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NOMBRE: VALIDACIÓN DE LA CUANTIFICACIÓN DE PRINCIPIO
ACTIVO POR HPLC
LABORATORIO
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1. OBJETIVO:
Demostrar que el método analítico de la cuantificación de atenolol tableta, por
Cromatografía Liquida de Alta Resolución (HPLC), proporciona resultados confiables y
consistentes los cuales cumplen con los parámetros de desempeño establecidos en la
monografía.
2. ALCANCE
Determinación de la cuantificación de atenolol tableta, por HPLC con un rango de 90.0
% a 110.0%.
3. RESPONSABLES:
Lic. Diego Alexander Salinas Rivera.
Lic. Jeimy Lisbeth Peña Reyes.
Lic. Víctor Alejandro Cortez Lara.
Lic. Marcia Alejandra Rivera Valladares.
Lic. Karla Marcela Guardado Jovel.
4. PARÁMETROS A ESTUDIAR Y LOS CORRESPONDIENTES CRITERIOS
DE ACEPTACIÓN
El método para determinación de ensayo del contenido de atenolol tabletas por HPLC es una
prueba cuantitativa que constituye un procedimiento químico y que mide la cantidad de activo
presente en una muestra determinada; por lo tanto, se relaciona en la Categoría II, de acuerdo
a Tabla 1: Parámetros de desempeño de los procedimientos analíticos físico-químicos y potencia
microbiológica, del Reglamento Técnico Centroamericano RTCA 11.03.39: 06 “Productos
Farmacéuticos. Validación de Métodos Analíticos para la Evaluación de la Calidad de los
Medicamentos”
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Se evaluarán los siguientes parámetros de validación:
Linealidad (Del sistema y del método)
Precisión (Del sistema y del método: Repetibilidad y Precisión Intermedia)
Exactitud
Especificidad
Estabilidad analítica de la muestra
Intervalo
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Criterios de aceptación
PARÁMETRO DE DESEMPEÑO REPORTAR LIMITE
Precisión del sistema Coeficiente de variación
Coeficiente de determinación (r2)
Coeficiente de variación de los
Linealidad del sistema factores de respuesta (CVf)
Intervalo de confianza de la
pendiente IC (β1)
Pendiente
RECOBRO
Prueba de Cochran
Prueba t de Student
Porcentaje de recobro
Intervalo de confianza de la media
poblacional IC (µ)
LINEALIDAD DEL MÉTODO
Coeficiente de variación de los
Parámetros de desempeño factores de respuesta
del método por adiciones Coeficiente de determinación (r2)
estándar. Pendiente (b)
Intervalo de confianza de la
pendiente IC (β1)
Intervalo de confianza de la
ordenada IC (βo)
PRECISIÓN
Coeficiente de variación
ESPECIFICIDAD
La pendiente de la curva de
referencia del método queda
incluida entre los límites P ± 3S
Repetibilidad Coeficiente de variación
Coeficiente de variación
Precisión Intermedia Prueba Fisher
Prueba t de Student
Diferencia absoluta de los
Estabilidad analítica de la muestra promedios de cada condición de
almacenaje respecto del análisis
inicial ( │di │ )
Intervalo Reportar en %
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5. MUESTRAS LISS
Nombre mx Lote: ----------- , Fabricación: ------------, Cliente: ------------
Rotula: cada tableta contiene: XXXX
mg Descripción:
6. EQUIPOS, REACTIVOS Y MATERIALES DE REFERENCIA INVOLUCRADOS EN LA
VALIDACIÓN LISS
6.1 EQUIPOS
6.2 REACTIVOS
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6.3 ESTÁNDARES
6.4 CRISTALERIA
6.5 CONDICIONES AMBIENTALES
Temperatura: 16°C a 25°C y Humedad Relativa: 30% - 70%
7. DESCRIPCIÓN DEL MÉTODO ANALÍTICO
Ver Método analítico de la cuantificación de atenolol tableta por HPLC
8. REFERENCIA DEL MÉTODO ANALÍTICO A VALIDAR
9. PROCEDIMIENTO PARA LA DETERMINACIÓN DE LOS PARÁMETROS A EVALUAR
9.1. Precisión del sistema.
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9.2. Linealidad del sistema.
Preparar por triplicado, 5 niveles de soluciones estándar de Atenolol a las siguientes
concentraciones: 0.007 µg/mL, 0.008 µg/mL, 0.01 µg/mL, 0.012 µg/mL, 0.013 µg/mL;
equivalentes a niveles 70%, 80%, 100%, 120% y 130% respectivamente.
Pesar con exactitud 10.0 mg del estándar de Atenolol caracterizado (ajustado al 100%), en un
balón volumétrico de 50.0mL.
De cada una de las tres soluciones madre, tomar las alícuotas con bureta de 10.0 mL a balones
volumétricos de 20.0 mL y aforar con agua, según se describe en el siguiente esquema:
10.0 mg 50.0 mL (0.2 mg/mL) – Solución madre
0.7 mL 20.0 mL (0.007 µg/mL) 70%
0.8 mL 20.0 mL (0.008 µg/mL) 80%
1.0 mL 20.0 mL (0.01 µg/mL) 100%
1.2 mL 20.0 mL (0.012 µg/mL) 120%
1.3 mL 20.0 mL (0.013 µg/mL) 130%
9.3. Exactitud, linealidad, precisión, especificidad y recobro del Método.
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mL adición de mg Dilución (µg/mL)
Peso de mg de ----- mg Concentración
sol. Madre Std. adicionados
mezcla (mg) de muestra totales final %
(mg/mL) estándar
Peso mezcla de polvo de las tabletas.
Preparación de la solución Madre de estándar para adición. (Preparar por triplicado).
Preparación de la solución estándar. (Preparar por sextuplicado).
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Preparación muestra sin adición. (Realizar por triplicado)
Preparación muestra 60%. (Realizar por triplicado)
Preparación muestra 100%. (Realizar por triplicado)
Preparación muestra 140%. (Realizar por triplicado)
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Procedimiento.
9.4. Repetibilidad
Procedimiento:
9.5. Precisión Intermedia.
9.6. Estabilidad Analítica de la Muestra
