, una pequeña estructura retenida dentro de los óvulos.
En ambos casos los gametos se producen a partir del gametó-
fito haploide por mitosis.
REPASO
1. Contraste las funciones generales de la mitosis y la meiosis en
la vida de una planta o animal. ¿Cómo se diferencian los nú-
cleos formados por estos dos procesos?
2. Contraste la secuencia temporal de la meiosis en la esperma-
togénesis contra la ovogénesis.
Cuerpo Fertilización Huevo
polar
Cuerpo
polar
b)
FIGURA 14-41 Las etapas de la gametogénesis en los vertebrados: com-
paración entre la formación de la esperma y los huevos. En ambos sexos
una población relativamente pequeña de células germinales primordiales,
presentes en el embrión, proliferan por mitosis para formar una población
de células gonadales (espermatogonias u ovogonias), a partir de las cuales
los gametos se diferencian. En el hombre a), la meiosis ocurre antes de la
diferenciación, mientras que en la mujer b), ambas divisiones meióticas
ocurren después de la diferenciación. Cada espermatocito primario por lo
general da lugar a cuatro gametos viables, mientras que cada ovocito pri-
mario forma solo un huevo fertilizable, y dos o tres cuerpos polares.
 574
14.13 Las etapas de la meiosis
Al igual que con la mitosis, el preludio de la meiosis incluye la
CAPÍTULO 14 • División celular
replicación del DNA. La fase S premeiótica por lo general toma
varias veces más tiempo que una fase S premitótica. La profase de
la primera división meiótica (es decir, la profase I) usualmente se
alarga de manera extraordinaria cuando se compara con la profa-
se mitótica. En la hembra humana, por ejemplo, los ovocitos ini-
cian la profase I de la meiosis antes del nacimiento, y luego en-
tran en un periodo de detención prolongada. Los ovocitos
reanudan la meiosis justo antes del momento en que se ovulan,
lo que ocurre cada 28 días después de que la persona alcanza la
pubertad. En consecuencia, muchos ovocitos humanos permane-
cen detenidos en la misma etapa aproximada de la profase duran-
te varias décadas. La primera profase meiótica también es muy
compleja y habitualmente se divide en varias etapas, que son si-
milares en todas las eucariotas de reproducción sexual (FIGU-
RA 14-42).
La primera etapa de la profase I es el leptoteno, durante la cual
los cromosomas se compactan y son visibles en el microscopio
óptico. Aunque los cromosomas se han replicado en una etapa
anterior, no hay ninguna indicación de que cada cromosoma esté
compuesto de un par de cromátidas idénticas. Sin embargo, en el
microscopio electrónico se revela que los cromosomas están com-
puestos de cromátidas emparejadas. hace que los cromosomas se asemejen a los tallos agrupados de un
La segunda etapa de la profase I, llamada cigoteno, está mar-
cada por la asociación visible de homólogos entre sí. Este proceso
de emparejamiento cromosómico se llama sinapsis y es un evento
intrigante que presenta preguntas importantes sin respuesta:
¿Sobre qué bases los homólogos se reconocen entre sí? ¿Cómo las
parejas llegan a estar tan perfectamente alineadas? ¿Cuándo ocu-
rre el reconocimiento entre homólogos por primera vez? Estudios
recientes han arrojado luz que responden a estas interrogantes.
Se ha supuesto durante años que la interacción entre cromoso-
mas homólogos comienza primero cuando los cromosomas ini-
cian la sinapsis. Sin embargo, las investigaciones sobre células de
levadura realizados por Nancy Klecknerand y sus colegas en la
Universidad de Harvard, demostraron que las regiones homólo-
gas de DNA de cromosomas homólogos ya están asociadas entre
sí durante el leptoteno. La compactación cromosómica y la sinap-
Centrómero
Leptoteno
Quiasma
Diploteno
FIGURA 14-42 Las etapas de la profase I. Los eventos en cada etapa se describen en el texto.
sis durante el cigoteno simplemente hacen que esta disposición
sea visible a través del microscopio. Como se analizará a conti-
nuación, el primer paso en la recombinación genética es la intro-
ducción deliberada de roturas de doble hebra en moléculas de
DNA alineadas. Los estudios, tanto en levadura como en ratones,
sugieren que las roturas de DNA ocurren en el leptoteno, mucho
antes de que los cromosomas se emparejen visiblemente.
Estos hallazgos están respaldados por investigaciones destina-
das a localizar secuencias particulares de DNA dentro de los nú-
cleos de células meióticas y premeióticas. En la sección 12.8 se vio
que los cromosomas individuales ocupan regiones discretas den-
tro de los núcleos, en lugar de dispersarse de manera aleatoria en
todo el espacio nuclear. Cuando se examinan las células de leva-
dura a punto de ingresar a la profase meiótica, se encuentra que
cada par de cromosomas homólogos comparte un territorio con-
junto diferente a los compartidos por otros pares de homólogos.
Este hallazgo sugiere que los cromosomas homólogos se empare-
jan en cierta medida antes del inicio de la profase meiótica. Los
telómeros (segmentos terminales) de los cromosomas del leptote-
no se distribuyen por todo el núcleo. Entonces, cerca del final del
leptoteno, en muchas especies existe una reorganización especta-
cular de los cromosomas, de manera que los telómeros se localizan
en la superficie interna de la envoltura nuclear en un lado del
núcleo. La agrupación de los telómeros en un extremo de la envol-
tura nuclear se produce en una amplia variedad de eucariotas, y
ramo de flores (FIGURA 14-43). Los ratones que portan mutacio-
nes que impiden la asociación de los cromosomas con la envoltura
nuclear exhiben defectos en la sinapsis, la recombinación genética
y la formación de gametos. Estos resultados experimentales sugie-
ren que la envoltura nuclear realiza un papel importante en la in-
teracción entre cromosomas homólogos durante la meiosis.
Un reciente estudio en levaduras con fisión ha demostrado
que los RNA no codificantes (meiRNA) también puede que des-
empeñen un papel clave en el emparejamiento de cromosomas
homólogos durante la meiosis. Se observaron meiRNA transcri-
tos a partir de ciertos loci a lo largo de un cromosoma, y parecie-
ron emparejarse con transcritos de meiRNA análogos en el cro-
mosoma homólogo, lo que condujo al emparejamiento de los
cromosomas. Se necesitan más investigaciones para determinar
la prevalencia de este mecanismo en diferentes organismos. Las
Tetrac
Complejo
sinaptonémico
Cigoteno Paquiteno
Diacinesis Metafase 1

4
5
6
X
7 DNA de las cromátidas
8 hermanas de un
FIGURA 14-43 Asociación de los telómeros de los cromosomas meióti-
cos con la envoltura nuclear. Los cromosomas del saltamontes masculino
en la etapa de profase meiótica, donde los cromosomas homólogos se
asocian físicamente como parte de un bivalente. Los bivalentes están dis-
puestos en un “ramo” bien definido, con sus regiones terminales agrupa-
das cerca de la superficie interna de la envoltura nuclear en la base de la
foto.
Fuente: B John, Meiosis, © 1990. Cambridge University Press.
Reproducida con permiso. Cortesía de Bernard John.
micrografías electrónicas indican que la sinapsis cromosómica se
acompaña de la formación de una estructura compleja llamada
complejo sinaptonémico. El complejo sinaptonémico (SC, sy-
naptonemal complex) es una estructura en forma de escalera con
filamentos de proteínas transversales que conectan los dos ele-
mentos laterales (FIGURA 14-44). La cromatina de cada homólo-
go se organiza en lazos que se extienden desde uno de los ele-
mentos laterales del SC (figura 14-44b). Los elementos laterales
están compuestos principalmente de cohesina (figura 14-14), que
presumiblemente une la cromatina de las cromátides hermanas.
Durante muchos años se pensó que el SC tenía cada par de cro-
mosomas homólogos en la posición adecuada para iniciar la re-
combinación genética entre cadenas de DNA homólogo. Ahora
es evidente que el SC no es necesario para la recombinación ge-
nética. No solo se usa la forma SC después de que se ha iniciado
la recombinación genética, sino que las células de levadura mu-
tantes incapaces de ensamblar un SC pueden participar en el
intercambio de información genética entre los homólogos. Hoy
se piensa que el SC funciona principalmente como un marco
para permitir que las cromátidas interactúen para completar sus
actividades de cruzamiento como se describe más adelante.
El complejo formado por un par de cromosomas homólogos
sinapsados se llama un bivalente o una tétrada. El primer tér-
mino refleja el hecho de que el complejo contiene dos homólogos,
mientras que el otro llama la atención sobre la presencia de cua-
tro cromátidas. El final de la sinapsis marca el final del cigoteno
y el comienzo de la próxima etapa de la profase I, llamada paqui-
teno (figura 14-44a), que se caracteriza por un complejo sinapto-
némico completamente formado. Durante el paquiteno los homó-
logos se mantienen muy juntos a lo largo de su longitud por el
SC. El DNA de las cromátidas hermanas se extiende en lazos
paralelos (figura 14-44b). A través del microscopio electrónico se
observan varios cuerpos electrodensos de casi 100 nm de diáme-
tro dentro del centro del SC. Estas estructuras han sido denomi-
nadas nódulos de recombinación porque corresponden a los sitios
575
14.13 • Las etapas de la meiosis
K
a)
cromosoma homólogo
Cruzamiento
Elemento lateral
(contiene cohesina)
Nódulo de
b) recombinación
FIGURA 14-44 El complejo sinaptonémico. a) Micrografía electrónica de
un paquiteno humano bivalente en el cual se muestra un par de cromoso-
mas homólogos en un arreglo apretado, paralelo y ordenado. K (kineto-
chore): cinetocoro. b) Diagrama esquemático del complejo sinaptonémico
y sus fibras cromosómicas asociadas. Los gránulos densos (nódulos de re-
combinación) vistos en el centro del SC (indicado por la punta de flecha en
la parte a) contienen la maquinaria enzimática necesaria para completar la
recombinación genética, que se cree comienza en una etapa mucho más
temprana en la profase I. Se representan lazos de DNA emparejados ínti-
mamente de dos cromátidas hermanas de cada cromosoma. Es probable
que los lazos se mantengan en una configuración pareada mediante cohe-
sión (no mostrado). Se presume que la recombinación genética (intercam-
bio de segmentos de cromosomas) se produce entre los lazos de DNA de
las cromátidas no hermanas como se muestra en la figura.
Fuente: Cortesía de Alberto J Solari. Chromosoma 1980;81:330. Con per-
miso de Springer Science 1 Business Media.
donde tiene lugar el intercambio de segmentos cromosómicos,
como se evidencia por la síntesis asociada de DNA que ocurre
durante los pasos intermedios de recombinación (sección 14.15).
Los nódulos de recombinación contienen la maquinaria enzimá-
tica que facilita la recombinación genética, que se completa al fi-
nal del paquinema.
El comienzo del diploteno, la próxima etapa de la profase
meiótica I, (figura 14-42) se reconoce por la disolución del SC,
que deja los cromosomas unidos entre sí en puntos específicos
por estructuras en forma de X, denominadas quiasmas (FIGU-
RA 14-45). Estas se localizan en los sitios de los cromosomas don-
de se había producido un cruce entre las moléculas de DNA de
los dos cromosomas. Los quiasmas se forman por enlaces cova-
lentes entre una cromátida de un homólogo y una cromátida no
hermana del otro homólogo. Estos puntos de unión proporcionan
una visualización llamativa del alcance de la recombinación gené-
tica. Los quiasmas se hacen más visibles por la tendencia de los
homólogos a separarse unos de otros en la etapa diploteno.
 576 Sitios de intercambio
de segmentos (quiasmas)
CAPÍTULO 14 • División celular
a)
b)
c)
FIGURA 14-45 Evidencia visible del entrecruzamiento de segmentos.
a, b) Bivalentes diploteno del saltamontes que muestran los quiasmas for-
mados entre las cromátidas de cada cromosoma homólogo. El recuadro
adjunto indica los cruces que se han producido, presumiblemente dentro
del bivalente en a). Las cromátidas de cada cromosoma diploteno están
estrechamente relacionadas, excepto en los quiasmas. c) Micrografía elec-
trónica de barrido de un bivalente del insecto langosta del desierto con
tres quiasmas (flechas).
Fuente: a-b) De Bernard John. Meiosis © 1990 Cambridge University
Press. Reimpreso con permiso. c) De Klaus Werner Wolf. BioEss
1994;16:108. Reproducida con permiso de John Wiley & Sons.
En los vertebrados, el diploteno puede ser una fase muy ex-
tendida de ovogénesis, durante la cual se produce la mayor parte
del crecimiento de los ovocitos. Así, el diploteno puede ser un
periodo de intensa actividad metabólica. La transcripción en el
ovocito durante el diploteno proporciona el RNA utilizado para la
síntesis de proteínas durante la ovogénesis y el desarrollo embrio-
nario temprano después de la fertilización.
Durante la etapa final de la profase meiótica I, llamada diaci-
nesis, se ensambla el huso meiótico y se preparan los cromosomas
para la separación. En aquellas especies en las que los cromoso-
mas se dispersan rápidamente durante el diploteno, los cromo-
somas se recompactan durante la diacinesis. Esta termina con la
desaparición del nucléolo, la ruptura de la envoltura nuclear y el
movimiento de las tétradas cromosómicas hacia la placa metafá-
sica. En los vertebrados ovocitos estos eventos se desencadenan
por un aumento en el nivel de actividad de la proteína cinasa del
factor promotor de maduración MPF. Como se discutió en las
“Vías experimentales” en la sección 14.3, el MPF se identificó por
primera vez por su capacidad de iniciar estos eventos, que repre-
sentan la maduración del ovocito (sección 14.3). La micrografía empotrada muestra que los cinetocoros de las cromátidas
En la mayoría de las especies eucarióticas aún se pueden ver
quiasmas en cromosomas homólogos alineados en la placa meta-
fásica de la meiosis I. De hecho, se requieren quiasmas para man-
tener los homólogos juntos como un bivalente durante esta etapa.
En humanos y otros vertebrados cada pareja de homólogos por lo
general contiene al menos un quiasma, mientras que ​​los cromo-
somas más largos tienden a tener dos o tres de ellos. Se cree que
existe algún mecanismo para garantizar que incluso los cromoso-
mas más pequeños formen un quiasma. Si no se produce un
quiasma entre un par de cromosomas homólogos, los cromoso-
mas de esa bivalencia tienden a separarse uno del otro después
de la disolución de la SC. Esta separación prematura de homólo-
gos resulta a menudo en la formación de núcleos con un número
anormal de cromosomas. Las consecuencias de tal evento se dis-
cuten en la “Perspectiva humana” (sección 14.14).
En la metafase I los dos cromosomas homólogos de cada biva-
lente están conectados a las fibras del huso de los polos opuestos
(FIGURA 14-46a). Por el contrario, las cromátidas hermanas están
conectadas con microtúbulos del mismo polo del huso, lo que es
posible gracias a la disposición lado a lado de sus cinetocoros,
como se ve en el dibujo de la figura 14-46a). La orientación de los
cromosomas maternos y paternos de cada bivalente en la placa
metafásica I es aleatoria, el miembro materno de un bivalente
particular tiene la misma probabilidad de enfrentarse a cualquie-
Metafase I Anafase I
a) b)
Cohesina Cinetocoro
Cinetocoro
Metafase II Anafase II
c) d)
FIGURA 14-46 Separación de cromosomas homólogos durante la meio-
sis I y separación de cromátidas durante la meiosis II. a) Diagrama es-
quemático de un par de cromosomas homólogos en metafase I. Las cro-
mátidas se mantienen juntas a lo largo de ambos brazos y centrómeros
mediante cohesión. El par de homólogos se mantiene como bivalente por
los quiasmas. La micrografía insertada muestra que los cinetocoros (pun-
tas de flecha) de las cromátidas hermanas están situados en un lado del
cromosoma, mirando hacia el mismo polo. Los puntos negros son partícu-
las de oro unidas a la proteína de motor CENP-E de los cinetocoros (véase
figura 14-16c). b) En la anafase I, la cohesina que sostiene los brazos de
las cromátidas se divide, permitiendo que los homólogos se separen entre
sí. La cohesina permanece en el centro, sosteniendo las cromátidas jun-
tas. c) En la metafase II, las cromátidas se mantienen juntas en el centró-
mero, con microtúbulos de polos opuestos unidos a los dos cinetocoros.
hermanas están ahora en lados opuestos del cromosoma, enfrentando
polos opuestos. d) En la anafase II, la cohesina que mantiene juntas las
cromátidas se ha dividido, lo que permite que los cromosomas se muevan
a polos opuestos.
Fuente: Insets; Jibak Lee, et al. Mol Reprod Develop 2000;56:51.
Reproducida con permiso de John Wiley & Sons.
ra de los polos. En consecuencia, cuando los cromosomas homó-
logos se separan durante la anafase I, cada polo recibe una colec-
ción aleatoria de cromosomas maternos y paternos (véase figura
14-39). Así la anafase I es el evento citológico que corresponde a
la ley de Mendel de la variedad independiente (p. 368). Como
resultado del surtido independiente, los organismos son capaces
de generar una variedad de gametos casi ilimitada. se recompactan y se alinean en la placa metafásica. A diferencia
La separación de cromosomas homólogos en la anafase re-
quiere la disolución de los quiasmas que mantiene juntos los bi-
valentes. Los quiasmas se mantienen por la cohesión entre cro-
mátidas hermanas en las regiones que flanquean estos sitios de
recombinación (figura 14-46a). Desaparecen en la transición me-
tafase I-anafase I, ya que los brazos de las cromátidas de cada bi-
valente pierden cohesión (figura 14-46b), lo cual se logra median-
te la división proteolítica de las moléculas de cohesina en esas
regiones del cromosoma. En contraste, la cohesión entre los cen-
trómeros unidos de las cromátidas hermanas permanece fuerte,
porque la cohesina situada allí está protegida del ataque proteolí-
tico (figura 14-46b). Como resultado, las cromátidas hermanas
permanecen firmemente unidas entre sí a medida que se mueven
juntas hacia un polo del huso durante la anafase I. óvulo fertilizado responde a estos cambios completando la segun-
La telofase I de la meiosis I produce cambios menos drásticos
que la telofase de la mitosis. Aunque los cromosomas suelen su-
frir alguna dispersión, no alcanzan el estado muy extendido del
núcleo de la interfase. La envoltura nuclear puede o no reformar-
se durante la telofase I. La etapa entre las dos divisiones meióticas
se denomina intercinesis y por lo general es de corta vida. En ani-
males las células en esta etapa fugaz se denominan espermatocitos
secundarios u ovocitos secundarios. Estas células se caracterizan por
ser haploides porque contienen solo un miembro de cada par de
cromosomas homólogos. A pesar de que son haploides, tienen el
doble de DNA que un gameto haploide, pues cada cromosoma
todavía está representado por un par de cromátidas adjuntas. Se
dice que los espermatocitos secundarios tienen una cantidad 2C
14.14  PERSPECTIVA HUMANA
La no disyunción meiótica y sus consecuencias
La meiosis es un proceso complejo, y los errores meióticos en
los seres humanos parecen ser sorprendentemente comunes.
Los cromosomas homólogos pueden no separarse el uno del
otro durante la meiosis I o las cromátidas hermanas pueden no
separarse durante la meiosis II. Cuando ocurre cualquiera de
estas situaciones se forman gametos que contienen un núme-
ro anormal de cromosomas, ya sea un cromosoma extra o un
cromosoma faltante (FIGURA 1). Si uno de estos gametos se fu-
siona con un gameto normal, se forma un cigoto con un número
anormal de cromosomas y se producen serias consecuencias.
En la mayoría de los casos, el cigoto se desarrolla en un embrión
anormal que muere en algún momento entre la concepción y el
nacimiento. Sin embargo, en algunos casos el cigoto se desa-
rrolla en un bebé cuyas células tienen un número anormal de
cromosomas, una condición conocida como aneuploidía. Las
consecuencias de la aneuploidía dependen de qué cromosoma
o cromosomas se vean afectados.
El complemento del cromosoma humano normal es 46: 22
pares de autosomas y un par de cromosomas sexuales. Un cro-
mosoma extra (que produce un total de 47 cromosomas) crea
una condición conocida como trisomía (FIGURA 2). Una per-
sona cuyas células contienen un cromosoma 21 adicional, por
ejemplo, tiene trisomía 21. La pérdida de un cromosoma (que
produce un total de 45 cromosomas) produce una monosomía.
de DNA, la mitad que un espermatocito primario, que tiene un 577
contenido de DNA 4C, y dos veces más que un espermatozoide,
que tiene un contenido de DNA de 1C.
Tras la interquinesis se desarrolla la profase II, mucho más
14.14 • Perspectiva humana
simple que su predecesora. Si la envoltura nuclear se había refor-
mado en la telofase I, se descompone de nuevo. Los cromosomas
de la metafase I, los cinetocoros de las cromátidas hermanas de la
metafase II se enfrentan a los polos opuestos, y se unen a conjun-
tos opuestos de fibras fusiformes cromosómicas (figura 14-46c).
La progresión de la meiosis en los vertebrados se detiene en la
metafase II. La detención de la meiosis en la metafase II se pro-
Cdc20
duce por factores que inhiben la activación de la APC , impi-
diendo así la degradación de la ciclina B. Mientras los niveles de
ciclina B permanezcan altos dentro del ovocito, la actividad de la
Cdk se mantiene y las células no pueden progresar a la siguiente
etapa meiótica. La detención de la metafase II se libera solo cuan-
do el ovocito (en esa etapa llamado óvulo) se fecunda. La fertili-
2+
zación conduce a una afluencia rápida de iones Ca , a la activa-
Cdc20
ción de la APC (p. 562) y a la destrucción de la ciclina B. El
da división meiótica. La anafase II comienza con la división sin-
crónica de los centrómeros que han mantenido unidas a las cro-
mátidas hermanas, permitiéndoles moverse hacia los polos
opuestos de la célula (figura 14-46d). La meiosis II termina con la
telofase II, en la que los cromosomas se vuelven a encerrar por
una envoltura nuclear. Los productos de la meiosis son células
haploides con una cantidad 1C de DNA nuclear.
REPASO
1. Compare los eventos que tienen lugar durante la profase I y la
profase II de la meiosis.
Comenzaremos considerando los efectos de un número anormal
de autosomas.
La ausencia de un cromosoma autosómico, con indepen-
dencia de qué cromosoma se vea afectado, invariablemente
demuestra ser letal en algún momento durante el desarrollo
embrionario o fetal. En consecuencia, un cigoto que contiene
una monosomía autosómica no da lugar a un feto que se lleva
a término. Aunque podría no esperarse que la posesión de un
cromosoma adicional genere una afección potencialmente mor-
tal, el hecho es que a las trisomías no les va mucho mejor que
a los cigotos monosómicos. De los 22 autosomas diferentes en
el complemento cromosómico humano, solo las personas con
trisomía 21 pueden sobrevivir más allá de las primeras semanas
o meses de vida. La mayoría de las otras trisomías posibles son
letales durante el desarrollo, mientras que las trisomías para
los cromosomas 13 y 18 a menudo nacen con vida, pero tienen
anomalías tan graves que perecen poco después del nacimien-
to. Más de una cuarta parte de los fetos que las madres abortan
espontáneamente tienen una trisomía cromosómica. Se cree que
muchos cigotos más, con números anormales de cromosomas,
producen embriones que mueren en una etapa temprana del
desarrollo antes de que se reconozca el embarazo. Por ejemplo,
por cada cigoto trisómico formado en la fertilización, presumible-
mente hay un número igual de cigotos monosómicos que tienen
(continúa)
 578 ciente de embriones tempranos formados por fertilización in vitro
(IVF, in vitro fertilization) encontró que la mayoría de estos em-
briones contenían algunas células (llamadas blastómeras) con un
cariotipo aneuploide. Las células aneuploides estaban presentes
Primera junto a las células normales en el mismo embrión, lo que sugie-
CAPÍTULO 14 • División celular

división re 1) que la no disyunción cromosómica ocurre con frecuencia

meiótica durante las divisiones mitóticas de las células embrionarias tem-
pranas y 2) que estas células anormales se destruyen de alguna
No disyunción Normal manera durante el desarrollo temprano, debido al hecho de que
los bebés nacidos como resultado de la fertilización in vitro no
muestran un nivel anormalmente alto de anormalidades cromo-
sómicas. Debido a que es imposible estudiar el complemento
cromosómico de las células de embriones humanos concebidos
in vivo, no sabemos si la ocurrencia de la ausencia de distensión
mitótica observada en este estudio es un fenómeno restringido
a los embriones generados por la IVF.
Segunda Aunque el cromosoma 21 es el más pequeño con menos de
división 400 genes, la presencia de una copia extra de este material ge-
meiótica nético conduce al síndrome de Down. Las personas con este sín-
drome exhiben grados variables de deterioro mental, alteración
Normal Normal Normal No disyunción
en ciertas características del cuerpo, problemas circulatorios,
mayor susceptibilidad a enfermedades infecciosas, un riesgo
mucho mayor de desarrollar leucemia y la aparición temprana de
la enfermedad de Alzheimer. Se cree que todos estos problemas
médicos son el resultado de un nivel de expresión más alto que
el normal en genes ubicados en el cromosoma 21. Además, la
expresión de los genes en otros cromosomas también se pue-
Gameto Gameto de ver afectada por los niveles excesivos de ciertos factores de
con con un
Gametos Gametos Gametos
cromosoma cromosoma transcripción codificados por genes en el cromosoma 21.
con con un normales La presencia de un número anormal de cromosomas sexua-
extra faltante
cromosoma cromosoma
extra faltante les es mucho menos perjudicial para el desarrollo humano. Un ci-
goto con solo un cromosoma X y sin segundo cromosoma sexual
FIGURA 1 La no disyunción meiótica ocurre cuando los cromosomas (designado como XO) se desarrolla en una mujer con síndrome
no se separan entre sí durante la meiosis. Si la falla en la separación de Turner, en el cual el desarrollo genital se detiene en el estado
ocurre durante la primera división meiótica, que se llama no disyunción juvenil, los ovarios fracasan en desarrollarse y la estructura del
primaria, todas las células haploides tienen un número anormal de cro- cuerpo es ligeramente anormal. Como el cromosoma Y es de-
mosomas. Si no se produce la disyunción durante la segunda división terminante masculino, las personas con al menos un cromosoma
meiótica, que se denomina no disyunción secundaria, solo se ven afec- Y se desarrollan como hombres. Un hombre con un cromoso-
tadas dos de las cuatro células haploides. (También pueden ocurrir ti- ma X adicional (XXY) desarrolla el síndrome de Klinefelter, que
pos más complejos de no disyunción que los que se muestran aquí).
se caracteriza por retraso mental, subdesarrollo de los genitales
y la presencia de características físicas femeninas (como aumen-
incluso menos éxito. Se estima que alrededor de 20 a 25% de los to de los senos). Un cigoto con un Y extra (XYY) se convierte
ovocitos humanos son aneuploides, lo que es mucho mayor que en un varón físicamente normal, que quizás sea más alto que el
cualquier otra especie que se haya estudiado. La meiosis en los promedio. Una controversia considerable se desarrolló en tor-
machos ocurre con un nivel mucho más bajo de anormalidades no a afirmaciones de que los varones XYY tienden a exhibir un
cromosómicas que en las hembras. comportamiento más agresivo, antisocial y criminal que el de los
No toda la aneuploidía que ocurre durante el desarrollo hu- varones XY, pero esta hipótesis nunca se ha corroborado.
mano necesariamente comienza con el cigoto. Un estudio re- La probabilidad de tener un hijo con síndrome de Down au-
menta drásticamente con la edad de la madre: de 0.05% para
madres de 19 años a más de 3% para las mujeres mayores de
45. La mayoría de las investigaciones muestran que no se en-
contró tal correlación entre la edad del padre y la probabilidad
de tener un hijo con trisomía 21. Las estimaciones basadas en las
comparaciones de las secuencias de DNA entre la descendencia
y los padres indican que casi 95% de las trisomías 21 se puede
remontar a la ausencia de disyunción en la madre. Sin embargo,
es de notar que aunque la ausencia de disociación cromosómica
no parece aumentar durante la espermatogénesis en relación
con la edad del padre, el número de nuevas mutaciones que
el padre hereda a un niño aparentemente aumenta a medida
que el hombre envejece. Este fenómeno está relacionado con
un aumento aparente en el riesgo de autismo en niños nacidos
de padres mayores.
Antes se ha señalado que un número anormal de cromo-
somas puede ser el resultado de la ausencia de disyunción en
cualquiera de las dos divisiones meióticas (figura 1). Aunque
estos diferentes eventos de no disyunción producen el mismo
efecto en términos del número de cromosomas en el cigoto, se
FIGURA 2 El cariotipo de una persona con síndrome de Down. El ca- pueden distinguir por análisis genético. La no disyunción primaria
riotipo muestra un cromosoma 21 adicional (trisomía 21). transmite dos cromosomas homólogos al cigoto, mientras que la
Fuente: PHANIE/Photo Researchers, Inc. no disyunción secundaria transmite dos cromátidas hermanas al
 cigoto (muy alteradas tal vez por el intercambio de segmentos
cromosómicos). Los estudios indican que la mayoría de los erro-
res ocurren durante la meiosis I. Por ejemplo, en un estudio de
433 casos de trisomía 21 que resultó de la no disyunción mater-
na, 373 fueron el resultado de errores que ocurrieron durante la
meiosis I y 60 fueron el resultado de errores durante la meiosis II.
¿Por qué la meiosis I debería ser más susceptible a la no
disyunción que a la meiosis II? No conocemos la respuesta preci-
sa a esa pregunta, pero casi con certeza refleja el hecho de que
los ovocitos de mujeres mayores han permanecido detenidos en
la meiosis I durante un periodo muy largo dentro del ovario. Se
observó en el capítulo que los quiasmas —que son indicadores
14.15 Recombinación genética
durante la meiosis 5 3
Además de reducir el número de cromosomas según lo requerido
para la reproducción sexual, la meiosis aumenta la variabilidad
genética en una población de organismos de una generación a
otra. La distribución independiente permite que los cromosomas
maternos y paternos se mezclen durante la formación de los ga-
metos, y la recombinación genética (intercambio de segmentos
cromosómicos) permite que los alelos maternos y paternos en un
cromosoma determinado también se mezclen (véase figura 14-
39). Sin recombinación genética, los alelos a lo largo de un cro-
mosoma particular permanecerían unidos generación tras gene-
ración. Al mezclar alelos maternos y paternos entre cromosomas
homólogos, la meiosis genera organismos con genotipos y fenoti-
pos novedosos sobre los que la selección natural puede actuar
(véase figura 10-7 para un ejemplo de la mosca de la fruta). En
humanos se ha estimado que existen alrededor de 25 eventos de
recombinación en cualquier espermatozoide dado.
La recombinación involucra la rotura física de moléculas de
DNA individuales, y el enlace de los extremos partidos de un
DNA dúplex con los extremos partidos del dúplex del cromoso-
ma homólogo. La recombinación es un proceso notablemente
preciso, que normalmente ocurre sin la adición o pérdida de un
solo par de bases. Para que ocurra con tanta fidelidad, la recom-
binación depende de las secuencias de bases complementarias
que existen entre una sola hebra de un cromosoma, y la hebra
homóloga de otro cromosoma, como se discute a continuación.
La precisión de la recombinación se asegura aún más por la par-
ticipación de las enzimas de reparación del DNA, que llenan los
gaps que se desarrollan durante el proceso de intercambio.
En la FIGURA 14-47 se muestra un modelo simplificado de los
pasos propuestos que ocurren durante la recombinación en célu-
las eucariotas. En este modelo dos dúplex de DNA, que están a
punto de recombinarse, se alinean uno al lado del otro como re-
sultado de algún tipo de búsqueda de homología, donde moléculas
de DNA homólogas se asocian entre sí en preparación para la
recombinación. Una vez que están alineadas, una enzima (Spo11)
introduce una ruptura en la hebra doble en una de las dobles
hélices de DNA (paso 1, figura 14-47). En consecuencia el gap se
ensancha (resecciona), como se indica en el paso 2. La resección
puede ocurrir por acción de una exonucleasa 59→ 39 o mediante
un mecanismo alternativo. A pesar de todo, las hebras rotas tie-
nen colas de una sola hebra expuestas, cada una con una termi-
nación 39 OH. En el modelo que se muestra en la figura 14-47,
una de las colas de cadena simple sale de su propia molécula de
doble hélice e invade la molécula de DNA de una cromátida no
hermana, uniéndose por enlace de hidrógeno con la cadena com-
plementaria en la molécula de doble hélice vecina (paso 3). En la
E. coli, este proceso en el que una sola hebra invade una molécula
doble intacta y desplaza la hebra correspondiente en esa molécu-
la doble, es catalizado por una enzima recombinasa, llamada pro-
visuales de la recombinación genética— desempeñan un papel 579
importante al mantener junto un bivalente durante la metafase
I. Según una hipótesis, los husos meióticos de los ovocitos más
viejos son menos capaces de mantener bivalentes débilmente
construidos (p. ej., bivalentes con solo un quiasma localizado
14.15 • Recombinación genética durante la meiosis
cerca de la punta del cromosoma) que los ovocitos más jóvenes,
aumentando la probabilidad de que los cromosomas homólogos
se segreguen de modo incorrecto en la anafase I. Otra posibili-
dad es que la cohesión de la cromátida hermana —que evita que
los quiasmas se “deslicen” del extremo del cromosoma— no se
mantenga totalmente durante un periodo prolongado, permitien-
do a los homólogos separarse de forma prematura.
1
5
3
3
5
3 5

3
3
2
3
4
Uniones de Holliday
5
6
No intercambio de segmentos cromosómicos
7
Intercambio de segmentos cromosómicos
FIGURA 14-47 Un mecanismo propuesto para la recombinación genéti-
ca iniciado por las roturas de doble hebra. Los pasos se describen en el
texto.
teína RecA. La RecA recombinasa se polimeriza a lo largo del
DNA de cadena sencilla, formando un filamento de nucleoproteí-
na. La RecA posibilita que el DNA de hebra simple busque e in-
vada una doble hélice homóloga. Las células eucariotas tienen
homólogos de la RecA (p. ej., la Rad51) que se piensa catalicen la
invasión de hebras. La invasión de hebras acciona una actividad
de reparación del DNA (sección 13.8) que llena los gaps, como se
muestra en el paso 4.
Como resultado del intercambio recíproco de cadenas de
DNA, los dos dúplex están unidos de forma covalente entre sí
para formar una molécula conjunta (o heterodúplex) que contiene
 580 un par de sitios de intercambio de segmentos cromosómicos de
DNA, o uniones de Holliday, que flanquean la región de intercam-
bio de hebras (pasos 4 y 5, figura 14-47). Estas uniones se nom-
bran así en honor a Robin Holliday, quien propuso su existencia
CAPÍTULO 14 • División celular
en 1964. Este tipo de intermediario de recombinación no necesita
ser una estructura estática porque el punto de enlace se puede
mover en una dirección u otra (un evento conocido como migra-
ción de rama) rompiendo los enlaces de hidrógeno que sostienen
pares originales de hebras y reformando los enlaces de hidrógeno
entre las hebras de doble hélice recién unidos (paso 5). La forma-
ción de las uniones de Holliday y la migración de ramificaciones
ocurren durante el paquiteno (figura 14-42). Para dividir en sus
partes constituyentes las moléculas de DNA interconectadas en
las uniones de Holliday y restablecer de nuevo el DNA en dos
hebras de doble hélice, se debe producir otra ronda de corte del
DNA. En dependencia de las hebras de DNA particulares que se
dividen y se ligan, se pueden generar dos productos alternativos.
En un caso las dos dobles contienen solo fragmentos cortos de
intercambio genético, lo que representa una falta de entrecruza-
miento (paso 6, figura 14-47). En la ruta alternativa de ruptura y
ligadura, la doble hélice de una molécula de DNA se une de for-
ma covalente la doble hélice de la molécula homóloga, creando
un sitio de recombinación genética (es decir, un entrecruzamien-
Preguntas analíticas  
1. ¿De qué manera la división celular es un vínculo entre los huma-
nos y las primeras células eucarióticas?
2. ¿Qué tipos de eventos de síntesis esperaría que ocurrieran en
G1 que no ocurren en G2?
3. Suponga que está marcando una población de células que
crece de forma asincrónica con [3H]timidina. G1 dura 6 horas, S
dura 6 horas, G2 dura 5 horas, y M 1 hora. ¿Qué porcentaje de
las células se marcarían después de un pulso de 15 minutos?
¿Qué porcentaje de células mitóticas se marcaría después de
dicho pulso? ¿Cuánto tiempo tendría que rastrear estas células
antes de ver algún cromosoma mitótico marcado? ¿Qué por-
centaje de las células habrían marcado cromosomas mitóticos
si usted rastreó las células durante 18 horas? (Véase “Video
tutorial cuantitativo”).
4. Suponga que toma un cultivo de las mismas células utilizadas
en la pregunta anterior, pero en lugar de etiquetarlas por impul-
sos con [3H]timidina, las etiqueta continuamente durante 20
horas. Trace un gráfico que muestre la cantidad de DNA radiac-
tivo que estaría presente en el cultivo durante el periodo de 20
horas. ¿Cuál sería la cantidad mínima de tiempo necesaria para
garantizar que todas las células tengan alguna marca incorpo-
rada? ¿Cómo podría determinar la duración del ciclo celular en
este cultivo sin el uso de una marca radiactiva?
5. La fusión de células de las fases G1 y S produce resultados dis-
tintos de fusionar una célula de la fase G2 con una de la S. ¿Cuál
esperaría usted que fuera esta diferencia y cómo puede expli-
carla? (Sugerencia: Mire hacia atrás en la figura 13-20, que
muestra que el inicio de la replicación requiere la formación de
un complejo de prerreplicación, que solo se puede formar en
G1).
6. La figura 14-6 muestra el efecto sobre el ciclo celular de las
mutaciones en los genes que codifican la Wee1 y la Cdc25. La
cinasa CAK se identificó bioquímicamente y no genéticamente
(es decir, mediante aislamiento de células mutantes). ¿Qué
fenotipo esperaría usted en una célula de levadura que trans-
portara una mutación de CAK sensible a la temperatura, des-
pués de aumentar la temperatura del medio de cultivo en la G1
temprana? ¿A finales de la G2? ¿Qué podría ser diferente en
dependencia de la etapa en que se elevó la temperatura?
to) (paso 7). Se piensa que la decisión de si la interacción recom-
binatoria dará lugar o no a un entrecruzamiento se produce mu-
cho antes de la etapa en la que la unión de Holliday doble
realmente se separa en sus partes constituyentes. Los entrecruza-
mientos, que representan la fusión de un cromosoma materno y
paterno (paso 7), se desarrollan en los quiasmas requeridos para
mantener juntos los homólogos durante la meiosis I (figura 14-
44). En los mamíferos la cantidad de no entrecruzamientos supe-
ra en gran medida a la cantidad de entrecruzamientos. Además,
como se observa en la página 402, se producen entrecruzamien-
tos en ciertas regiones del genoma (“puntos calientes” de recom-
binación) con una frecuencia mucho más alta que en otras regio-
nes. Se predice que estos puntos calientes de recombinación son
sitios de enlace para una proteína llamada PRDM9, que luego
dirige la recombinación mediante un mecanismo que aún no se
conoce bien.
REPASO
1. ¿Cuál es el papel de las roturas del DNA en la recombinación
genética?
7. Proporcione cuatro mecanismos distintos mediante los cuales
se pueda activar un Cdk.
8. Un sincitio es una “célula” que contiene más de un núcleo,
como por ejemplo una fibra de músculo esquelético y una blás-
tula de un embrión de mosca. Estos dos tipos de sincitios sur-
gen por caminos muy diferentes. ¿Qué dos mecanismos puede
imaginar que podrían llevar a la formación de sincitios? ¿Qué le
dice esto sobre la relación entre la mitosis y la citocinesis?
9. ¿Cómo podría determinar experimentalmente si los microtúbu-
los de los microtúbulos polares estaban en un estado de flujo
dinámico durante la fase anafásica? Conociendo los eventos
que ocurren en esta etapa, ¿qué esperaría ver?
10. Si tuviera que agregar [3H]timidina a una célula a medida que
fuera sometida a la replicación (fase S) antes de comenzar la
meiosis, ¿qué porcentaje de los cromosomas de los gametos
producidos se marcarían? Si uno de estos gametos (un esper-
matozoide) fuera a fertilizar un huevo no marcado, ¿qué porcen-
taje de los cromosomas de la etapa de dos células se marcarían?
11. Si el número haploide de cromosomas en humanos es 23 y la
cantidad de DNA nuclear en un espermatozoide es 1C, ¿cuán-
tos cromosomas posee una célula humana en las siguientes
etapas: metafase de mitosis, profase I de meiosis, anafase I de
meiosis I, profase II de la meiosis, anafase II de la meiosis?
¿Cuántas cromátidas tiene la célula en cada una de estas eta-
pas? ¿Cuánto DNA (en términos de números de C) tiene la
célula en cada una de estas etapas?
12. Haga un gráfico de la cantidad de DNA en el núcleo de una
espermatogonia desde la etapa G1 antes de la primera división
meiótica hasta completar la meiosis. Marque cada una de las
etapas principales del ciclo celular y de la meiosis en el gráfico.
13. ¿Cuántos centríolos tiene una célula en metafase de mitosis?
14. Suponga que le dijeron que la mayoría de los casos de trisomía
provocan la formación de un óvulo en el oviducto mientras
espera la fertilización. ¿Qué tipo de evidencia podría obtener al
examinar fetos abortados espontáneamente que confirmaran
esta sugerencia? ¿Cómo encajaría esto con los datos ya recopi-
lados?
15. Supongamos que se incuba una célula meiótica en [3H]timidina
entre las etapas de leptoteno y cigoteno, y luego fija la célula
 durante el paquiteno y prepara una autorradiografía. Se encuen-
tra que los quiasmas son sitios de concentración de granos de
plata. ¿Qué le dice esto sobre el mecanismo de recombinación?
16. ¿Qué tipo de fenotipo esperaría de una célula cuyo polipéptido
Cdc20 fuera mutado de modo que 1) no fuera capaz de unirse
a la Mad2, 2) no se pudiera unir a las otras subunidades del
APC, o 3) fallara en disociarse del APC al final de la fase?
17. Supongamos por un momento que el intercambio de segmen-
tos cromosómicos no ocurrió. ¿Estaría de acuerdo en que reci-
bió la mitad de sus cromosomas de cada padre? ¿Estaría de
acuerdo en que recibió una cuarta parte de sus cromosomas
de cada abuelo? ¿Cambiarían las respuestas a estas preguntas
si permitiera que se produjera el cruce?
18. Los fetos cuyas células son triploides, es decir, contienen tres
conjuntos completos de cromosomas, se desarrollan a término
y mueren cuando son bebés, mientras que los fetos con triso-
mías cromosómicas individuales tienden a no funcionar bien. 581
¿Cómo puede explicar esta observación?
19. ¿Qué tipo de fenotipo esperaría de una célula de levadura con
fisión cuya subunidad Cdk careciera de cada uno de los
siguientes residuos como resultado de la mutación: Tyr 15, Thr
Preguntas analíticas
161?
20. Como se observó en la página 549, la duplicación del centro-
soma y la síntesis del DNA son iniciadas por la ciclina E-Cdk2,
que se vuelve activa al final de la G1. Un estudio reciente descu-
brió que si la ciclina E-Cdk2 se activaba en una etapa anterior,
como el comienzo de la G1, esa duplicación del centro comienza
en ese punto en el ciclo celular, pero la replicación del DNA no
se inicia hasta que la fase S comience normalmente. Propor-
cione una hipótesis para explicar por qué la síntesis de DNA no
comienza también. Puede consultar la figura 13-20 para obte-
ner más información.