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Ph
Diámetro
La longitud
Velocidad de flujo
flujo electroosmótico. Cuando se aplica un alto voltaje a un capilar de sílice fundida que contiene una
solución amortiguadora, se origina por lo regular un flujo electroosmótico en el cual el líquido migra
hacia el cátodo. , la causa del flujo electroosmótico es la doble capa eléctrica que se forma en la
interfase sílice-solución. A valores de pH por encima de 3, la pared interna de un capilar de sílice
presenta carga negativa debido a la ionización de los grupos silanol (Si¬OH) en su superficie. Los cationes
de la solución amortiguadora se agrupan sobre la doble capa eléctrica adyacente a la superficie negativa
del capilar de sílice. Los cationes situados en la capa exterior difusa de la doble capa son atraídos hacia
el cátodo o electrodo negativo, y dado que los cationes están solvatados arrastran entonces al solvente
con ellosEn general, la velocidad del flujo electroosmótico es mayor que la velocidad de migración
electroforética de los iones individuales y llega a ser, en la práctica, el mecanismo de bombeo de la fase
móvil en la electroforesis capilar. Aun cuando los analitos migran según sus cargas dentro del capilar, la
velocidad del flujo electroosmótico es por lo regular suficiente para arrastrar a todas las especies, las
que tienen carga positiva, las neutras y hasta aquellas con carga negativa hacia el mismo extremo del
capilar, de tal forma que todas pueden serdetectadas al pasar por un punto común (véase figura 30.4).
El electroferograma resultante es similar a un cromatograma, pero con picos más angostos.
v (me meo)E
co medida en su base. Es posible invertir el sentido del flujo electroosmótico normal al añadir un
tensoactivo catiónico a la solución amortiguadora. El tensoactivo se adsorbe sobre la pared del capilar y
hace que ésta quede con carga positiva. En esta nueva situación, los aniones de la solución
amortiguadora se agrupan en las proximidades de la pared y son arrastrados hacia el cátodo o electrodo
positivo. Esta estratagema se utiliza a menudo para acelerar las separaciones de los aniones.
las paredes exteriores del capilar de sílice fundida están casi siempre cubiertas con poliimida por
razones de durabilidad, flexibilidad y estabilidad.
En el método de inyección por presión, el extremo del capilar por donde se introduce la muestra se
coloca de manera momentánea en un pequeño recipiente que la contiene y se utiliza una diferencia de
presión para conducirla al interior del capilar. Esta diferencia de presión se origina al aplicar vacío en el
extremo del detector, al aplicar presión en el recipiente que contiene la muestra o bien, elevando el
extremo que contiene la muestra (inyección hidrodinámica). La inyección por presión no diferencia los
iones de acuerdo con su movilidad y no puede utilizarse en capilares rellenos de gel.
Para que el volumen de detección se mantenga dentro del orden de magnitud de los nanolitros o
menos, la detección se lleva a cabo en la columna. Para ello se elimina el revestimiento protector de
poliimida de la parte externa de una pequeña sección del capilar mediante combustión o ataque de
ácido. Este tramo del capilar hace las veces de celda de detección.
El agua inyectada tiene como función proporcionar un área de baja conductividad para
que puedan apilarse los analitos, y según algunos autores, mejora la reproducibilidad
(Chien, 1991; Wey y Thormann, 1999).
Por lo tanto, seleccionando una correcta polaridad durante la inyección, tanto cationes
como aniones pueden inyectarse y pre-concentrarse dentro del capilar (Chien, 1991).
Isotacoforesis