PROGRAMA DE BACTERIOLOGÍA Y LABORATORIO CLÍNICO

CURSO DE BIOTECNOLOGÍA

INFORME PSEUDOMONAS AERUGINOSA

Evelyn Navarro Coronel 01200171013

Karen Julitza Flórez Tapias 01200171007
Bacteriología y Laboratorio Clínico
Universidad de Santander, Bucaramanga, Colombia

OBJETIVO

Identificar y conocer el microorganismo Pseudomonas aeruginosa principalmente en

el área de laboratorio con sus pruebas bioquímicas, teniendo como correlación los
aspectos clínicos y su tratamiento.

INTRODUCCIÓN

Pseudomonas aeruginosa es un patógeno importante en el diagnóstico diferencial de

varias infecciones comunes.
La consideración de este organismo es importante porque tiene el potencial de causar
infecciones graves, especialmente en pacientes inmunodeprimidos, y es resistente a
múltiples fármacos.

MATERIALES
֊ Aceite de inmersión
֊ Aceite mineral estéril
֊ Asas bacteriológicas de argolla
֊ Cinta de enmascarar
֊ Coloración de Gram
֊ Fósforos
֊ Implementos de bioseguridad
֊ Incubadora
֊ Gradillas
֊ Láminas portaobjetos
֊ Lápiz marcador
֊ Mecheros
֊ Microscopio
֊ Solución salina 0.9%
֊ Lámpara de U.V
֊ Medios de cultivo Agar nutritivo, Agar cetrimide, Agar Mac Conkey, Agar sangre
֊ Cepas bacterianas de Pseudomonas aeruginosas
֊ Series bioquímicas
֊ OF: glucosa, lactosa, maltosa, sacarosa y manitol
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METODOLOGÍA

Pruebas Oxidación - Fermentación (OF)

1ml
aceite 48-72 h

15 cm

Glucosa Maltosa Manitol Lactosa Sacarosa

Gram

Pseudomonas aeruginosa Agar Sangre

Agar Nutritivo
Replique
Agar Mac Conkey Agotamiento
Agar Cetrimide

MARCO TEÓRICO

Las P. aeruginosa son lo suficientemente versátil en cuanto a sus necesidades energéticas y

de crecimiento como para utilizar moléculas simples como amoniaco y dióxido de carbono
como sus únicas fuentes de nitrógeno y carbono. Así, no se requiere de medios enriquecidos
para su cultivo y puede sobrevivir y multiplicarse en un amplio intervalo de temperatura (20 a
42 °C) en casi cualquier ambiente, lo que incluye entornos ricos en sales.
El microorganismo utiliza mecanismos productores de energía por oxidación y altas
concentraciones de oxidasa del citocromo (positivo para oxidasa). Aunque es necesaria una
atmósfera aeróbica para el crecimiento y metabolismo óptimos, casi todas las cepas crecen
con lentitud anaeróbicamente si hay nitrato como aceptor de electrones.

Como mecanismo de patogenicidad se encuentra que la unión a las células epiteliales es el

primer paso en la infección esta bacteria y probablemente esté mediada por pilosidades,
flagelos y una cubierta de polisacáridos extracelulares. Los receptores incluyen ácido siálico
y N-acetilglucosamina que se originan en los glucolípidos de la superficie celular. La unión es
favorecida por la pérdida de fibronectina de superficie, lo que explica en parte la propensión
en personas debilitadas.
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Cuadro clínico

P. aeruginosa puede producir cualquiera de las infecciones extraintestinales oportunistas

causadas por enterobacterias. Pueden ocurrir infecciones de heridas por quemaduras,
heridas abiertas, vías urinarias, piel, ojo, oído y vías respiratorias que pueden progresar a
bacteriemia. P. aeruginosa es una de las causas de infección en heridas contaminadas en el
medio ambiente.

֊ La neumonía por P. aeruginosa es una infección particularmente rápida y

destructiva en individuos con granulocitopenia. Se asocia con necrosis alveolar,
invasión vascular, infartos y bacteriemia.
֊ La infección pulmonar en individuos con fibrosis quística es diferente; es una
infección crónica que se alterna entre un estado de colonización y bronquitis más
evidente, o bien, neumonía. Aunque no es común un comportamiento más
agresivo de la infección por Pseudomonas en individuos con inmunodepresión, la
infección aún es lo suficientemente grave para causar la muerte en personas con
fibrosis quística.
֊ P. aeruginosa también es una causa común de otitis externa, lo que incluye el
“oído de nadador” y de una otitis externa “maligna” poco común, pero que pone en
riesgo la vida y que se observa en personas con diabetes.
֊ La foliculitis cutánea puede aparecer después de baños en tinas de agua caliente
mal descontaminadas que presentaron contaminación intensa con el
microorganismo.
֊ También puede causar conjuntivitis, queratitis y endoftalmitis cuando se introduce
en el ojo a través de traumatismos, medicamentos contaminados o en soluciones
de lentes de contacto contaminadas.

Tratamiento

Las cepas de P. aeruginosa por lo común son resistentes a penicilina, ampicilina, cefalotina,
tetraciclina, cloranfenicol, sulfonamidas y a los primeros aminoglucósidos (estreptomicina,
kanamicina). Los aminoglucósidos más nuevos (gentamicina, tobramicina, amikacina)
muestran actividad contra la mayor parte de las cepas pese a la presencia de resistencia
mediada por plásmidos y por mutaciones.
• La carbenicilina y ticarcilina presentan actividad y pueden administrarse en dosis
elevadas, pero las mutaciones de permeabilidad ocurren más a menudo que con los
aminoglucósidos. La característica más notable de algunas de las cefalosporinas de
tercera generación (ceftazidima, cefepima, cefoperazona), carbapenémicos
(imipenem, meropenem) y monobactámicos (aztreonam) radica en su actividad contra
Pseudomonas.

• En términos generales, las infecciones urinarias pueden tratarse con dosis única, pero
las infecciones sistémicas más graves por P. aeruginosa por lo común se tratan con
una combinación de betalactámicos con actividad contra Pseudomonas y un
aminoglucósido, en particular en individuos con neutropenia. También se ha utilizado
ciprofloxacina en el tratamiento de algunos casos.
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RESULTADOS

Prueba de OF

Gram Agar Nutritivo

Agar Sangre Agar Cetrimide

Agar Mac Conkey

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DISCUSIÓN DE RESULTADOS

Prueba de OF Resultados Discusión

Se observa que el tubo con un

medio anaeróbico (aceite mineral)
viró a un azul verdoso
posiblemente porque el tubo lo
dejamos muy cerrado y el cultivo en
esas condiciones se mantuvo en
ese color, sin embargo, la prueba
Manitol debería haber quedado todo el
medio verde. Así mismo el tubo con
una condición aeróbica el resultado
es el esperado, un medio verde con
una ligera superficie amarilla)
posible por una contaminación.

Manitol= Asacarolítico

En el tubo anaerobio no se obtuvo

lo esperado, dado que no viró al
color amarillo en todo el medio. El
tubo anaeróbico sí obtuvo el color
esperado (verde), indicándonos
Maltosa que en esta prueba con este azúcar
el resultado debió ser: Amarillo -
Verde

Maltosa= Oxidativo

Es uno de los resultados que más

asertividad alcanzó, porque
encontramos el primer
tubo(aerobio) totalmente amarillo y
Glucosa el segundo (anaerobio) verde.

Glucosa= Oxidativo

Tanto la sacarosa como la lactosa

obtuvieron en el tubo anaeróbico
un viraje verde, en contraste con el
otro tubo con un medio azulado.
La bacteria en este caso debería
Sacarosa y dejar la prueba con los dos
Lactosa azúcares:
verde- verde.
Sacarosa=Asacarolítico
Lactosa=Asacarolítico
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Pruebas Resultados Discusión

Se observan bacilos Gram

Gram negativos agrupados en pares
o aislados.

֊ Presenta hemolisis.
Aeruginosa es la producción
de hemolisina, enzima que le
Agar Sangre permite la degradación de la
hemoglobina presente en
el agar sangre.

֊ Olores característicos
(Chancleta nueva)
Es un medio que se utiliza para
Agar Nutritivo obtener un cultivo puro para la
confirmación de las presuntas
colonias positivas
de Pseudomonas aeruginosa

Hay presencia de pigmento

azulado (Piocianina) y en
visualización de la luz UV se
ve la fluorescencia.
Agar Cetrimide
La piocianina y la fluoresceína
combinadas producen un color
verde brillante que se difunde
a través del medio de cultivo.

CONCLUSIÓN

Pseudomonas aeruginosa constituye uno de los microorganismos más

frecuentemente aislados en la práctica clínica en los pacientes críticos. Es causante
de infecciones con una elevada morbilidad y mortalidad. El tratamiento antibiótico
inapropiado o el retraso en el inicio de éste se asocia a un peor pronóstico. La
infección por P. aeruginosa es clínicamente indistinguible de otras infecciones por
bacilos gramnegativos u otros patógenos.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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SHERRIS. MICROBIOLOGÍA MÉDICA quinta edición.McGRAW-HILL

INTERAMERICANA EDITORES, S. A. de C. V. Capítulo 35 pag 471-474.