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PROTOCOLO DE VALIDACIN

Validacin del mtodo analtico para


deteccin de trazas de detergente por
conductivimetra

(Usado para la determinacin de trazas de detergente en


el agua de enjuague de la limpieza de mquinas en
Laboratorios Orion)

ELABORADO POR: Firma / Fecha

Analista Control de Calidad

APROBADO POR: Firma / Fecha

Jefe de Control de Calidad


CONTENIDO

1. OBJETIVO___________________________________________________________3

2. ALCANCE___________________________________________________________3

3. MOTIVO DE LA VALIDACIN__________________________________________3

4. RESPONSABILIDADES________________________________________________3

5. FUNDAMENTO DEL METODO ANALITICO y EL INSTRUMENTO__________4

5.1 METODO ANALITICO_______________________________________________4

5.2 FUNDAMENTO_____________________________________________________5

5.3 APARATOS Y REACTIVOS___________________________________________7

5.4 ESTNDARES DE REFERENCIA Y MUESTRAS (si los hubiera)__________7

5.5 EQUIPO y SUS CONDICIONES DE OPERACIN._______________________8

5.6 CRITERIO DE ACEPTACION DE TRAZAS DE DETERGENTE en las


mquinas de Laboratorios Orion___________________________________________8

6. PARAMETROS DE VALIDACION DEL METODO ANALITICO Y CRITERIOS


DE ACEPTACION.________________________________________________________9

6.1 Linealidad___________________________________________________________9

6.2 Exactitud___________________________________________________________9

6.3 Precisin___________________________________________________________10

6.4 Robustez___________________________________________________________10

6.5 Pruebas de Especificidad del mtodo___________________________________10

6.6 Lmite de Deteccin (LOD) y Lmite de Cuantificacin (LOQ)______________11

7. RESULTADOS._______________________________________________________11

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1. OBJETIVO

Demostrar evidencia documentada de que el Mtodo Analtico utilizado para la


determinacin de trazas de detergente, que pudiera estar presente en el agua de enjuague de
las mquinas de Laboratorios Orion, y que se utilizar para validar la limpieza de las
mismas, muestra un Lmite de Deteccin y Cuantificacin de suficiente sensibilidad y libre
de interferentes analticos, y por lo tanto es capaz de arrojar resultados confiables y
reproducibles, siendo apto para la determinacin de trazas de detergente en el proceso de
limpieza de las mquinas de Laboratorios Orion.

2. ALCANCE

Este protocolo de validacin se aplica para la identificacin y cuantificacin de TRAZAS


DEL DETERGENTE en el agua de enjuague de las mquinas de Laboratorios Orion, que
han sido lavadas segn el SOP correspondiente, y que hayan sido seleccionadas como peor
caso en la validacin del proceso de limpieza de dichas mquinas.

3. MOTIVO DE LA VALIDACIN

Validacin inicial del mtodo analtico, para contar con un mtodo apto para Validacin de
Limpieza de las mquinas en Laboratorios Orion, demostrando ausencia de trazas de
detergente.

4. RESPONSABILIDADES

Analista de Validaciones:

Realizar el protocolo de validacin.

Realizar los anlisis de validacin.

Jefe de Control de Calidad:

Planificar y coordinar la realizacin de ensayos de validacin.

Revisar los reportes analticos de validacin

Analizar y evaluar los resultados obtenidos y emitir el respectivo informe de validacin del
mtodo analtico.

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5. FUNDAMENTO DEL METODO ANALITICO y EL INSTRUMENTO

5.1 METODO ANALITICO

El mtodo analtico consiste en la lectura de conductividad, usando el conductivmetro


marca yyyyy, modelo xxxxx o un instrumento de similares caractersticas, calibrado
apropiadamente.

El mtodo incluye los siguientes pasos:


En un recipiente de vidrio, limpio y seco, que ha sido enjuagado 3 veces con agua
destilada, recoger aprox. 500 mL de agua de enjuague de una mquina que ha sido
lavada previamente segn el POE respectivo,
Leer por triplicado la conductividad de una muestra de agua potable de la planta, de
la que se utiliza normalmente para el lavado de las mquinas. Esta ser la solucin
blanco, y sta lectura de conductividad ser restada de la conductividad leda en el
agua de enjuague.
Curva de calibracin. Leer por triplicado la conductividad de una serie de 6
soluciones preparadas con las siguientes concentraciones de detergente Inspector
Choice
o 30 ppm = 30 mg/L x F
Pesar con toda exactitud en balanza analtica 60.0 mg y aforar a
250.0 mL
o 50 ppm = 50 mg/L x F
Pesar con toda exactitud en balanza analtica 100.0 mg y aforar
a 250.0 mL
o 70 ppm = 70 mg/L x F
Pesar con toda exactitud en balanza analtica 140.0 mg y aforar
a 250.0 mL
o 90 ppm = 90 mg/L x F
Pesar con toda exactitud en balanza analtica 180.0 mg y aforar
a 250.0 mL
o 110 ppm = 110 mg/L x F

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Pesar con toda exactitud en balanza analtica 220.0 mg y aforar
a 250.0 mL
o 130 ppm = 130 mg/L = 52 mg /250 mL x F
Pesar con toda exactitud en balanza analtica 260.0 mg y aforar
a 250.0 mL

F = Factor de correccin por la concentracin de componentes inicos, capaces de


modificar la conductividad en el producto comercial Inspectors Choice y aforo a
balones de 250mL
F = 12.5% = 100/12.5 = 8
F = 8/4 = 2

Clculos:
Conduct H20 emjuague = Conduct. M Conduct B

Donde:
= promedio de las 3 lecturas
M = Muestra
B = Blanco

La concentracin de detergente, expresada en ppm, se obtiene por interpolacin


matemtica en la curva de calibracin.

5.2 FUNDAMENTO

Despus del lavado de una mquina, es necesario demostrar que las trazas del detergente
utilizado en el lavado, se encuentran en niveles aceptables.

El detergente actualmente utilizado en Laboratorios Orion, es el de nombre comercial


Inspectors Choice , cuya frmula contiene compuestos inicos, tales como:

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Nombre Qumico CAS No. Porcentaje
Etilendiamina tetraacetato tetrasdico 64-02-08 1a5%
Disodio tiroxosilicato 6834-92-0 1a5%
Sodio dodecilbencenosulfonato 25155-30-0 1a5%
Hidrxido de Sodio 1310-73-2 1a5%
Olefina sulfonato sdico 68439-57-6 1a5%

Tabla 1. Compuestos inicos que pueden modificar la conductividad del agua en la


frmula declarada por el fabricante del detergente Inspectors Choice

Nota aclaratoria: La MSDS del producto comercial Inspectors Choice declara que la
identidad qumica especfica y/o porcentaje exacto de la composicin ha sido retenida
como secreto comercial. Debido a esto, se tomar un 2.5% como el valor promedio de
para cada uno de los 5 componentes mencionados en la Tabla 1, que son capaces de
modificar la conductividad, lo que nos da una concentracin total de compuestos de sodio
de aprox. 12.5%

La presencia de iones en una solucin es capaz de alterar la conductividad electroltica de


la misma. La conductividad de una solucin de electrolitos es una medida de su capacidad
para conducir la electricidad. La unidad en el SI (Sistema Internacional de Unidades) para
la conductividad es el siemens por metro (S/m). Para medir conductividades muy bajas, se
usa ms convenientemente el micro siemen por metro (S/m)

Las medidas de conductividad se utilizan de forma rutinaria en muchas aplicaciones


industriales y medioambientales como un modo rpido, barato y fiable de medir el
contenido inico en una solucin. Por ejemplo, la medida de la conductividad es un modo
de supervisar la tendencia del funcionamiento de los sistemas de purificacin del agua.

La conductividad est directamente vinculada a la cantidad de iones disueltos en el agua.


El agua desionizada tiene una conductividad de 5,5 S/m, mientras que el agua potable
muestra valores tpicos de alrededor de 5000-50000 S/m, el agua de mar cerca de
5000000 uS/m (es decir, la conductividad del agua de mar es un milln de veces mayor que
el agua desionizada).

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Con estos fundamentos tericos, se puede establecer que la medicin de conductividad del
agua de enjuague de las mquinas, luego de ser lavadas segn lo establecido en un
Procedimiento Operativo Estndar, pueda darnos una informacin directa sobre posibles
trazas de detergentes en solucin, dado que, como se explic en la Tabla 1, estos tienen
compuestos inicos (por la presencia del catin sodio). Este es el fundamento tcnico en el
que se basa el presente mtodo analtico, y cuya validacin ser demostrada en el
respectivo Informe de Validacin.

5.3 APARATOS Y REACTIVOS

Los equipos y reactivos que se utilizan en la identificacin y cuantificacin de posibles


trazas de detergente en el agua de enjuague son:

Conductivmetro XXXX YYYY, calibrado contra soluciones Buffer de pH 7.00 y pH 4.00


Balanza analtica Mettler Toledo XP205DR, o similar en cuanto a precisin y exactitud,
apropiadamente calibrada
Balones volumtricos de 250.0 mL

Agua destilada

5.4 ESTNDARES DE REFERENCIA Y MUESTRAS (si los hubiera)

Para la validacin sern utilizados los siguientes estndares y muestras:

MUESTRAS / PROVEEDOR LOTE FECHA DE OBSERVACIN


EXPIRACIN

Detergente Inspector Spartan Vigente Vigente Producto No. 305


Choice de Spartan

Estndares para curva de N/A N/A Los 6 Preparados segn


calibracin estndares se indica en el
utilizados Mtodo Analtico
debern ser
recientemente
preparados
(mximo 4
horas desde el
momento de
preparacin)

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Solucin Buffer pH 4.00 a MERCK Vigente Vigente
20C

Solucin Buffer pH 7.00 a MERCK Vigente Vigente


20C

5.5 EQUIPO y SUS CONDICIONES DE OPERACIN.

Los parmetros de operacin del conductivmetro Hanna HI98160 sern:

PARMETRO CONDICIN DE OPERACIN

Ubicacin En una mesa estable y nivelada

Alimentacin elctrica 110 V, 50 Hz, conectados a regulador de


voltaje

Volumen de muestra para la lectura Aprox. 10 mL

Temperatura de muestras 20C

6. PARAMETROS DE VALIDACION DEL METODO ANALITICO Y CRITERIOS


DE ACEPTACION.

6.1 Linealidad

Esta prueba sirve para demostrar la Linealidad en la relacin SEAL / RESPUESTA del
mtodo Analtico. Esto significa que el mtodo y el instrumento es capaz de responder con
una adecuada correlacin de respuesta analtica ante incrementos de seal producida por el
analito.
La prueba se efecta de la siguiente manera:
Preparar 6 soluciones de detergente Inspector Choice en Agua Purificada de 30,
50, 70, 90, 110 y 130 ppm, como se indic en el mtodo analtico.
Leer las respuestas producidas por el instrumento
Realizar una regresin lineal en la curva de calibracin mencionada.
Calcular el coeficiente de correlacin (r) en una regresin lineal de la curva de
calibracin anteriormente mencionada
Criterio de aceptacin:

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r 0,99

6.2 Exactitud

Esta prueba sirve para demostrar que ante repeticiones de una solucin de concentracin
conocida, el instrumento y el mtodo es capaz de responder con una adecuada exactitud, lo
cual se manifiesta en un porcentaje de recuperacin entre el 95% al 105% de la
concentracin estimada como lmite admisible de trazas de detergente (90 ppm)

La prueba se efecta de la siguiente manera:


Leer por sextuplicado una solucin que represente el 100% del valor aceptado
como lmite (90 ppm) de detergente Inspectors Choice
Determinar el valor de conductividad, siguiendo el mtodo analtico definido
Criterio de Aceptacin:
Diferencia entre el valor mximo y mnimo de las 6 soluciones, comparado contra
el valor experimental: Mx. 5,0%
Porcentaje de recuperacin: 95,0 105,0%

6.3 Precisin

8.4.1 Repetibilidad
Esta prueba sirve para demostrar que ante repeticiones de una solucin de concentracin
conocida, el instrumento y el mtodo es capaz de responder con una adecuada precisin, lo
cual se manifiesta en un coeficiente de variacin muy reducido entre las 6 lecturas.

La prueba se efecta de la siguiente manera:


Preparar 6 soluciones al 100% (90 ppm) de detergente
Determinar el valor de conductividad siguiendo el mtodo analtico definido
Coeficiente de variacin: Mx., 2,0%

6.4 Robustez

8.5.1 Estabilidad de las soluciones analticas


Estabilidad a las 24 horas: En refrigeracin y a temperatura ambiente

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Porcentaje de recuperacin: 95,0 105,0% (*)
Coeficiente de variacin: Mx. 2,0%
(*) con respecto al valor obtenido inicialmente en la prueba de exactitud

6.5 Pruebas de Especificidad del mtodo


6.5.1 Especificidad en relacin con el agua purificada.
Conductividad mxima leyendo solo agua purificada a las condiciones del mtodo
analtico = 5 S/m. Si se obtuvieran conductividades mayores, el agua purificada
utilizada para preparar las soluciones de las curvas de calibracin ser considerada
un interferente analtico, y deber ser tomada en cuenta en los clculos, restando
dicha conductividad de la lectura de conductividad de los estndares de calibracin.

6.6 Lmite de Deteccin (LOD) y Lmite de Cuantificacin (LOQ)

Leer soluciones diluidas (2, 4, 6, 8 y 10 ppm) hasta obtener una solucin en la cual se
produce seal detectable en el instrumento. Determinar la primera concentracin a la que
se detecta seal como lmite de deteccin del mtodo e instrumento (LOD)

Leer soluciones diluidas hasta obtener la solucin a cuya concentracin se produce una
seal cuantificable en dentro del rango lineal en la curva de calibracin (r = 0.99) y con el
mtodo analtico establecido. La primera concentracin de esta solucin, que sea
cuantificable corresponde al lmite de cuantificacin (LOQ)

7. RESULTADOS.

Evaluar los resultados obtenidos para los parmetros de validacin mencionados en este
protocolo, y elaborar un Informe de Validacin de Mtodo Analtico, con una discusin y
conclusin, declarando al mtodo analtico validado y apto para deteccin de trazas de
soya en la validacin de limpieza de las mquinas de Laboratorios Orion, seleccionadas
como peor caso.

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