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La fluorescencia es un proceso de emisión en el cual las moléculas son excitadas por la absorción
de radiación electromagnética. Las especies excitadas se relajan al estado fundamental, liberando
su exceso de energía en forma de fotones. una de las características más atractivas de los métodos
de fluorescencia es su sensibilidad inherente, la cual es, con frecuencia, de uno a tres órdenes de
magnitud mejor que las de la Espectroscopía de absorción. No obstante, los métodos de
fluorescencia se aplican mucho menos que los métodos de absorción debido al número
relativamente limitado de sistemas químicos que se pueden hacer fluorescer. (Universidad de
Burgos, non)
Normalmente, el tiempo de vida media de una especie excitada es breve porque hay diversas
formas en las cuales un átomo o una molécula excitada liberan su exceso de energía y se relajan a
su estado fundamental. Dos de las más importantes de estos mecanismos son la relajación
(desactivación) no radiante y la relajación fluorescente. (Universidad de Burgos, non)
Las sustancias que no son fluorescentes no emiten energía (luz): simplemente, reflejan parte de las
radiaciones recibidas. Por eso, cuando vemos un objeto azul que está siendo iluminado por la luz
del Sol, ese objeto está reflejando esa luz azul, y está absorbiendo el resto de las longitudes de
onda que recibe. Si el objeto es blanco, refleja todas las radiaciones que recibe, y, si es negro, las
absorbe todas. Esto es distinto a lo que ocurre con una sustancia fluorescente: estas sustancias
absorben unas radiaciones, y emiten otras radiaciones. (AgsAnalitica, non)
En general, la longitud de onda emitida por una sustancia fluorescente es mayor que la recibida
(es decir que su energía es menor). La duración de todo el proceso es de unos nanosegundos, por
lo que se considera que es instantáneo. (AgsAnalitica, non)
Espectrofluorómetro:
Bibliografía: