LABORATORIO DE BIORREACTORES ELABORÓ: RAMÍREZ SÁENZ D., SALGADO ROMÁN J.M., RODRÍGUEZ SIERRA J. C.

ACTUALIZÓ: JIMÉNEZ CASTILLO R. I.

PRÁCTICA 2. INSTRUMENTACIÓN Y CONTROL DE

BIORREACTORES

INTRODUCCIÓN.

El crecimiento de un microorganismo en un biorreactor tiene que estar controlado, y el operador tiene que
tener suficiente información acerca del estado del microorganismo y las condiciones del biorreactor.
Monitorear un proceso de fermentación podría necesitar conocimiento del bioproceso, así como de las
condiciones en que se lleva a cabo. Los Biorreactores operan en condiciones estériles y se obtiene información
tomando muestras o por mediciones in situ, es decir, que el sensor se encuentra en el interior del biorreactor
en contacto con el medio de cultivo evitando problemas de retardo o representatividad de la muestra, la
medición y control de las condiciones de fermentación son muy importantes para el control del bioproceso ya
que proporcionan conocimiento y por consiguiente un mejor entendimiento de la operación. Los sensores en el
biorreactor proveen información del estado de los procesos y además proporcionan adecuadamente datos de
operación de las variables de proceso. Algunos fenómenos químicos o físicos del biorreactor son convertidos a
señales eléctricas, las cuales son amplificadas y luego graficadas en un monitor (o almacenadas) y usadas en la
señal de entrada para una unidad de control.Durante la fermentación se pueden medir parámetros del tipo
físico, químico y biológico, y en Biorreactores equipados la instrumentación básica puede proveer suficiente
información para determinar la masa total, la velocidad de agitación, potencia y torque, potencial redox,
concentración de dióxido de carbono disuelto y velocidades de flujo de gas y líquido dentro del reactor.
Mientras que el control básico es sobre las variables de temperatura, pH, concentración de oxígeno disuelto,
nivel de espuma y nivel del líquido.

El control se realiza según el lazo de control típico formado por el proceso (tanque, tuberías, y bombas en el
caso del nivel; e intercambiadores de calor y serpentín en el caso de control de temperatura) el transmisor, el
controlador y la válvula de control.Un circuito o lazo abierto de control es el camino que sigue la señal sin re-
alimentación, es decir, carece de un detector de señal de error y de controlador. Mientras que el lazo cerrado
de control es el camino que sigue la señal desde el controlador hacia la válvula de proceso y re-alimentándose
a través del transmisor hacia un punto de suma con el punto de consigna.Una característica importante de los
instrumentos de medición son la exactitud y la precisión

OBJETIVO
Manejar los sistemas de medición y control de variables de operación de un biorreactor de tanque agitado a
través de la determinación en línea de pH, temperatura, oxígeno disuelto y espuma.

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MATERIALES Y MÉTODOS

MATERIALES Y EQUIPO:
BiorreactorApplikon.

a. Interfase colectora de datos

b. Electrodos de pH, temperatura y oxígeno disuelto.
c. 1 Probeta de 1000 mL. REACTIVOS:
d. 1 Pipeta de 10 mL. 1. 50 mL solución de NaOH 0.5N.
e. 1 Manguera de silicón. 2. 50 mL solución de HCl 0.5N.
f. 1 Cronómetro. 3. Tanque de nitrógeno puro con válvula de control
g. Solución de NaOH 0.5N de presión y de flujo.
h. Solución de HCl 0.5 N
i. Antiespumante Tween 60 o Tween 80 (10% v/v) en agua.
j. Agua destilada.
k. Detergente
l. Recipiente de agua de enfriamiento con bomba.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL.

ACTIVIDADESPREVIAS
 Medir las dimensiones de todas las partes del biorreactor.
 Consultar los manuales de operación tanto del biorreactor como de los servicios auxiliares al equipo
(Gas Nitrógeno, Compresor de aire).
 Identificar, en el biorreactor, los sistemas de medición y control de temperatura, pH, oxígeno disuelto y
espuma.
 Llenar el biorrector con agua con el volumen de trabajo.
 Calibrar los electrodos de temperatura, pH y oxígeno disuelto, este último requiere de una polarización
de 6 horas antes de su uso.
 Deshabilite el control de espuma.
 Establecer condiciones de operación para cada situación a estudiar.

Todo lo anterior se realizará auxiliado por el instructor.

ACTIVIDADES PARA MEDIR LAS PROPIEDADES DE LOS BIORREACTORES

Medición y control de pH

 Agregue agua al biorreactor a temperatura ambiente, determine antes el volumen de operación.

 Establezca una velocidad de agitación siguiendo las indicaciones del manual de operación.
 Ajuste el pH a un valor de cinco con la disolución de ácido clorhídrico 0.5 N y establezca en el equipo un
valor de Set Point de cinco siguiendo las indicaciones del manual de operación.

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 Cerciorarse de que el sistema de adición de ácido y álcali este correctamente instalado y conectado al
biorreactor.
 Agregue al biorreactor 10 ml de una solución de ácido clorhídrico 0.5 N con objeto de simular una
biorreacciónacidogénica (disminuye el valor del pH con forme pasa el tiempo).
 Observe cómo el controlador enviará una señal a la bomba peristálica para accionar el álcali. La bomba
dejara de funcionar cuando el pH alcance o sobrepase el valor del Set Point.
 Repita el protocolo hasta que se comprenda el sistema de medición y control de pH.

Medición y control de temperatura

 Establezca una velocidad de agitación de 200 rpm.

 Cerciorarse de que el sistema de calentamiento y enfriamiento este correctamente instalado y
conectado al biorreactor.
 Establezca en el equipo un valor de Set Point de 30 ° C siguiendo las indicaciones del manual de
operación.
 Observe cómo el controlador enviará una señal para accionar el sistema de calentamiento.
 Establezca en el equipo un valor de Set Point de 25 ° C siguiendo las indicaciones del manual de
operación.
 Observe cómo el controlador enviará una señal para accionar el sistema de enfriamiento.
 Repita el protocolo hasta que se comprenda el sistema de medición y control de temperatura.

Medición del oxígenodisuelto

 Establezca una velocidad de agitación de 300 rpm y una temperatura de 25 ° C .

 Cerciorarse de que el sistema de aireación este correctamente instalado y conectado al biorreactor.
 Establezca un flujo de aire de 0.5 vvm (ajustar con el rotámetro del equipo) y espere unos 15 minutos
hasta que la lectura permanezca estable.
 Con este valor, establezca en el equipo 100% del valor de saturación.
 Suspenda el suministro de aire cerrando la válvula del rotámetro de aire. Conecte un tanque de
nitrógeno puro al sistema y haga pasar un flujo de nitrógeno tal que no sobrepase los 0.75 vmm
totales, con el objetivo de disminuir la concentración de oxígeno disuelto en el agua.
 Observe cómo el oxígeno disuelto en el agua disminuye.
 Suspenda el suministro de nitrógeno cerrando la válvula del rotámetro y abra la válvula de aire para
obtener 0.5 vmm , observe cómo el valor de oxígeno disuelto volverá a su valor inicial.

Medición y control de la espuma

 Agregue al biorreactor 2% de detergente a temperatura ambiente y establezca una velocidad de

agitación de 250 rpm y un flujo de aire de 0.15 vvm que deberá verificar en el rotámetro.
 Observe si se genera espuma.
 Incremente la velocidad de agitación en intervalos de 50 rpm hasta llegar a 400 rpm . Mantenga las
diferentes velocidades durante 10 minutos y observe lo que ocurre con la formación de espuma.
Anotesusobservaciones.
 Estando a 400 rpm incremente el flujo de aire hasta un valor de 0.75 vvm , observe lo que ocurre con la
formación de espuma. Anotesusobservaciones.
 Cerciorarse de que el sistema de adición de antiespumante este correctamente instalado y conectado
al biorreactor.
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 Accione el sistema de control de espuma.

 Establezca una velocidad de agitación y flujo de aire que tenga la más alta formación de espuma, el
objetivo es que se acciones el sistema de control de espuma. Anotesusobservaciones.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN.

Identifique los sistemas de control e instrumentación en el biorreactor que observó en la práctica. Anote sus
observaciones en la Tabla 1.1.

Tabla 1.1. Sistemas de monitoreo y control en los diversos biorreactores de la UPIIG.

BIORREACTOR

SENSOR

CONTROL

ESQUEMA
ESPUMA

NOTAS

MONITOREO
NIVEL

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CONTROL

ESQUEMA

NOTAS

BIORREACTOR

SENSOR

CONTROL
TEMPERATURA

ESQUEMA

NOTAS

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BIORREACTOR

SENSOR

CONTROL
PH

ESQUEMA

NOTAS

MONITOREO

CONTROL
OXIGENO DISUELTO

ESQUEMA

NOTAS

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OBSERVACIONES
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REFERENCIAS.
1. Aiba, S. y Humprey A.E. Biochemical Engineering. Academic Press. EUA. 1973, 434 págs.
2. Harper, E.H. 2000. El ABC de la instrumentación en el control de procesos industriales. Limusa. Mexico.
3. Lydersen, B.K., D’Elia N.A., Kim, L.N. 1994. Bioprocess engineering: systems, equipment and facilities. John
Wiley and Sons, Inc. USA.
4. Najafpour, G.D. 2007. Biochemical engineering and biotechnology. Elsevier. Holanda. 421 pags.
5. Stanbury, P.F., Whitaker, A., Hall, S.J. 1999. Principles of Fermentation Technology. Butterworth-
Heinemann. EUA. 376 págs.
6. Wang, D.I.C., Cooney, C.L., Demain, A.L. Dunill, P., Humphrey, A.E. Lilly, M.D. 1978. Fermentation and
Enzyme Technology. John Wiley & Sons. Nueva York, EUA. 384 págs.