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Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas


Químico Farmacéutico Industrial
Fisiología Celular

Práctica 10: “MÚSCULO LISO ”

4FM1

Equipo:4

7.8
Integrantes:
Fernández Peña Carlos Sebastián
Noria Velarde Ivonne
Pacheco González Alinne Aketzali
Ramírez Guerrero Haylie Vianey

Fecha de entrega:
15/06/2022

Profesores:
Ana Lilia Gutiérrez Lozano
Sonia Guzmán Velázquez
Sergio Roberto Zamudio Hernández
Efecto de sustancias simpaticomiméticas, parasimpaticomiméticas y
parasimpaticolíticas sobre la actividad contráctil​

Objetivos
● Analizar el efecto de sustancias simpaticomiméticas sobre la frecuencia, tono y
fuerza de contracción del músculo liso en el yeyuno de conejo (Oryctolagus
cuniculus).
● Analizar el efecto de sustancias parasimpaticomiméticas sobre la frecuencia, tono
y fuerza de contracción del músculo liso en el yeyuno de conejo (Oryctolagus
cuniculus).
● Analizar el efecto de sustancias parasimpaticolíticas sobre la frecuencia, tono y
fuerza de contracción del músculo liso en el yeyuno de conejo (Oryctolagus
cuniculus).

Fundamento
Se utilizó el conejo (Oryctolagus cuniculus) debido a que es un animal que tiene una gran
actividad y contractilidad intestinal, a su vez se utilizó el yeyuno porque presenta inervación
parasimpática y simpática (observar efectos de los fármacos agonistas y antagonistas), es
decir, el yeyuno es la parte del intestino del conejo con mayor actividad contráctil, siendo un
modelo experimental útil para determinar la acción de sustancias con actividad
simpaticomimética, parasimpaticomimética y parasimpaticolítica, o la influencia de factores
como la temperatura, la tensión y la presión parcial de oxígeno.
La solución de Tyrode ayuda a mantener el pH fisiológico (2.1-2.5) del yeyuno de conejo y
aporta energía y electrolitos que requiere el intestino para su funcionamiento adecuado, adema
sla Tyrode contiene glucosa, por lo que manteniendo la aireación, el oxígeno y la glucosa
ayudan a producir ATP para que la contracción se pueda llevar a cabo. Además Se adiciona la
solución Tyrode entre cada sustancia, para registrar sólo las contracciones que producen las
sustancias que administramos y se mide el tono, frecuencia y fuerza de contracción, para
observar los cambios en las contracciones dependiendo de las sustancias que se le
administran.
Se administra adrenalina porque se quiere poner en evidencia a las sustancias
simpaticomiméticas, activando los receptores adrenérgicos (alfa 1 y beta 2) que favorecen la
relajación.
Se administró acetilcolina porque se quiere poner en evidencia las sustancias
parasimpaticomiméticas que favorecen la contracción.
Finalmente se administró atropina con acetilcolina, ya que la acetilcolina favorece la
contracción, mientras que la atropina favorece la relajación, poniendo en evidencia en
sustancias parasimpaticolítica

Resultados
1) Adrenalina

Figura 3. Registro del BIOPAC ante el efecto de la adrenalina en el músculo liso en un tiempo basal comparado a los tiempos
1, 2 y 3 min.

Los resultados deben estar descritos,


no se trata sólo de presentar gráficos
y tablas
2) Acetilcolina

Estos valores son bajos

Figura 6. Registro del BIOPAC ante el efecto de la acetilcolina en el músculo liso en un tiempo basal comparado a los tiempos
1, 2 y 3 min.

Los resultados deben estar descritos,


no se trata sólo de presentar gráficos
y tablas
3) Atropina+Acetilcolina

Figura 8. Registro del BIOPAC ante el efecto de la atropina en el músculo liso en un tiempo basal

Figura 9. Registro del BIOPAC ante el efecto de la atropina en el músculo liso en un minuto.

Los resultados deben estar descritos,


no se trata sólo de presentar gráficos
Figura 10. Registro del BIOPAC ante el efecto de la atropina + acetilcolina en el músculo liso en un tiempo basal
comparado a los tiempos 1, 2 y 3 minutos.

Discusión
La frecuencia y la fuerza disminuyeron. Como sabemos la adrenalina tiene receptores
adrenérgicos (α1 y β2) los cuales, α1 es de la vía Gq (contracción) de los receptores GPCRs
de las proteínas G y β2 es de la vía Gs (relajación). Sin embargo, los receptores α1 tienen la
misma capacidad de relajarse. Por eso observamos que las contracciones por minuto
disminuyen. por otro lado están los receptores β2 los cuales por la vía Gs de los receptores
GPCRs acoplados a las proteínas G, activan la cinasa PKA para la relajación del yeyuno: La
subunidad α activa interacciona con adenilato ciclasa, enzima que es sustrato de ATP
generando AMPc, el cual es el segundo mensajero, el AMPc se une a dos subunidades
reguladoras de PKA y libera 2 subunidades catalíticas, de tal manera que el resultado de esta
vía son altos niveles de AMPc y activación de PKA el cual transfiere un grupo fosfato que retira
del ATP modificando la actividad del miosina. Las cadenas ligeras de miosina se desfosforila
por la enzima MLCP ( fosfatasa de las cadenas largas de miosina). además para la relajación
debe haber una disminución de la concentración de calcio, para esto hay tres maneras: por la
bomba SERCA moviendolo del sarcoplasma al RS, bomba PMCA mueve el calcio del
sarcoplasma al LEC y por último, la NCX intercambiando 3 sodio y salen 1 de calcio. este
proceso lo podemos observar en la siguiente imagen.
La acetilcolina como sabemos tiene receptores colinérgicos muscarínicos pero estos dependen
del músculo, en el caso del músculo liso tiene M1, M3 Y M5, todas de la vía Gq, el cual es la
vía para la contracción del ML. El PIP2 es hidrolizado por PLC beta: el PI-4 cinasa fosforila en
posición 4 el fosfatidilinositol para después el PI-5 fosforila a fosfatidilinositol para formar PIP2,
en el REL se almacena Calcio y hay receptores IP3 llamados R-IP3 los cuales son canales de
calcio dependientes de ligando, cuando el IP3 se une a R-IP3 los canales se abren y dejan salir
calcio del RS al sarcoplasma, generando el aumento de concentración de calcio en el
sarcoplasma y la activación de
PKC. Para la contracción del
músculo liso debe haber un
aumento de concentración de
calcio en el sarcoplasma el cual
fue generado por la vía Gq, de tal
manera, que el calcio se une a la
calmodulina generando el
complejo Ca-CaM, activando las
cinasas de las cadenas ligeras de
miosina (MLCK) las cuales toman
un grupo fosfato del ATP y lo
transfiere a las MLC20,
aumentando la actividad. El PKC
fosforila al caldesmo y a la
calponina de la actina, generando
un cambio conformacional en la
tropomiosina descubriendo los sitios de unión de la actina para la miosina y se lleve a cabo el
ciclo de formación de puentes cruzados de miosina y actina, como lo observamos en la
imagen.

La atropina es un bloqueador de los receptores colinérgicos muscarínicos, en este caso


bloquea acetilcolina. De tal manera que por eso observamos que la frecuencia disminuye al
igual que la fuerza de contracción. Sin embargo, al minuto 4 vuelve a estabilizarse generando
12 contracciones en un minuto, ya que como fue bloqueado el parasimpático del SNA, queda el
simpático, además de que la atropina está a mayor concentración que la acetilcolina.

Conclusión
● La adrenalina favorece la relajación, por lo que la frecuencia y fuerza de contracción
disminuye.
● La acetilcolina favorece la contracción, por lo que la frecuencia y fuerza de contracción
aumenta
● La atropina favorece la relajación pero la acetilcolina la contracción, por lo que al
administrar atropina la fuerza de contracción y frecuencia disminuye; y al adicionar
acetilcolina habrá un aumento de la fuerza de contracción y frecuencia
Efectos de estímulos físicos sobre actividad contráctil

1) Tensión y Disminución de T°
Objetivos
● Analizar el efecto que se tiene en la frecuencia, y fuerza de contracción al aumentar la
tensión del yeyuno aislado de conejo ​
● Analizar el efecto que se tiene en la frecuencia, y fuerza de contracción al disminuir la T°
de la solución fisiológica (Tyrode)

Fundamento
Se ocupó yeyuno de conejo por su alta actividad contráctil, además que el conejo es un ser
herbívoro, su alimento tiene un bajo aporte energético, así que necesita estar constantemente
ingiriendo alimento haciendo que su actividad contráctil aumente.
Se ocupó la solución tyrode ya que se tenía que mantener un pH fisiológico, y una T° y sobre
todo necesitaba tener electrolitos y glucosa.
Igualmente la muestra necesitaba oxígeno para poder producir ATP con la glucosa.
Nosotros al aumentar la tensión lo que queríamos ver es el efecto que se tiene en la frecuencia
y en la fuerza del intestino y de la misma manera al bajar la T° de la solución fisiológica

Resultados
a) Tensión
Tabla4.Frecuencia y fuerza del efecto de tensión del yeyuno de conejo.

Discusión

Los resultados deben estar descritos,


no se trata sólo de presentar gráficos
y tablas
DISCUSIÓN
Cuando se aumenta la tensión aumenta la frecuencia y la fuerza de contracción pero después
de cierto tiempo regresa a su valores basales, esto se debe a que los canales de calcio
dependientes de estímulos mecánicos hace que se estire la membrana se abra el canal y
permite que haya mayor entrada de calcio aumentando la contracción. Nosotros en nuestro
registro basal tenemos que en nuestro intestino haya contracciones sin haber administrado
estímulos eléctrico o la administración de alguna sustancia aparte de que únicamente tenemos
un segmento de intestino sin inervación el que se encarga de la actividad contráctil son las
células intersticiales de Cajal, lo que hacen es generar potenciales de onda lenta, para después
para llevar a cabo la contracción lo que hacen es que como están acopladas a las fibras del
músculo liso mediante la sinapsis química eléctrica le llega a las células contráctiles haciendo
que se abran los canales de calcio tipo L dependientes de voltaje ubicados en el sarcolema se
abren dejando entrar al calcio al sarcoplasma, Formándose el complejo calcio-calmodulina que
activa una cinasa que finalmente hace que se active la MLCK donde toma un fosfato del ATP y
se lo transfiere al MLC, donde el caldesmon y la calmodulina las fosforilan el PKC para que
haya ese cambio de conformación y se observa la contracción, el MLCK fosforila las cadenas
ligeras que genera un cambio de conformacion que descubren los sitios de unión de actina
paramiosina para despues formar puentes cruzados, generar el golpe de fuerza y finalmente la
contraccion. Cuando relajamos el músculo se debe disminuir la concentración de calcio en el
sarcoplasma los mecanismos pueden ser por MCA, Bomba SERCA y MCX para ver la
relajación del músculo.
Cuando nosotros tensionamos el músculo se abren los canales de calcio y se genera mayor
número de puentes cruzados
Conclusión
● El aumento en la tensión provoca un incremento en la fuerza de contracción y en la
frecuencia hasta que el intestino se acostumbre y vuelva a su valores basales

b) Disminución de T° de Tyrode
Tabla5. Frecuencia y fuerza de la tyrode en 20°C de T°.

Los resultados deben estar descritos,


no se trata sólo de presentar gráficos
y tablas
Los resultados deben estar descritos,
no se trata sólo de presentar gráficos
y tablas

Discusión
Para comenzar la temperatura de la tyrode no estuvo tan fría como debió de haber estado
como para que el experimento hay tenido los resultados esperados
Por lo tanto podemos decir que el efecto de la temperatura en el músculo fue por el movimiento
iónico (energía cinética), por lo tanto cuando se disminuye la temperatura cambia de
conformación y hace que la desfosforilación disminuye y esto quiere decir que el flujo de iones
se vuelve lento a lo que normalmente es lo que normalmentes es haciendo que disminuya la
frecuencia y la fuerza de contracción

Conclusión
● La disminución de T° de la tyrode hará que la frecuencia disminuya, pero regrese a sus
datos basales​
● La tyrode fría hará que la fuerza disminuya, pero regrese a sus datos basales ​

2) Efecto de la hipoxia sobre la actividad contráctil

Objetivos
● Determinar la influencia que ejerce la hipoxia sobre la actividad contráctil del músculo
liso intestinal.

Fundamento:
Hipoxia: Es un estado de deficiencia de oxígeno en la sangre, células y tejidos del organismo,
con compromiso de la función de los mismos.​
Se disminuye la presión parcial de oxígeno para llevar a la preparación de yeyuno a la hipoxia,
se busca poner en evidencia el efecto de la hipoxia sobre la fuerza y la frecuencia contráctil del
músculo liso. ​

Resultados:

No se nota en su registro este


aumento de frecuencia

Discusión:
Al restringir el oxígeno a la preparación del yeyuno disminuye la cantidad de ATP. En la
contracción, el ATP energiza y separa las cabezas de la miosina, además permite la función de
las bombas SERCA y PMCA, por lo que al faltar se modifica el proceso de formación de
puentes cruzados por lo que la fuerza de contracción y frecuencia disminuyen.​

Se observa una disminución poco significativa en la frecuencia y la fuerza de contracción


debido a su mecanismo de “puente en cerrojo” debido a este mecanismo sus puentes cruzados
duran más tiempo y evitan la disminución significativa de la frecuencia y la fuerza de
contracción como ya se mencionó antes.

Conclusión:
● La disminución de la presión parcial de oxígeno ocasionó que disminuyeran la
frecuencia y la fuerza de contracción. En la gráfica se ve un aumento

REFERENCIAS
● Kim E. Barrett; Susan M. Barman; Scott Boitano; Heddwen L. Brooks ( 2016) Fisiología
Médica GANONG 25ª. Edición. Editorial INTERAMERICANA, CDMX, México 495-497​

● WALTER F. BORON, MD, PhD; MILE L. BOULPAEP, MD (2017) Fisiología médica 3ª


edición, Barcelona España pág. 855-857​

● Susan E. Mulroney; Adam K. Myers (2011) Netter. Fundamentos de Fisiología, Elsevier


España, S.L pág. 253 y 254 ​

● Fajardo, M., 2011. Fisiología General. CDMX: UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA


DE MÉXICO, pp.52-53.

¿Referencia del Manual de Laboratorio?

Las referencias se citan en orden alfabético, de preferencia

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