8. ¿Qué tipo de transiciones son mas probables en una molécula fluorescente?

Menciona dos
ejemplos de moléculas fluorescentes:

El primer requisito para que exista florescencia (o fosforescencia) es que la molécula posea
una estructura capaz de absorber radiación ultravioleta o visible, esto es, puedan tener lugar
transiciones π—>π* y n—>π*. Experimentalmente se ha observado que el comportamiento
fluorescente se presenta con más frecuencia en compuestos en los que la transición es π—
>π*

Ejemplos:

 Ámbar: Presentan radiación de color anaranjado al recibir luz ultravioleta de onda corta.
 Quinina: Es un componente de la tónica que ofrece un fenómeno de fluorescencia cuando
es excitada con luz UV (máximo de eficiencia en 350nm), proporcionando fluorescencia en
450nm.

9. Explica con tus palabras el “Efecto del átomo pesado”:

Esto pasa en moléculas orgánicas aromáticas, las cuales son influidas en su emisión de
fluorescencia cuando los sustituyentes que se unen al anillo bencénico son átomos grandes, como
es el caso de los halógenos, entre mas pesado es el átomo la fluorescencia disminuye.

10. ¿Qué es rendimiento cuántico?

El rendimiento o la eficacia cuántica de la fluorescencia es simplemente la relación entre el

número de moléculas que emiten fluorescencia respecto al número total de moléculas
excitadas. Las moléculas altamente fluorescentes, por ejemplo, la fluoresceína, tienen
eficiencias cuánticas que, en ciertas condiciones, se aproximan a la unidad. Las especies no
fluorescentes tienen eficiencias que son prácticamente cero.
11. ¿Qué grupos funcionales pueden favorecer la fluorescencia y cuáles inhibiría?

Los grupos funcionales que favorecen la fluorescencia son los aromáticos, por otro lado, la adición
de un acido carboxílico o de un grupo carbonilo en un anillo aromático generalmente inhibe la
fluorescencia.

12. Si quisieras que prevaleciera la fosforescencia sobre la fluorescencia que acciones realizarías.

La introducción de un átomo de número atómico elevado en un sistema de electrones π

13. ¿Qué efecto tiene el pH en una molécula aromática sustituida sobre la fluorescencia?

Los cambios en la emisión de los compuestos de este tipo provienen del número de especies
resonantes diferentes que están asociadas con las formas ácidas o básicas de las moléculas.
Así, por ejemplo, la anilina, en medio neutro y alcalino presenta fluorescencia en la región
visible, pero dicha fluorescencia desaparece en medio ácido.
14. Explique el fenómeno de rigidez estructural auxiliándose de la siguiente imagen:

El fenómeno de rigidez estructural básicamente explica como

la fluorescencia es favorecida si la molécula tiene mayor
rigidez. En este caso el fluoreno tendrá mayor fluorescencia
ya que este tiene mayor rigidez gracias al grupo metileno.

15. ¿Qué es Quenching?

El “quenching” o atenuación de fluorescencia puede ser definido como cualquier proceso que
disminuye la intensidad de fluorescencia de un determinado fluoroforo sin cambiar el espectro de
emisión.

Titulo del Articulo: La microscopia de fluorescencia en la investigación del Mycobacterium

tuberculosis.

En este articulo se hizo un estudio comparativo en la microscopia usando diferentes técnicas, por
una parte, usando la técnica de coloración de Ziehl – Neelsen que se basa en la tinción en caliente
con fucsina fenicada, decoloración con alcohol – acido y una coloración de contraste. Y por otro
lado se usará la técnica de fluorescencia esto puesto que el fluorocromado del Mycobacterium
tuberculosis mediante la auramina presenta ventajas sobre la coloración de Ziehl-Neelsen, pues
la luminosidad propia del bacilo sobre un fondo oscuro facilita su observación en menos tiempo y
basta para examinar la preparación mediante objetivos de pequeño aumento.

Se estudiaron 653 productos patológicos con estas 2 técnicas, al finalizar se pudo notar que la
eficacia es muy similar en ambos casos, sin embargo, la de fluorescencia es la que presenta una
ligera eficacia sobre la de Ziehl – Neelsen, sin embargo, la técnica de fluorescencia destaca mas en
la rapidez con la que se efectúa pues como se menciono anteriormente con esta técnica facilita su
observación. Cabe mencionar también que la técnica de fluorescencia tiene un costo más elevado
por lo tanto se recomienda usar este tipo de técnica cuando la demanda de exámenes
microscópicos es elevada