HAYATI Vol. 27 No.

1, enero de 2020 37-44

DOI:10.4308/hjb.27.1.37
ISSN: 1978-3019
Revista de Biociencias EISSN: 2086-4094

Rhizopus pudriéndose en productos agrícolas en Yakarta

Anastasia Tatik Hartanti*, Amelia Raharjo, Agustín Wydia Gunawan

Facultad de Biotecnología, Universidad Católica Atma Jaya de Indonesia, Yakarta, Indonesia

ARTÍCULO INFO ABSTRACTO

Historia del artículo: Los productos agrícolas pueden perecer fácilmente si no se los cuida bien durante el
Recibido el 6 de julio de 2018 tratamiento poscosecha. Una de las principales causas de los productos dañados es la
Recibido en forma revisada 20 de agosto contaminación biológica de hongos patógenos, como Rhizopus spp. que da lugar a los
de 2019 Aceptado 30 de agosto de 2019
síntomas de la putrefacción de Rhizopus. El propósito de esta investigación fue aislar
Rhizopus spp. de diferentes productos agrícolas que muestran síntomas de putrefacción
PALABRAS CLAVE: de Rhizopus, así como para identificarlos. Se aislaron cultivos puros de rizopo en agar
Rhizopus rot, de dextrosa de patata. La identificación se realizó a través de técnicas moleculares
SU rDNA, utilizando el Kit de Extracción de ADN PhytopureTM y el Kit de ADN de Planta RSC para aislamiento de
moho, ADN, espaciador transcrito interno (ITS4 e ITS5) como cebadores para amplificación y análisis genético evolutivo molecular 7 (MEGA7) para la
reconstrucción del árbol filogenético a partir del resultado de la secuencia. El árbol filogenético usando las estadísticas de Máxima Probabilidad
enfermedad poscosecha,
R.
con 1000 replicaciones de la prueba de bootstrap mostró cinco cepas, a saber, AR9, AR10, AR11, AR13 y AR14, que pertenecen a
agricultura
delemar, y las otras siete cepas restantes, AR1-AR7 pertenecen a R. stolonifer. La identificación se aclaró con
datos morfológicos y fisiológicos utilizando el crecimiento de Rhizopus en el control de
temperatura de 33 y 42°C, así como la observación microscópica que involucra
rizoides, columelas, medición de esporangiosporas y esporangioóforos.

1. Introducción clarificado con relaciones filogenéticas precisas. Un lado de

Una causa frecuente de deterioro de los cultivos es la
contaminación biológica. Un grupo común de
microorganismos que contaminan los productos agrícolas
es Rhizopus spp. , un hongo patógeno que causa
descomposición, así como la enfermedad de muchas frutas
y verduras. Médicamente, se sabe que causan mucormicosis
en hombres y animales. Mientras que en la agricultura y la
alimentación, desempeña un papel importante como agentes
de fermentación y biorremediación que producen enzimas
que podrían catalizar la formación de drogas. El impacto
beneficioso de Rhizopus contribuye a la idea de recolectar
tantas especies para futuras aplicaciones útiles.
La taxonomía y la filogenia molecular del género
Rhizopus han sido intensamente analizadas durante varias
décadas. La clasificación actual de Rhizopus se basa en
revisiones publicadas por Schipper (1984), seguido por
Schipper y Stalpers (1984), que utilizaron enfoques
morfológicos y clasificaron todas las especies del género en
el grupo stolonifer, R. oryzae y el grupo microsporus.
Después de esta revisión, la clasificación basada en la
morfología
* Autor correspondiente
Dirección de correo electrónico: anast.hartanti@atmajaya.ac.id
Copyright ©2020 Institut Pertanian Bogor
las características morfológicas, Zheng et al. (2007)
aplicaron ADN ribosomal codificador de ARN (rDNA) con
análisis de secuencia de pirG para datos filogenéticos
basados en Liu et al. (2007) y reclasificaron el género en
10 especies y 7 variedades. Esto se revisó aún más debido a
las obscuridades encontradas en el rDNA SU secuencia de
R. americanus, que tenía tres secuencias distintas similares
a R. stolonifer, R. microsporus y R. oryzae. Las relaciones
filogenéticas fueron reevaluadas usando el gen actina
(act1), el factor de elongación de traducción 1α (EF-1α), y
el rDNA ITS por Abe et al. (2010), quien propuso que
R. niveus fuera reclasificado como R. delemar, AMERICR.
anus y R. sexualis para ser reclasificado como R. stolonifer.
Zheng et al. (2007) reemplazaron a R. arrhizus por R.
oryzae, que difería de Abe et al. (2010), que usó el nombre
anterior.
La identificación morfológica de Rhizopus como
fitopatógeno llevada a cabo en Indonesia se limitó solo al
género. El método estándar en cada taxonomía fúngica
requiere análisis filogenético molecular para reflejar
características morfológicas. El propósito de esta
investigación fue aislar a Rhizopus spp. de diferentes
productos agrícolas, así como identificarlos a nivel de
especie.
38 Hartanti ATet al.

2. Materiales y métodos homogéneneización de la mezcla lentamente. La

centrifugación se hizo a 13.000 rpm durante 10 minutos
2.1. Materiales para obtener el sobrenadante que luego se eliminó. Se
Los materiales utilizados en esta investigación fueron agregaron hasta 50 μl de etanol frío 70% y se centrifugó a
productos agrícolas con síntomas de pudrición de Rhizopus, 13.000 rpm durante 10 min, luego se eliminó el
incluyendo manzanas (Crab y Fuji), plátanos (Cavendish y sobrenadante y se secó al aire durante aproximadamente 30
Latundan), tomate cherry, uvas, guayaba, melocotón, pera, min. Se agregó hasta 50 μl de NFW al pellet, y luego se
fresa, camote y tomate obtenido de varios mercados en mantuvo en -20°C. Preparación para ITS4 (5'-TCC TCC
Yakarta. GCT TAT TGA TAT GC-3') e ITS5 (5'-GGA AGT AAA
AGT CGT AAC AAG G-3') se realizó para amplificar un
2.2. Métodos gen en el sitio 18S-5.8S-28S utilizando el sistema de PCR
Esta investigación consistió en el aislamiento de Gene Amp PCR 2400 with KAPA Taq EXHotStart PCR KIT. Las reacciones de PCR para cada
muestra de rDNA consistieron en 1 μl de 100 ng de ADN, 1,5 μl de 10 mm de mezcla de dNTP, 3,5 μl de 25
Rhizopus, la identificación molecular de Rhizopus, y la
mm de MgCl2, 2,5 μl de 10 μm de ITS4 e ITS5, 0,5 μl de 2,5 μl de Uμl de enzima
aclaración de las especies de Rhizopus.
de polimerasa Taq, 10 μl de 5L de Kapa, y 28 de NFE. Ciclo de reacción de

2.3. Rhizopus Isolation PCR fue operado 94°C, 2 min; 35 ciclos a 94°C, 15 seg; 55°C, 30 min; 72°C, 1
Se determinó la putrefacción del rizopo a partir de min; 72°C, 5 min. Los resultados de la PCR se visualizaron en gel de agarosa al
productos agrícolas mediante la clarificación microscópica 1% a 100 V durante 45 min, y luego se siguió teñido de bromuro de etidio
de la estructura rizoidea. El aislamiento se realizó durante 15 min. El gel se enjuagó con acuarelas y se observó con luz UV
mediante el método de enchapado directo en una placa de
(Hartanti et al. 2015).
agar de dextrosa (PDA) de patata que contenía 250 ppm de
cloranfenicol. Los cultivos se incubaron a 28°C. Los aislamientos extraídos y amplificados sin complicaciones con el kit de extracción de ADN
PhytopureTM se trataron con un protocolo rápido de Promega Maxwell= RSC Plant DNA
La suspensión de esporas de un cultivo de 4 días de
Kit con el sistema RSC Maxwell (AS4500). Se colocó una
edad se llevó a cabo para adquirir una sola hifa. La única
muestra de hasta 20 mg en el fondo de un microtubo
hifa fue transferida a un medio PDA fresco. El único
ClickFit con una capacidad de 1,5 ml. Se añadió nitrógeno
aislamiento de hifas se incuba a 28°C durante dos días. La
líquido a la muestra para congelarla. Usando una mano de
única hifa obtenida se transfirió a un nuevo medio PDA
plástico, la muestra congelada fue molida contra la pared
inclinado para la recolección de cultivos. del tubo. Se añadió hasta 300 μl de tampón de lisis de cola
(TLA) a cada tubo, seguido de 10 μl de ARNAsa. Todos los
2.4. Identificación molecular de Rhizopus tubos se agitaron brevemente durante 10 segundos. y se
La extracción genómica de rizopos se realizó con
centrifugaron a 13.000 rpm durante 2 min. Se instaló una
materiales adquiridos de illustra Nucleon PhytopureTM Kit.
Mycelia se recogió de la colección de cultivo anterior y se transfirió a un tubo de Eppendorf con una
bandeja de cubierta y cartuchos del kit. Se añadió una
capacidad máxima de 1,5 ml que ya contenía 500 miliQ μl. Se hizo centrifugación a 10.000 rpm durante 10 cantidad de 300 μl de NFW al primer pozo de cada
minutos, seguida de la eliminación del sobrenadante. El pellet fue machacado con una cuchara de plástico
hasta que el pellet formó una sustancia similar a la avena. Se agregaron hasta 300 μl de reactivo 1, seguido cartucho reactivo del Kit de ADN de la Planta de RSC. El
de resuspensión. Se añadieron hasta 3 μl de ARNsa (20 μg/ml), se resuspendieron y luego se incubaron a
37°C durante 30 min. Se añadieron hasta 200 μl de reactivo 2 y se agitaron hasta que fueran homogéneneos, lisado de la muestra, excluyendo cualquier material sólido,
luego se incuba a temperatura ambiente durante 10 min y se pone en hielo durante 20 min. La suspensión de
micelias se añade a continuación con 500 μl de fenol frío: cloroformo: isopropanol, luego se agita la mezcla se transfirió del tubo de extracción al primer pocillo del
durante 10 min a temperatura ambiente y se centrifuga a 10,000 rpm a 4°C durante 10 min. El sobrenadante
formado se transfirió a un nuevo tubo de Eppendorf, y luego se añadió con isopropanol frío hasta la mitad
cartucho reactivo. Las muestras fueron programadas bajo el
del volumen del tubo mientras
Sistema RSC Maxwell con 45 min. de duración.
Los resultados de la PCR fueron secuenciados por 1st
Base, Malasia. La secuencia de ADN fue editada usando
ChromasPro2. La secuencia editada se alineó con la
referencia de la base de datos de ADN en Gene Bank,
incluyendo especies tipo Rhizopus
(www.ncbi.nih.gov/Genbank), utilizando MEGA7 con el
grupo externo Phycomyces blakesleeanus. El resultado de
alineación se utilizó para construir el árbol filogenético
utilizando el método MEGA7 con máxima probabilidad
(ML).
HAYATI J Biosci 39
Vol. 27 No. 1, enero de 2020

Fresa AR3 Yakarta R. stolonifer MF4610

Batata AR9 Yakarta R. delemar MF4451
2.5. Aclaración de especies de Rhizopus Tomate AR10 Yakarta R. delemar MF4451
La observación morfológica se hizo a través de la
técnica de cultivo de diapositivas de Riddle. El examen
microscópico incluyó la medición de la longitud del
esporangioóforo y el diámetro de la esporangiosfera, así
como la visión de rizoides y columelas. La observación
fisiológica utilizó cinco placas PDA inoculadas de cada
cepa que se incubaron a 33 y 42°C durante dos días.

3. Resultados

Doce cepas de Rhizopus fueron aisladas con éxito de

nueve tipos de productos agrícolas (tabla 1). Diversidades
de Rhizopus spp. en productos agrícolas se clasificaron en
base al árbol de la región rDNA-ITS generado a partir del
análisis de ML que identificó R. delemar (5 cepas) y R.
stolonifer (7 cepas) con 1000 réplicas bootstrap y el modelo
de Tamura-Nei (figura 1).

3.1. Temperatura máxima y morfología de

Rhizopus
Los datos moleculares se aclararon con datos
fisiológicos. Las cepas AR1-AR7 no mostraron crecimiento
a 33°C, mientras que las cepas AR9-AR11, AR13 y AR14
mostraron crecimiento a 33°C, y ningún crecimiento a 42°C
(tabla 2).
Las cepas de Rhizopus delemar fueron identificadas a
través del microscopio con esporangiores que miden entre
120,43-1088,5 μm con hinchazones comúnmente
observadas. Los esporangioophores fueron vistos
generalmente en un racimo que surgía de rizoide. El rizoma
no estaba bien desarrollado, no era abundante y parecía
asemejarse a un dedo. Su columela mostró apofismos
distintos. Esporangiosporas

Cuadro 1. Origen de la muestra, código de cepa, ubicación y fecha

de
Aislamiento y número de adhesión adquirido
Muestra Cepa Ubicación de Especie Adhesión
origen código aislamiento número
Manzana
(cangrejo) AR5 Yakarta R. stolonifer MF461024
Manzana
(Fuji) AR11 Yakarta R. delemar MF445158
Banana AR4 Yakarta R. stolonifer MF461023
(Cavendish)
Banana AR1 Yakarta R. stolonifer MF461020
(Latundan)
Cereza AR14 Yakarta R. delemar MF445161
tomate
Uva AR2 Yakarta R. stolonifer MF461021
Guayaba AR6 Yakarta R. stolonifer MF461025
Melocotón AR13 Yakarta R. delemar MF445160
Pera AR7 Yakarta R. stolonifer MF461026
fueron variables en formas y tamaños de entre 2,31 y 10,23 μm
(figura 2). En el examen macroscópico, todas las cepas de R.
delemar mostraron colonias que inicialmente eran blancas,
luego se volvieron de color gris a negro en toda la porción
superior, mostrando un proceso de maduración.
Las cepas de stolonifer de Rhizopus fueron identificadas a
través del microscopio habiendo desarrollado bien y abundante
ramificación de rizoides repetidamente. Las esporangioospores
fueron irregulares y midieron entre 5.41-24.55 μm, mientras
que los esporangioophores entre 463.69-2683.87 μm. Su
columela mostró apofismos distintos (Figura 3). En el examen
macroscópico, todas las cepas tenían sus colonias blancas en la
parte central y negras en el borde exterior.

4. Debate

Se identificaron doce cepas hasta el nivel de especie

utilizando técnicas moleculares con datos morfológicos y
fisiológicos de apoyo. Según el análisis filogenético, las cepas
AR9-11 y 13-14 estaban en concordancia con la especie tipo R.
delemar CBS120 12T AB181318. Los clados monofiléticos de
R. delemar y R. oryzae se separaron con un 99% de valor
bootstrap, lo que hizo que ambas especies estuvieran en clados
diferentes. Las cepas AR1-AR7 fueron confirmadas como R.
stolonifer dentro de sus subclases que no estaban en el clado
con los dos tipos de especies R. americanus CBS340 62T
AB113010 y R. sexualis CBS336 39T AB113020. Esta
ocurrencia es interesante para ser estudiada más a fondo en
estudios taxonómicos, utilizando un enfoque multigénico para
validar la identificación de estas cepas.

Se evaluaron las temperaturas máximas de R. delemar y R.

stolonifer. Las cepas de R. delemar no mostraron crecimiento a
42°C, pero sobrevivieron a 33°C. Esto es similar a Zheng et al.
(2007), quien declaró que R. arrhizus var. delemar tenía una
temperatura máxima que alcanzaba 42°C. R. arrhizus var.
delemar nombre actual es R. delemar. R. oryzae tenía la misma
temperatura máxima con R. delemar. Las cepas de R. stolonifer
no mostraron crecimiento a 33°C, que también es similar a
Zheng et al. (2007), quien declaró que R. stolonifer tenía una
temperatura máxima que no excedía de 33°C. La temperatura
máxima de cada cepa registrada se adhirió bien a los datos
moleculares.
Los resultados morfológicos se compararon con Zheng et
al. (2007) como parte de la identificación de las cepas AR1-
AR14. Todas las cepas mostraron coherencia con la referencia.
Se encontró que las colonias de R. delemar y R. stolonifer en
PDA eran de color gris profundo a casi negro. El desarrollo de
rizoides está bien desarrollado en R. stolonifer pero menos
desarrollado en R. delemar. Rhizopus delemar tenía
esporangioophores
40 Hartanti ATet al.

Rhizopus delemar AR9 MF445156

Rizoma delemar AR10 MF445157
Rizoma delemar NBRC4810 AB512276
Rhizopus delemar NBRC4759 AB512275
Rizopo delemar CBS395 34 AB181316
69 Rizopo delemar CBS278 38 AB097299 R. delemar
Rizopo delemar CBS120 12T AB181318
Rizopo delemar CBS391 34 AB181325
Rizoma delemar AR11 MF445158
99 Rizoma delemar AR13 MF445160
Rizoma delemar AR14 MF445161
Rhizopus oryzae CBS330 53 AB181314
Rizopo oryzae CBS257 28 AB181311
78 Rizopo oryzae CBS127 08 AB181304 R. oryzae
74
Rizopo oryzae CBS112 07T AB097334
100 Schipperae Rhizopus ATCC204270 AB113015
Schipperae Rhizopus ATCC96514T AB106340
Rizopo caespitosus CBS427 87 AB097387
Rizopo homotálico CBS336 62T AB097388
Rhizopus microsporus var. microsporus CBS699 68 AB097385
54
Rhizopus microsporus var. microsporus CBS700 68 AB097386
54 Rhizopus microsporus var. azygosporus CBS357 92 AB097391
90 Rhizopus microsporus var. azygosporus CBS357 93T
AB097392 Rhizopus microsporus var. chinensis CBS631 82 AB097394
Rhizopus microsporus var. oligosporus CBS337 62 AB097395
82
Rhizopus microsporus var. oligosporus CBS338 62 AB097389
Rhizopus microsporus var. rhizopodiformis CBS343 29 AB097390
Rhizopus microsporus var. rhizopodiformis CBS536 80 AB097393
Rhizopus microsporus var. tuberosus CBS113206 AB512274
Rhizopus reflexus CBS319 35 AB100449
100 Rhizopus reflexus CBS320 35 AB100450
Rizoma americano CBS340 62T AB113010
Rhizopus sexual CBS336 39T AB113020
55
Estolonifer rizoposo CBS150 83 AB113022
50
Estolonifer rizoposo CBS609 82 AB113023
77 Estolonifer de Rhizopus AR2 MF461021
Estolonifer de Rhizopus AR7 MF461026
99
Estolonifer de rizopo AR1 MF461020
Estolonifer de rizopo AR4 MF461023 R. stolonifer
Estolonifer de rizopo AR6 MF461025

95 Estolonifer de Rhizopus AR3 MF461022

Estolonifer de Rhizopus AR5 MF461024
Phycomyces blakesleeanus CBS284 35 JN206308

0.10
Figura 1. Árbol filogenético de las cepas de Rhizopus AR1-7, 9-11, 13-14 comparado con la especie de referencia utilizando las
estadísticas de máxima probabilidad con 1.000 réplicas de la prueba bootstrap
HAYATI J Biosci 41
Vol. 27 No. 1, enero de 2020

Tabla 2. Datos fisiológicos de Rhizopus delemar y Rhizopus measuring mostly within 1,000 μm, and reaching 1,700 μm
stolonifer realizados a temperatura 33 y 42°C or more in length; in this study 120.43-1,088.50 μm of
sporangiophore’s length was acquired. R. stolonifer had
Código de cepa 33°C 42°C sporangiophores measuring mostly within 2,500 μm,
R. STOLONIFER AR1 - reaching 3,000 μm or more in length; in this study 463.69-
R. STOLONIFER AR2 -
R. stolonifer AR3 -
2,683.87 μm of sporangiophore’s length was acquired.
R. STOLONIFER AR4 - Swellings were supposedly seen mostly at the apex or the
R. STOLONIFER AR5 - middle portion of the R. delemar sporangiophores;
R. stolonifer AR6 - meanwhile, R. stolonifer had no swellings present. Both R.
R. STOLONIFER AR7 - delemar and R. stolonifer are typically ovoid, ellipsoidal, or
R. delemar AR9 + - roundish conical shaped columellae. The diameter of
R. delemar AR10 + - sporangiospores on R. delemar is mostly 5-9 (-14.5) μm,
R. delemar AR11 + -
R. delemar AR13 + - and when irregular it reached 53 μm in length; in this study
R. delemar AR14 + - 2.31-
Annotation: (+) growth, (-) no growth

un

b e
Figure 2. Rhizopus delemar strain collected from cherry tomato and peach: (a) sporangiophores in one cluster arising from rhizoid, (b)
finger-like shaped rhizoid, (c) columella with distinct apophyses, (d) irregular shaped sporangiospores, (e) swelling on
sporangiophore
42 Hartanti ATet al.

un b

c d
Figure 3. Rhizopus stolonifer strain colleted from apple, banana, and pear: (a) profusely branched rhizoid, (b) irregular shaped
sporangiospores, (c) columellae with distinct apophyses, (d) sporangiophores in single clusters arising from rhizoid

10.23 μm of sporangiospore’s diameter was acquired.
Rhizopus stolonifer had sporangiospores with a diameter
measuring mostly 5-12.5 (-19) μm; in this study 5.41-
24.55 μm of sporangiospore’s diameter was acquired.
Rhizopus spp. can be divided into fumaric-malic
acid producers, lactic acid producers, and producers of
both. Although there wasn’t a clear correlation between
organic producers and morphological classification, R.
delemar and R. oryzae were distinct from each other by
the acids they produced. Rhizopus delemar was reported
to be lacking ldhA gene, which was responsible in the
production of lactic acid; furthermore, R. delemar was
classified to be a fumaric-malic acid producer. On the
other hand, R. oryzae was capable of producing lactic
acid, thus making R. oryzae different from R. delemar
(Abe et al. 2007).
HAYATI J Biosci
Vol. 27 No. 1, January 2020
Abe et al. (2010) reported that R. americanus, R.
sexualis, and R. stolonifer shared morphological and
physiological features. However, R. stolonifer is
heterothallic, and both R. americanus and R. sexualis are
homothallic, so these strains are classified as independent
species in morphological taxonomy. A molecular
phylogeny cluster occuring in phylogenetic trees based on
rDNA-ITS, act1, and EF-1α consisted of R. reflexus, R.
stolonifer, R. sexualis, and R. americanus. Abe et al. (2010)
reclassified these species to be in the R. stolonifer group.
However, high divergence and multiple types sequences in
this cluster should be modified further for conclusive
taxonomy.
Rhizopus stolonifer AR7, AR6, and AR2 is similar to R.
stolonifer occuring on pear (Kwon and Lee 2006), guava
(Ooka 1980) and grapes (Latorre et al. 2002). Although R.
delemar AR10 and AR14 were found on cherry tomato and
tomato, R. stolonifer has been reported to be the fruit
pathogen as well (Kwon et al. 2001). Rhizopus stolonifer
AR1, AR3, AR4, AR5 and R. delemar AR11, AR9
contradict reports of R. oryzae invading banana, apple,
sweet potato, and strawberry (Kwon et al. 2011, 2012a,
2012b, 2014). Although R. delemar AR13 occured on
peach, this product had the potential in experiencing R.
stolonifer rot (Kwon and Lee 2006). Host nutrients and
acidic pH are required for all Rhizopus species to germinate
optimally, thus different agricultural products from
different origins do not trigger species specific growth.
There’s no clear correlation between the host nutrients, in
this case agricultural products, and Rhizopus species.
However, environmental factor affects prominently in the
infection of species specific pathogens, which might result
in inconsistencies of Rhizopus spp. discoveries from
different regions. The ecology and distribution of Rhizopus
spp. on fruits or vegetables are inadequate in mild or
tropical regions; therefore, it is hard to conclude whether
some of the known fungi are limited to specific hosts and
geography.
Rhizopus spp. are capable of producing significant
amount of organic acids and enzymes that could be used in
industries and medicinal uses. Rhizopus delemar and R.
stolonifer produce fumaric acid used in plastic industry, and
to a lesser extent, in the food industry (Roa Engel et al.
2008). Rhizopus stolonifer also produces lactic acid and is
often used in dairy industry as preservatives or flavour
enhancer (Soccol et al. 1994). Rhizopus stolonifer was
reported to bring about hydroxylation in the synthesis of
steroid used in treating hormonally imbalanced individuals,
patients with auto-immune diseases, and as birth control
pills (Nassiri-Koopaei and Faramarzi 2015). Rhizopus
delemar was reported to produce extracellular lipase
capable of acidolysis. The lipase acted strong on myristic,
palmitic, palmitoleic, stearic, oleic, linoleic, and α-linolenic
acids,
43
hence, making it useful in oil companies or biodiesel
production (Shimada et al. 1997). Protease produced by R.
stolonifer is of greater importance due to its higher protease
producing activity. Protease is essential in about 60% of
total enzyme market and capable of digesting insoluble
materials such as cellulose and protein (Kranthi et al.
2012). Naming and validating a specific Rhizopus species is
an essential step to ensure the role and benefit of the actual
sample acquired.
5. Conclusion
Twelve strains were successfully isolated and identified
from nine different types of agricultural products. Five
strains were identified as R. delemar and the other seven
remaining strains were identified as R. stolonifer. These
strains have the potential to yield useful organic acids and
enzymes for many types of industries.
Acknowledgements
The authors would like to thank Faculty of
Biotechnology, Atma Jaya Catholic University of Indonesia
for providing a fund to support this research.
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