carátula

0
ÍNDICE

INTRODUCCIÓN 3
CAPÍTULO I 5
I. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 5
1.1 Formulación del problema 5
Problema general: 5
Problemas específicos: 5
1.2 Objetivos del proyecto 5
Objetivo General 5
Objetivos Específicos 5
1.3 Delimitación del proyecto 6
Delimitación espacial: 6
Delimitación temporal: 6
Delimitación social: 6
Delimitación conceptual: 7
1.4 Justificación e importancia de la investigación 7
1.5 Limitaciones de la investigación 7
CAPÍTULO II
II. MARCO TEÓRICO. 8
NIvel nacional: 8
Nivel internacional: 11
Bases teóricas: 12
CAPÍTULO III 18
III. METODOLOGÍA 18
3.1. Tipo y diseño de investigación 18
3.2. Variables y operacionalización 18
Variable independiente: 18
Medida: 18
Variable dependiente: 18
3.3. Población, muestra y muestreo 18
Población 18
Muestra: 19
Muestreo: 19
Hipótesis: 19

1
3.4. Técnicas e instrumentos de recolección de datos 20
3.5. Procedimientos 20
3.6. Método de análisis de datos 21
3.7. Aspectos éticos 21
IV. ASPECTOS ADMINISTRATIVOS 22
4.1. Cronograma de ejecución 22
4.2. Recursos financieros 23
REFERENCIAS 24
ANEXOS 27

2
 EFECTO ANTIPARASITARIO DE LOS EXTRACTOS ETANÓLICOS DE
SEMILLAS DE CURCUBITA Y PLANTA ARTEMISIA ABSINTHIUM
CONTRA GIARDIA LAMBIA EN ANIMALES DE LABORATORIO MUS

INTRODUCCIÓN

Durante los últimos 1000 años se ha utilizado a la medicina tradicional en todos los
lugares del mundo, y una de sus intenciones es “desparasitar” , y es por ello que a
lo largo de este trabajo buscaremos confirmar o descartar el efecto antiparasitario
de los extractos etanólicos de semillas de curcubita y planta artemisia absthium
contra giardia Lambia en animales de laboratorio que este caso serán mus
musculus. Se tiene conocimiento que nuestro país posee una variedad de vegetales
de orden medicinal en donde la importancia de conocer sus resultados terapéuticos
es de gran valor. Esta gran variedad de especies por estudiar y verificar sus
posibles acciones farmacológicas es de mayor interés para brindar una opción
terapéutica usando plantas nativas.1

Así como aclarar la importancia del aprovechamiento de las especies medicinales

para contrarrestar infecciones parasitarias, La Asociación Española de Pediatría
(AEPED) considera que las infecciones parasitarias del intestino generan en este
país un número bastante importante de niños infestados, para lo cual menciona que
los parásitos para esta patología con mayor prevalencia son Giardiasis, Oxiuriasis y
Ascariosis; por ello es que resulta elemental que obtengamos de forma exacta las
propiedades medicinales que otorgan las semillas que usaremos en este proyecto,
como sabemos, están ya se han puesto a prueba con animales como equinos y
vacunos, pero ahora gracias al planteamiento de nuestros objetivos que son:
OBJETIVO GENERAL Determinar el efecto antiparasitario de extractos etanólicos
de semillas de curcubita máxima Duch y planta Artemisi absinthium en Mus
musculus. OBJETIVO ESPECÍFICO a) Determinar la actividad antiparasitaria de
extractos de semilla de Cucurbita máxima Duch y planta Artemisi absinthium en Mus

1 Coico M. y Vega J. Actividad antibacteriana del extracto etanólico de Cucurbita moschata Duch.
“loche” in vitro frente a Escherichia coli, Shigella sp., Salmonella enterica, Vibrio cholerae; y actividad
antiparasitaria del extracto acuoso de Cucurbita moschata Duch. “loche” in vivo contra Syphacia
obvelata e Hymenolepis nana

3
musculus. b) Determinar la concentración ideal para conseguir un efecto
antiparasitario de semilla de Curcubita máxima Duch y planta Artemisi absinthium en
Mus musculus. c) Determinar las limitaciones de los efectos antiparasitarios de
semilla de Curcubita máxima Duch y planta Artemisi absinthium en Mus musculus,
podremos determinar la relevancia de este proyecto; ademas de conocer si
podemos confirmar o rechazar las hipótesis, que son: HIPÓTESIS GENERAL
HIPÓTESIS 0: No existe efecto antiparasitario de extractos de semilla de Cucurbita
máxima Duch y planta Artemisi absinthium en Mus musculus. HIPÓTESIS 1: SÍ
existe efecto antiparasitario de extractos de semilla de Cucurbita máxima Duch y
planta Artemisi absinthium en Mus musculus. HIPÓTESIS ESPECÍFICAS a) Existe
efecto antiparasitario de extractos de semilla Cucurbita y planta Artemisi absinthium
en Mus musculus. b) Existe relación entre la concentración del extracto de semilla
de Curcubita máxima Duch y planta Artemisi absinthium y el efecto antiparasitario
en Mus musculus. c) Existe limitación en el efecto del extracto por la técnica
empleada para la extracción de semillas de Cucurbita máxima Duch y planta
Artemisi absinthium en mus musculus.

4
CAPÍTULO I

I. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

1.1 Formulación del problema

Problema general:

● ¿Existe efecto antiparasitario de los extractos etanólicos de semillas

Cucurbita ficifolia bouché "calabaza" y la planta Artemisia absinthium
"Ajenjo" en Mus musculus?

Problemas específicos:

● ¿Cuáles son los efectos antiparasitarios de extractos de semilla de Cucurbita

máxima Duch y planta Artemis absinthium es Mus musculus?
● ¿Cuáles son las concentraciones ideales para conseguir el efecto
antiparasitario de los extractos de Cucurbita máxima Duch y planta Artemis
absinthium?
● ¿Cuáles son las limitaciones de los efectos antiparasitarios de semilla de
Cucurbita máxima Duch y planta Artemisi absinthium en Mus musculus?

1.2 Objetivos del proyecto

Objetivo General

● Determinar si el extracto etanólico de las semillas de Cucurbita ficifolia

bouché "calabaza" y la planta Artemisia absinthium "Ajenjo" presentan efecto
antiparasitario, en Mus musculus

Objetivos Específicos

● Determinar los metabolitos secundarios presentes en los extractos etanólicos

de las semillas de Cucurbita ficifolia bouché "calabaza" y la planta Artemisia
absinthium "Ajenjo"

5
 ● Determinar la concentración óptima de los extractos etanólicos de las
semillas de Cucurbita ficifolia bouché "calabaza" y la planta Artemisia
absinthium "Ajenjo" que posee efecto antiparasitario, en Mus musculus

1.3 Delimitación del proyecto

Este proyecto se llevará a cabo en el laboratorio de la Universidad Privada San

Juan Bautista, ubicada en la Ex Hacienda Villa, Av José Antonio Lavalle N° 302,
Chorrillos 15067, Perú; dando inicio al mes de y dando término al mes de
Noviembre del año 2022, en dónde se realizarán los ensayos pertinentes, midiendo
el costo de los recursos financieros, recursos humanos y recursos sociales que se
necesitan para llevarlo a cabo; en una población de 12 Mus musculus de diferentes
edades y sexos; así como las semillas a usar.

Delimitación espacial:

● laboratorio de la Universidad Privada San Juan Bautista, ubicada en la Ex

Hacienda Villa, Av José Antonio Lavalle N° 302, Chorrillos 15067, Perú

Delimitación temporal:

● Esta investigación se llevará a cabo en el periodo comprendido del

Delimitación social:

● La población de estudio corresponde a los 12 Mus musculus de diferentes

edades y sexos del laboratorio.

Delimitación conceptual:

● La investigación se limitará a concer si existe efecto antiparasitario de los

extractos etanólicos de semillas Cucurbita ficifolia bouché "calabaza" y la
planta Artemisia absinthium "Ajenjo" en Mus musculus.

6
1.4 Justificación e importancia de la investigación

Conocer si el extracto etanólico de las semillas de Cucurbita ficifolia bouché

"calabaza" y la planta Artemisia absinthium "Ajenjo" presentan efecto
antiparasitario, en Mus musculus nos permitirá agregar los resultados al marco
teórico existente sobre las variables de estudio; ya que hay muy poco estudios al
respecto de este planteamiento de problema. En Perú los estudios sobre la
diversidad biológica a estudiar son escasos en comparación con otros países como
México; aunque la alta diversidad biológica de estas plantas sugiere orígenes
andinos. Asimismo, el estudio se justifica ya que en un ensayo farmacológico
realizado por Abarca F.et al, en el 2014, con el decocto de las semillas de 7
Cucurbita en concentraciones mínimas inhibitorias de 23 gr. de almendra se verificó
el resultado helmíntico, solución que da inicio a la utilización del resultado
antiparasitario. Se mide al compuesto activo como la fitosterolina mediante la toma
del concentrado en semillas de Curcubita lo que le da gran importancia a la
realización de investigaciones2

1.5 Limitaciones de la investigación

El presente estudio tiene como limitación las prácticas en el laboratorio con los
especímenes de Mus musculus, por lo que nos encontraremos con dificultades a la
hora de poner en observación los efectos de las semillas a utilizar sobre los mismos.
Sin embargo, con la ayuda de buenos observadores que documenten, identifiquen y
analicen correctamente la información, será más sencillo poder presentar los
resultados finales sin alteraciones o lo más acercado a la realidad posible. Otra
limitación a considerar son los recursos con los que contamos versus los que
necesitamos.

2 Bussman Rainer W, Ashley Glenn, Karen Meyer, Alyse Kuhlman, Andrew Tpropietario, Douglas
Sharon et al. Antibacterial Activity of Medicinal Plants of Northern Peru

7
CAPÍTULO II
II. MARCO TEÓRICO.

NIvel nacional:

Desde la antigüedad hasta la actualidad se ha hecho uso de medicina tradicional en

algún momento casi toda la población ha hecho uso de ella, esta realidad llevó a
tomar interés por el uso de plantas, ya que un alto porcentaje de las poblaciones las
utilizan para poder tratar el parasitismo de forma tradicional. Siendo así que
Artemisia absinthium también conocida como “ajenjo” ha demostrado tener efecto
beneficioso para el ser humano. La información acerca del carácter medicinal de la
planta Artemisia absinthium; la misma que se ha utilizado en diversos tratamientos
de enfermedades, entre ellas las parasitosis intestinales, en diferentes
preparaciones de la planta; ha sido descrita desde tiempos ancestrales por
personajes como Gallen e Hipócrates, así mismo Dioscórides elaboró un tratado
sobre plantas medicinales donde describe las grandes propiedades del ajenjo como
3
importante nematicida, antifúngico y antiparasitario.

Mravcakova et al. Realizó un estudio basado en plantas medicinales buscando la

actividad antihelmíntica de la Artemisia absinthium y la Malva sylvestris contra
Haemonchus contortus, un parásito común presente en el intestino de las ovejas.
Para llevar a cabo este estudio el evaluador realizó un extracto mezclando ambas
plantas obteniendo compuestos fenólicos y flavonoides, seguidamente se
recolectaron los huevos de los parásitos y con una prueba de eclosión in vitro
ambas plantas demostraron poseer alto efecto ovicida contra H. contortus. 4

Liu et al. lograron determinar que los extractos de acetato de etilo, etanol de
diferentes partes del ajenjo (flores, hojas, tallos, raíces), demostraron actividades
nematicidas y antifúngicas notables. También determinaron que esta planta contiene
un principio activo importante llamado Tiofeno, el cual se encuentra en
concentraciones parecidas en distintas partes de la planta. El Tiofeno y las
3 Mravcakova Dominika, Komaromyova Michaela, Babjak Michal, Urda Michaela D, Konigova
Alzbeta, Petric Daniel et al. Anthelmintic Activity of Wormwood (Artemisia absinthium L.) and Mallow
(Malva sylvestris L.) against Haemonchus contortus in Sheep
4 .Liu Ting-ting, Wu Hai-bin, Wu Hai-bo, Zhang Jing. Wormwood (Artemisia absinthium L.) as a
promising nematicidal and antifungal agent: Chemical composition, comparison of extraction
techniques and bioassay-guided isolation. Ind Crop Prod

8
actividades biológicas estaban altamente correlacionadas, lo que indica que los
tiofenos desempeñaron un papel importante en las actividades nematicidas y
antifúngicas.5

Abarca et al. tuvo como objetivo reconocer aquellos parásitos que tienen alta
prevalencia y afectan a los niños en edad escolar y con qué frecuencia 7 sucede,
asimismo evaluó el efecto antiparasitario de Chenopodium ambrosioides y la
Cucurbita maxima, para lo cual realizo un estudio de tipo transversal, con una
población compuesta de 201 niños con nivel de estudio primario, siendo el grupo
etario de 7 a 10 años. Los resultados obtenidos demuestran que Chenopodium
ambrosioides presenta en un 70% efecto antiparasitario contra Ascaris lumbricoides
y a la vez la resistencia fue del 30% para Giardia lamblia; mientras que Cucurbita
maxima tiene una efectividad de un 80% para Ascaris lumbricoides y una resistencia
de 20% para Giardia lamblia. De esta manera se ha comprobado que los parásitos
muestran una alta sensibilidad al tratamiento con plantas medicinales mencionadas
en el estudio y que de la misma forma pueden ser sensibles a la planta de ajenjo. 6
Se ha observado y determinado que la pulpa de Cucurbita es ampliamente utilizado
en la cocina, las flores tienen un “almizcle” perfume y las semillas se caracterizan
por varios efectos farmacológicos tales como ejemplo antihelmíntico, y la prevención
de enfermedades de la próstata. En cuanto al análisis fitoquímico para el aceite de
las semillas de calabaza, se puede obtener por reflujo, con hexano y etanol 7;
encontrándose mayor rendimiento del extracto de hexano en comparación con el de
etanol, y la presencia de grupos específicos de ésteres alifáticos, los cuales por
tamizaje fitoquímico que revelaron alcaloides, carotenoides, azúcares reductores,
derivados de la cumarina, esteroides, triterpenoides, proteínas, aminoácidos y
taninos8

Satalaya R. et al. Investigaron la aplicación antiparasitaria en especies medicinales

de la amazonía peruana, Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad
Nacional de la Amazonia Peruana; 2009(11) . En su estudio mencionan que los
5 Abarca Fernández DS, Gonzales Alcos VC. Efectividad del Chenopodium ambrosioides y Cucúrbita
máxima Duch para el tratamiento de parasitosis en escolares de primaria
6 Satalaya J et al. Actividad antiparasitaria de plantas medicinales de la Amazonía Peruana
7 Lawrence Brunton; Jhons S. Lazo; Keith L Parker. Goodman & Gilman: Las bases farmacológicas
de la terapéutica
8 Satalaya J et al. Actividad antiparasitaria de plantas medicinales de la Amazonía Peruana

9
males parasitarios, como la leishmaniosis, la malaria y la enfermedad de Chagas,
están determinados como problema de salud pública mundialmente, sobre todo en
zonas amazónicas. Son las especies medicinales la mayor opción, al averiguar
novedosos tratamientos para estos males, llevándose a cabo una investigación de
ocho plantas medicinales de la amazonía peruana, de las cuales prepararon
concentrados diclorometánicos, etanólicos y acuosos, resultando 40 concentrados.
En cada concentrado se determinó la propiedad antiparasitaria in vitro contra formas
promastigotes en distintas cepas de Leishmania, epimastigotes de Tripanosoma
cruzi y trofozoitos de Plasmodium falciparum. La respuesta de las muestras fue que
el concentrado de Unonopsis spectabilis fue el mejor, con una CI50 de 65.3, 54.2 y
24.5 µg/ml frente a L. amazonensis, L. brazilensis y L. donovani respectivamente; y
una CI50 de 10µg/ml frente a P. falciparum, sin embargo resultó inactivo frente a T.
cruzi9

Díaz D. et al. Estudios preclínicos de cucurbita máxima (semilla de zapallo) un

antiparasitario intestinal tradicional en zonas urbano rurales, en Lima Perú; 2004;
dicho estudio experimental realizado en los laboratorios de Parasitología y Química
de la Universidad Nacional Jorge Basadre Grohmann, en Tacna comprendió dos
fases: 1: la determinación de la concentración mínima inhibitoria (CMI) de Cucúrbita
máxima como antiparasitario, usando tenías caninas durante 5 a 6 horas de
aislamiento intestinal y 2: la determinación de la reacción adversa de Cucúrbita
máxima en ratas albinas expuestas. En conclusión, se halló que la CMI de semilla
de zapallo a razón de 23 g. en 100 ml de agua destilada, tuvo capacidad de producir
un efecto antihelmíntico, concentración equivalente a ± 73 semillas de zapallo (x2 =
5.6, P<0.01). Macroscópicamente en dosis de 23 g. a más se encontraron
alteraciones en el movimiento del helminto, con resultado proteolítico con un tiempo
promedio de supervivencia de 38.4 minutos. Microscópicamente los proglótidos
maduros tuvieron destrucción del tegumento comprometiéndose la membrana basal.
En los proglótidos grávidos hay destrucción de huevos, hallazgos mucho más
acentuados a concentraciones de 30 y 32 g. de cucúrbita experimentados. Se

9 Díaz D et al. Estudios preclínicos de cucúrbita máxima (semilla de zapallo) un antiparasitario

intestinal tradicional en zonas urbano rurales.

10
encontró gastritis no erosiva superficial en ratas weys a dosis de 9 g/kg luego de 4
horas de dosificar10

Nivel internacional:

Agüero M. et al. Estudios sobre la semilla de calabaza con efecto antiparasitario en

un grupo de 5 a 9 años. Zamuro. Tucupita; 2012(16) . Se desarrolló una
investigación descriptiva, transversal en el consultorio médico de la comunidad del
Zamuro, parroquia San Rafael, municipio Tucupita, Estado Delta Amacuro. El total
de niños entre 5 a 9 años era un grupo uniforme quedando al final en una muestra
de 112, que en consulta indicaron encontrarse con síntomas por parasitismo
intestinal producido por helmintos, se eliminaron 28 que no cumplieron criterios de
inclusión, se selecciona enfermos fortuitamente, con el logro de con el objetivo de
confirmar el comportamiento del tratamiento con la semilla de calabaza en esta
enfermedad parasitaria, entre época de enero a julio del 2012. Imperó el sexo
masculino y se logró curar niños con tratamiento con la semilla de calabaza
demostrando lo inofensivo y eficaz del método, haciendo comparaciones clínicas,
antes y después del tratamiento. Dominaron los grupos uniformes entre 6 y 8 años
con parasitismo intestinal, predominando el sexo masculino del total. Las respuestas
aumentaron a 94 enfermos sanos simbolizando un 83.9% del total de la muestra del
grupo de investigación, 17 enfermos (15.2%), 1 paciente evaluado de igual (0.9%) y
nadie empeoró. A través de esta tabla se demostró la eficacia de la semilla de la
calabaza como antihelmíntico. Al finalizar, las respuestas fueron positiva: 111
pacientes para un 99.1% de la muestra, y un solo paciente con respuesta no
satisfactoria que representó un 0.9% de la muestra, sin reacciones adversas durante
el tratamiento.11

Bases teóricas:

Curbita
10 Saade L. Estudios taxonómicos y eco geográficos de las cucurbitáceas latinoamericanas de
importancia económica
11 Saade L. Estudios taxonómicos y eco geográficos de las cucurbitáceas latinoamericanas de
importancia económica

11
Características
La especie Cucurbita ficifolia Bouché (calabaza) es de gran importancia, tiene 27
especies. Son del grupo de las calabazas, de gran valor nutricional y cultural
nacional como en el mundo. Lo nutritivo en la planta se encuentra en lo frutos
inmaduros, maduros, semillas, flores y algunas partes vegetativas. Se utilizan en los
ámbitos industrial, comercial, medicinal y tradicional como recipientes para
artesanía12

Clasificación y taxonomía
División: Magnoliophyta
Clase: Magnoliopsida
Subclase: Delleniidae
Orden: Violales
Familia: Cucurbitaceae
Género: Cucurbita
Especie: Cucurbita ficifolia Bouché
Nombre común: Calabaza, Chilacayote

Propiedades terapeúticas
Cucurbita ficifolia ayuda en el aparato digestivo en afecciones agudas, como
13
inflamación de los intestinos, en casos de fiebre tifoidea y disentería
Cucurbita ficifolia es una planta de fácil digestión, pero no muy alimenticia. Su
propiedad nutritiva es muy tomada en cuenta para la preparación de dulces, barras
energéticas y granolas debido a su cantidad de lípido y proteína. Con gran
contenido de fibra14

Usos
Se usan las semillas, las hojas y la pulpa; las tres son de utilidad para obtener
ácidos grasos, vitaminas y minerales; en la antigüedad se usaba como tratamiento
diurético A, para aliviar la fiebre, la diarrea, como cicatrizante y un buen ejemplo, es
que lo usaban para combatir la hiperplasia prostática.

12 Garcia C. Características de la especie cucúrbita pepo

13 López E. Estudio Fitoquímico y aproximación Genética en especies de la sección Plinthine del
género Arenaria
14 Artemisia absinthium: morfología y ecología

12
Artemisia Absthium
Características
Mata perenne de hasta 90 cm de altura. Toda la planta tiene un intenso aroma, muy
característico, y un sabor amargo. Hojas alternas, pecioladas, con limbo 2-3 veces
pinnatisecto formado por lóbulos estrechos (hasta 6 mm de anchura) y obtusos.
Hojas y tallos herbáceos están cubiertos por un indumento seríceo (densa cubierta
de pelos aplicados a la superficie dando aspecto sedoso) y son de color gris
blanquecino. Los capítulos son pequeños (hasta 3 x 4 mm) y péndulos. Están
reunidos en panículas en el extremo de algunas ramas. El receptáculo de los
capítulos (superficie sobre la que se disponen las flores) es piloso. Todas las flores
que contienen -muy pequeñas- son de corola actinomorfa, amarilla, las de la
periferia son solamente femeninas, y hermafroditas las de la parte central. Florece
durante el verano. Forma vital: Caméfito.15

Clasificación y taxonomía
Reino: Plantae
División: Magnoliophyta
Clase: Magnoliopsida
Subclase: Asteridae
Orden: Asterales
Familia: Asteraceae
Subfamilia: Asteroideae
Tribu: Anthemideae
Subtribu: Artemisiinae
Género: Artemisia
Especie: A. absinthium

Propiedades terapeúticas
El célebre médico griego Dioscórides (siglo I d.C.) refiere varias de las propiedades
medicinales del ajenjo apreciadas incluso hoy en día. La actividad terapéutica de
esta planta reside principalmente en su aceite esencial, el que posee acción
colerética, antihelmíntica, antibacteriana, además de emenagogo, vermífugo y
15 Minsal.cl.

13
favorecedor de las funciones digestivas. En medicina popular se emplea la infusión
de las hojas y sumidades floridas frescas o desecadas del ajenjo en malestares
estomacales y hepáticos, para eliminar parásitos intestinales, regular el ciclo
menstrual (emenagogo) y como tratamiento del resfrío con tos. Por su sabor
amargo, esta planta entra en la composición de varias bebidas alcohólicas, como
aperitivos, de libre venta en el comercio.16

Usos
Usos tradicionales: malestares estomacales y hepáticos; parásitos intestinales; ciclo
menstrual irregular; resfrío con tos. La infusión se prepara con 1 cucharada del
vegetal para 1 litro de agua recién hervida: beber 1 taza 3 veces al día.
Efectos: antiespasmódico, carminativo , emenagogo, vermífugo. 17

Mus musculus

Características.
Los ratones son pequeños roedores, no superan los 20 cm de largo total, su cola (6
- 10,5 cm) es más larga que el cuerpo (6 - 9,5cm). Peso aproximado de 12 a 30 gr,
ojos negros prominentes, orejas redondas y hocico puntiagudo con bigotes largos.
El color del pelaje varía, desde marrón a negro con vientre blanco o gris. El color de
la cola es más claro que el cuerpo. Su sentido de la vista es poco desarrollado, sin
embargo su oído y olfato son muy sensibles, le ayudan a escapar del peligro y
encontrar sus alimentos. Los adultos tienen dimorfismo sexual no detectable a
simple vista, pero si con manipulación directa de los animales. Los testículos del
macho son grandes en proporción al cuerpo. Las hembras poseen cinco pares de
glándulas mamarias con pezones, los machos carecen de estos. Mus musculus es
activo al crepúsculo o durante la noche, evita las luces intensas. Es territorial y vive
en colonias.18

Clasificación y taxonomía
Dominio: Eukaryota

16 Minsal.cl.
17 (Linnaeus 1758). Lista de Especies de Galápagos
18 (Linnaeus 1758). Lista de Especies de Galápagos

14
Reino: Animalia
Filo: Chordata
Clase: Mammalia
Orden: Rodentia
Familia: Muridae
Género: Mus
Especie: musculus

Tipo de alimentación: Polifago

Preferencias de alimentación: En la naturaleza, los ratones comen muchas clases
de materia vegetal, como semillas, raíces, hojas y tallos. También insectos (larvas
de escarabajo, orugas y cucarachas) y carne (carroña) cuando están disponibles.
En asociación con los humanos, consumen cualquier alimento al que puedan
acceder, incluso materiales blandos como papel, tejidos, ceras, etc. 19
Papel trófico: Omnívoro
Mecanismos de persistencia: Su capacidad reproductiva los vuelve muy exitosos,
además de su rapidez y habilidad para escapar de los depredadores. 20
Modalidad de reproducción: Exclusivamente sexual
Uso económico: Formas domésticas y albinos se usan como mascotas y animales
de laboratorio.21
Vector de enfermedades: Los ratones propagan enfermedades como el tifus murino,
rickettsiosis exantemática y vesicular, tularemia, salmonella, este bubónica (Yersinia
pestis), toxoplasmosis, coriomeningitis linfocítica y fiebre lassa. 22

Parásitos
Saredi (2006). Se define como parásito a todo ser vivo, vegetal o animal, que vive
durante toda su existencia, o parte de ella, a expensas de otro ser vivo,
generalmente más potente que él (huésped), causándole daño o no, que puede ser

19 (Linnaeus 1758). Lista de Especies de Galápagos

20 (Linnaeus 1758). Lista de Especies de Galápagos
21 (Linnaeus 1758). Lista de Especies de Galápagos
22 Centers for Disease Control and Prevention (CDC). DPDx - Laboratory Identification of Parasitic
Diseases of Public Health Concern. Giardiasis.

15
aparente o inaparente, y con el cual mantiene una dependencia obligada y
unilateral.

Giardia Lambia
Giardia Lambia y ciclo de vida.
Giardia lamblia es un protozoo flagelado, perteneciente al filo Metamonada. Su ciclo
de vida comprende dos estadios: la forma vegetativa móvil, que parasita el intestino
delgado (trofozoíto) y la forma de vida libre e infectante (quiste). El trofozoíto es
anaerobio aerotolerante, heterótrofo y se multiplica por fisión binaria longitudinal
cada 9 a 12 horas. Tiene forma de pera, mide de 9 a 21 micras (μm) de largo y de 5
a 15 μm de ancho y su espesor es de 2 a 4 μm; presenta dos núcleos colocados en
la parte anterior, un disco ventral convexo en la mitad anterior, con el que se adhiere
a la mucosa intestinal, y cuatro pares de flagelos que participan en la locomoción.
Los quistes son de forma ovalada, con paredes finas y un tamaño de 11-14 μm de
longitud, de 7-10 μm de ancho y de 0,3-0,5 μm de espesor. Su ciclo de vida es
directo (un solo hospedador). Cuando el hospedador animal o humano ingiere los
quistes, en el intestino (duodeno) del hospedador la cubierta del quiste se disuelve
dejando libre la forma vegetativa, el trofozoíto móvil. El trofozoíto se multiplica en el
intestino delgado y a medida que avanza hacia el colon se va transformando en
quiste, que sale al exterior con las heces. La excreción de los quistes suele coincidir
con la manifestación de los primeros síntomas, si los hay, de la infección. 23

Reservorio: Humano, suelo, agua, alimentos y fómites.

Hospedadores: Humanos y otros mamíferos terrestres y marinos (por ejemplo:
primates, cánidos, felinos, ovinos, bovinos, porcinos, cérvidos, equinos, roedores y
cetáceos).24
Dosis Infectiva Mínima (DIM): De 10 a 25 quistes son suficientes para causar una
infección en humanos.

23 Centers for Disease Control and Prevention (CDC). DPDx - Laboratory Identification of Parasitic
Diseases of Public Health Concern. Giardiasis.
24 Centers for Disease Control and Prevention (CDC). DPDx - Laboratory Identification of Parasitic
Diseases of Public Health Concern. Giardiasis.

16
Supervivencia ambiental: Los quistes sobreviven en el suelo, el agua (agua dulce y
salada), el estiércol y las heces humanas de semanas a meses en ambientes fríos y
húmedos.25
Vías de entrada: Digestiva.
Distribución geográfica: Mundial.

Medidas preventivas generales:

Control higiénico sanitario del agua, los alimentos y los animales.
Diseño adecuado de los locales de trabajo, con superficies impermeables, lisas y
fáciles de limpiar. Limpieza y desinfección periódica de los lugares de trabajo,
instalaciones y equipos.
Manipulación y eliminación adecuada de las heces. En caso de utilizar para riego
las aguas residuales y para abono los lodos y el estiércol, cumplir la legislación
específica en relación con la utilización de los mismos (Real Decreto 1620/2007, de
7 de diciembre, por el que se establece el régimen jurídico de la reutilización de las
aguas depuradas y Real Decreto 824/2005, de 8 de julio, sobre productos
fertilizantes).
Control de vectores, desinsectación.
Correctas medidas de higiene en el puesto de trabajo: lavado frecuente de manos,
después del contacto con animales o materiales contaminados, después de quitarse
los guantes, antes de las comidas y al final de la jornada. Utilización de ropa de
trabajo y equipos de protección individual.26

CAPÍTULO III

III. METODOLOGÍA

3.1. Tipo y diseño de investigación

El estudio que se realizará es de tipo: experimental

25 Centers for Disease Control and Prevention (CDC). DPDx - Laboratory Identification of Parasitic
Diseases of Public Health Concern. Giardiasis.
26 Efecto antiparasitario in vitro del extracto etanólico de las semillas de Cucurbita ficifolia Bouché
(calabaza) en Ascaris lumbricoides

17
El diseño es de tipo investigación explicativa o causal debido a que es el más
adecuado para el proyecto de investigación, debido a que no sólo busco la
respuesta del problema, también buscar encontrar las causas del problema.

3.2. Variables y operacionalización

Variable independiente:

● Sexo de Mus musculus

● Edad del Mus musculus

Medida:

Riesgo bajo

Variable dependiente:

● Extracto etanólico
● Parásito Giardia Lamblia

3.3. Población, muestra y muestreo

Población

12 Mus musculus (ratones caseros de la familia Muridae)

● Criterios de inclusión: Ratones mus musculos vivos y que no hayan sido
expuestos a fármacos o tratamientos previos como sustancias
antiparásitarias que modifiquen la evolución de la investigación.
● Criterios de exclusión: Ratones muertos, enfermos o que hayan tenido
contacto previo con fármacos, sustancias o tratamientos antiparásitarios que
modifiquen la evolución de la investigación.

18
Muestra:

El proyecto se realizará en el laboratorio de la Universidad Privada San Juan

Bautista,en donde se realizarán los ensayos pertinentes,midiendo el costo ya que se
emplearán una docena de ratones Mus musculus y las semillas a usar.

Muestreo:

Se determinó el tamaño de la muestra, utilizando la fórmula de tamaño de muestra

que tiene en consideración el tamaño de la población, el nivel de confianza
expresado en un coeficiente de confianza y el margen de error.

Hipótesis:

Hipótesis general
HIPÓTESIS 0: No existe efecto antiparasitario de extractos de semilla de Cucurbita
máxima Duch y planta Artemisi absinthium en Mus musculus.
HIPÓTESIS 1: SÍ existe efecto antiparasitario de extractos de semilla de Cucurbita
máxima Duch y planta Artemisi absinthium en Mus musculus.

Hipótesis específicas:
● Existe efecto antiparasitario de extractos de semilla Cucurbita y planta
Artemisi absinthium en Mus musculus
● Existe relación entre la concentración del extracto de semilla de Curcubita
máxima Duch y planta Artemisi absinthium y el efecto antiparasitario en Mus
musculus.
● Existe limitación en el efecto del extracto por la técnica empleada para la
extracción de semillas de Cucurbita máxima Duch y planta Artemisi
absinthium en mus Musculus.

3.4. Técnicas e instrumentos de recolección de datos

Se utilizará la observación, donde la información se recolectará con una ficha de

observación donde se realizará un coproanálisis parasitológico y coprológico de
observación macro y micro de las heces de los 12 mus musculus; particularmente

19
se desarrollará en la ficha de observación una lista de cotejo para controlar que el
observador no esté interfiriendo de alguna manera en que los resultados salgan
variados.

3.5. Procedimientos

Lo primero a realizar es enviar el presente proyecto alcómite institucional de ética en

investigación de la Universidad Privada San Juan Bautista, donde una vez que haya
sido verificado y aprobado, se coordinarán los préstamos de material, espacio y
lugar con el fin de mantener las facilidades correspondientes para el correcto
desarrollo del proyecto. Ya con esta aprobación se procederá a solicitar al
laboratorio de la misma institución un espacio, material y lugar donde se nos permita
trabajar con los 12 especimenes de mus musculus y las semillas, las cuales serán
tratadas para obtener extractos etanólicos y todo esto será observado con la ficha
de observación que será nuestro instrumento base para asegurar comodidad,
confianza y eficacia de los resultados, así como de los observadores.

Obtención del extracto etanólico de ajenjo: Para el proceso de obtención del

extracto etanólico de las hojas del ajenjo se tomaron como guía el método
propuesto por García Rico y Herrera Arias, para lo cual, haciendo uso del mortero
se realizó el machacado de las hojas del ajenjo por 10 minutos aproximadamente
hasta obtener una masa uniforme. Luego con la ayuda de un papel filtro Whatman
grado 41, se realizó la filtración del extracto inicial en un vaso de precipitado,
proceso muy importante para evitar el paso de residuos. Seguidamente se añadió al
extracto obtenido una solución alcohólica de 96% en una cantidad de 200 ml, luego
se colocó en la estufa a 40 grados de temperatura por un tiempo de ocho (08) días;
una vez terminado este proceso se retiró de la estufa la solución restante. Este
proceso se llevó acabo en 3 oportunidades, manteniendo las mismas cantidades y
tiempos correspondientes, pero agregando agua destilada en proporción de 1/1
hasta obtener una concentración pura del extracto etanólico de ajenjo.
Posteriormente el extracto puro (100%) se conservó a una temperatura de 4 °C y
fue utilizada para obtener las diferentes concentraciones motivo de estudio 27

27 Bejarano Pichen Y. Efecto antiparasitario in vitro del extracto acuoso de semillas de Inga edulis y
Cucurbita maxima sobre Ascaris suum.

20
3.6. Método de análisis de datos

Una vez recogidos, almacenados y analizados los resultados, serán procesados en

una base de datos en Microsoft excel con los resultados de la ficha de observación,
para luego poder ser transposrtados al programa SPSS donde se realizará la
elaboración de tablas estadísticas.
Además de que el análisis de datos se logrará aplicando prueba de Pearson con un
nivel de significancia estadística de p<0.05

3.7. Aspectos éticos

La presente investigación se realizará bajo los principios bioéticos y la Declaración

de Helsinki, respetándose los principios: autonomía, beneficencia, no maleficencia y
justicia.
● El principio de autonomía: Es respetado ya que las personas participantes a
lo largo de este proyecto decidieron hacerlo, cumpliendo con sus
responsabilidades como observadores.
● El principio de beneficencia :Este principio es en el que el proyecto está
basado, ya que la intención del mismo es hacer el bien, buscando respuesta
a una problemática que podría llevarse más lejos en beneficio de la
humanidad.
● El principio de no maleficencia: Se asegura que se evitará generar daño a los
especimenes a toda costa, de forma que no mataremos, no provocaremos
dolor o sufrimiento a los mismos, serán únicamente utilizados con los fines
presentados.
● El principio de justicia: Se tratará a todos de lamisma manera sin incurrir en
discriminación o actos que denigren. Buscando que no haya problema en la
sitribución de cargas y beneficios.

IV. ASPECTOS ADMINISTRATIVOS

4.1. Cronograma de ejecución

21
 -Noviembre 2022
# Act
S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8

4.2. Recursos financieros

Entidad financiadora Monto Concepto

Bienes

22
personal 10 Papel

personal 12 Lápices

personal 15 cuadernos

personal 8 goma

personal 16 engrapadora

Servicios

personal 120 Transportes

personal 50 Impresiones

personal 40 Internet

personal 40 Luz

personal 60 Extras

Materiales a usar

personal 20 guantes

personal 10 vasos

personal 5 bolsas

personal 15 toallas

personal 6 desinfectantes

personal 11 jabón

personal 17 alcohol

REFERENCIAS

1. Coico M. y Vega J. Actividad antibacteriana del extracto etanólico de

Cucurbita moschata Duch. “loche” in vitro frente a Escherichia coli, Shigella
sp., Salmonella enterica, Vibrio cholerae; y actividad antiparasitaria del
extracto acuoso de Cucurbita moschata Duch. “loche” in vivo contra Syphacia

23
 obvelata e Hymenolepis nana. [Tesis de titulación]. Perú: Universidad
Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo, 2018.
2. Barrera-Redondo Josué, Hernández-Rosales Helena S., Cañedo-Torres
Verónica, Aréstegui-Alegría Katia, Torres-Guevara Juan, Parra Fabiola et al .
Variedades locales y criterios de selección de especies domesticadas del
género Cucurbita (Cucurbitaceae) en los Andes Centrales del Perú:
Tomayquichua, Huánuco. Bot. sci [revista en la Internet]. 2020 Mar [citado
2022 Nov 29] ; 98( 1 ): 101-116. Disponible en:
http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S2007-
42982020000100101&lng=es. Epub 20-Jun-2020.
https://doi.org/10.17129/botsci.2239.
3. Vista de Inhibición del crecimiento de Giardia Lamblia por acción del extracto
acuoso y metanólico de semillas de Cucurbita Pepo [Internet]. Org.mx. [citado
el 29 de noviembre de 2022]. Disponible en:
https://www.ride.org.mx/index.php/RIDE/article/view/18/74
4. Horna Vásquez KV, Sangay Llanos R. Actividad antiparasitaria de las hojas
de Artemisia absinthium L. “Ajenjo” en niños de la I.E. 10253 Cutervo –
Cajamarca – 2018. Universidad Privada Antonio Guillermo Urrelo; 2019.
5. Edu.pe. [citado el 29 de noviembre de 2022]. Disponible en:
http://repositorio.uigv.edu.pe/bitstream/handle/20.500.11818/4989/
TESIS_MALDONADO%20CULQUICONDOR-PERALES%20LAPA.pdf?
sequence=2&isAllowed=n
6. Profesional E, Medicina DE, Cirujano M, Moreno O, Tomassini M, Polo
Gamboa M, et al. FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD [Internet].
Edu.pe. [citado el 29 de noviembre de 2022]. Disponible en:
https://repositorio.ucv.edu.pe/bitstream/handle/20.500.12692/56097/
Ortega_MMT-SD.pdf?sequence=1&isAllowed=y
7. Bussman Rainer W, Ashley Glenn, Karen Meyer, Alyse Kuhlman, Andrew
Tpropietario, Douglas Sharon et al. Antibacterial Activity of Medicinal Plants of
Northern Peru – Part II. Arnaldoa [Internet]. 2009 [Cited 2020 Mar
15];16(1):93– 103. Available from: t.ly/Dhnu
8. Guarrera Paolo M. Traditional antihelmintic, antiparasitic and repellent uses of
plants in Central Italy. J Ethnopharmacol [Internet]. 1999 [Cited 2020 May 10];
68, p183-192. DOI: 10.1016/S0378-8741(99)00089-6

24
 9. Mravcakova Dominika, Komaromyova Michaela, Babjak Michal, Urda
Michaela D, Konigova Alzbeta, Petric Daniel et al. Anthelmintic Activity of
Wormwood (Artemisia absinthium L.) and Mallow (Malva sylvestris L.) against
Haemonchus contortus in Sheep. Animals [Internet]. 2020 [Cited 2020 Feb
8];10(2):219. Available from: https://www.mdpi.com/2076-2615/10/2/219
10. Liu Ting-ting, Wu Hai-bin, Wu Hai-bo, Zhang Jing. Wormwood (Artemisia
absinthium L.) as a promising nematicidal and antifungal agent: Chemical
composition, comparison of extraction techniques and bioassay-guided
isolation. Ind Crop Prod [Internet]. 2019 [cited 2020 May 8]. p295–303. DOI:
10.1016/j.indcrop.2019.03.039
11. Abarca Fernández DS, Gonzales Alcos VC. Efectividad del Chenopodium
ambrosioides y Cucúrbita máxima Duch para el tratamiento de parasitosis en
escolares de primaria – Puno. Revista Investig - Esc Post Grado [Internet].
2014 [Citado 10 de febrero de 2020];5(3). Disponible en: t.ly/VlWu
12. Satalaya J et al. Actividad antiparasitaria de plantas medicinales de la
Amazonía Peruana. [Tesis de titulación]. Perú: Universidad Nacional de la
Amazonia Peruana, 2009.
13. Lawrence Brunton; Jhons S. Lazo; Keith L Parker. Goodman & Gilman: Las
bases farmacológicas de la terapéutica. 11ª ed. México: Editorial Mc Graw
Hill Interamericana, 2015
14. Díaz D et al. Estudios preclínicos de cucúrbita máxima (semilla de zapallo) un
antiparasitario intestinal tradicional en zonas urbano rurales. Rev.
Gastroenterol. 2004 jun; 24
15. Saade L. Estudios taxonómicos y eco geográficos de las cucurbitáceas
latinoamericanas de importancia económica. 3ª ed. Roma: Publicaciones
Internacional Plant Genetic. Italia; 2008. 281p.
16. Garcia C. Características de la especie cucúrbita pepo l. Y su semilla en el
tratamiento de la próstata. Congreso de fitoterapia; 2006; Cuba; 2006. 233p
17. López E. Estudio Fitoquímico y aproximación Genética en especies de la
sección Plinthine del género Arenaria. [Tesis de titulación]. España:
Universidad de Granda, 2007.
18. Artemisia absinthium: morfología y ecología [Internet]. Ehu.eus. [citado el 29
de noviembre de 2022]. Disponible en:

25
 https://www.ehu.eus/documents/1686888/3913390/66.+Artemisia+absinthium
.pdf
19. Minsal.cl. [citado el 29 de noviembre de 2022]. Disponible en:
https://www.minsal.cl/portal/url/item/7d983cf52c858bd6e04001011e011da0.p
df
20. (Linnaeus 1758). Lista de Especies de Galápagos [Internet]. Fundación
Charles Darwin. [citado el 29 de noviembre de 2022]. Disponible en:
https://www.darwinfoundation.org/es/datazone/checklist?species=5228
21. Centers for Disease Control and Prevention (CDC). DPDx - Laboratory
Identification of Parasitic Diseases of Public Health Concern. Giardiasis.
2017.
22. Bejarano Pichen Y. Efecto antiparasitario in vitro del extracto acuoso de
semillas de Inga edulis y Cucurbita maxima sobre Ascaris suum. [Tesis en
internet]. [Trujillo]: Universidad César Vallejo; 2019 [Citado 25 de febrero
2020]. Disponible en: http://repositorio.ucv.edu.pe/

26
 ANEXO

27
Anexo. Matriz de operacionalización de variables

PROBLEMA OBJETIVOS HIPÓTESIS VARIABLES DISEÑO MUESTRAS

METODOLÓGICO

Problema General: Objetivo General: Hipótesis General: Variables Enfoque de Población:

Dependientes: identificación: 12 Mus musculus de
¿Existe efecto Determinar si el El extracto etanólico de diferentes edades y
antiparasitario de los extracto etanólico de las semillas de Efecto antiparasitario Cuantitativo y sexos.
extractos etanólicos de las semillas de Curcubita ficifolia descriptivo
semillas Cucurbita ficifolia bouché "calabaza" y la Sexo de Mus musculus
Cucurbita ficifolia bouché "calabaza" y la planta Artemisa Nivel: Muestra:
bouché "calabaza" y la planta Artemisia absinthium Edad del Musculus Explicativo Este proyecto se
planta Artemisia absinthium "Ajenjo" "Ajenjo" presentarán Exploratorio llevará a cabo en el
absinthium "Ajenjo" en presentan efecto efecto antiparasitario, Variables laboratorio de la
Mus musculus? antiparasitario, en Mus en Mus musculus Independientes: Universidad Privada
musculus Compuestos químicos Tipo de diseño de San Juan Bautista, en
Hipótesis Específicas: de la semilla de investigación: dónde se realizarán los
Problemas Específicos: Objetivos Específicos: Cucurbita Diseño es investigativo ensayos pertinentes,
Determinar los Los extractos ficifolia bouché y experimental. midiendo el costo de
¿Qué metabolitos metabolitos etanólicos de las "calabaza" y la planta los materiales que se
secundarios secundarios presentes semillas de Cucurbita Artemisa absinthium necesitan para llevarlo
presentarán los en los extractos ficifolia bouché "Ajenjo" a cabo.
extractos etanólicos de etanólicos de las “calabaza” y la planta
las semillas de Cucurbita Artemisia absinthium
Semillas ficifolia bouché "Ajenjo" poseen
Cucurbita ficifolia "calabaza" y la planta metabolitos
bouché "calabaza" y la Artemisia absinthium secundarios con
planta Artemisia "Ajenjo" actividad
absinthium "Ajenjo"? antiparasitaria. Existe
¿Existirá una Determinar la un grado de

28
concentración óptima concentración óptima concentración óptima
de los extractos de los extractos de los extractos
etanólicos de las etanólicos de las etanólicos de las
semillas de Cucurbita semillas de Cucurbita semillas de Cucurbita
ficifolia bouché ficifolia bouché ficifolia bouché
"calabaza" y la planta "calabaza" y la planta "calabaza" y la planta
Artemisia absinthium Artemisia absinthium Artemisia absinthium
"Ajenjo" y que posee "Ajenjo" que posee "Ajenjo" que poseen
efecto antiparasitario, efecto antiparasitario, efecto
en Mus musculus? en Mus musculus antiparasitario,
"Ajenjo" y que posee en Mus musculus
efecto antiparasitario,
en Mus musculus?

29
Anexo. Ficha de observación

observación

Coprológico Parasitológico

MACROSCOPICO MICROSCOPICO POSITIVO

color forma bacteriana Forma parasitaria

olor grasas

consistencia almidones Especie

restos levaduras

moco NEGATIVO

Anexo. Determinación del tamaño de la muestra

30
Se determinó el tamaño de la muestra, utilizando la siguiente fórmula que tiene en
consideración el tamaño de la población, el nivel de confianza expresado en un
coeficiente de confianza y el margen de error.

Datos:
● Tamaño de población (N): 27 mus musculus
● .e: Margen de error (expresado en porcentaje)
● z: Puntuación z, el cual es de 1.96 al tener un 95% de confianza deseada.

Obteniendo una muestra de 12 especimenes de mus musculus.

Anexo. Lista de cotejo

31
PREGUNTA Sí No

¿Se observa polvo en el ambiente?

¿El laboratorio cuenta con varios lavamanos?

¿Los observadores hacen uso de vestimenta esteril?

¿Los observadores se presentan limpios y con la higiene

adecuada?

¿Los observadores hacen uso del agua potable?

¿Los utensilios del laboratorio se encuentran esteriles?

¿Los materiales a usar en el proyecto se encuentran limpios o

esteriles?

¿Se mantienen en adecuadas condiciones las 12 especies de

mus musculus?

¿Se consideraron los criterios de inclusión al proyecto?

¿Se consideraron los criterios de exclusion al proyecto?

32