RETOS EN MICRO, NANO

Y BIOTECNOLOGÍA
P R IM E R A S P R U E B A S D E H A B ILID A D E S

P R E SE N TA C IÓ N D E P R O Y E C T O S D E IN V E ST IG A C IÓ N

ISB N :978-958-15-0187-8


Editor:
Darwin D. Rodriguez P.
MSc. Ingeniería
Servicio Nacional de
Aprendizaje—SENA
Comité Editorial:
Alba G. Avila B. Ph.D.
Universidad de los Andes.
Luz America Malagon G.
SENA– Grupo SENNOVA
Fernando Pastrana
MD, MSc, PhD Candidato
Universidad de los Andes.
David Ayala
BS Microbiología
Universidad de los Andes.
SERVICIO NACIONAL DE
APRENDIZAJE—SENA.
DIRECCIÓN GENERAL.
Alfonso Prada Gil
Director General del SENA
Gina Maria Parody
D´Echeona
Directora General de SENA
(2013—2014)
Mauricio Alvarado Hidalgo
Director de Formación
Profesional
Natalia Ariza Ramírez
Directora de Formación
Profesional (2013—2014)
Emilio Eliecer Navia Zuñiga
Coordinador del Grupo de Ges-
tión Estratégica de la Investiga-
ción, Desarrollo Tecnológico e
Innovación—SENNOVA
CarlosEusebioLugoSilva
Coordinador del Grupo de Ges-
tión Estratégica de la Investiga-
ción, Desarrollo Tecnológico e
(VWDREUDHVWiEDMRXQD/LFHQFLD&UHDWLYH&RPPRQV$WULEXFLyQ1R&RPHUFLDO&RPSDUWLU,JXDO
,QWHUQDFLRQDO
Innovación—SENNOVA
(2013-2014)
EDITORIAL
El Servicio Nacional de Aprendizaje—SENA, es la institución de formación profesional más
importante de Colombia, cuenta con 117 centros de formación, 15 TecnoParques y 5
TecnoAcademias a nivel nacional en donde se imparte programas de formación para el trabajo,
investigación aplicada, innovación y desarrollo tecnológico.
La formación para el trabajo y el uso de las herramientas como parte integral del desarrollo
humano y cultural de la humanidad, ha permitido el avance y la evolución de las herramientas
dando origen a nuevas formas de trabajo que generalmente van ligadas al avance la ciencia y
la tecnología, de allí que los procesos de innovación evocan nuevas formas hacer las cosas y de
realizar un trabajo específico, por esta razón el SENA desde sus programas de fortalecimiento
de la investigación, desarrollo tecnológico e innovación, buscan mejorar y descubrir nuevos
procesos que permitan enriquecer los programas de formación orientados desde los centros de
formación, así como los de innovación desde los Tecno Parques y TecnoAcademias a Nivel
Nacional.
En razón de lo anterior, el SENA propone este reto en micro nano y biotecnología como un
concurso de investigación, desarrollo tecnológico e innovación, una propuesta que impactó a
559 personas entre las cuales están 408 aprendices de formación titulada, 33 talentos, 9 gesto-
res de los Tecno Parques, 62 instructores, 6 expertos externos y 41 aprendices de las
TecnoAcademias, el concurso se planteó dos tipos de retos, uno equivalente a un 50% de la
evaluación donde se desarrollaron 17 proyectos que apuntan a sectores industriales como los
de energía, textiles, cosméticos, medio ambiente, agrícola, biotecnología vegetal, materiales y
alimentos. El 50% restante fue evaluado con la primera prueba de habilidades técnicas y tec-
nológicas en micro, nanotecnología y biotecnología conocidas hasta el momento en Latinoa-
mérica, pruebas que contenían retos técnicos, de operación, conocimiento de procedimientos,
herramientas, buenas prácticas de laboratorio y escritura de reportes, pruebas realizadas contra
reloj y realizadas bajo condiciones similares a la de un laboratorio real; retos similares se reali-
zan en otras áreas técnicas en competencias internacionales como WordSkills (Competencia
internacional de habilidades técnicas y tecnológicas www.worldskills.org). Para estas pruebas,
se acondiciono una celda de trabajo similar a los ambientes de laboratorio típicos de la indus-
tria, adicionalmente las instalaciones de entrada se decoraron con objetos y módulos interacti-
vos alusivos a la micro, nano y biotecnología, como un nano túnel, una capsula de conteo de
átomos del cuerpo y módulos interactivos con microscopios.
Este libro contiene algunos artículos con resultados de este concurso, evento en el que el SE-
NA propone retos innovadores que invitan al mundo del trabajo a reconocer el desarrollo de
los técnicos y tecnólogos en áreas de las tecnologías emergentes en Colombia, así como de
presentar propuestas de evaluación y medición de estas habilidades en el mundo que deja ver
que el SENA propicia innovación de talla internacional.
Darwin Dubay Rodriguez Pinto
Gestor y Líder de Concurso.
1


InvitadosEspeciales:
LaIng.LauraToledoesegresadadelaUniversidadTecnológicaNacional,ArgenƟna.Realizóunaespeciali-
zaciónenGesƟóndelavinculaciónylatransferenciacienơĮco-tecnológicabrindadaporlaUniversidadNa-
cionaldelLitoralenelmismopaís.LuegodetrabajardentrodelsectorprivadoenmulƟnacionalesderubros
como embalajes, autopartes y línea blanca, se incorporó a la Fundación ArgenƟna de Nanotecnología en
2011.DesdeentoncesesresponsabledelProgramadeInversiónenEmprendimientosNanotecnológicosde
laFAN.Sehadesempeñadocomoevaluadoradeproyectosdeinnovaciónnacionaleseinternacionales.Ac-
tualmente lleva adelante la ejecución de proyectos de vinculación público-privados Įnanciados conjunta-
menteporelMinisteriodeCiencia,TecnologíaeInnovaciónProducƟvadelaRepúblicaArgenƟnaylaUnión
Europea.

PalabrasacercadelPrimerConcursodeMicro,NanoyBiotecnología2013Ͳ2014.

Haciendo referencia al alto nivel de los parƟcipantes resultan destacables las capacidades adquiridas, tanto
por los aprendices como los talentos y sus instructores, en términos de contenidos técnicos, teóricos, prácƟ-
cos y comunicacionales.

Asimismo, la iniciaƟva es altamente valorable como políƟca de inclusión y desarrollo social al haber parƟci-
pado proyectos llevados a cabo a lo largo y a lo ancho de Colombia, demostrando el alcance integral y fede-
ral que posee el SENA. El haber desarrollado un concurso basado en micro, nano y biotecnología es el reŇejo
de una Nación que desempeña un rol vanguardista a nivel regional. Las tecnologías transversales son promi-
sorias alrededor del mundo y debe ser un orgullo para Colombia el haber incursionado, exitosamente, en
acƟvidades de este Ɵpo. Vale agregar que tal éxito no hubiera sido posible sin el notable compromiso y profe-
sionalismo del equipo del SENA.

ParƟcularmente, agradezco la oportunidad de haberme invitado a parƟcipar como jurado de un evento de

esta envergadura. Ha sido un honor para mí poder comparƟr esta iniciaƟva de gesƟón innovadora que pre-
mia a aquellos que, con dedicación y empeño, asumen la responsabilidad de trabajar cada día para brindar a
la sociedad en su conjunto, nuevas soluciones tecnológicas.

PhD. Alba Graciela Avila Bernal es Ingeniera eléctrica y Física, Maestría en ingeniería, Doctor en Física.
DirectoradelalíneademicroynanotecnologíadelCentrodeMicroelectrónicadelaUniversidaddelosAn-
des.ProfesorAsociadoDepartamentodeIngenieríaEléctricayElectrónicadelaUniversidaddelosAndes.
InvesƟgaciónenModelamientodeMEMs,NEMs,transporteeléctricoytérmicoananoescalasMicroscopia
debarridoSTMyAFM;Caracterizacióntérmicayeléctricadenanomaterialesynanoestructuras;Educación
enNanotecnología.

PalabrasacercadelPrimerConcursodeMicro,NanoyBiotecnología2013Ͳ2014.

El Primer Concurso de micro, nano y biotecnología 2013-2014, posiciona a través del Sena a Colombia como
líder en la región. Un liderazgo que apunta a formar recurso humano desde temprana edad en proyectos de
invesƟgación. El ambiente del concurso dejo la experiencia de trabajo en equipo, de competencia y con am-
plio espectro de fortalezas que en áreas como nano, bio y micro y programas como la TecnoAcademia y los
Tecno Parques han desarrollado. Es impresionante tener en un solo lugar un grupo tan interdisciplinario y
muƟ-edad de jóvenes, instructores, invesƟgadores, empresarios que estuvieron inmersos en desarrollo de
proyectos como los presentados en este concurso; a la par reconocer retos innovadores de competencias
técnicas desde la formación de jóvenes que están en la educación secundaria. Espacios como estos deben
dárseles conƟnuidad y fortalecerse con las experiencias que demandan la construcción y el desarrollo de un
concurso como este.

Como invesƟgadora exƟendo mi felicitación al SENA por el impacto que ha tenido en fomentar y visibilizar el
avance de nanotecnología en Colombia. Sin duda el recurso humano que forman será el engranaje y las
""manos" que muchos centros y enƟdades de invesƟgación integren en sus equipos y proyectos.


2


Contenido Pagina




VIDEOINTERACTIVOYEXPLICATIVODELPRIMERCONCURSODEMICRO,NANOYBIOTECNOLOGÍA2013– 04
2014.    



CAPITULO1:ModiĮcacióndetejidosdealgodónparaaplicacionescompeƟƟvasenlaindustriatexƟl. 05

CAPITULO2:Determinacióndelprocesodetratamientodeaguasresidualesconmétodosdeelectrocoagula- 11
ciónydegradaciónfotocatalíƟcaconnanoparơculasdedióxidodeƟtanio(TiO2),paraserimple- 
mentadosenlazonadeCazucá.

CAPITULO3:TransformacióndetexƟlesconpropiedadesdecontroldetemperaturacontécnicasdemicro 20
tecnología. 

CAPITULO4:CaracterizacióndelaparedcelulardediferentesespeciesdelgeneroGuadua, paralaextracción 24
delananocelulosaenPitalito,Huila—UnaNuevaopciónparamaterialesnanoestructurados. 
CAPITULO5:NanocompuestosdearcillasparaprotecciónultravioletaentexƟles. 29

CAPITULO6:AislamientodeLactobacillusspdelrumencomoalternaƟvaprobióƟcaparabovinos. 35


CAPITULO7:DesarrollodeunbioferƟlizanteenarrozabasedecianobacterias. 39

CAPITULO8:Determinaciónpreliminardemetabolitosdealtovaloragregado(ácidolácƟco,ácidoacéƟco,

48
etanol)enunabebidafuncionaldepanelafermentadaconkéĮrdeaguanaƟvo. 


CAPITULO9:EstudioagroecológicodeincidenciadecompuestosbioacƟvosdelaFamiliaLoranthaceaeenla 53
nanoestructuradelhongoHemileiavastatrixenPitalito-Huila. 
RECONOCIMIENTO. 60


3
VIDEO INTERACTIVO Y EXPLICATIVO DEL PRIMER
CONCURSO DE MICRO NANO Y BIOTECNOLOGÍA
2013 - 2014

4
 Modificación de Tejidos de Algodón para
Aplicaciones Competitivas en la Industria Textil
Análisis comparativo de propiedades funcionales en textiles modificados con nanoparticulas
de plata versus textiles modificados con nanoparticulas de oxido de cinc.
Elsa Yadira Lancheros Colorado
Centro de Manufactura en Textiles y Cuero
Servicio nacional de aprendizaje - SENA
Bogotá, Colombia
eylancheros@misena.edu.co
Diana Julieta Martínez Calderón
Centro de Manufactura en Textiles y Cuero
Servicio nacional de aprendizaje - SENA
Bogotá, Colombia
dianitasantafe@gmail.com
Abstract² The growing demand for textiles exhibiting new
properties requires production processes engineered with
emerging technologies (specifically nanotechnology)
resulting in products of increased value that deliver a competitive
advantage for &RORPELD¶V textile sector. This report presents a
comparative analysis of the performance of 100% cotton textiles
with respect to antimicrobial properties, UV protection and
hydrophobia, as a result of the application of nanoparticles of
silver compared with the application of nanoparticles of zinc
oxide as an alternative to the process of impregnation currently
employed in the industry. The results suggest that impregnation
with zinc oxide nanoparticles may be a viable alternative to the
use of silver in the functionalization of cotton fabrics. Scaling
industrial level requires adjustments of the work presented in
both the control of the synthesis and the impregnation process.
Index Terms² Nanotechnology, cotton, antimicrobial, UV
protection, hydrophobicity, silver nanoparticles, zinc oxide
nanoparticles.
I. INTRODUCTION
En Colombia la industria textil genera el 1,3% del PIB total y
cuenta con más de 100 años de tradición, el país está
posicionado como un productor y exportador importante de
materiales utilizados en la confección de origen natural como
algodón, lana, cuero y pieles, entre otros [1].
La relevancia de la empresa textil a nivel nacional e
internacional y la creciente investigación en nanomateriales,
han permitido la intervención de textiles a escala molecular,
obteniendo tejidos inteligentes, a los cuales a través de
estímulos físicos y químicos se les han alterado algunas de sus
José Libardo Molina Ojeda
Centro de Manufactura en Textiles y Cuero
Servicio nacional de aprendizaje - SENA
Bogotá, Colombia
jolimoo@misena.edu.co
Gabriel Steeven Castañeda Beltrán
Centro de Manufactura en Textiles y Cuero
Servicio nacional de aprendizaje - SENA
Bogotá, Colombia
gscastaneda5@misena.edu.co
propiedades, dotándolos de características específicas con el fin
de satisfacer las necesidades del consumidor, representando un
aumento en la fabricación de prendas innovadoras con
propiedades hidrofóbicas, termoreguladoras, antibacteriales,
entre otras [2].
Para dichos propósitos, se han intervenido las fibras textiles
directamente desde su elaboración o a manera de
impregnación, como es el caso de nanoacabados a base de
óxido de cinc como protectores UV, o a base de plata utilizados
en la elaboración de tejidos con propiedades antibacteriales [3].
Las nanopartículas de plata se han venido implementando en
los textiles de uso médico, ropa deportiva, ropa de cama, etc,
por las cualidades mencionadas anteriormente y la necesidad
de control bacteriano en dichos tejidos [4], sin embargo la
obtención de nanopartículas de plata suele tener un elevado
costo, motivo que sugiere su reemplazo por otras con
comportamiento similar pero de menor valor para facilitar su
producción a nivel industrial. El óxido de cinc (ZnO) es un
aditivo de muchos productos conocidos, inclusive pinturas,
que se caracteriza por su acción antimicótica, además de sus
propiedades astringentes y queratoplásticas. El óxido de Cinc
es utilizado en prácticas terapéuticas en la curación de
quemaduras y heridas leves por la industria farmacéutica y
cosmetológica en ungüentos antisépticos, talcos para bebe,
enjuagues, etc.[5]. Por estas cualidades el óxido de cinc puede
ser una alternativa a la impregnación de nanopartículas de plata
en los tejidos de uso médico, también por su bajo costo y su
fácil adquisición.
El objetivo de esta investigación es comparar el efecto de la
impregnación de tejidos 100% algodón con nanoparticulas de
plata versus impregnación con nanoparticulas de óxido de cinc,
respecto al comportamiento hidrofobico, protección UV y
5
antimicrobiano del tejido, con el fin de proponer acabados de
óxido de cinc como una alternativa mas económica y de menor
impacto ambiental ideales para conferir propiedades
funcionales en tejidos de importancia para la industria textil.
La investigación y el mejoramiento de las características de los
textiles es prioridad para el laboratorio del Centro de
Manufactura en Textiles y Cuero del SENA Regional Distrito
Capital, por lo tanto este estudio descriptivo es realizado con el
fin no sólo de investigar el comportamiento de las
nanopartículas de óxido de cinc frente a las nanopartículas de
plata en la impregnación de tejidos, sino también como
instrumento para promover, la investigación, el acercamiento a
la nanotecnología, la familiarización con técnicas y manejo de
los equipos disponibles en el centro y el desarrollo de tejidos
inteligentes para la industria textil del país con la participación
activa de los aprendices SENA.
II. METODOLOGÍA
El análisis planteado contempló el desarrollo de tres etapas:
(1) síntesis de nanoparticulas e impregnación simultanea de
tejidos de algodón, (2) síntesis de nanoparticulas de óxido de
cinc y posterior impregnación y (3) pruebas semi-cuantitativas,
para determinación de actividad antimicrobiana,
hidrofobicidad, protección UV y efecto del lavado. El ensayo
se llevó a cabo para dos tratamientos: nanoparticulas de plata y
nanoparticulas de óxido de cinc, teniendo como variables el
tipo de tejido y los tiempos de impregnación.
Los textiles probados fueron, algodón 100%, tejido plano
tafetán APT (100 a 160g/m2) y algodón 100%, tejido doble
punto APT (80 a 120g/m2). Se prepararon un total de 13
muestras de 40 cm2 por cada tipo de tejido, con el fin de contar
con el área necesaria para realizar de forma independiente y
por duplicado la determinación de propiedades, evitando que la
manipulación de la muestra para una determinación afectara las
condiciones de la misma para las otras determinaciones.
A. Sintesis de nanoparticulas de plata e impregnación de
tejidos
La obtención de tejidos de algodón impregnados con
nanoparticulas de plata se realizó mediante el proceso
simultaneo de síntesis y recubrimiento planteado por Shams et
al. (2011). [6]. La síntesis de nanoparticulas de plata consiste
en la reducción química de una sal metálica, AgNO3, mediante
la acción de un monómero como agente reductor, en este caso
se empleó dextrosa, este método se denomina síntesis verde
por su compatibilidad con el medio ambiente [7]. Inicialmente
las muestras fueron colocadas en una funda de malla 225 de
nylon e introducidas en agua destilada por dos minutos, las
muestras húmedas se colocaron en contacto por cinco minutos
con una solución de dextrosa al 0.117 M mediante agitación
mecánica. Una solución de nitrato de plata 0.15 M fue
incorporada lentamente al montaje en constante agitación,
finalizada la adición del nitrato de plata se permitió el curso de
la reacción y la impregnación de las muestras por un periodo
de cuatro o diez minutos. Las muestras impregnadas fueron
centrifugadas por cinco minutos a 120 rpm y secadas a 100ºC
por 20 minutos, luego fueron lavadas con agua destilada y
nuevamente secadas por quince minutos.
B. Sintesis de nanoparticulas de óxido de cinc e impregnación
de tejidos [8,9].
El proceso de sintesis se realizó mediante la reacción de
cloruro de cinc e hidróxido de sodio. A una solución de cloruro
de cinc 2.054 M en agua destilada a 88ºC y en agitación
constante, fue adicionada gota a gota, una solución de
hidroxido de sodio 4.42 M, manteniendo las condiciones de
reacción por diez minutos. El precipitado formado se separó de
la solución mediante una hora de sedimientación y descarte del
sobrenadante. El sedimento fue lavado cinco veces con 250 mL
de agua destilada para eliminar el exceso de cloruro de sodio
producto de la reacción. La peptización del sedimento se
realizó por 10 minutos en alcohol isopropilico en ultrasonido a
temperatura ambiente, y mediante centrifucación a 6000 rpm
por 15 minutos se colectaron las particulas. Finalmente se
realizó un tratamiento térmico a las particulas en horno a 250ºC
por 5 horas.
El tratamiento de las muestras de textil se realizó mediante
agitación magnética en una solución 5% p/p de partículas de
cinc en alcohol isopropilico según el tiempo de impregnación
establecido a 40 ºC.
C. Determinación de propiedades en tejidos modificados.
Se realizó observación de las muestras tratadas por
microscopio electrónico de barrido JSM 6010 JEOL, para
determinar la presencia y distribución de las nanoparticulas y
análisis espectrográfico de su composición con el detector de
energía dispersa, de igual forma se realizaron las pruebas
descritas a continuación para las muestras impregnadas, antes y
después de un proceso de lavado acelerado [10], con solución
jabonosa de detergente WOB AATCC 1993 sin blanqueadores
ópticos por cincuenta minutos a 30ºC.
x Protección UV: La determinación de esta propiedad se
realizó por el método in vitro, comparando el perfil de
absorbancia, transmitancia y reflectancia de los tejidos
sin modificar y los que fueron sometidos a
impregnación con los dos tratamientos propuestos
[8,11]. Las mediciones se realizaron por triplicado en
espectrofotómetro UltraScan Vis en el rango de 360 a
400 nm y 10 nm de intervalo de reporte.
x Actividad antimicrobiana: esta propiedad fue
determinada cualitativamente por el método de difusión
en agar [12]. Staphylococcus aureus subsp. aureus
ATCC® 25923™ y Candida albicans ATCC®
10231™ fueron utilizados como microorganismos
prueba, 0.1 μL de un cultivo de 24 horas en caldo
tripticasa soya de cada cepa fue inoculado por siembra
masiva en superficie de agar nutritivo, para bacterias y
de agar sabouraud para levaduras. Dos muestras de
aproximadamente 1 cm2 del textil de prueba y una del
textil control (sin impregnación), se colocaron sobre el
agar previamente inoculado, permitiendo una íntima
interacción. El tiempo de incubación fue de 48 horas a
28°C.
6
 x Hidrofobicidad: un volumen de 25 μL de agua destilada Las fibras de tejidos tratados por diez minutos se observan
a 21ºC fue adicionada sobre la superficie de los textiles en su mayoría mejor recubiertas que el caso de las tratadas por
prueba y del textil control; se tomó fotografía de la gota 4 minutos. Finalmente el análisis por EDS confirmó la
formada sobre el textil para calcular el ángulo de presencia de ZnO en las partículas observadas.
contacto entre la línea base de la gota y la tangente del
B. Caracterización por SEM de tejidos con y sin
borde de la misma [13, 14].
impregnación de Ag.
III. RESULTADOS Se intentó la caracterización por detección de electrones
Finalizados los procesos de síntesis de partículas e secundarios en muestras impregnadas con plata a diferentes
impregnación de textiles mediante las metodologías condiciones de los parámetros de resolución del microscópio,
establecidas en el capitulo II, se observó que las muestras tanto pero solo fue posible detectar una partícula de
de tejido plano tafetán como tejido punto doble adquirieron una aproximadamente, 128 nm en una de las muestras de tejido
apariencia diferente en textura y color. En el caso de las plano. Por tanto se realizó análisis de composición por energía
muestras impregnadas con plata, el color difiere según el tipo dispersa utilizando la herramienta de mapas, lo que permitió
de textil, el tejido plano se tornó color amarillo – café y el corroborar la presencia de plata en las muestras de tejido plano
doble punto color gris, sin percibirse cambio en la textura ni tafetán (Fig. 2).
diferencias según el tiempo de impregnación. Las muestras
modificadas con ZnO se aprecian color rosa pálido, con textura
arenosa y evidente falta de homogeneidad del recubrimiento,
estas características no dependen del tiempo de impregnación.
A. Caracterización por SEM de tejidos con y sin
impregnación de ZnO.
La caracterización por microscopio electrónico de barrido
de los tejidos con y sin modificación se realizó con voltaje de
aceleración 5 kV y 2.5 kV respectivamente. Se evidenció la
presencia de partículas de ZnO en las dos clases de tejidos
ensayados, las partículas no tienen morfología definida, su
distribución en las fibras es heterogénea y se presenta como
aglomerados. Se estableció un tamaño promedio de 213 nm,
medición afectada por la aglomeración de las partículas que
dificulta su delimitación (Fig.1).

A B

SEI 2.5kV SS49 x550 20μm SEI 5.0kV SS47 x550 20μm
Fig. 2. Mapa análisis de composición por EDS, muestra tejido plano tafetán,
tratada por cuatro minutos.
C D
Las muestras de tejido doble punto no presentaron plata
para ninguno de los tiempos ensayados, a pesar de que la
impregnación se realizó simultáneamente en el mismo montaje
con las muestras de tejido plano.
C. Determinación de protección UV
Definida la transmitancia de un tejido como la trasmisión
de radiación ultravioleta a través de un textil [15], las
SEI 2.5kV SS50 x600 20μm SEI 5.0kV SS50 x1800 10μm mediciones de este parámetro indican que de los tejidos
ensayados sin tratamiento, el tejido de punto doble permite
Fig. 1. Micrografía SEM, Textiles sin y con ZnO. A. Tejido doble punto mayor trasmisión de radiación UV en el rango 360 nm a 400
sin tratar, B. Tejido doble punto tratado, C. Tejido plano tafetán sin nm (Fig. 3)
tratar, D. Tejido plano tafetán tratado.

7
 35 frente a los obtenidos para el textil sin tratar (Datos no
suministrados).
30 TABLE I. PORCENTAJE PROMEDIO DE TRANSMITANCIA DE
TEXTILES MODIFICADOS
% Transmitancia

25
Longitud de Onda (nm)
Tejido
360 370 380 390 400
20
Plano Tafetán Control 19,37 20,76 22,16 23,39 24,48
Plano Tafetán (Ag-4min) 0,32 0,32 0,29 0,25 0,25
TDP Control
15 Plano Tafetán (Ag-10min) 0,41 0,37 0,33 0,30 0,27
TPT Control
Plano Tafetán ( ZnO-4min) 0,12 0,15 0,68 2,12 3,66
Plano Tafetán ( ZnO-10min) 0,06 0,13 0,49 1,70 3,11
10
Doble Punto Control 17,77 24,3 29,96 32,51 33,39
360 370 380 390 400
Doble punto (ZnO-4min) 1,39 1,64 3,02 6,45 9,88
Longitud de Onda (nm) Doble punto (ZnO-10min) 2,05 2,38 4,47 9,42 13,89

Fig. 3. Espectro de transmitancia de textiles sin tratar.
De igual forma se observó que tanto las partículas de plata
como las de óxido de cinc, se comportan como un agente de
protección contra la radiación UV (en el rango analizado) al ser
impregnados en textiles de tejido plano reduciendo de forma
notoria la transmitancia del tejido (Fig. 4).
25
21
% Transmitancia
Respecto a los parámetros de absorbancia y reflectancia se
puede considerar al primero como un componente que
contribuye en la determinación de protección contra radiación
UV de un tejido, teniendo en cuenta que la parte de luz
incidente en el textil que es absorbida por éste aumenta con los
tratamientos realizados en los tejidos de prueba; caso contrario
sucede con la reflectancia, parámetro para el cual los valores
disminuyen comparado con el textil sin modificar, aunque
sigue existiendo este componente.
D. Determinación de actividad antimicrobiana
El método cualitativo utilizado para la comprobación de
actividad antimicrobiana de los textiles a prueba, es una técnica

17 TPT Control rápida y sencilla de estimación aproximada [16], mediante la

13
TPT + Ag observación directa de áreas de inhibición de crecimiento. De
TPT + ZnO
esta forma se confirma que la impregnación de plata para los
9 dos tiempos ensayados en textiles tejido plano presenta
5 actividad bacteriostática frente Staphylococcus aureus, al igual
que la impregnación con óxido de cinc tanto en tejido plano
1 como de punto (Fig. 5). Las áreas de inhibición para el tejido
-3 de punto impregnado con plata no fueron evidentes para
360 370 380 390 400
ninguno de los dos tiempos corroborando su ausencia en el
Longitud de onda (nm) textil.

Fig. 4. Espectro de transmitancia comparativo de tejido plano sin tratar y

tejido plano modificado con Ag y ZnO (Tiempo impregnación: 4min).

La tabla I relaciona el porcentaje promedio de

transmitancia determinado para textiles modificados con plata
(tejido plano) y óxido de cinc (tejido plano y doble punto). Se
observa que el comportamiento de este parámetro presenta
menor variación a lo largo del rango de medición ensayado
para el tratamiento con plata, por el contrario cuando el
tratamiento se realiza con ZnO el porcentaje de transmitancia
aumenta de forma considerable a medida que se acerca a los
400 nm, lo que indica que a mayor longitud de onda el efecto
protector de este tratamiento puede verse reducido.
Los valores de transmitancia obtenidos para el tejido de
punto doble impregnado con plata, corroboran la ausencia de
ésta, ya que son muy altos comparados a los encontrados para
Fig. 5. Actividad bacteriostática en cepas de Staphylococcus aureus. A.
el mismo tratamiento en el tejido plano, a pesar de ser menores Textil control, B textil con ZnO, C Textil con Ag

8
 Adicionalmente se observó que ninguno de los tratamientos Se demostró de forma cualitativa propiedades de actividad
tiene efectividad contra Candida albicans, bajo las condiciones bacteriostática frente Staphylococcus aureus, en tejidos planos
ensayadas. de algodón impregnados con plata al igual que aquellos
modificados con ZnO, resultado de importancia ya que al
E. Determinación de hidrofobicidad
inhibir el desarrollo de bacterias en los tejidos no solo se
La prueba de mojabilidad evaluada en los textiles control y protegen las características propias del textil, también protege
prueba mediante el cálculo del ángulo de contacto por el al usuario de posibles infecciones y el desarrollo de mal olor
método de la gota en reposo [17], mostraron un debido al metabolismo de microorganismos como es el caso de
comportamiento similar para los dos tipos de tejidos en los la bacteria S. aureus[19]. Para el caso de tejidos de punto doble
diferentes tratamientos, en todos los casos el ángulo tratados con plata las áreas de inhibición de crecimiento
determinado fue superior a 90° (tabla II). De este modo se bacteriano fueron muy incipientes, resultado de la falta de
considera, que es la fuerza de cohesión la que predomina entre impregnación, aunque aquellos tratados con ZnO presentaron
el líquido y la superficie del textil, retardando que el líquido áreas de inhibición bien definidas. No se obtuvo actividad
moje el sólido [18] y haciéndolo hidrófugo. inhibitoria frente a levaduras.
El comportamiento de los tejidos como protectores contra
TABLE II. ÁNGULOS DE CONTACTO POR TEJIDO radiación UV requiere de un análisis más detallado que
Ángulo de abarque la totalidad del espectro de radiación UV-A (315 –
Tejido Tratamiento
contacto (°) 400nm), debido a su importancia teniendo en cuenta que es la
N.A 122.8 radiación UV que penetra en mayor medida a la superficie
Ag - 4 min 130,024 terrestre. Aunque se puede concluir que los acabados utilizados
confieren en mayor o menor grado protección contra radiación
Plano Tafetán Ag - 10 min 133,93
con longitud de onda entre 360 nm y 400 nm, comportamiento
ZnO- 4 min 130,223 demostrado con la disminución del porcentaje de radiación
ZnO - 10 min 124,005 trasmitida a través del textil y sutil incremento de la absorción
Penetración de la misma por éstos.
N.A
total del agua De igual forma se pudo observar que los tratamientos tanto
Ag - 4 min 144,053 de óxido de cinc como de plata mantienen las condiciones de
Punto Doble Ag - 10 min 128,882 hidrofobicidad del textil, caso del tejido plano; o le proveen
mayor resistencia a la absorción de líquidos como en el textil
ZnO- 4 min 131,747
doble punto.
ZnO - 10 min 127,48
Mediante el análisis de los resultados obtenidos para cada
una de las propiedades caracterizadas se pueden plantear
Aunque los ángulos de contacto no superan los 150° para acabados textiles con óxido de zinc en un futuro cercano como
considerar que los tratamientos proporcionan características de alternativa de las partículas de plata.
superhidrofobicidad a los textiles [14], si se observa un Todo lo anterior debe estar ligado a realizar modificaciones
comportamiento más hidrófugo especialmente en el tejido en los procesos de síntesis a nivel del laboratorio, que permitan
punto doble, para el cual la falta de tratamiento permite la ejercer control sobre el proceso de crecimiento de las partículas
penetración del líquido de forma inmediata (Figura 6). con el fin de obtener recubrimientos homogéneos, no
aglomerados y de tamaño nanométrico.

Fig. 6. Prueba de la gota en reposo. A. Tejido Punto doble (Ag-4min), B.
Tejido plano (Ag-10min).
IV. CONCLUSIONES
Fue posible obtener textiles modificados con plata por el
método simultáneo de síntesis e impregnación para tejidos
planos tipo tafetán, al igual que textiles impregnados con
partículas de óxido de cinc sintetizadas vía reducción química,
tanto tejido plano como de punto, aunque con dificultad para
obtener el tamaño deseado.
V. TRABAJOS FUTUROS
El presente proyecto constituye no solo un avance
importante en el acercamiento a la investigación por parte de
los aprendices, los instructores y la institución en general,
también es el inicio de una serie de trabajos de investigación
para estandarizar las metodologías desarrolladas con el fin de
buscar una mejor relación costo-beneficio, entre la academia y
la industria. Entre los trabajos que se plantean para avanzar en
la implementación de aplicaciones desarrolladas a nivel
laboratorio, están: pruebas cuantitativas de actividad
antimicrobiana frente a un espectro de microorganismos más
amplio, pruebas con diferentes metodologías de impregnación
asociadas a técnicas de teñido y estampación, montaje de las
pruebas descritas en otros materiales para buscar nuevos
mercados y buscar alternativas ambientalmente amigables para
su aplicación en metodologías existentes.

9
 AGRADECIMIENTOS
Los autores expresan su agradecimiento a la Doctora Sonia
Enciso Mosquera, subdirectora del Centro de Manufactura en
Textiles y Cuero y la instructora Andrea Reyes Meneses por
su constante apoyo. De igual forma agradecen la colaboración
del Tecnoparque Colombia Nodo Bogotá y el soporte técnico
de los instructores Carlos Quintero, Juan Evangelista Soriano y
Jhon Suárez.
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5-13.
10
 Determinación del proceso de tratamiento de aguas
residuales con métodos de electrocoagulación y
degradación fotocatalítica con nano partículas de
dióxido de titanio (TiO2), para ser implementados en
los hogares de la zona de Cazucá.
Ing. Química July Alexandra Rincón Chacón
Centro Industrial de Desarrollo Empresarial CIDE
SENA Soacha, Alexandra.rch@misena.edu.co
Tel.: +57 (051) 5461600 IP: 18557
Es. Gerencia Recursos Naturales Nelly Patricia Lozano,
Centro Industrial de Desarrollo Empresarial CIDE SENA
Soacha, Nellyplp@misena.edu.co
Tel.: +57 (051) 5461600 IP: 18554
Abstract— Nowadays researchers are looked different
alternatives of remediation of the most influent environmental
problems, for instance, the final disposition of grey waters as
product of the homes consumes; for this research has been
taken Cazuca's zone houses as a population.
This article presents a technological compact development
from the field of the Nanotechnology, on fact, its objective the
sustainable and innovative development of a prototype of
treatment plant which contains different phases, as the
electrocoagulation and degradation photo-catalytic with
nanoparticles of Dioxide of Titanium (TiO2).
It consists of an alternative to degrade the pollutants across the
coupling stage: firstly, the application of a potential difference
and secondly, the degradation was using nanoparticles of
dioxide of titanium as photocatalyst. This joins in a
wastewater treatment plant of produced by the systems of
wash in the homes of Cazuca’s zone, so that these can be re-
used. In this way, an important solution is provided for one
of the most problematic topics in this zone, which is the
recovery of the water sources, also, a protection method of the
aquatic ecosystems of the zone of influence.
En la actualidad se buscan diferentes alternativas de
remediación de los problemas ambientales más influentes,
como lo es la disposición final de aguas grises producto del
consumo de hogares tomando como población de estudio la
zona de Cazucá en Soacha Cundinamarca. Teniendo como
objetivo el desarrollo sostenible e innovador de un prototipo
Aprendiz 1: José Jonathan Velandia Olaya
Aprendiz 2: Brayan Sneider Garzón Sánchez
Aprendiz 3: Joaquín Rubén Hernández Betancourt
Aprendiz 4: Daniel Sneyder Ramírez Torres
Aprendiz 5: Ingrid Julieth Soacha Ríos
Aprendiz 6: Jefferson Daniel Calvache Sandoval
Centro Industrial y Desarrollo Empresarial de Soacha CIDE
autopista Sur Transversal 7 # 8 – 40, Entrada 3, Soacha,
Colombia Tel.: +57 (051) 5461600 IP: 18557
de planta de tratamiento que contienen diferentes fases
fundamentales, como lo es electrocoagulación y degradación
fotocatalítica con nano partículas de dióxido de Titanio (TiO2),
en este artículo se presenta un desarrollo tecnológico
compacto desde el campo de la Nanotecnología. Consiste en
una alternativa para degradar los contaminantes a través del
acoplamiento de etapas: primero la aplicación de una
diferencia de potencial y segunda etapa es la degradación
usando nanopartículas de dióxido de titanio como
fotocatalizador, este se incorpora en una planta de tratamiento
de aguas residuales producidos por los sistemas de lavado en
los hogares de la zona de Cazucá, de modo que éstos pueden
ser reutilizados, proporcionando una solución importante para
uno de los temas más fuertes de la zona, como en la
recuperación de las fuentes de agua y por lo tanto, el mismo
como un método de protección de los ecosistemas acuáticos
de la zona de influencia.
Keywords—electro flocculation, wastewater treatment
nanoparticles supported TiO2, photocatalyst, plant
wastewater, Wastewater
I. INTRODUCCIÓN
Para la conservación del medio ambiente es indispensable plantear
soluciones innovadoras y de fácil implementación en zonas d e
mayor impacto. Es por esta razón q u e este proyecto se desarrolla
en la zona de Cazucá del municipio de Soacha, teniendo como
11
objetivo el estudio las aguas grises que constituyen el 80% del total
de agua residual que terminan en los ríos que cruzan las zonas
urbanas, a consecuencia de la ausencia de redes de alcantarillado y
construcción de barrios subnormales. Generando finalmente como
resultado la recepción de las aguas provenientes de conexiones
erradas, que deterioran el medio ambiente y convirtiéndose en una
fuente de microorganismos patógenos que afectan directamente la
salud de la comunidad de Soacha. [21] por tal motivo, se decidió
trabajar con métodos para la eliminación eficiente de los
contaminantes de tipo químicos, físicos y biológicos, que alteran la
calidad de esté recurso. Los métodos escogidos tienen como
característica común ser sostenibles. Entre los que se encuentra la
fotocatálisis [3] y electrocoagulación [4]. La primera de estas
técnicas, utiliza foto catalizadores con capacidad de generar
potenciales Redox (reducción- oxidación) más favorables para el
tratamiento de la contaminación de fuentes hídricas. Esta técnica, ha
tenido gran acogida en el ámbito investigativo e industrial. Debido a
que se cataloga como una alternativa de degradación de
contaminantes en fases acuosas, con versatilidad en el uso de
tratamiento de mezclas complejas de contaminantes. En esta
técnica, se resalta el proceso de fotodegradación, fenómeno de
absorción de la radiación electromagnética y absorción de
contaminantes en la superficie del fotocatalizador o sustrato. Es
entonces, como se genera y recombinan los portadores que
destruyen los contaminantes para finalmente mineralizarlos [2].
La segunda técnica, es la electrocoagulación la cual es una proceso
electroquímico para la eliminación de contaminantes del agua
residual. Este método es eficiente en la eliminación de sólidos en
suspensión en la que se puede emplear diferentes electrodos de
materiales conductores. En este proceso se forman coagulantes
asociados a las reacciones de óxido-reducción que se lleva a cabo
entre los electrodos y el medio acuoso. [9] Para el desarrollo de este
proyecto se tuvo como objetivo general determinar el proceso de
transformación de aguas grises, utilizado electrocoagulación y
degradación fotocatalítica, con nano-partículas de dióxido de titanio
(TiO2), para ser implementados por medio de una planta en los
hogares de la zona de Cazucá.
II.METODOLOGIA
El proyecto es desarrollado en tres fases, y tiene como propósito el
optimizar el proceso de tratamiento de aguas residuales en los
hogares de la zona de Cazucá; g e n e r a n d o c o m o resultado una
planta de tratamiento de aguas residuales portables que utilice
técnicas innovadoras, desarrollado por un equipo de trabajo del
programa Tecnoacademia Cazucá que se puede ver en la Imagen 1.
Primera fase
Como parámetros de inicio del procesos tomo indicadores que se
emplean para el análisis en los tratamientos de aguas, con la
medición del porcentaje de remoción y degradación de los
contaminantes presentes en el agua gris, para esto en la primera fase
se inició con establecer protocolos de trabajo en el laboratorio,
aplicables a la caracterización de aguas como: parámetros
microbiológicos con la medición de unidades formadoras de colonia
de microorganismos mesófilos y coliformes; parámetros químicos
con medición de concentración de nitratos y fosfatos, y parámetros
fisicoquímicos como turbiedad, color, pH, conductividad y
demanda biológica de oxigeno (DBO 3). Con el fin de tener la
información requerida para poder evaluar el agua antes y después
del proceso de tratamiento y de esta forma se identificó la eficiencia
del prototipo desarrollado.
Segunda fase:
El diseño de experimentos nos permitió instaurar los parámetros
para cada uno de los proceso como se puede ver en el diagrama 1, en
donde fueron establecidas condiciones de implementación por
medio de la triangulación de datos bibliográficos, ensayos
empíricos, variación de parámetros de entrada y evaluación de las
mejores condiciones de trabajo con la que diseño el prototipo de la
planta compacta. Estableciéndose constantes en la unidad
experimental, en donde se realizó tres repeticiones, con la finalidad
de obtener un análisis eficiente, y posterior identificación de los
parámetros de mejora del prototipo. De esta forma, comprobado
cada una de las etapas a una escala de laboratorio, con indicadores
en la determinación del tiempo óptimo de retención y el porcentaje
de degradación, para lo que se estableció en las siguientes etapas de
tratamiento:
‡Etapa de degradación con electrocoagulación: se enfatiza en el
principio en que las partículas que se hallan en suspensión dentro
del agua, con un carácter eléctrico, se hacen recolectora de iones
de carga opuesta, formando agregados más grandes llamados
“flocs”, los cuales por su mayor peso sufren un proceso de
sedimentación debida a la fuerza de gravedad. Esto permitirá
generar remoción de material orgánico, como de otros
contaminantes [6],
‡(WDpa de degradación con fotocatalizador utilizando nano
partículas de dióxido de titanio TiO2, las cuales tiene un rango de
tamaño de 21 nm-30 nm (ver anexo, ficha técnica) se genera una
oxidación avanzada que permite degradar contaminantes disueltos y
de difícil degradación
‡(WDSD GH ILOWUDFLyQ SRU FDUEyQ DFWLYDGR GHILQLGD FRPR XQ SURFHVR
de separación donde algunos componentes del agua gris pueden ser
retirados transfiriendo hacia un sustrato sólido, quedando física o
químicamente enlazados a la superficie del adsorbente ΀Ϯϯ΁͘ Este
material se emplea en sistemas de lecho fijo, el cual consiste en una
columna donde el adsorbente (carbón activado) se deposita en su
interior como un lecho y el líquido que atraviesa la columna en
sentido ascendente, horizontal o descendente llevando a cabo el
proceso de filtración.
III. DESARROLLO
Se da inicio a la construcción del prototipo de planta compacta de
tratamiento de aguas grises con la adecuación de cuatro tanques de
forma cilíndrica, el primero destinado para la fase de alimentación y
sedimentación, el segundo electrocoagulación, la tercera
degradación con fotocatálisis y el cuarto filtración con carbón
activado. El prototipo que fue utilizado para el estudio de
laboratorio es construido en hojas de acrílico (polimetilmetacrilato)
calibre cuatro milímetros (4 mm) material seleccionado por tener las
características de resistencia a la intemperie y a productos químicos,
que permite el mecanizado y termo formado para desarrollo de
prototipos. Las dimensiones efectivas de la planta son en altura 75
cm con una base de 20,5 cm y un radio de 10,5 cm, con un
capacidad de 0.24 L/min, que se encuentran en permanente
circulación entre sus cuatro compartimientos con una conexión
entre tanques por medio de codos y tubería de poli- cloruró de vinilo
(PVC); finalmente, el último tanque de construcción estructural de
filtro de carbono se realizó en empack N (Nylon) empleado por la
versatilidad del material. Su diseño fue trabajado en software de
diseño Solidwords representado en la imagen 2.
12

Imagen 1. Equipo de trabajo semillero de investigación programa
Tecnoacademia Cazucá SENA.
Imagen 2. Diseño digital de planta de tratamiento compacta elaborado en
Soliword.
1. Unidad de Sedimentación
En esta unidad se lleva a cabo la alimentación del sistema
manualmente con un volumen de cuatro punto cinco ( 4.5) litros en
20 minutos de agua gris provenientes del procesos de lavado en
lavadora y limpieza de pisos, con el propósito que en este tanque se
lleve a cabo el proceso de sedimentación de las partículas de mayor
peso hacia el fondo del tanque, este se encuentra construido en
forma cilíndrica con un radio 10,5 cm y una altura 20 cm , su base se
diseñó con una inclinación de treinta (30 grados), con la finalidad
principal de generar un almacenamiento de los lodos obtenidos de
esta fase.
2. Unidad de electrocoagulación
Esta unidad tiene una capacidad de 4.1 Litros desde la fase de
sedimentación, por medio de una válvula de mariposa de PVC y el
sistema de tubería, que alimenta un tanque dispuesto con un arreglo
de un ánodo y un cátodo que son conectada a placas de metal
conductoras de Aluminio (Al) y Hierro (Fe), el primero
comportándose como ánodo y segundo como cátodo llevándose a
cabo el siguiente proceso representado por las reacciones 1,2,3,
primero los iones precursores de metal para la producción de
coagulantes se liberan en la fase acuosa a través oxidación del
electrodo de sacrificio, que para el procesos es el ánodo [24] .En el
segundo paso, los iones del metal generados a partir de la primera
etapa se hidroliza para formar hidróxidos metálicos insolubles y poli
hidróxidos. [25] Y finalmente, la desestabilización de los
contaminantes que están en la suspensión de partículas [26] generan
un rompiendo de la emulsión y la agregación de las fases
desestabilizadas dan lugar para formar flóculos junto con hidróxidos
metálicos y poli hidróxidos [1].
Liberación de Iones de Aluminio del ánodo de sacrificio
Al Al3+(aq) + 3e- (1)
Hidrolisis del agua por corriente eléctrica
2H2O O2 (g) + 4H+ (aq) + 4 e- (2)
En la zona entre el cátodo y el ánodo se forma los flocs de hidróxido
de aluminio
Al3+(aq) +3 H2O Al (OH)3 +3H+(aq) (3)
3. Unidad de degradación Fotocatalítica
El desarrollo de la unidad de proceso fotocatalítico fue construida
contando con la presencia de un agente semiconductor como lo es el
TiO2, el cual es el semiconductor más utilizado para aplicaciones
medioambientales, posee gran estabilidad química frente a ácidos,
bases fuertes, no es peligroso, alta porosidad, baja densidad, es
abundante en la naturaleza, es inocuo y su costo es bajo [17,60];
también reduce la actividad de virus, presente en tres formas
poliméricas., rutilo broquita y anatasa siendo esta ultima la que
presenta mayor actividad fotocatalítica, como consecuencia de las
diferentes estructuras de red, en la tabla 1., se hace una descripción
específica del empleado en el desarrollo de este proyecto, el cual será
fijado en un sustrato de arcilla natural de venta comercial:
Fotocatalizador Tamaño de Composición Área
partícula fase cristalina superficial
(nm) (m3/g)
Degussa P25 70/30 80% anatasa 50+/-15
20% rutilo
Tabla 1. Propiedades fisicoquímicas de dióxido de Titanio, tomado de
fuente Geres R,Whole D, Spiller,Scheider,Gschinurpfel, C Y Shulz-Exloff G
1997 Photocatalytic properties of Titanium Dioxide.
3.1 Mecanismo de degradación fotocatalítica
El mecanismo se lleva a cabo, por medio de procesos de oxidación
avanzada (PAOs) [18] basado en procesos fisicoquímicos capaces de
producir cambios profundos en la estructura química de los
13
contaminantes, involucrando la generación y uso de especies
transitorias como radicales hidroxilo (HO·), los cuales son los
encargados de la oxidación de la materia orgánica y de los
contaminantes inorgánicos, por medio de fotocatálisis heterogénea
que sigue el mecanismo que se encuentra descrito en el diagrama 1.
catalizadores utilizados son económicos, estables y recuperables
[19]. Como consecuencia de estos factores, las arcillas presentan un
valor elevado de área superficial activa, pueden interaccionar con
diversas sustancias, en especial compuestos polares, en base a esto se
estableció un protocolo para purificar y activar e impregnar la arcilla
con TiO2 el qué se describe en el diagrama 2 y en la Imagen23.

Proceso de fotocalísis se llevava a cabo Imagen 2. Equipo de trabajo semillero de investigación programa
por medio de la presencia de la Tecnoacademia Cazucá SENA
absorción de energia radiante UV ;ʄф380
nm) , un catalizador semiconductor TioϮ 1. Purificacion de arcilla
que sera fijado en arcilla, y un medio
oxidante (O2).

22. D
Decantación
t ió separacioni solidos
lid
Incia un proceso de absorción de fotones insolubles y centrifugación
del UV por parte del dióxido de titanio
generando pares electrón/hueco sobre la
superficie del catalizador desde la banda
de valencia hasta la banda de condución, 3. Activacion de arcilla
generación de especies redox adsorbidas
en la partícula del semiconductor.

4.Medio acido
Se producen entonces simultáneamente
reacciones de oxidación y de reducción en
la superficie del semiconductor,
permitiendo la reduccion de los 55. Elaboracion
El b i dde pelles (forma cilindrica
ll (f ili d i
contaminates .
de la arcilla tratada)

66. Impregnacion
I i de
d la
l arcilla
ill natural
t l
activada con tio2
Diagrama 1. Mecanismo de fotocatálisis con dióxido de titanio [23]
Imágenes elaboradas por la facilitadora de diseño de video juegos
Diana Marcela Acosta 7. Baño ultrasonico, calcinación
3.2 Fijación de TiO2 en Arcilla
Diagrama 2. Descripción del proceso de Purificación, Activación e
Este catalizador debe ser fijado en un sustrato, el escogido para este impregnación de arcilla con TiO2 [19]
proceso las arcillas, que son silicatos de aluminio y magnesio
hidratado que tienen una estructura laminar. Consisten de un material 3.3 Caracterización
granuloso muy fino, formado por partículas de tamaño inferior a Después de este proceso de impregnación se lleva a un proceso de
ȝP /D SRURVLGDG LQWHUQD \ OD FDUJD HOHFWURVWiWLFD DVRFLDGD HQ ODV moldeado, en este caso se trabajó con esferas de diámetro
arcillas permiten la adsorción de cationes; en este artículo se muestra aproximado de 5 mm las cuales se someten a proceso de calcinación
como se trabajó con la modificación de las propiedades físicas y a 1000ºC por1 horas, procedimiento con el cual se busca la
químicas de una arcilla natural mediante la intercalación de solidificación y fijación del TiO2 sobre la superficie de la esfera, este
moléculas de TiO2, la fotodegradación se convierte en un proceso procedimiento fue caracterizado por medio de microscopia
con ventajas sobre otros métodos de degradación, debido a que los electrónica de barrido SEM JEOL ver imagen 5, tomándose
14
imágenes en donde se puede ver la morfología del TiO2 soportado
en arcilla como en la Imagen. 3 como también, la muestra de
arcilla sin dióxido de titanio en la Imagen. 4. Otro análisis empleado
fue el de espectrometría de dispersión de energía de rayos X (EDS),
que se encuentran los informes respectivos como anexo 1, obtenido
con la colaboración del laboratorio de textiles del complejo sur,
SENA.
Imagen.3 Microscopia electrónica de barrido Dióxido de Titanio fijo en
arcilla a 5 μm.
Imagen.4 microscopia electrónica de barrido arcilla a 5 μm.
En donde se puede determinar la presencia de TiO2 en 60% de
composición en la muestra, por medio de la técnica basada en la
captación de los fotones de alta energía que emite cada elemento al
ser bombardeado por el haz primario, siendo este tipo de señales
específico de cada elemento de la superficie de la muestra y es
captado por un detector y luego traducida cada señal en un pulso
específico, que es conducido a un sistema que compara esta
información con un banco de datos que corresponde a los diferentes
elementos de la tabla periódica , El software permite la realización
gráfica del espectro de picos de energía correspondientes a cada uno
de los elementos que constituyen el área estudiada, pudiendo
conocer, de manera semicuantitativa, el porcentaje de cada uno de
ellos. [22]
Imagen 5. caracterización en microscopia electrónica de Barrido SEM de
muestras de fijación de Dióxido de Titanio en arcilla.
3.4. Diseño y experimentación para la unidad de Fotocatálisis
Se realiza un ensayo a escala laboratorio para poder evaluar el
proceso de degradación fotocatálica que tiene la fijación de TiO2 en
los peles, para esto se contó con un reactor de 100 ml con luz UV en
un arreglo de leds y en presencia de oxígeno. Así con estos
resultados poder escalar la planta de tratamiento de aguas grises.
Para evaluar el proceso se usa como indicador la degradación del
colorante Azul de metileno (AM) seleccionado por ser un colorante
presente en la ropa y que se disuelve en el agua de las lavadoras.
Como primer paso se preparó una solución stock de 100 ppm con
la que se realizaron diluciones de 10, 5, 1 y 0.5 ppm, con la finalidad
de establecer la concentración de trabajo; Se escoge la concentración
que se encuentre más cercana a la línea graficada del coeficiente de
correlación con un valor R=0,9937, como se puede ver en la
Gráfica 1. La concentración de trabajo seleccionada es de 5ppm
determinada gráficamente por ser paralela a la recta, este
comportamiento es típico de soluciones concentradas ya que la ley
de Lambert-Beer cumple su linealidad solo a bajas concentraciones.
Se evaluó la degradación dentro del reactor con la medición
continua hasta obtener la degradación completa del azul de metileno
que se da en 70 minutos; la degradación fue medida en absorbancia
con el colorímetro a un rango de 660 nm.
Ϭ͕ϳϬϬϬ
Ϭ͕ϲϬϬϬ
Ϭ͕ϱϬϬϬ
Ϭ͕ϰϬϬϬ
Abs
Ϭ͕ϯϬϬϬ y = 0,0586x + 0,0572
R² = 0,9937
Ϭ͕ϮϬϬϬ
Ϭ͕ϭϬϬϬ
Ϭ͕ϬϬϬϬ
Ϭ͕ϬϬ ϱ͕ϬϬ ϭϬ͕ϬϬ ϭϱ͕ϬϬ
concentracion ppm
Gráfica.1 Representación gráfica curva de calibración del azul de metileno
15
Obteniendo como resultados una degradación en la concentración del IV. RESULTADOS
azul de metileno de 46% en el tiempo de trabajo representado por la
Gráfica 2. Los resultados presentados a continuación son obtenidos de las
Ϭ͕ϱ pruebas realizadas al prototipo de planta de tratamiento de aguas
Absorbancia 660 nm
grises donde fueron ensambladas las cuatro etapas anteriormente
Ϭ͕ϰ descritas, partiendo de la hipótesis planteada,” La remoción en el
prototipo es superior al 60% en la concentración de contaminantes
Ϭ͕ϯ presentes en las agua grises”. Se parte de la toma de parámetros de
entrada para cada etapa como lo son: la turbidez que se define como
Ϭ͕Ϯ la dificultad del agua para trasmitir la luz debido a materiales
LJсͲϬ͕ϬϬϯϱdžнϬ͕ϰϯϳ
insolubles en suspensión, coloidales o muy finos presentados en
Ϭ͕ϭ ZϸсϬ͕ϵϰϮϯ unidades NTU (Unidades Nefelométricas de Turbidez),color por
Ϭ medio de la unidad de absorbancia en rango de 610 nm, variación de
conductividad, pH, demanda biológica de oxigeno (DBO3), nitratos,
Ϭ ϮϬ ϰϬ ϲϬ ϴϬ
fosfatos, cantidades de mesófilos, y cantidades de mesófilos, y
Tiempo (minutos ) coliformes presentes en la muestra con concentraciones variables de
acuerdo a aguas grises, representando por tres repeticiones en
condiciones constantes podemos ver algunas representaciones
Gráfica.2. Representación gráfica de la degradación fotocatalítica de azul gráficas de esto en donde se puede observar el comportamiento de
metileno 5 ppm, con Tio2 fijado en arcilla. esta variable con respecto a la fase en la que fue tratada.
Las aguas grises tienen diferentes tipos de contaminaste donde la
Con los resultados se escaló la unidad de la etapa de fotocatálisis de concentración se puede medir a través de indicadores como la
la etapa de tratamiento. turbiedad que en el agua que representa los residuos en suspensión, y
el color que mide la concentración de residuos de diluidos en el agua,
3.5 Unidad de filtración con carbón activado la reducción en estos indicadores permiten verificar la eficiencia del
tratamiento.
La unidad de filtración con carbón activado se diseñó con una altura Los resultados permiten observar que la planta de tratamiento
de 15 cm y conservando la línea de diseño de la planta con un base de presenta una eficiencia de reducción en los parámetros medidos,
radio de 10.25 cm a la cual ingresa el flujo de agua proveniente de como en el agua tratada por el prototipo genera una remoción que
la unidad de degradación con TiO2; El material de fabricación llega hasta del 99.94% en solidos suspendidos medidos por turbiedad
seleccionado fue empack N (Nylon). (NTU) y reducción de color por medición indirecta de solidos
La estructura obtenida se llenó con carbón activado (02+40 mesh), disueltos y suspendidos en un 92.97% en Asb a 610 nm.
una de sus partículas fue caracterizada por medio del Microscopio
Electrónico de barrido SEM (Jeol) del Laboratorio de
Nanotecnología de Tecnoacademia, de la cual se obtiene la imagen
6, donde se puede observar el tamaño de partícula que registra
morfología antes del proceso de filtración con poros de tamaño
menor (>500Ɋ y 200Ɋ) donde se hace la absorción del
material. En la Imagen 7, se puede ver el carbón activado utilizado en pH en cada unidad de tratamiento
el proceso de filtración donde se puede observar la saturación de los
poros a comparación con las Imagen 6. pH

ϭϬ͕ϬϬ
ϵ͕ϱϬ
ϵ͕ϬϬ
ϴ͕ϱϬ
ϴ͕ϬϬ
ϳ͕ϱϬ
ϳ͕ϬϬ

Imagen .6 carbón activado antes de pasar por el proceso de filtración en

microscopia electrónica de Barrido SEM A 500, (μm), tomado con alto vacío,
aplicando un voltaje de 10 Kv. Gráfica.3 Representación gráfica del pH tomado en cada una de las etapas
Imagen .7 carbón activado después de pasar por el proceso de filtración en de tratamiento.
microscopia electrónica de Barrido SEM a 200 (μm) micras, tomado con alto
vacío, aplicando un voltaje de, 15 Kv.

16
 Comportamiento Conductividad despues
Conductivid de cada tratamiento Medición de la turbiedad NTU
ad uS/cm
probeta 10X
ϭ͘ϰϬϬ
ϭ͘ϮϬϬ ϲϬϬϬ
ϭ͘ϬϬϬ
ϴϬϬ ϱϬϬϬ

Turbiedad NTU
ϲϬϬ ϰϬϬϬ
ϰϬϬ
ϮϬϬ ϯϬϬϬ
Ϭ ϮϬϬϬ
ϭϬϬϬ
Ϭ

Gráfica.4 Representación gráfica de la conductividad.

Los resultados permiten observar que la planta de tratamiento

presenta una eficiencia de reducción en los parámetros medidos,
como en el agua tratada por el prototipo genera una remoción que
llega hasta del 99.94% en solidos suspendidos medidos por turbiedad
(NTU) y reducción de color por medición indirecta de solidos
disueltos y suspendidos en un 92.97% en Asb a 610 nm.
Se puede Observar en la Gráfica 3 una importante reducción de la
conductividad iniciando en 1000 uS/cm y llegando hasta 223 uS/cm.
Factor importante de la eficiencia en el tratamiento debido a que nos
indica la eliminación de materiales conductores dentro de las aguas
grises y acercando el valor en calidad del agua obtenida posterior al
tratamiento.
Se puede observar eficiencias importantes en las unidades de
tratamiento como la electrocoagulación que reduce hasta 46% de
remoción en turbiedad y la asociación fotocatálisis y filtración con
una remoción 53. 94%. (Ver gráficas 4, 5 y 6)
Medición Color en Abs 610 nm
Ϭ͕ϯ
Color 610 nm Abs
Gráfica.6. Representación gráfica de la turbiedad NTU en
las etapas de tratamiento.
En cuanto a la reducción de los mesófilos y colíformes en la planta,
podemos ver una reducción en mesófilos superior a 4200 UFC/100
ml equivalente a una inicial superior a 5000UFC/100 ml tomada en
el tanque de sedimentación y un conteo final al proceso de filtración
de 1800 UFC/100 ml y una eliminación completa de colíformes
obtenido por conteo en siembra por filtración por membrana. Es de
destacar que las aguas grises poseen muy bajo conteo de colíformes
que no supera las 100 UFC/100 ml.
Los resultados de DBO3 es una medida indirecta de la materia
biodegradable presente en el agua destacando que paso de ser de
360 mg/ l O2 a 0.212 mg /l O2 dándose una reducción muy
importante dentro del tratamiento de aguas y estandarizando el agua
dentro de las condiciones admisibles a ser potabilizada.
La reutilización del agua es muy difícil y requiere un gran esfuerzo
técnico y económico, los resultados de esta investigación son de gran
importancia debido a que representa la posibilidad de tratar el agua
en la fuente de origen y poder ser reutilizada dentro de los hogares,

Ϭ͕Ϯϱ esto genera un impacto importante dentro la zona de Cazucá, donde

Ϭ͕Ϯ las vertientes de aguas grises tiene impactos negativos en los sistemas
Ϭ͕ϭϱ hídricos de la zona. La calidad necesaria para ser reutilizada: en el
Ϭ͕ϭ parámetro turbiedad debe estar en el rango de 0-5 NTU, en las
Ϭ͕Ϭϱ mediciones obtenidas la planta presenta una reducción de 99% y con
Ϭ la concentración final en turbiedad es de 0.0 NTU, la
concentración de coliformes no debe ser mayor de 200 UFC/100
ml con el tratamiento de la planta la presencia de colifórmes al final
del tratamiento es de 0.0 UFC/100 ml, En DBO3 la concentración
permitida esta 0 – 30 mg /l O2 la de la obtenida en la planta después
del tratamiento se obtuvo una concentración 0.212 mg /l O2.

Los resultados de los indicadores medidos del prototipo muestran,

que este es eficiente para la reutilización del agua como riego,
sistemas sanitarios y lavados de pisos. Dentro de la zona de Cazucá
permitirá generar una reducción en el impacto causado por el
deficiente manejo de los residuos líquidos urbanos en la zona. De la
Gráfica.5 Representación gráfica de la medición del color en absorbancia
misma forma este prototipo puede ser empleado en el tratamiento de
medida en un rango de 610 nm.
diferentes organizaciones urbanas.

17

V. CONCLUSIONES
El método planteado para la obtención de la fase experimental,
permitió hacer observación de un sistema integrado para plantas
compactas y estableció los criterios de entrada, que se mantuvieron
constantes en la evaluación. Permitiendo reconocer la eficiencia en
el tratamiento y generar las modificaciones para la mejora del
prototipo. De esta forma se pudo obtener los diseños para el prototipo
que mantuvo los resultados eficientes para el tratamiento de aguas
grises.
La evaluación en serie del tratamiento busco determinar la eficiencia
se tiene en total de la planta y mostrar la complementación de los
tratamientos, donde se parte del principio de emplear métodos que
permitan primero remover material de mayor tamaño y peso hasta
métodos que remuevan materiales de menor tamaño y peso. La
agrupación de los métodos de sedimentación, electrocoagulación
degradación con TiO2 y filtración genera remociones importantes en
los parámetros evaluados que llego a ser del 99% y las
concentraciones finales en los parámetros se encuentran dentro de las
normas para ser reutilizadas sin riesgo a la población.
La investigación nos refleja que se puede tener como alternativa,
utilizar la arcilla como soporte para fijación TiO2, mostrando
eficiencias en la oxidación del azul de metileno hasta porcentajes
superiores a 40% para la degradación de color que es uno de los
contaminantes más difíciles de disminuir en el tratamiento de aguas
grises.
V. TRABAJOS FUTUROS
Mejoras en el prototipo de planta que conduzca a ser eficiente dentro
de los hogares con sistemas de recolección y almacenamiento de
agua sin tratar y agua tratada. Con este prototipo se buscara sacar la
patente para la comercialización.
Desarrollo y evaluación de nuevos sustratos para soporte de TiO2 que
conduzca al desarrollo de nuevos métodos de tratamiento en la
descontaminación de agua, aire y suelo.
VI. AGRADECIMIENTOS
Brindamos nuestros sentidos agradecimientos al equipo de la
tecnoacademia nodo Cazucá, que siempre nos brindaron toda su
colaboración y apoyo en la ejecución del proyecto, y a todos los
gestores de Tecnoparque nodo Cazucá en especial, Lina Bolaños
desde la parte de diseño y Oscar Robayo y Juan Carlos Sandoval
desde la parte de Electrónica .
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19
 Transformación de Textiles con propiedades de control de temperatura por
técnicas de microtecnología
Ballesteros Luis Miguel1, Gutiérrez Johana2, Isaza Julián3, Gutiérrez Sebastián3, Londoño Marta1
1 Grupo de Investigación en Ingeniería Biomédica, Escuela de Ingeniería de Antioquia – Universidad CES, Medellín, Colombia.
2 Tecnoparque nodo Medellín, Servicio Nacional de Aprendizaje SENA, Medellín, Colombia.
3 Centro Tecnológico de Gestión Industrial, Servicio Nacional de Aprendizaje SENA, Medellín, Colombia.

Resumen - Los textiles inteligentes son materiales
prometedores para brindar condiciones de confort y
seguridad, especialmente en condiciones de calor excesivo.
En este proyecto se exploraron diferentes técnicas de
integración de micro-hidrogeles sobre un textil comercial,
buscando brindar propiedades innovadoras a los textiles,
con el fin de aportar elementos diferenciadores en la
industria textil reconocida en Colombia a través de
técnicas de microtecnología. Los micro-hidrogeles se
integraron empleando presión y se validó a través de
pruebas de microscopia óptica, hinchamiento y lavado,
confirmando la permanencia exitosa al textil luego de ser
sometidos a condiciones de proceso de lavado
convencional.
Palabras clave: micro-hidrogeles, textil inteligente, sensación
de confort, temperatura corporal.
Abstract - Intelligent textiles are promising materials for
bringing comfort and safety conditions, especially in
excessive heat conditions. In this project, micro-hydrogels
integration techniques were explored over a commercial
textile, bringing innovative properties to the garment, in
order to provide a distinguish elements in the textile
industry recognized in Colombia trough micro technology
techniques. The integration of micro-hydrogels was done
by pressure and validated by optic microscopy, swelling
and soaking tests confirming the successful permanence
into the textile after being subjected to conventional
laundering process.
Keywords: micro-hydrogels, intelligent textiles, comfort
sensation, corporal temperature.
I. INTRODUCCIÓN
La piel es un sistema natural que mantiene la
integridad del cuerpo humano actuando como barrera contra
peligros ambientales como el frio, calor, químicos entre
otros[1], sin embargo es muy sensible y necesita una
protección extra proporcionada por las prendas de vestir [1],
[2].
Particularmente, en el sector deportivo se ha notado
una disminución en el rendimiento físico y una alta
probabilidad de padecer deshidratación debido a la cantidad de
líquidos perdidos al transpirar, inducidos por el aumento en la
temperatura corporal en el momento de la actividad [3], [4].
La industria deportiva ha tratado de solucionar estos efectos
utilizando fibras naturales de algodón para favorecer la
ventilación de la piel [5]acompañados de fibras sintéticas, las
cuales no tienen la facultad de permitir el intercambio de calor
[1].
3RU FRQVLJXLHQWH OD LQGXVWULD WH[WLO VH KD YLVWR HQ OD
QHFHVLGDG GH HPSOHDU PDWHULDOHV PiV DYDQ]DGRV \ HV DTXt
GRQGH DOJXQRV DYDQFHV HQ PDWHULDOHV \ PLFURWHFQRORJtD VH
SUHVHQWDQFRPRXQDRSRUWXQLGDGSDUDEULQGDUVROXFLyQDHVWDV
GHPDQGDV 6LVWHPDV FRPR ORV PLFURKLGURJHOHV ORV FXDOHV
WLHQHQODFDSDFLGDGGHUHWHQHUOtTXLGRVTXHOXHJRVRQOLEHUDGRV
GH IRUPD FRQWURODGD DO PHGLR GRQGH VH HQFXHQWUHQ KDQ VLGR
HPSOHDGRV>@ >@
(QEXVFDGHSURSRUFLRQDUSURSLHGDGHVLQQRYDGRUDVD
ORV WH[WLOHV VH UHDOL]y SRU PHGLR GH WpFQLFDV GH
PLFURWHFQRORJtD XQDLQWHJUDFLyQH[LWRVDGHPLFURKLGURJHOHVD
XQ WH[WLO FRPHUFLDO FRQYLUWLpQGROR en un material potencial
para la elaboración de textiles a gran escala en una ciudad
como Medellín que basa gran parte de su economía en esta
industria.
II. METODOLOGÍA
A. Selección y caracterización del textil 
Para la selección del textil se tuvo en cuenta las propiedades
elásticas, flexibles, de bajo peso y de secado rápido de las
prendas deportivas comerciales [8]. Se seleccionaron 4 tipos
de telas deportivas comerciales y se caracterización mediante
un microscopio óptico (Nikon) de luz transmitida y reflejada,
por el cual se observaron los poros y el entramado de las telas.
Para determinar el tamaño de poro se empleó el software
estadístico NIS Instrument. 
Los criterios utilizados para la selección fueron los siguientes:
20
Tamaño de poro: homogéneo y definido que permitiera el
almacenamiento del micro-hidrogel correcto.
Entramado: de comportamiento organizado y definido que
proporcionara un espacio apto para el almacenamiento de los
micro-hidrogeles.
B. Obtención de los micro-hidrogeles
La obtención de los hidrogeles de alcohol polivinílico
(PVA) se logró mediante un proceso físico que consistió en
someter las soluciones preparadas a ciclos repetidos de
congelamiento descongelamiento.
Los micro-hidrogeles se obtuvieron siguiendo el procedimiento
definido por [9]. Brevemente, se preparó una solución de
polivinil alcohol (SIGMA –ALDRICH) al 10% p/v, y se
adiciono buffer fosfato (pH 7.4) con agitación y temperatura
constante. A la solución se le agregó gota a gota 100mL de
aceite de silicona (Protokimica, Colombia) mientras se agitaba,
a temperatura ambiente, luego, se sometió el sistema a 6 ciclos
de congelamiento/descongelamiento. Finalmente la solución se
filtró, adicionando acetona grado analítico (ABC LABS,
Estados Unidos) y se recogieron los micro-hidrogeles
formados [10]͘ 
C. Hinchamiento de micro-hidrogeles
Con el fin de corroborar el ciclo de hidratación del
hidrogel, se realizó una prueba de hinchamiento, en la que se
seleccionó un aglomerado de micro-hidrogeles, se les adicionó
una gota de agua y durante 75 minutos se hizo seguimiento
periódico cada 5 minutos al diámetro del aglomerado el al cual
se verificó usando la fórmula empleada por Londoño [10].
݀݉ܽ‫ ݔ‬െ ݀݉݅݊
‫ ͲͲͳ כ‬ൌ Ψ݄݄݅݊ܿܽ݉݅݁݊‫݋ݐ‬
݀݉݅݊
Siendo: dmax el diámetro máximo y dmin el diámetro mínimo
de los micro-hidrogeles.
D. Integración de los micro-hidrogeles al textil.
El textil seleccionado en el numeral A (1x1) cm, se colocó
sobre un portaobjetos y se añadió una pequeña cantidad de
micro-hidrogeles. Para una correcta integración con el textil, se
adiciono (20-100) μL de agua desionizada y se esperó por 1
minuto hasta que hidrogel presentara una textura adherente.
Con un segundo portaobjetos, se ejerció presión sobre los
micro-hidrogeles previamente hidratados sobre el textil, se dejó
secar a temperatura ambiente y se observó en el microscopio
óptico (Carl Zeiss,Alemania).
E. Verificación de la integración
Con el fin de facilitar la observación de los micro-
hidrogeles después de realizadas las pruebas, se tiñeron
utilizando un colorante natural [11]. Y se recrearon las
condiciones de lavado a las que se someten los textiles
practicando las siguientes pruebas [1]
Prueba de inmersión :Se realizó con el fin de verificar
que los hidrogeles no se desprendieran del textil. Para esto, se
sumergió el trozo de tela modificado en una caja de Petri llena
de agua durante 5 minutos, pasado el tiempo de inmersión se
retiró el textil.
Prueba de permanencia Se realizó para verificar la
capacidad de permanencia de los micro-hidrogeles al textil
sometiéndolo a un flujo de agua constante por un periodo de
tiempo determinado.
Prueba de lavado: Simulando las condiciones de una lavadora
comercial, se sometió al textil integrado a una prueba de
lavado. Se colocó un beaker de 250 mL con l00 mL de agua
sobre una plancha magnética y se añadió la tela modificada
agitándola a 800 rpm durante 5 minutos.
Las pruebas fueron realizadas por triplicado y se verificaron en
el microscopio óptico.
III. RESULTADOS
A. Selección del textil
Se procedió a observar los textiles a través del
microscopio, y se pudo determinar la diferencia de cada uno,
ya que, los tamaños de poro y la conformación de los
entramados generan características únicas que benefician o
perjudican la posterior integración de los micro-hidrogeles. Por
tal motivo, se utilizó un software estadístico con el fin de
determinar el promedio de diámetro de poros de cada uno de
los textiles (Tabla 1). Teniendo en cuenta lo reportado por Li y
colaboradores [12] por la naturaleza de los micro-hidrogeles y
su tendencia a formar aglomeraciones, es necesario disponer de
tamaños de poros adecuados (aproximadamente 1000um) para
una posterior integración al textil. Por tal motivo se decidió
seleccionar el textil 3 (Figura 1), prenda a base de poliéster con
un entramado organizado, definido y con poros homogéneos
que lo hacen la prenda más apta para una posterior integración
de los micro-hidrogeles sobre el textil.
Tabla 1. Cuantificación promedio de los textiles promedio del diámetro de poro
de los textiles.
Textil Promedio de
diámetro
1 – poliéster 891.81μm
2 – poliéster 106.09 μm
21
 3 – poliéster 972.51 μm
4 – algodón 836.82 μm
B. Hinchamiento del micro-hidrogel
El porcentaje de hinchamiento obtenido en esta prueba fue
de 81.54% (Figura 2), comportamiento propio de los hidrogeles
[10], [13]. Sin embargo, el porcentaje de hinchamiento
obtenido en esta prueba es mucho menor a los reportados por
Londoño [9], quien alcanzó un porcentaje de hinchamiento del
250% haciendo el seguimiento a un solo micro-hidrogel. Esto
puede ser debido a la aglomeración de los micro-hidrogeles, ya
que al hincharse las partículas internas del aglomerado no
pueden expandirse libremente por las restricciones en su
periferia.
C. Evaluación del textil modificado
Una vez teñidos los hidrogeles (Figura 3), se realizaron las
pruebas
Prueba de Inmersión: A través del microscopio óptico se pudo
confirmar la presencia de micro-hidrogeles en el textil, ya que
se pueden comprobar la presencia de estos no solo en los
poros, sino también en el entramado del textil (Figura 4). Esto
es debido a la textura de los micro-hidrogeles ya que la tensión
superficial provoca la adherencia con más facilidad no solo a
los poros del textil sino también a las fibras.
Figura 1. Microscopía óptica del textil seleccionado (20X)
 este estudio.
 
a) b)
Figura 2. Comportamiento de hinchamiento del micro-hidrogel (5X), a) sin
hidratación, b) con la presencia de agua
Prueba de permanencia de los micro hidrogeles al textil: Las
prendas, en general son sometidas a condiciones climáticas
tortuosas como la lluvia, granizo etc. Por tal motivo, al someter
al textil a flujos de agua constante se pudo evidenciar dos
comportamientos. El primero de remoción, generado por la
eliminación de los hidrogeles al aplicar una corriente de agua,
causados por la tensión superficial y los enlaces débiles
formados en la periferia del textil. Y el segundo de
permanencia, debido a que los hidrogeles en el proceso de
integración se situaron en las fibras internas del textil,
causando una mayor adhesión del micro-hidrogel generando
una resistencia superior al flujo de agua utilizado en el
experimento y causando así que los hidrogeles no se
removieran del textil, sin embargo no todos los micro
hidrogeles permanecieron en el textil, esto es debido a
.Prueba de lavado: Al simular las condiciones de lavado al
textil en una lavadora, y observando su comportamiento
posterior en el microscopio óptico se pudo observar que los
aglomerados de micro-hidrogeles permanecían en el textil Fig.
5, con estos resultados se puede observar la viabilidad de este
tipo de telas modificadas para una posterior comercialización.
IV. DISCUSIÓN
La integración de micro-hidrogeles al textil fue exitosa y puede
ser un potencial innovador para fabricar textiles con
propiedades de control de temperatura. Después de las pruebas
de lavado convencionales se comprobaron dos
comportamientos en la permanencia de los hidrogeles en el
textil. Este textil con microhidrogeles puede proponerse para
elaboración de prendas que generen sensación de frescura. Se
deben adelantar pruebas en condiciones reales para fortalecer

 D E
Figura 3. Micro-hidrogeles en el proceso de teñido a) antes de la coloración b)
después del finalizado el proceso de coloración.
22
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comportamiento dieléctrico de un hidrogel del alcohol
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“Obtención y caracterización de microhidrogeles de alcohol
polivinílico para su potencial aplicación en sistemas de
liberación de fármacos,” 2010.
23
 Caracterización de la pared celular de diferentes especies del género
Guadua, para la extracción de nanocelulosa en Pitalito, Huila
Una nueva opción para los Biomateriales Nanoestructurados
Autores Segunda afiliación.
Esp. BLANCO, Carlos. Ing. Agroecólogo. Centro de
Gestión y Desarrollo Sostenible Surcolombiano-Instructor,
carlosblancoro@misena.edu.co. 311509020,
http://201.234.78.173:8081/cvlac/visualizador/generar
CurriculoCv.do?cod_rh=0000543560, Pitalito-Huila.
M.Sc. GASCA, Jemid. Biólogo. Centro de Gestión y
Desarrollo Sostenible Surcolombiano-Instructor,
jemigascavargas@misena.edu.co
3133762125,
http://201.234.78.173:8081/cvlac/visualizador/generarCurric
uloCv.do?cod_rh=0000015802, Pitalito-Huila.
Esp. PATIÑO, Lina. Microbióloga. Centro de Gestión y
Desarrollo Sostenible Surcolombiano-Asesora Tecnoparque,
lfpatino40@misena.edu.co, 3156307253, Pitalito-Huila.
M.Sc. SANDOVAL, Claudia. Bióloga. Centro de Gestión y
Desarrollo Sostenible Surcolombiano-Instructora,
clsandoval08@misena.edu.co, 3002709376,
http://201.234.78.173:8081/cvlac/visualizador/generarCurric
uloCv.do?cod_rh=0000710679, Pitalito-Huila.
M.Sc. SILVA, Yesenia. Química/Gestión de la Innovación.
Centro de Gestión y Desarrollo Sostenible Surcolombiano-
Instructora, yeseniasilva@misena.edu.co, 3133864062,
http://201.234.78.173:8081/cvlac/visualizador/generarCurric
uloCv.do?cod_rh=0000521760, Pitalito-Huila.
TOVAR, Margarita. Ing. Física. Centro de Gestión y
Desarrollo Sostenible Surcolombiano-Instructora,
margarita.tovar@misena.edu.co, 3207537292,
http://201.234.78.173:8081/cvlac/visualizador/generarCurric
uloCv.do?cod_rh=0000659657, Pitalito-Huila.
Autores Tercera afiliación.
VARGAS, Gustavo. Centro de Gestión y Desarrollo
Sostenible Surcolombiano-Aprendiz Tecnólogo en Gestión
Sostenible de la Biodiversidad Vegetal, Pitalito-Huila.
GOMEZ, Karen. Centro de Gestión y Desarrollo Sostenible
Surcolombiano-Aprendiz Tecnólogo en Gestión Sostenible
de la Biodiversidad Vegetal, Pitalito-Huila.
MUÑOZ, Marly. Centro de Gestión y desarrollo Sostenible
Surcolombiano-Aprendiz Tecnólogo en Gestión Sostenible
de la Biodiversidad Vegetal, Pitalito-Huila.
RAMIREZ, Jhininson. Centro de Gestión y Desarrollo
Sostenible Surcolombiano-Aprendiz Tecnólogo en Gestión
Sostenible de la Biodiversidad Vegetal, Pitalito-Huila.
RAMOS, María Lilí. Centro de Gestión y Desarrollo
Sostenible Surcolombiano-Aprendiz Tecnólogo en Gestión
Sostenible de la Biodiversidad Vegetal, Pitalito-Huila.
RENGIFO, Solangie. Centro de Gestión y Desarrollo
Sostenible Surcolombiano-Aprendiz Tecnólogo en Gestión
Sostenible de la Biodiversidad Vegetal, Pitalito-Huila.
RIVERA, Jeferson. Centro de Gestión y Desarrollo
Sostenible Surcolombiano-Aprendiz Tecnólogo en Gestión
Sostenible de la Biodiversidad Vegetal, Pitalito-Huila.
RODRIGUEZ, Yesica. Centro de Gestión y Desarrollo
Sostenible Surcolombiano-Aprendiz Tecnólogo en Gestión
Sostenible de la Biodiversidad Vegetal, Pitalito-Huila.
ROJAS, Diego. Centro de Gestión y Desarrollo Sostenible
Surcolombiano-Aprendiz Tecnólogo en Gestión Sostenible
de la Biodiversidad Vegetal, Pitalito-Huila.
TOBAR, Yesika. Centro de Gestión y Desarrollo Sostenible
Surcolombiano-Aprendiz Tecnólogo en Gestión Sostenible
de la Biodiversidad Vegetal, Pitalito-Huila.
24
Abstract
Genus Guadua belongs to the Bambusoideae gramineae
subfamily. It can be found in the humid tropical forests,
near the rivers sides. Its morphological characteristics
allow high resistance and flexibility, providing uses as a
construction material. Its structural composition is
characterized by different fibers and vascular bundles that
structure tissues such as parenchyma. Guadua is an ideal
material for cellulose extraction; therefore the objective of
this project is the characterization of cellular ultra-
structures from cellular walls of Guadua in Pitalito - Huila,
in order to obtain cellulose through different procedures
and to characterize final products that could be useful as
nano-structured materials. Also, vegetal micro-
propagation methods will be implemented to be adapted
under nursery conditions, aiming to increase raw material
conservation for further extractions.
Keyword: Guadua, Cellular wall, Alcalinization, Hydrolisis,
Electron microscopy, Atomic force microscopy.
I. Introducción
Las especies del género Guadua se conocen popularmente
como guadua o tacuara. Pertenece a la subfamilia de las
gramíneas Bambusoideae. Habita en la selva tropical húmeda
en las riberas de los ríos. Es propia de las selvas de sudestes
venezolanas, extendiéndose por las selvas de las Guyanas. Se
encuentra en Brasil, Colombia, Guyana, Perú, y Surinam [1].
Debido a la composición química de sus fibras naturales,
la guadua presenta alta resistencia y flexibilidad.
Representando gran potencial económico, de ahí sus usos en
construcción, protección de cuencas, riberas de ríos y
quebradas; elaboración de muebles y artesanías, fabricación de
laminados y aglomerados.
Un estudio previo de microscopía óptica en Guadua
angustifolia Kunth, ha evidenciado características especiales
de variación en los haces vasculares entre cada nodo (culmo)
en cuanto a tamaño, forma, distribución y número [2]. Esta
variación es relacionada con el espesor de la pared de cada
culmo, con una concentración más alta de los haces vasculares
hacia la periferia, un 40% de fibra, 51% parénquima y tejido
vascular 9% en promedio y a la vez es independiente de la
edad del culmo. Las características anteriormente descritas
confieren a la guadua la particularidad flexibilidad y
resistencia [2].
La composición química de las fibras naturales varía
en función del tipo y origen. Ellas contienen principalmente
diferentes proporciones de celulosa y hemicelulosa (60 – 80
%) y de lignina (5 – 20 %) [3]. La celulosa es el principal
componente de la pared celular de las fibras naturales. Por
tanto, la guadua al estar compuesta de muchas fibras de haces
vasculares, permite la extracción de celulosa con menor
dificultad. La celulosa es un polímero natural y representa
cerca de un tercio de los tejidos vegetales que regenera
mediante fotosíntesis. Anualmente, se producen en todo el
mundo aproximadamente 1000 toneladas de celulosa por
medios naturales a partir de recursos naturales diferentes a la
guadua [4].
En la industria, la celulosa es utilizada para la construcción
de nanocompositos, ya que es una alternativa a materiales
convencionales empleados en el sector del empaque
alimentario, además de otros usos en los recubrimientos de
películas de celofán ya que se incorporan fácilmente. Gracias
a sus excelentes propiedades como las cualidades
biodegradables y biosostenibles [5]. En medicina los
biopolímeros de celulosa es un material prometedor en la
construcción de Biomembranas para la medicina, como lo son
en el uso tratamientos de diálisis, en pacientes con problemas
renales [6].
Estudios de ultra estructuras por microscopía electrónica
en otras especies, han permitido conocer la existencia de
diferencias en la condensación de moléculas de hemicelulosas,
lignina y microfibrillas de celulosa, y engrosamiento de la
pared celular de especies vegetales, la cual puede modificarse
en respuesta a factores ambientales[7]. Por tanto, el estudio de
ultraestructuras en la Guadua pretende identificar una especie
con características particulares que podrían representar una
materia prima potencial para la obtención de nanocelulosa a
partir de guadua de la región de Pitalito, Huila, para su futura
utilización como refuerzo de matrices materiales
biodegradables.
De esta manera, el objetivo de este trabajo es realizar
caracterización de ultraestructuras celulares de la pared celular
en diferentes especies del género Guadua en la región del
municipio de Pitalito para obtener celulosa a partir de fibras
mediante diferentes procedimientos químicos, con el fin de dar
valor agregado a proyectos de desarrollo municipal - que
pretenden plantar el guadal más grande de Colombia
contribuyendo a fortalecer el eje ambiental con la
reforestación de guadua.
Por lo cual el presente documento hace referencia a los
avances obtenidos hasta la fecha, con la participación de
actores quienes ejecutan las actividades de investigación
aplicada por la modalidad de formación e innovación por
proyectos. Los resultados preliminares del proyecto pretenden
mostrar de su viabilidad como estudia para continuidad de su
ejecución, liderada por aprendices e instructores vinculados al
proyecto tecnológico –Uso Sostenible y Conservación de la
Biodiversidad- en los diversos ambientes de aprendizaje del
Centro de Desarrollo Sostenible Sur Colombiano- en Pitalito,
Huila.
II. Metodología y Resultados
Para evaluar la relación se seleccionaron al azar en el
bambuzal existente en el tecnoparque Agroecológico
Yamboró, vereda Aguadas del municipio de Pitalito, Huila.
25
 1. Herborización y Fijación de Material Vegetal
Durante el trabajo de campo, donde se realizó colecta
del material vegetal se dio inicio a procesos de
identificación y de herborización del material colectado
Figura 1.
3. Cortes
Los tejidos fueron cortados en láminas delgadas de una
micra para posibilitar su observación con el microscopio
de barrido electrónico. Dichos cortes se realizaron con
bisturí Nº 3.

4. Análisis de los tejidos.

El análisis de las fibras de guadua se realizó por
microscopia óptica y microscopia electrónica de Barrido,
con el fin de observar la composición de sus paredes
celulares a nivel nano [9].
Se realizaron respectivas observaciones en microscopia
óptica a 10X, 50X y 100X y también empleando
Microscopio óptico Carl Zeiss Axio Lab A1.-. Que
permitió ver los resultados previos de procesamiento de la
muestra (Figura 2). Para así posteriormente mejorar
detalles de cotes para los posteriores análisis de paredes
celulares de fibras de guadua.
Figura 1. Herborización de material de campo
de Guadua angustifolia Kunth.

La fijación se realizó con glutaraldehído al 2%, de

tejidos de hojas infectadas y de tejidos conductores, con el
fin de preservar la morfología y la composición química de
las células y los tejidos. Así también para producir la
muerte de las células, de manera tal que las estructuras que
éstas conforman en el estado vivo, se conserven con un
mínimo de modificaciones en las subsiguientes etapas del
análisis.
Ambientes de aprendizaje empleados: Laboratorio de
Biodiversidad –Cabina extracción de gases-, Aérea rural
municipio de Pitalito, Huila.

2. Preparación del material vegetal E F

Para la obtención de cortes finos es indispensable que
el tejido este previamente endurecido: Con el fin de
endurecer los tejidos se usaron las técnicas más frecuentes
que se empleadas en métodos de inclusión.
El tejido se impregnó en parafina dado que ésta es una
sustancia hidrofóbica, llevando a cabo un proceso previo:
Los tejidos fijados fueron previamente deshidratados
Figura 2. Registro fotográfico de avance de proyecto en
durante una hora en etanol de concentración (v/v) diferente Histología. A. cortes de material vegetal (2cmx2cm aprox.) B.
(50%, 70%, 80%, 90%, 96% y 100%). Posteriormente se Soluciones preparadas para deshidratación de vegetal. C. Material
pasaron por solventes de polaridad intermediarios como el de Guadua incluido en parafina. D, Observaciones realizadas
xileno, el benceno o el tolueno (conocidos como agentes donde se detalla la pared celular – 100X- las flechas la pared
aclarantes). Finalmente fueron sumergidos en parafina celular. E y F, histología de guadua a 50X donde se notan paredes
fundida (56 - 60°C) y se dejaran solidificar constituyendo celulares de guadua.
bloques o tacos histológicos para observación por
microscopia de óptica [8].
Ambientes de aprendizaje empleados: Laboratorio de
Ambientes de aprendizaje empleados: Laboratorio de nanotecnología -Microscopio electrónico barrido EVO
biodiversidad –Cabina extracción de gases-. HD15, Microscopio óptico Carl Zeiss Axio Lab A1.
26
 5. Extracción de nanocelulosa mediante hidrólisis
Para lograr la elucidación de extracción de la celulosa
previamente es necesario realizar los siguientes
procedimientos descritos a continuación y los cuales se han
realizado parcialmente dado a la limitante de materiales.
Figura 3. Registro fotográfico de avance de proyecto-
La caracterización del material de ensayo, Análisis proximal y micropropagación. A. Siembre de explantes de guadua. B. y C.
extracción e identificación de nanocelulosa [10; 11]. Activación de meritemos. La flecha indica los primeros primordios
después 2 semanas.
La caracterización las ultra estructuras del material vegetal y
del producto obtenido por hidrólisis será realizado, ya que no
se tienen limitantes de reactivos para la extracción química de Tabla 1. Composición del medio de cultivo.
la nanocelulosa.

6. Micropropagación in vitro de
plántulas.
Establecer clones vegetales mediante cultivo in vitro de
plántulas de Guadua, obtenidos de explantes, donde se
emplearon modificaciones del medio de Murashige-Skoog
[12]. Para permitir la conservación de especies de
características únicas que proporcionen reservas de materia
prima ante futuras extracciones [13, 14].

Se partió de plantas jóvenes de aproximadamente 50 cm de

altura, de las cuales se le realizaron cortes en los entrenudos
de aproximadamente 5cm.
Para el proceso de esterilización se procedió haciendo
desinfección del material vegetal de la siguiente manera:

‫ڹ‬Se lavó inicialmente con agua y jabón, haciendo cepillados,

para luego realizar dos cambios con extran y agua esterilizada,
destilada en un volumen de 1/1. Cada cambio por 5 minutos.

‫ڹ‬Se realizó dos cambios en 100 ml de agua destilada estéril +

1 gota de tween 80 (1/1000), Cada cambio por 5 minutos.
También se utilizó en 100 ml de Hipoclorito de Sodio 5.25 %
+ 1 gota de tween 80 (1/1000) constante agitación durante 5
minutos.

‫ڹ‬Finalmente se enjuago con agua destilada estéril 3 veces.

Para la Preparación del medio de cultivo se utilizaron los
siguientes reactivos -macro/micro nutrientes, hormonas y
reguladores de crecimiento- mostrados en la tabla 1.
Los resultado de los primeros ensayos mostraron un activación
metabólica a las siguientes dos semanas de realizado la
siembra de los diferentes explantes vegetales como se observa
en la figura 3. Evidencio un buen rendimiento con las
condiciones mostrados en cuanto a la preparación de medios y
cultivo en laboratorio para establecimientos de bancos de una
especie con características únicas de pared celular.
Ambientes de aprendizaje empleados: Laboratorio de
micropropagación vegetal-biotecnología Cabinas de Flujo
laminar Class II. Vivero
III. Resultados Preliminares
Los avances del proyecto a la fecha de acuerdo a los
resultados esperados, mostraron un avance de aproximado del
25% según lo establecido en el cronograma de actividades,
dado alas limitaciones de accesorios, equipos y materiales.
El avance obtenido fue significativo, dado que los resultados
obtenidos en cuanto a la histología vegetal y multiplicación de
27
microplántulas de guadua mediante biotecnología vegetal,
permite justificar la viabilidad del estudio para su continuidad
a futuro. Donde se pudo evidenciar que los protocolos que se
comenzó a trabajar, mostraron resultados viables que permiten
ser mejorados para dar continuidad al proyecto (Figura 2 y 3).

En cuanto al análisis de tejidos se lograron imágenes de la

pared celular de guadua donde se puede visualizar en los
cortes, estructuras de la pared celular, pero es pertinente
afirmar que existen limitaciones en cuanto a los cortes finos
requeridos para analizar las imágenes a escala nano (Figura 2).

Los análisis químicos se han visto fuertemente limitados a la

disponibilidad de los materiales de formación, que son
indispensables para ejecutar los análisis bromatológicos,
extracción e identificación de la nanocelulose.

ZĞĨĞƌĞŶĐŝĂƐ
[1] Londoño, X et al.. La Guadua un gigante dormido.
Memorias Seminario Guadua en la Reconstrucción.
Armenia. Quindíovol.12, pp. 37-42 2000.
[2] Londoño, X, et al.,Characterization of the anatomy of
Guadua angustifolia (Poaceae: Bambusoideae) culms. The
Journal of the American Bamboo Society, vol. 16,pp.18-
31, 2002.
[3] Bledzki A-K-, Gassan J. Composites reinforced with
cellulose based fibres. Progress in Polymer Science. vol.
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[4] Growth of the plant cell wall. Nature Reviews Molecular
Cell Biology. Vol.6, pp. 850-861 November 2005
[5] Giménez, E.; et al.,Nanocompuestos poliméricos
biodegradables: nuevos materiales para el envasado
alimentario. I Simposio Iberoamericano de Ingeniería de
Residuos. Castellón, 23-24 julio 2008
[6] Hoenich, N. “Cellulose for medicals aplications,”
bioresources.vol 1, pp. 270-280, 2007
[7] Katia Ruel, et al., The wood cell wall at the ultrastructural
scale –formation and topochemical organization.
Maderas. Ciencia y tecnología, vol. 8, pp.107-116, April
2006.
[8] Yilun Ma, V.K. Sawhney, T.A. Steeves. Staining of
paraffin-embedded plant material in safranin and fast
green without prior removal of the paraffin. Canadian
Journal of Botany, vol. 71 pp 996-999, 1993,
[9] Obtención de Gelulosa a Partir de los Desechos Agrícolas
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Tecnológica. vol. 16 pp. 83-88, 2005.
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Vol.86, Issues 12–13, pp. 1781–1788August 2007,
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growth and bioassays with tobacco tissue cultures.
Physiol. Plant. vol.15, pp.473-497. 1962.
[13] Marta leonor marulanda a.et al., La biotecnología aplicada
al estudio y aprovechamiento de la guadua. Seminario -
Taller Avances en la investigación sobre Guadua., Mayo
16-17 y 18. 2002
[14] 9ÕFWRU 0 -LPHQH]  -KDPQD Castillo. In vitro
propagation of the neotropical giant bamboo, Guadua
angustifolia Kunth, through axillary shoot proliferation.
Plant Cell Tiss Organ Cult. vol. 86 pp. 389–395. 2006
28
 Nano compuestos de arcillas
para protección ultravioleta en textiles
Ruy Sebastián Bonilla Osorio, Department of Materials,
University of Oxford sebastian.bonilla@materials.ox.ac.uk,
(+44186) 528-3097, Mobile (+44787) 496-1011,
http://201.234.78.173:8081/cvlac/visualizador/generarCurric
uloCv.do?cod_rh=0001403817, Oxford, United Kingdom.
Andrea del Pilar Reyes Meneses
Instructor
SENA - Centro de Manufactura en Textiles y Cuero
e-mail: apreyesm@misena.edu.co
Teléfonos de contacto: 3008247711
4swCiudad: Bogotá, D.C.
Hernán Mauricio Barrera Nova
Talento
SENA-
Gestión de Mercados, Logística y Tecnologías de la
Información,
Tecnoparque Colombia
Email: mauro_b0812@hotmail.com.
Teléfonos de contacto: 3184636125, Ciudad: Bogotá D.C.
Abstract—.The increasing environmental effects of
greenhouse gases and ozone layer depletion have raised
our awareness of the negative effect of ultraviolet radiation
(UVR) in humans. Effective protection has been strongly
recommended by organizations around the world
including the World Health Organization and the
Environmental Protection Agency. Textiles used for
clothing and protection not always provide a sufficient
reduction of UV radiation. The aim of this study was to
evaluate the potential of a nanocomposite clay embedded
with titanium dioxide nanoparticles as a textile coating
film for UV protection.
Laura Lorena Cortez, Aprendiz,
Centro de Manufactura en Textiles y Cuero (CMTC),
Tecnólogo en Diseño para la Industria de la Moda y
Confección,
E-mail: Moldesmaster@gmail.com, larag@misena.edu.co ,
Teléfono de contacto: 3104769342, Ciudad: Bogotá D.C.
Omar Bolívar
Asesor de Proyectos
SENA - Centro de Manufactura en Textiles y Cuero
e-mail: omarbolivar@misena.edu.co
Teléfonos de contacto: 5960050Ext 14946
Ciudad: Bogotá D.C.
Laura Natalia Espinel
SENA - Centro de Gestión de Mercados, Logística y
Tecnologías de la Información,
Talento
Tecnoparque Colombia
E-mail: lana102@live.com
Teléfono de contacto:32043272049
Ciudad: Bogotá D.C.
Liliana Margarita Ocampo
Instructor
SENA – Centro de Manufactura en Textiles y Cuero
Email: lmocampo35@misena.edu.co
Teléfono de contacto: 3006154677
Ciudad: Bogotá, D.C
El aumento del efecto de los gases invernadero y la
disminución de la capa de ozono, ha incrementado la
preocupación del efecto negativo de la radiación ultravioleta
en humanos. La Organización Mundial de la Salud (OMS) y la
Agencia de Protección Ambiental (EPA), junto con otras
entidades alrededor del mundo, ha recomendado de manera
enfática la importancia de la protección efectiva contra la
radiación ultravioleta en el sol. Los textiles usados en ropa y
protección, no siempre proveen una suficiente reducción de la
radiación UV. Este proyecto explora el potencial de un nano
compuesto de arcilla y nano partículas de dióxido de titanio,
como película de recubrimiento que podría brindar al textil un
alto grado de absorción ultravioleta.
29

Keywords— Clay, Coating, Environmental
effects, nanocomposite, Nanoparticles,
titanium dioxide,,, Ultra Violet Radiation UV.
Introducción
de látex, continuando con la agitación, cuando se completaron
5 minutos de agitación se retiraron de la mezcla en agitación
30 ml y se sirvieron en un Erlenmeyer, una vez se
Protection, completaron 10 minutos de agitación se retiraron otros 30 ml y
se sirvieron en otro Erlenmeyer y así sucesivamente hasta
completar quince minutos de agitación, para un total de tres
muestras con diferente tiempo de agitación (5, 10 y 15
minutos de agitación), las cuáles serían empleadas para la
impregnación textil.

El aumento en el consumo de combustibles fósiles tiene b. Impregnación textil

como efecto un incremento de gases invernadero que terminan
ocasionando una disminución en la capa de ozono, aumentando Para la impregnación textil se utilizó algodón 100% APT de
así la radiación ultravioleta y por ende la probabilidad de diferente tejido y densidad, algodón punto sencillo de 80g/m2
cáncer en la piel [1] [2]. por metro cuadrado y algodón doble punto de 120g/m2.Se
cortaron probetas de 1 pulgada de diámetro, se realizaron tres
Por lo anterior, es indispensable el desarrollo de nuevos
réplicas por tiempo de agitación y por tipo de algodón, para un
materiales que sirvan de barrera anti solar. Durante siglos los
total de 60 muestras.
textiles ha cumplido esta función, debido a sus características
únicas como: apariencia, flexibilidad, resistencia mecánica, y Con el fin de lograr una impregnación homogénea del textil, se
textura, entre otras, sin embargo, estas propiedades no son utilizaron dos láminas de vidrio de 3mm de ancho, el textil fue
suficientes, por lo cual es necesario funcionalizar fibras y puesto sobre una de las láminas, con una jeringa se agrego en el
textiles para aumentar la barrera de protección UV [3]. centro de la probeta 0.5ml de solución de arcilla, se le coloco
encima la otra lámina de vidrio y una pesa calibrada de 450g,
Los recubrimientos textiles con nano partículas de arcillas, son
durante 5 min. Luego se retiraban los excesos de líquido y se
considerados acabados funcionales revolucionarios, que
sumergían las muestras en metanol al 98% durante 3 min,
brindan propiedades como: agentes antimicrobianos agentes
finalmente las muestras eran llevadas al horno a 35ΣC durante
ignífugos, dureza, flexibilidad, resistencia, entre otros [4]. El
30 minutos hasta su secado completo(Ver Figura 1).
dióxido de titanio es ampliamente conocido por sus
propiedades de absorción de radiación UV, su capacidad de
absorción se encuentra en la región de 280 a 400nm [5].
El objetivo principal de este trabajo fue obtener nano
compuestos de arcilla, usados como acabados en dos tipos de
textiles 100% algodón y comprobar su capacidad de absorción
de radiación UV. a b

I. METODOLOGIA

a. Preparación de nanocompuestos de arcilla

Para la preparación de nano compuestos de arcilla se utilizó
Caolín, dióxido de titanio 98%(Fase Anatasa), Glicerina 98%, c.
Látex y Metanol al 98%. d
Se prepararon cuatro mezclas de nano compuestos con
diferente concentraciones de arcilla y de dióxido de Titanio
(Ver Tabla .1)
Tabla 1. Concentración de los compuestos empleados para la
preparación de nanoarcillas.

Nanocompuesto Caolín(g) Dióxido de Titanio (g)

1 5 25
2 10 20
3 15 15
Fig 1. Proceso de impregnación textil. a. Probetas de algodón
4 25 5 con nanocompuesto de arcilla. b. Impregnación con láminas de
vidrio y pesa. Remojo en metanol al 98%.d. Secado al horno.
Una vez preparadas las muestras se agregaron 400ml de
glicerina y se agitaron con motor con aspa superficial a 1000
rpm durante tres horas, posteriormente se adicionaron 300 ml
30
 c.Análisis de protección Ultravioleta

Con el fin de determinar la radiación ultravioleta bloqueada,

reflejada o transmitida por los textiles modificados, se utilizó
espectrofotómetro Ultrascan Vis (Hunter Lab), se realizaron
tres mediciones de: Absorbancia, reflectancia especular y
transmitancia total, con precisión de 10 nm, teja tipo esfera, en
el caso de las muestras líquidas se usó celda de cuarzo con
capacidad de 30ml. El blanco corresponde al textil
impregnado con látex, glicerol y metanol. Así mismo se
realizaron lecturas de la transmitancia para las muestras
líquidas, como blanco se preparó una solución de glicerol,
látex y metanol.
Las lecturas se realizaron en el rango de 360-400nm, teniendo
en cuenta que el equipo no analiza todo el espectro de Fig. 2. Absorbancia y transmitancia de nanocompuestos de
radiación ultravioleta A (315-400). Todas las mediciones se arcillas líquidos
realizaron previa calibración del equipo.
Textiles impregnados
c. Caracterización de textiles usando
Como blanco o patrón, se utilizó una muestra de textil
Microscopia de barrido electrónico y
impregnado con látex y glicerol, realizando mediciones de
Espectroscopia de energía dispersa. absorbancia, reflactancia y transmitancia en dos textiles
Con el fin de verificar los acabados en los textiles y el tamaño algodón punto sencillo y algodón punto doble.
de los nanocompuestos, se observaron las muestras usando
microscopio JEOL JSM - 6000 LA, la resolución y Algodón punto sencillo
magnificación varió con cada muestra. Los textiles recubiertos con nanocompuestos de arcilla con alta
concentración de dióxido de titanio muestran una tendencia a
Este equipo cuenta con un detector EDS que permitió verificar aumentar la protección contra la radiación ultravioleta a
la composición de las muestras. Debido a que las muestras no diferencia de los textiles recubiertos con bajas concentraciones
son conductivas, su observación en bajo vacío no fue posible. de dióxido de titanio, indicando que la concentración de
Por el contrario, alto vacio y voltajes de aceleración entre 5 y dióxido de titanio influye en la capacidad de absorber la
8 kV fueron utilizados en este análisis. radiación ultravioleta, lo anterior confirma las propiedades foto
catalíticas del dióxido de titanio como agente protector de
radiación ultravioleta (Figura 3)

II. RESULTADOS
c. Análisis de protección UVA

Muestras líquidas
Con el objetivo de evidenciar si los nanocompuestos de
Ă Đ
arcillas líquidas sirven como agente protector de radiación
UVA, se realizaron mediciones de absorbancia y transmitancia
usando celda de cuarzo de 30 mm.

Los resultados muestran que el nanocompuesto dos es el que

presentó la mayor absorbancia (0.21) a 360nm y 10 minutos
de agitación y el nanocompuesto uno mostró el menor valor
promedio de transmitancia (0.01%) y 15 minutos de agitación,
evidenciando una relación directa entre la concentración de
dióxido de titanio en la arcilla, el tiempo de agitación y la
protección de la radiación UVA (Figura 2).
ď Ě
Figura 3. a y b. Porcentajes de transmitancia de algodón punto
sencillo impregnado con nanocompuestos de arcillas. c y d.
Absorbancias de algodón punto sencillo impregnado con
nanocompuestos de arcillas.
Se esperaría que el nanocompuesto que registraría menor
transmitancia fuese el uno, debido a que este presentaba la
concentración más alta de TiO, sin embargo, esto no ocurrió, lo
anterior podría ser explicado por varios factores como: no todas
las muestras quedaron impregnadas homogéneamente, esto se
31
pudo evidenciar en que las mediciones entre una réplica y otra
eran diferentes y al analizar las muestras en microscopía de a
b
barrido se evidenciaron algunos espacios en la superficie de
recubrimiento que podrían estar alterando las mediciones,
también se pudo observar que cuando la concentración de
Caolín y dióxido de titanio están en proporciones similares se
evita la formación de material particulado, igualmente, a
medida que el tiempo de agitación de los nanocompuestos
aumenta, la transmitancia tiende a disminuir, favoreciendo la
capacidad de protección del textil contra la radiación
ultravioleta [6][7][8][9].
c d
Con relación a la reflectancia el textil impregnado con nano
compuesto uno fue el de menor reflectancia (14.4%) a 360nm y
15 min y el mismo nanocompuesto registró mayor reflectancia
(67.64%) a 400nm y 15 minutos de agitación, En general los
valores de reflectancia muestran una tendencia a aumentar con
el tiempo de agitación y la longitud de onda, lo anterior
evidencia la característica del dióxido de titanio como agente
inorgánico que tiene la capacidad de reflejar los rayos UVA Fig. 5 a y b. Porcentajes de transmitancia de algodón punto
[10] (Figura. 4). doble impregnado con nanocompuestos de arcillas. c y d.
Absorbancias de algodón punto sencillo impregnado con
nanocompuestos de arcillas.
Con relación a la reflactancia, los resultados son diferentes a
los del algodón punto sencillo, ya que el textil impregnado con
nanocompuesto dos fue el de menor reflactancia (14,87%) a
360 nm y 10 minutos de agitación y el textil impregnado con
nanocompuesto uno presentó el mayor valor de reflectancia
(68.15%) a 400nm y 15 min de agitación (Figura 6).

a b

Fig. 4. Porcentaje de reflactancia Algodón Punto Sencillo

impregnado con nanocompuesto de arcilla uno.

Algodón punto doble

El textil impregnado con nanocompuesto tres registró el menor
porcentaje de transmitancia (0.35%) a 360nm y 10 minutos de
agitación y el textil impregnado con nanocompuesto uno fué
que registró mayor porcentaje de transmitancia (28.9%) a
400nm y 5 minutos de agitación, en cuanto a la absorbancia, el
menor valor lo registró el nanocompuesto uno (0.54) a 400nm
y 5 minutos de agitación y el mayor valor lo registró el textil
impregnado con nanocompuesto tres (2.49) a 360nm y 10
minutos de agitación, los valores de transmitancia versus
absorbancia muestran una relación inversa (Figura 5).
Fig. 6. Porcentaje de reflactancia Algodón Punto Doble
impregnado con nanocompuesto de arcilla a. Textil
impregnado con nanocompuesto uno. b. Textil impregnado con
nanocompuesto 2.
A diferencia de los resultados encontrados en el algodón punto
sencillo, el algodón punto doble recubierto con nanocompuesto
uno, transmite menor radiación UVA , estos resultados
concuerdan con el esperado, es decir que a mayor
concentración de TiO2 menor transmitancia y altas
reflactancias, lo anterior puede ser explicado no solamente por
la capacidad del dióxido de titanio, sino también relacionado
con los principales factores que influyen en la efectividad
contra la radiación ultravioleta son: la densidad del tejido y el
peso de los textiles, entre más cercanas y más pesadas sean las
fibras menos radiación pasará a través del textil, es el caso del
algodón doble punto (120g/m2), mientras que el algodón punto
32
sencillo la densidad es (80g/m2) por lo que se esperaba que
transmitiera mayor radiación ultravioleta [11][12].
Caracterización morfológica
Con el fin de corrobar la homogeneidad del recubrimiento
textil se obtuvo micrografías electrónicas a una escala de
l00μm.
a b
principalmente aluminio silicatos hidratados, la presencia de
otros minerales no asociados puede ser atribuida a la pureza de
la muestra, lo anterior confirma la formación de
nanocompuestos de arcilla y la presencia de nanopartículas de
dióxido de titanio [10].
a

Fig. 7. Micrografía electrónica de barrido de textil algodón b

100% tejido doble punto. a. sin recubrimiento. b. con
recubrimiento de nanocompuestos de arcilla.
Como se observa en las micrografías los nanocompuestos de
arcilla recubren las fibras, sin embargo, no lo hacen de manera
homogénea factor que pudó afectar la variación en la capacidad
de absorción de radiación ultravioleta [12].
Tamaño de los nanocompuestos
En ambos tejidos (punto sencillo y punto doble) se encontraron
nanopartículas cuyo tamaño varió entre 662nm y 972nm, a
medida que disminuía el tiempo de agitación, el tamaño de la Fig. 9. Mapa composicional análisis de espectroscopia dispersa
nanopartículas era mayor (Ver Figura 4). de rayos x (EDS) a. Tejido punto sencillo recubierto con
nanocompuesto 1, tiempo de agitación 15 minutos. b. Tejido
a 1.07 μm b punto doble recubierto con nanocompuesto 1, tiempo de
agitación 15 minutos.

1.080 μm
c d
0.82 μm
0.82 μm
0.662 μm
0.82 μm
Fig. 8. Micrografía electrónica de barrido de textiles de
algodón 100%. a y b. Algodón punto sencillo, recubrimiento
con nanocompuesto 3, tiempo de agitación 5 minutos. c y d.
Algodón punto doble recubierto con nanocompuesto 1, tiempo
de agitación 15 minutos.
Análisis composicional básico de los nanocompuestos de
arcilla
Los mapas composicionales obtenidos en el análisis de
espectroscopia de energía dispersa (Figura 9), evidencia la
presencia de dióxido de titanio y otros elementos inorgánicos
como el Bario, Potasio y Silicio entre otros, propios de arcillas
de origen tecto y del Caolín cuya composición es
III. CONCLUSIONES
Este trabajo ha estudiado el potencial de un nanocompuesto
de particulas de TiO2 como pelicula protectora contra
radiación ultravioleta en textiles.
Aquí se encontró que la homogeneidad del recubrimiento
influencia la capacidad de absorción de radiación UV.
Los recubrimientos en textiles de algodón punto sencillo con
nanocompuestos de arcillas aumentan la capacidad de
reflejar los rayos ultravioleta A, cuando la longitud de onda
es de 400nm.
Se comprobó que el algodón doble punto transmite menor
radiación ultravioleta que el algodón punto sencillo, lo
anterior relacionado con la densidad del tejido que se
constituye en un factor determinante en la protección contra
la radiación ultravioleta.
El tiempo de agitación durante el proceso de preparación de
los nanocompuestos de arcillas influye en la dispersión de
las arcillas y por ende en la capacidad de protección ante
radiación Ultravioleta A.
33
 IV. TRABAJOS FUTUROS [9] Abdelhady,M. Preparation and characterization
of chitosan/ZincOxide Nanoparticles for
Como análisis complementario se propone realizar pruebas de imparting antimicrobial and Uv protection to
actividad antimicrobiana de nano compuestos de arcillas. cotton fabric. International Journal of
Carbohydrate Chemistry Volume 2012.p. 1-6.
Es necesario realizar trabajos complementarios en la síntesis de [10] Bartolome, J. El Caolín: composición, estructura,
nanocompuestos de arcillas, ya que el tamaño de los genésis y aplicaciones. Boletín de la Sociedad
nanocompuestos obtenidos es más cercano a la microescala. Española en Cerámica y Vidrio. Artículo de
Revisión.Volumen 36. No1.Enero-Febrero de
Se recomienda realizar ensayos de impregnación textil con 2007.
foulard o rasquetas para garantizar una distribución homogénea [11] Nanoparticles and their uses in textiles.
del nano compuesto o un mejor acabado. Disponible en: www.indiantextilejournal.com
[12] Scott, R. 2005.Textiles for protection. The
Se recomienda realizar pruebas de lavado a los textiles con y Textile Institute. Woodhead Publishing Limited.
sin impregnar para comprobar la estabilidad de los USA. p 355-374.
nanocompuestos, así mismo podrían realizarse pruebas de
flamabilidad.
V. AGRADECIMIENTOS
Los autores quieren manifestar sus agradecimientos a:
Dra. Sonia Enciso Mosquera, Subdirectora del Centro de
Manufactura en Textiles y Cuero, por el respaldo en la
ejecución de este trabajo.
Elsa Yadira Lancheros por la asesoría técnica en Microscopia
Electrónica de Barrido y la compañía en la ejecución de este
trabajo.
Juan Evangelista Soriano por la medición de reflectancia en las
muestras textiles.

REFERENCIAS

[1] Lvovsky ,K; Hughes,D; Gordon ,M; Ostro,B;Pearce, D.

2000. Environmental Costs of Fossil Fuels A Rapid
Assessment Method with Application to Six. The world bank
environment department.P.10-13
[2] Moan,J ; Dahlback,A. The relationship between skin cancers,
solar radiation and ozone depletion. P. Br.J. Cancer (1992),
65, 916-921.
[3] Takuya, Tsuzuki and Xungai Wang. Nanoparticle Coatings
for Uv protective textiles. RJTA.Vol14 No2.2010.P.1-13.
[4] Ghosh,A. Nano-Clay Particle as textile coating.
IJET-IJENS. Vol 11 No05.2011.P.40-43.
[5] Saravanan, D. Uv protection textile materials.
AUTEX Research Journal., Vol.7, No1, March,
2007.P.1-10.
[6] AATCC . AATCC. Technical manual:
Transmittance or blocking Erythemally
Weighted Ultraviolet Radiation Through fabrics.
Test method 183, 2004
[7] Camacho, F. Antiguos y nuevos aspectos de la
fotoprotecciónRev Int Dermatol Dermocosm Clin, Vol.4,
No 7,Octubre 2001. P.441-448.
[8] Brunatti, C;Martín,A. Introducción a la
espectroscopía de absorción molecular
ultravioleta, visible e infrarrojo cercano.
Disponible en línea en:
http://materias.fi.uba.ar/6305/download/Espectro
fotometria.pdf.
34
Aislamiento de Lactobacillus sp del rumen como alternativa probiótica
para bovinos.
Cartagena Bolívar, Colombia, octubre de 2014
Barrios J. R.
Ingeniero Agrónomo
Líder de la Investigación
Fuentes L.L
Biotecnologia industrial
SENA- Agroempresarial y Minero
Hueto A. P
Biotecnologia industrial
SENA- Agroempresarial y Minero
Mendoza M. P
Biotecnologia industrial
SENA- Agroempresarial y Minero
Miranda L.S
Biotecnologia industrial
Abstract— This research is for an ongoing project aimed at the
isolation and identification of microorganisms with potential
probiotic food that helps reduce enteric disease in cattle, and the
subsequent pollution of its derivatives. The project is carried
out under ambient conditions in the laboratory of Biotechnology
SENA Regional Agribusiness and mining Bolívar; bacteria of
the genus Lactobacillus sp were isolated in selective medium
MRS (Man, Rogosa and Sharpe), then proceeded to their
identification by macroscopic, microscopic and biochemical
tests; Finally the process of biomass production was performed
in laboratory scale.
Resumen— La presente investigación corresponde a un
proyecto en curso encaminado al aislamiento e identificación de
microorganismos con potencial alimenticio probiótico que
ayude a reducir las enfermedades entéricas en los bovinos, y la
subsiguiente contaminación de sus derivados. El proyecto se
lleva a cabo bajo condiciones ambientales, en el laboratorio de
Biotecnología del SENA Agroempresarial y minero Regional
Bolívar; se aislaron bacterias del genero Lactobacillus sp, en
medio de cultivo selectivo MRS (Man, Rogosa y Sharpe), luego
se procedió a su identificación a través pruebas macroscópica,
microscópica y bioquímicas; por último se realizó el proceso de
producción de biomasa a escala de laboratorio.
I. INTRODUCCIÓN
En Colombia la producción ganadera es uno de los
sistemas de mayor importancia en la economía del sector
rural, según Vergara 20101, aporta cerca del 4% del PIB
(Producto interno bruto), en el Caribe Colombiano este
SENA- Agroempresarial y Minero
Paredes A. E
Biotecnologia industrial
SENA- Agroempresarial y Minero
Perez C.L
Biotecnologia industrial
SENA- Agroempresarial y Minero
Velasquez C.J
Biotecnologia industrial
SENA- Agroempresarial y Minero
Morris L.F.
Microbiólogo en alimentos, Toxicólogo M.Sc.
Asesor.
sistema enfrenta dificultades que disminuyen la
productividad de carne y leche, se aumentan las tasas de
morbilidad y mortalidad en el periodo seco debido
principalmente a la disminución de alimentos recurriéndose
en este periodo a la suplementación con forrajes de corte,
bloques multinutricionales, probióticos, entre otros 2.
Los probióticos son definidos por la FAO (Food and
Agriculture Organization of the United Nations) como
microorganismos vivos que administrados en adecuadas
cantidades ejercen un efecto beneficioso sobre el huésped. 3.
Un microorganismo probiótico efectivo debe poseer una serie
de características entre las cuales se encuentran: no ser
patógeno, ni toxico, debe ejercer efecto benéfico sobre la
salud del animal, debe ser capaz de sobrevivir a la flora
intestinal (rumen) y debe ser tecnológicamente utilizable 4.
Los principales géneros utilizados para tal fin son
Lactobacillus sp y Bifidobacterium sp.
Los lactobacilos se encuentran en vegetales, humanos y
algunos animales, entre ellos los bovinos, estos no son
patógenos y tienen gran importancia industrial ya que se
utilizan en la realización de fermentos lácticos. Son bacilos,
Gram positivos, fermentan azucares para producir ácido
láctico y son anaerobios facultativos5.
El uso de probióticos representa una nueva visión en la
industria alimenticia, al contemplar una tecnología de
producción limpia. Este proyecto va encaminado al
aislamiento de microorganismos del contenido ruminal como
alternativa probiótica para alimentación bovina,
35
 disminuyendo el impacto generado durante las épocas de
sequía. Los resultados que se presentan corresponden al
proceso de aislamiento, caracterización, y estandarización de
un medio para producción de biomasa de Lactobacillus sp a
escala de laboratorio.
II. METODOLOGÍA
A. Aislamiento de bacterias probióticas
1) Toma de muestras: El muestreo se llevó a cabo en una
planta de beneficio situada en Arjona- Bolívar, donde se
tomaron muestras representativas directamente del contenido
ruminal de los bovinos luego del sacrificio; empleando
materiales estériles como cucharillas de acero inoxidable,
frascos tapa rosca, neveras de conservación y los respectivos
elementos de protección personal; las muestras fueron
selladas herméticamente, rotuladas con parafilm siguiendo
una cadena de custodia hasta el laboratorio de
Biotecnología del SENA localizado en la ciudad de
Cartagena-Bolívar para su respectivo análisis.
TABLA I
TOMA DE MUESTRAS DEL TRACTO DIGESTIVO DEL RUMIANTE
N° orden Muestras (Parte del Temperatura
estómago) (°C)
1 Libro 39.5
2 Libro 40,3
3 Libro 38.8
4 Panza 40.7
5 Panza 39.6
6 Panza 39.9
Las muestras se conservaron a temperatura de 4 °C para
luego hacer el aislamiento de los microorganismos con
potencial probiótico. Las muestras obtenidas se analizaron
en medios de cultivos no selectivos para confirmar la
variedad de la flora microbiana del rumen, haciendo énfasis
en los microorganismos de interés.
2) Aislamiento microbiológico: Para el aislamiento se
tuvieron en cuenta las 6 muestras tomadas en diferentes
partes del animal. Para ello se utilizó medios de cultivo
selectivo. Agar MRS (Lactobacillus) (S.A, 2010) y Agar
TPY para Bifidobacterium sp
3) Siembra de las muestras: Se llevó a cabo la siembra
por diluciones en medio de cultivo Agar Plate Count,
utilizando 1g de muestra por cada 9 ml de agua peptonada.
Luego se procedió hacer las diluciones cada una de ellas
con 9.9 ml de agua peptonada más 0.1ml de la solución
madre, se realizó la siembra en las diluciones 10 -5 y 10-7
por duplicado, tomando 1 ml de las mismas para hacer la
siembra en profundidad en Agar Plate Count. Cada una de
las muestras sembradas se incubaron a 35 °C/48 h. Al
finalizar el periodo de incubación se procedió hacer
recuento de UFC, determinando los diferentes tipos de
morfologías presentes en el contenido ruminal.
El tratamiento de las seis muestras se realizó
independientemente, pero se aplicó la misma metodología a
todas las muestras; Para el proceso de aislamiento se inició
con la activación de los microorganismos, tomando 10g de
muestras por cada 50 ml de agua peptonada al 1%, se hizo
una homogenización de la muestra y se procedió a incubar a
35 °C / 6-12 h.
Después de haber pasado el tiempo de incubación se
procedió a realizar el aislamiento por la técnica de estrías o
agotamiento en un medio selectivo para Lactobacillus sp,
(Agar MRS) A partir del aislamiento se llevó a incubar en
condiciones de anaerobiosis por 44 °C/48-72h en el Baño
Serológico. Para la obtención de cultivo puro se procedió
hacer siembras sucesivas con sus respectivas caracterización
macro y microscópica.
B. Estandarización de un medio para producción de
biomasa
Para el proceso de producción de biomasa se emplearon dos
medios alternativos, melaza de caña y lactosuero
estudiando el comportamiento de Lactobacillus sp bajo
condiciones ideales en un biorreactor, teniendo en cuenta
los requerimientos de temperatura 38 +/-2 ºC; pH 5,5 - 6,2;
°Brix 8 - 12; ausencia de luz y anaerobiosis, se adiciono
urea como fuente de nitrógeno y tiamina para asimilación
de carbohidratos. Luego se realizaron pruebas para
cuantificar la biomasa obtenida, por métodos de recuento
en cámara de Neubauer y conteo en placa.
1) Preparación de pre-inoculo: Para la preparación del
pre-inoculo se tomó el 10% del volumen total del medio de
producción, en este caso se tomó un volumen de 250 ml,
equivalente a 25 ml del volumen del pre-inoculo, teniendo en
cuenta los requerimientos de pH y temperatura de los
microorganismos para la obtención de una mayor cantidad de
biomasa. (Ver tabla III).
TABLA III
PARÁMETROS PARA CRECIMIENTO ÓPTIMO
Cepa Lactobacillus sp
Parámetro
pH 5.5-6.2
Temperatura °C 30-40
2) Preparación del medio de producción:
¾ Se utilizó melaza de caña, para observar el
comportamiento y crecimiento del Lactobacillus sp, los
parámetros tenidos en cuenta fueron los siguientes:
°Brix: 8-10 Temperatura: 38 - 40°C RPM8: 80-100
Se tomaron diferentes volúmenes de melaza de caña: 100, 70
y 50 ml para la conformación de los medios de producción
se le realizaron varias diluciones con el fin de obtener los
grados °Brix necesarios y bajar su viscosidad para un
crecimiento óptimo por parte del microorganismo, a
continuación se presentan las diluciones realizadas, los
grados °Brix y pH obtenidos (ver tabla IV):
TABLA IV
DILUCIONES PARA OBTENCIÓN DE 100-70-50 ML DE MELAZA
36
 Concentración Agua destilada pH °Brix Fig. 1 Crecimiento de Lactobacillus sp
melaza (mL) Fuente: Autor 2014
100 950 5,82 9,9
B. Identificación microscópica
70 600 5,72 10,7
Para la observación de Lactobacillus sp, se procedió a
50 500 5,83 10,2
realizar la prueba microscópica empleando la técnica
Tinción de Gram. Se observó morfología bacilar, en algunas
Se agregó 0,06 g/l de tiamina para la asimilación de especies algo flexionados, con longitud y grosor variado,
carbohidratos por parte de Lactobacillus sp y 0,4 g/l de urea. Gram positivos. En las figuras 4 se pueden observar las
morfologías obtenidas:
El segundo medio evaluado fue lactosuero a el cual se le
determino el comportamiento de Lactobacillus sp,
teniendo en cuenta los parámetros de temperatura de 30-
40°C, °Brix 7,3 y pH inicial 4,60 Para ello se ajustó el
pH con NaOH al 5N, obteniendo un pH optimo de 6,6 y
con agitaciones de 80-100 RPM.
Fig. 4 Morfología de Lactobacillus sp.
Fuente: Autor 2014
4) Montaje de biorreactores
A continuación en la fig. 1 se presenta los montajes C. Pruebas bioquímicas
realizados para el proceso de producción de biomasa: Para llevar a cabo la identificación bioquímica de
Lactobacillus sp, se realizaron cuatro pruebas:
hidrolisis de gelatina, prueba de catalasa con peróxido
de hidrogeno, tinción de esporas y determinación de
burbujas o producción de CO2 en caldo MRS. En la
Tabla VIII se muestran los resultados obtenidos:
TABLA VIII
Fig. 1 Montaje para producción de biomasa. (Melaza-Lactosuero).
PRUEBAS BIOQUÍMICAS
Fuente: Autor 2014
Los montajes están constituido cada uno por 4 Erlenmeyer Pruebas bioquímicas
de 500 ml, agregando 225 ml de medio de producción; Hidrolisis Catalasa Tinción Producción
melaza de caña y lactosuero con 25 ml de inoculo de Microorganismo en gelatina de de CO2
Lactobacillus sp. Los biorreactores poseen una salida esporas
hermética para toma de muestras; se colocaron en un Lactobacillus sp NO NO NO SI
agitador con base en la parte superior para sujetar los Los resultados confirman que la bacteria aislada fue
Erlenmeyer y mantener una agitación constante y adecuada Lactobacillus sp, ya que coinciden con la descripción en la
para el proceso de producción de biomasa. A partir del literatura: “no formadores de esporas, Inmóviles, catalasa
volumen inicial de 500ml, se procedió a escalar a 7 litros a negativos, no licuan la gelatina, su temperatura óptima de
partir del sustrato de mayor rendimiento. Utilizando como crecimiento es de 30-40 °C”7.
muestra control 1 sustrato estéril por cada medio producción.
D. Proceso de fermentación
1) Conteo en cámara de Neubauer: Se determinó la
5) Fermentación: para realizar el proceso de fermentación
cantidad aproximada de células microbianas contenidas en
se calcularon los parámetros de trabajo, que permitieron
el inoculo de Lactobacillus sp, el resultado obtenido se
establecer los volúmenes, el número de muestreos, toma de
muestra en la figura 6, presentada a continuación:
muestra y duración total de la fermentación.

IV. R ES U LT AD O S

A. Identificación macroscópica
Se realizó la caracterización macroscópica de las cepas
Lactobacillus sp, observando colonias blancas, cremosas y
con elevación. En la figura 1 se observa los crecimientos en
medio de cultivo Agar MRS. Fig. 6 Recuento en cámara de Neubauer

En el conteo realizado se estimó aproximadamente

2.950 células por cm3.

2) Medición de parámetros para fermentación: para llevar

37
 a cabo esta etapa se utilizó la concentración de 70 ml para
evaluar la obtención de biomasa en el caso del sustrato de
melaza, ya que presentaba las mejores condiciones para el
crecimiento; se tomó 5 mL de muestra de cada biorreactor
con el fin de realizar pruebas para determinar los °Brix, el
pH y la temperatura, con una duración de 48 horas. Los
parámetros de °Brix y pH fueron tomados al comienzo y
final de cada medio de producción. A continuación se
muestra en la tabla IX y X los resultados obtenidos:
TABLA IX
PARÁMETROS DE FERMENTACIÓN MELAZA
Temperatura (°C) 38
°Brix pH
INICIO 10,7
5,75
FINAL 9 5,58
TABLA X
PARÁMETROS DE FERMENTACIÓN LACTOSUERO
Temperatura (°C) 38
°Brix pH
INICIO 7,4 6,6
FINAL 6,8 4,5
Al comparar las tablas podemos observar que los
parámetros al inicio y al final de la fermentación
permanecen prácticamente constantes en el proceso;
aunque con el medio de lactosuero se obtuvo mayor
crecimiento y por ende aumento de biomasa, el escalado a
7 L se realizó con el medio de más rendimiento en este
caso el de mejor resultado fue el lactosuero, utilizando un
biorreactor con paletas para la agitación del medio.
3) Estimación de biomasa: para realizar el conteo
estimado de biomasa en los medios alternativos, se
emplearon los métodos de recuento en Neubauer y
conteo en placa. Los recuentos fueron llevados a cabo al
comienzo y final del proceso, dando como resultado un
conteo estimado de 756 x 10 8 células/ml. Con lo cual se
confirmó que el medio lactosuero es el más viable para
producción de biomasa de Lactobacillus sp.
V. C ON C LU SIO NE S
Se realizó el aislamiento e identificación de bacterias
nativas del contenido ruminal de bovinos de la zona norte de
Bolívar, obteniendo la cepa aislada del género Lactobacillus
sp, teniendo en cuenta sus características microscópicas y
macroscópicas, y mediante pruebas bioquímicas.
En la etapa de identificación y aislamiento no fue posible
aislar las cepas de Bifidobacterium sp, pues al realizar las
siembras y los repiques, en condiciones anaerobias y con
medios selectivos (TPY), se obtuvieron crecimientos y
morfologías diferentes a la presentada por Bifidobacterium
sp, para realizar este aislamiento se propone realizar
nuevamente un muestreo y repetir el procedimiento llevado a
cabo para su obtención.
En el proceso de fermentación se pudo obtener
crecimiento y por ende una mayor cantidad de biomasa en el
medio alternativo lactosuero, la será utilizada para la
producción del suplemento probiótico.
A partir de los resultados de la presente investigación se
ha obtenido biomasa de Lactobacillus sp, para la construcción
del prototipo se tomara dicha biomasa y se realizara un
proceso de filtración, la biomasa será inoculada al medio de
fermentación que en este caso será miel de campano, hasta
alcanzar una concentración mínima de 1x108 UFC/mL.
VI. T R AB AJ O S P O ST ERI OR ES
A continuación se presentan las investigaciones que se
realizaran posteriormente:
x Identificación y aislamiento de Bifidobacterium sp.
x Proceso estandarizado para producción de miel de
Campano.
x Caracterización física, química, nutricional y
microbiológica del suplemento probiótico.
x Evaluación técnica, estadística y económica del
suministro del suplemento alimenticio probiótico en
vacas paridas.
RECONOCIMIENTOS
Sinceros agradecimientos al SENA por permitir que los
jóvenes puedan emprender una carrera investigativa y
brindarnos las herramientas necesarias, a la Subdirectora del
centro Agroempresarial y Minero de Bolívar Bibiana Pinto
Tovar, por apoyarnos en el desarrollo de la investigación, y
al personal del Laboratorio de Biotecnología Industrial por
apoyar el desarrollo del proyecto.
REFERENCIAS
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de un modelo de desarrollo rural sustentable para Colombia.
Revista Ciencia Animal N° 3. 2010, p. 45-53.
[2] FAO. Buenas practicas agropecuarias (BPA) en la producción de
ganado de doble propósito bajo confinamiento con caña panelera
como parte de la dieta. 2012, p. 45-51.
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Aislamiento, identificación y caracterización de bacterias acido
lácticas para la elaboración de queso crema tropical. Universidad
y Ciencia. 25(2), 2009, p. 159-171.
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probiótico a partir de pan de abejas. Tesis. Universidad Nacional de
Colombia. Bogotá. 2012.
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http://www.mastgrp.com/IFUS/IFU402_SPA.pdf
[7] Moreno. L. Aislamiento y selección de Lactobacillus sp con potencial
probiótico a partir de pan de abejas. Tesis. Universidad Nacional de
Colombia. Bogotá. 2012
38
 DESARROLLO DE UN BIOFERTILIZANTE EN ARROZ A BASE DE
CIANOBACTERIAS
Efecto de la inoculación de cianobacterias sobre el crecimiento de plantas de arroz

Vanegas Guerrero Javier*

Hernández Benítez Ruth Elena**
Colorado Gómez Mario Andrés***
Rodríguez Serna Fredys Guillermo****
Peralta Sarmiento Nubellys María,
Causil Lozano María Elena
Torres Bravo Daimer Antonio

Abstract- This work was performed in order to determine the effect of inoculation of cyanobacteria growth on rice
plants. Cyanobacteria were obtained from sampling conducted in the rice fields and the municipalities of Fonseca
Dibulla Guajira department. To achieve this aim, an experimental study was carried out through the identification of
the species present in soils of paddy fields. The strains were cultured in BG-11 medium free of combined nitrogen.
The most abundant and highest growth rate was kind cyanobacteria Arthrospira sp, which was grown in bioreactors
under laboratory conditions in Terrazul and SENA Foundation. To determine the growth promoting activity of
cyanobacteria in rice plants 4 experimental plots with seed of the variety Fedearroz 2000, which is the most widely
grown in the region, which has been substantiated as Kennedy, Choudhury, Kecskés were performed (2004), Ladha
and Reddy (2003), Pereira, Ortega, Barrientos, Moya, Reyes, Kramm (2009), Innok, Chunleuchanon, Boonkerd and
Teaumroong, (2009). Prasanna, Jaiswal and Singh (2008), among others. The batches used were 1 m2 in the center
seat Acuicola Agribusiness and Riohacha, which were inoculated in different treatments and compared against a
witness.

Keywords— (cyanobacteria, biofertilizer, rice, culture)

Resumen – Este trabajo se realizó, con el objetivo de determinar el efecto de la inoculación de las cianobacterias
sobre el crecimiento de plantas de arroz. Las cianobacterias se obtuvieron del muestreo realizado en los campos
arroceros de los municipios de Fonseca y Dibulla del departamento de la Guajira. Para alcanzar este propósito, se
realizó un estudio de tipo experimental, a través de la identificación de las especies presentes en los suelos de los
arrozales. Las cepas se cultivaron en medio BG-11, libre de nitrógeno combinado. La especie más abundante y de
mayor tasa de crecimiento fue la cianobacteria Arthrospira sp, la cual se cultivó en biorreactores bajo condiciones
de laboratorio en la Fundación Terrazul y el SENA. Para determinar la actividad promotora de crecimiento de
cianobacterias en las plantas de arroz se realizaron 4 parcelas experimentales con semillas de la variedad Fedearroz
2000, que es la más cultivada en la región, el cual ha sido fundamentado según, Kennedy, Choudhury, Kecskés,
(2004), Ladha y Reddy (2003), Pereira, Ortega, Barrientos, Moya, Reyes, Kramm, (2009), Innok, Chunleuchanon,
Boonkerd y Teaumroong, (2009). Prasanna, Jaiswal y Singh, (2008), entre otros. Los lotes utilizados fueron de 1 m2
en el centro Agroempresarial y Acuicola sede Riohacha, los cuales se inocularon en diferentes tratamientos y
comparados frente a un testigo

**Dr Biotecnología. Biólogo Profesor Universidad Antonio Nariño,. Investigador activo. Correo electrónico javanegas100@uan.edu.co Bogotá
*Ingeniera Química Estudiante Msc Gerencia de proyectos de investigación y desarrollo. Líder de investigación. Instructora de Biotecnologia.
Centro Agroempresarial y Acuícola SENA Regional Guajira, Investigador activo. Correo electrónico. ruthelenahb@misena.edu.co Riohacha.
***Biólogo Marino, Instructor de acuicultura, Centro Agroempresarial y Acuícola SENA Regional Guajira, Investigador activo correo
electrónico.. mariocol@misena.edu.co. Riohacha.
**** Aprendiz Tecnólogo en Control Ambiental. Investigadores activos Centro Agroempresarial y Acuícola Regional Guajira

39

INTRODUCCIÓN
Los cereales son de los cultivos más importantes en el
mundo para alimentación humana, animal y como
materia prima en numerosas industrias. El arroz es el
segundo cultivo de ciclo corto de mayor importancia
económica y social en el país, con alrededor de 460.000
ha sembradas para el año 2011 con una producción
cercana a los 2´900.000 ton, valores que en su conjunto
representan el 4% del PIB agropecuario y alrededor del
5% del empleo del sector agrícola nacional. El Tratado
de Libre Comercio (TLC) con los Estados Unidos
plantea nuevos retos para el desarrollo del arroz en el
país toda vez que en un periodo de 19 años se llevará a
cabo la desgravación arancelaria completa para el arroz
importado desde los Estados Unidos. Rafael Hernández
Lozano, gerente General de Fedearroz, afirmó que los
arroceros disponen de seis años para mejorar la
productividad, o el pacto bilateral podría llevar a la
quiebra al sector arrocero.
Hernández resaltó la importancia de disminuir los
costos para incrementar la producción si se quiere
competir con el mercado estadunidense, en Colombia
producir una tonelada de arroz cuesta alrededor de 444
dólares, mientras que en Estados Unidos dicho valor no
supera los 265 dólares (El Nuevo día, 2012).
Igualmente, el cultivo intensivo de arroz ha conducido a
un deterioro constante de las propiedades físicas y
químicas del suelo (Fedearroz, 2000). Esto ha
incrementado el uso de fertilizantes inorgánicos los
cuales representan el 20% de los costos de producción
(Fedearroz, 2012) y cuyo precio, en especial la
fertilización nitrogenada, ha duplicado su precio en la
última década debido a la fluctuación del precio del
petróleo (USDA, 2012).
Los fertilizantes nitrogenados presentan una baja
asimilación (50%), lo que genera problemas ambientales
como la eutroficación de aguas, la producción de gases
de invernadero como N2O, NO y NH3 como lo
mencionan (Kennedy et al., 2004; Adesemoye et al.,
2009) y problemas en salud humana que van desde
enfermedades respiratorias hasta la generación de
enfermedades cancerígenas según, (Ladha y Reddy,
2003). Por otra parte, el crecimiento de la demanda
alimenticia por el arroz ha sobrepasado el crecimiento de
la producción del arroz en las últimas décadas, esto ha
conducido a la disminución de reservas de arroz y
limitaciones de exportación del grano por lo que es
necesario aumentar la producción mundial por área
sembrada, como lo plantea (Seck et al., 2012)
Una estrategia para aumentar la competitividad del
sector arrocero es la incorporación de biofertilizantes de
cianobacterias. Esta estrategia es ambientalmente
amigable ya que permite reducir la aplicación de
fertilizantes nitrogenadas hasta en un 50% según,
(Prasanna et al., 2012; Pereira et al., 2009), aumentar la
asimilación de nutrientes en la planta, incrementar entre
el 15-20% la producción de grano de arroz bajo
condiciones de campo según, (Innok et al., 2009) y
mejorar la calidad del suelo así como lo mencionan (Jha
y Prasad, 2006; Roger y Kulasooriya, 1980). Igualmente,
el uso de cianobacterias permite la captación de gases de
invernadero como el CO2 y la producción de O2 dice
(Herrero y Flores, 2008) y hacer bioprospección de
nuestros recursos biológicos. Esta estrategia aún no ha
sido implementada en nuestro país como una alternativa
del manejo de la fertilización en este cultivo a pesar de
los numerosos reportes en países asiáticos como lo
plantea (Hashem, 2001) y algunos países de Suramérica
(Pereira et al., 2009).
Sharma et al., 2011, dice que el potencial de las
cianobacterias como biofertilizantes en arroz obedece a
su capacidad para fijar N2 (síntesis de azucares por
fijación de CO2, producir una gran variedad de
metabolitos secundarios como vitaminas, antibióticos y
antifúngicos, múltiples mecanismo de promoción como
la solubilización de fósforo según, (Rai y Sharma, 2006),
producción de sideróforos y reguladores de crecimiento
(Prasanna et al., 2008), mínimos requerimientos
nutricionales para su crecimiento, rápidas tasas de
crecimiento y exigentes condiciones de luminosidad
como las del trópico afirman (Herrero y Flores, 2008),
alta competitividad por la tolerancia a altas temperaturas,
radiación UV, desecación, estrés salino y hídrico , lo que
le permite mantener una alta diversidad y abundancia en
agroecosistemas como el arroz. (Mishra y Pabbi, 2004)
aseguran que incluso, la aplicación de cianobacterias de
forma consecutiva permite mejorar la calidad del suelo y
el establecimiento de estas en cultivos como el arroz.
Área de estudio
Este trabajo se desarrolló principalmente en la zona
sur del departamento de la Guajira, en los municipios de
40
Fonseca y Dibulla, donde los cultivos herbáceos
extensivos han crecido por lo menos en los últimos 30
años, los cuales son lugares estratégicos que presentan
las condiciones para el crecimiento de cianobacterias y la
producción de arroz. El caribe norte representa el 6.8%
de la superficie sembrada de arroz, el 7.0% de la
producción nacional y reporta rendimientos promedios de
los últimos 10 años de 4.6 ton ha-1, muy inferiores a los
reportados para la zona central de 6.2 ton ha-1 según
(Fedearroz, 2012).
Este tipo de brechas en superficie sembrada y
rendimiento de grano se podrían disminuir con la
implementación de cianobacterias ya que además de las
características descritas tienen la capacidad de decrecer
entre un 25-30% la salinidad de los suelos como lo
plantea (Thomas, 1977 ), mejorar el contenido de materia
orgánica, la capacidad de retención de agua y la erosión
del suelo . (Choudhury y Kennedy, 2004) lo que podría
permitir expresar el mayor potencial de producción de las
cultivariedades de arroz o el establecimiento de
cultivariedades de alto rendimiento según, (Minhas y
Grover, 1999).
Cianobacterias fijadoras de nitrógeno.
Las cianobacterias son procariotas pertenecientes al
Phylum Cyanobacteria, poseen un sistema fotosintético
muy similar a los eucariotas. Pueden ser unicelulares,
existir como colonias o formar filamentos. Por lo general,
las cianobacterias filamentosas tienen células
especializadas llamados heterocistos, células redondas y
con aspectos de estar más o menos vacías, que se
encuentran distribuidas regularmente a lo largo del
filamento o en un extremo del mismo y su función es la
fijación de nitrógeno a través de la enzima nitrogenasa.
De un 5 a 10% de células, pueden convertirse en
heterocistos según, (Garbisu et al., 1999; Franco, 2004).
Muchas cianobacterias, poseen la doble capacidad de
fijarcarbono y nitrógeno ya que los toman de la atmósfera
en donde se encuentran en forma de gases CO2 y N2, esta
característica les permite desarrollarse sin problema en
suelos pobres en nitrógeno. Otra gran ventaja que
presentan las cianobacterias, es que tiene una amplia
distribución, desde los fríos ambientes de la Antártica y
el Ártico, hasta en áridos y cálidos desiertos del planeta.
Se conoce que los agregados de cianobacterias,
contribuyen a cementar los suelos en una capa que resiste
al viento y la fuerza de arrastre del agua, proporcionan
una excelente retención de la humedad y son una fuente
de materia orgánica . En suelo descubierto de vegetación
las cianobacterias ayudan a la protección y estabilización
de agregados disminuyendo la erosión de suelos. Las
cianobacterias son de gran importancia ecológica, ya que
actúan como colonizadoras de suelos quemados,
erosionados y degradados donde se desarrollan a partir de
sales, agua y luz como lo plantean (Iglesias y Montero,
2005).
Según García (2005) las cianobacterias pueden actuar
como:
x Biofertilizantes de arrozales, por inoculación con
helechos flotantes como Azolla conteniendo la
cianobacteria Anabaena la cual proporciona una
fijación simbiótica de nitrógeno.
x Bioestimulantes obtenidos de extractos líquidos de
Spirulina o de microalgas.
x Estructurador de suelos, por aplicación de
microalgas vivas.
x Biofertilizante, por inoculación al suelo de
cianobacterias fijadoras de nitrógeno de manera no
simbiótica.
Las técnicas de fertilización empleando cianobacterias
más conocidas en el mundo son dos: la simbiosis Azolla-
Anabaena y con cianobacterias vivas inoculadas al suelo.
En 1972 Venkataraman denominó a esta técnica
algalización, basada en la inoculación de cianobacterias
fijadoras de nitrógeno.
Biofertilizantes un beneficio para la agricultura
Dada la prioridad de aumentar las respuestas de la
agricultura para la alimentación humana disminuyendo el
uso de agroquímicos, las investigaciones se han orientado
hacia el desarrollo de nuevas biotecnologías. La ciencia
moderna nos ha permitido comprender de qué manera
ocurren procesos como el de aprovechar las bacterias del
suelo para convertir el nitrógeno atmosférico en
nitrógeno asimilable para las plantas y ha facilitado el
desarrollo tecnológico que ha hecho posible la
introducción de nuevos productos a la agricultura y a la
biotecnología.
En la era actual, en que se pone énfasis en el manejo
responsable del suelo y en la sostenibilidad
medioambiental, el uso de inoculantes constituye un
aspecto verdaderamente promisorio (Mark et al., 2002).
Estos beneficios a más de ser esenciales para el
funcionamiento de ecosistemas naturales, consisten en un
41
importante recurso para el manejo sustentable de los
sistemas agrícolas (FAO, 2007).
La necesidad de los productores agrícolas de elevar al
máximo su producción y de mejorar la calidad de su
producto sumado al elevado costo de la fertilización,
presentan a la inoculación o biofertilización, como una
herramienta útil que puede complementar al sistema
productivo según, (Ghosh, 2002; Medina y León, 2004).
La gran variedad de especies bacterianas que pueden
utilizarse para la elaboración de inoculantes es tan
abundante como los beneficios que se pueden obtener
con su utilización (Cossoli et al., 2008).
Los biofertilizantes facilitan la captación de nutrientes,
producen fitohormonas que favorecen el enraizamiento,
protegen a la planta frente a patógenos, degradan
sustancias tóxicas y mejoran la estructura del suelo
(Vessey et al., 2003 Padhi y Swain, 2001). Se conoce un
gran número de bacterias de vida libre o asociativa que se
destacan por su potencial como biofertilizantes (Morte et
al., 2004; Santillana, 2006).
Los fertilizantes biológicos son biopreparados basados
en microorganismos propios del suelo o de las plantas,
pero en tasas de población mucho más altas de lo que
normalmente se encuentran en la naturaleza, estos
cultivos microbianos son multiplicados artificialmente a
nivel de laboratorio inicialmente, para ser probados en
diferentes especies de plantas en el invernadero, usando
diferentes concentraciones celulares para encontrar la
más efectiva, midiendo parámetros tales como biomasa
seca, altura de planta, área foliar, entre otros, y en caso de
obtener resultados positivos se realizan ensayos en
campo para que posteriormente pueda ser producido a
escala industrial, plantean (Ghosh, 2002; Medina y León,
2004).
En esta investigación se propagaron las cianobacterias
en el laboratorio y fueron probadas sobre plantas de arroz
a nivel de parcelas experimentales. En una segunda etapa
estas cepas serán evaluadas a nivel de campo.
Fijación Biológica de Nitrógeno
El nitrógeno gaseoso representa aproximadamente el
80% de la atmósfera terrestre. El nitrógeno es una de las
claves globales de la producción agrícola, se estima que
de 150 a 200 millones de toneladas de N2 son requeridas
cada año por las plantas dentro de los sistemas agrícolas,
para producir el alimento mundial, alimento para
animales y productos para la industria. Para cumplir en
parte esta demanda 100 millones de toneladas de
nitrógeno son fijadas anualmente vía industrial mediante
el proceso de Haber Bosch. (Unkovich et al., 2008).
METODOLOGÍA
Se realizó una determinación cualitativa y cuantitativa
de las cianobacterias presentes en muestras de agua de
los cultivos de arroz del departamento de la Guajira para
su posterior aislamiento y propagación.
1. Caracterización agrícola de fincas arroceras
de la Guajira.
Antes de realizar los muestreos se realizaron entrevistas
a agricultores de los municipios de Dibulla y Fonseca en
el Departamento de la Guajira para caracterizar los
cultivos arroceros de estas zonas. Esta zona es de clima
cálido y seco, con precipitaciones promedio de 1.000 mm
y temperaturas superiores a 24 ºC, lo cual hace que el
clima sea deficiente en agua debido a los elevados
valores de evapotranspiración. Estas fincas manejan
cultivos de tipo arroz secano. Para Dibulla se cultivan
unas 500 ha de arroz y para Fonseca unas 3000 ha.
2. Muestreo
Se muestrearon 6 lotes arroceros del departamento de la
Guajira, en los municipios de Dibulla y Fonseca. (Ver
figura 1).
Primer muestreo: se muestrearon 3 lotes arroceros en el
municipio de Dibulla. De cada lote se tomaron 3
muestras integradas de plantas de arroz entre 40-55 días
después de emergencia. Estas plantas fueron arrancadas
de raíz y el exceso de suelo se eliminó por agitación
suave (Ver figura 1).
En el segundo muestreo se visitaron 3 fincas en el
municipio de Fonseca. Las muestras se obtuvieron por
raspado del sustrato, según la metodología descrita en
(Hashtroudi et al., 2013). Igualmente se tomaron 3
muestras de agua superficial de 250ml en tres puntos de
cada finca según se indica en (Pereira et al., 2009) (Ver
figura 2).
Figura1. Muestreo en cultivo Figura2. Muestreo por raspado
de arroz
Fuente: Elaboración propia
42
 3. Aislamiento y conservación
Las cianobacterias utilizadas en este estudio se
obtuvieron de muestras de tapetes microbianos de los
cultivos de arroz.
El material colectado en campo se resuspendió en 30 ml
de medio liquido BG 11 con 100 g/ml de ciclohexamida,
los cultivos se dejaron en incubación por un periodo de 7
días bajo fotoperiodo 12:12 y la iluminación de 200 Em-
2s-1. Como menciona Hashtroudi, et al., 2013) según
describe (Stanier et al., 1971; Andersen y. Kawachi,
2005). Igualmente se realizaron montajes para
observaciones en el microscopio a escala de 40X (Ver
cuadro 1).
Cuadro 1. Aislamiento de cianobacterias
a.Gloeocapsa sp. b. Arthrospira sp.
c. Rivularia sp. d. Rivularia sp.
e. Arthrospira sp.
f. Nodularia sp.
Fuente: Elaboración propia
La especie más abundante y de mayor tasa de
crecimiento fue purificada y caracterizada
morfológicamente mediante claves taxonómicas. Esta
especie fue identificada como Arthrospira sp. Los
cultivos mono-axénicos de las cianobacterias se
conservaron en 6 cajas de Petri y 6 medio líquido en
tubo de ensayo según describe (Day, 2007).
4. Propagación.
Posterior al aislamiento de la Arthospira sp, se escaló
mediante el incremento progresivo de medio de cultivo
Zarrouck (1966). Se partió de un volumen de 0,5 ml,
hasta alcanzar un volumen 30 l una alta densidad celular
de 0,9 Abs a 680 nm. Este proceso tuvo una duración de
30 días.
Cultivo en Erlenmeyer: Se inocularon 10ml de muestra
en un matraz de 250 ml que contenía 100 ml de medio de
cultivo durante 8 días hasta una densidad óptica de 0,9
Absorbancias (680 nm) bajo condiciones controladas de
luz y fotoperiodo. La temperatura de cultivo, osciló entre
los 26 a 30 °C, el pH estuvo entre los 9 a 10,5 y la
salinidad se situó en 4%. Los cultivos permanecieron a
una distancia de 15-20 cm de las lámparas fluorescentes
de 80 W. El cultivo llego a su máxima producción a los
12 días de cultivo.
Cultivo en fotobiorreactores de un litro: Los cultivos de
Arthrospira sp se realizaron en fotobiorreactores de un
litro a partir de 500 ml de medio de cultivo a una
temperatura de 30 ± 2 °C, con aireación constante,
fotoperiodo de 16:8 h y pH 9,5. La iluminación se
suministró por lámparas fluorescentes laterales que
proporcionaron la misma intensidad de luz a todos los
cultivos.
Cultivo en fotobiorreactores de 30 Litros: Los inóculos
de un litro se depositaron en un fotobiorreactor de 30 l en
una proporción de 50% de inóculo y 50% de medio de
cultivo. Los botellones fueron mantenidos en la zona de
cultivos outdoor oscilando entre 30 - 35 °C, con
aireación constante, fotoperíodo de 12:12 h y con pH
entre 9,5 – 10,5. (Ver cuadro 2. Proceso de escalado). El
proceso de escalado se realizó en el laboratorio de la
Fundación Terrazul.
43
 Cuadro 2. Proceso de escalado de la cyanobacteria
Arthrospira sp.
a. Cultivo en tubo b. Culivo en placa
inclinado
c.Escalamiento a d.Cultivo en erlenmeyer
erlenmeyer
e. Cultivo en f.Cultivo en
fotobiorreactor de 1 fotobiorrectoers de 30
Litro Litros
Fuente: Fundación Terrazul 2013
5. Mantenimiento de cepas monoalgales de
Arthrospira sp
La manera más común para conservar cultivos de
microalgas es mantener estos continuamente bajo
condiciones ambientales controladas. Rutinas de
subcultivos en serie es llevado a cabo usando técnicas
asépticas, que consiste en transferir un inoculo de la fase
exponencial final dentro de medio fresco esterilizado.
Esto origina cultivos metabólicamente activos que
pueden ser usados en tiempos cortos. Por lo tanto, las
cepas están dispuestas en tubos de ensayo con capacidad
de 20 ml en medio de cultivo Zarrouck con un pH entre 9
a 10 a una temperatura de 25 ºC. Se cultivan a una
distancia de 15-20 cm de las lámparas fluorescentes de
80 W, proporcionando un nivel de iluminación de la
superficie de cultivo de 5 250 lux.
6. Actividad promotora de crecimiento de la
cianobacterias en parcelas experimentales.
Los aislamientos fueron evaluados a nivel de parcelas
experimentales para determinar la actividad promotora de
crecimiento vegetal en plantas de arroz. Para ello se
realizaron dos experimentos en parcelas de un tamaño de
1 m2. Las semillas de la variedad Fedearroz 2000 fueron
embebidas en agua por 24h. A los 15 días de sembradas
las semillas se hicieron los siguientes tratamientos:
Tratamiento 1: La parcela inoculada con 800 ml
Arthrospira sp fresca a una concentración de 0,9 g/l.
Tratamiento 2. Esta parcela recibió el mismo manejo del
tratamiento 1 pero no fue inoculada. Parcela Testigo.
Tratamiento 3: La parcela 3 no inoculada fue fertilizada
con UREA a una concentración de 10%.
Tratamiento 4: La parcela 4 fue inoculada con
Arthrospira sp inactiva a una concentración de 0,9 g/l. La
cepa fue inactivada al someter la biomasa a 90ºC por 5
min.
Las inoculaciones se hicieron de forma directa en el
suelo. La parcela testigo no tenía cianobacterias. Las
parcelas experimentales se desarrollaron en las
instalaciones del Centro Agroempresarial y Acuícola
sede Riohacha. El Sistema de riego empleado fue
estático, para mantener la humedad en el cultivo.
A los 45 días de crecimientos se determinó el peso seco
de raíz y vástago. La altura de las plantas se realizó
semanalmente. Se analizó una muestra compuesta de 3
plantas respetando la proporcionalidad del peso de cada
planta, en cada una de las parcelas. En las figuras 4 y 5 se
muestra el crecimiento en cada una de las parcelas. La
Tabla I muestra los pesos secos de las parcelas que
determinan la promoción de crecimiento de las plantas de
Arroz. Ver figura 3.
Figura 3. Parcelas experimentales
.
Fuente: Elaboración propia
44

RESULTADOS Y DISCUSIONES
Identificación de cianobacterias
Se identificaron cuatro especies de cianobacterias,
basado en sus descripciones microscópicas y aspectos
morfológicos (Cuadro 1). El género más frecuentemente
aislado e identificado fue Arthrospira sp con 65%
(Figura b y e), seguido de Rivularia sp 21% (Figura c y
d), Gloeocapsa sp 9% (Figura a) y Nodularia sp 5%
(Figura f).
fácil, no destructivo. También se pudo observar que las
parcelas con Arthrospira frescas tuvieron un cambio de
color, las plantas se tornaron amarillas. Las parcelas con
urea y la que se inoculo con Arthrospira inactiva
lograron mantener su color verde y con mayor
crecimiento que la parcela testigo. Ver Tabla I.
Figura 4. Crecimiento promedio semanal de
las plantas de arroz en diferentes concentraciones

Crecimiento en parcelas experimentales

Luego de realizar una breve descripción de cada uno de

los tratamientos que se le hicieron a las plantas de arroz
para evaluar su crecimiento con y sin la cianobacteria en
estudio, se identificaron criterios de comparación como
se muestra en el figura 4 y 5.

Se logró establecer con este estudio las ventajas y

desventajas de cada uno de los tratamientos y la
facilidad de obtener un método de comparación más

Tabla I. Mediciones de los parámetros de crecimiento vegetal. Tratamientos: control sin inocular, con urea,
con Arthrospira fresca y Arthrospira Inactiva
Parcela inoculada con Arthrospira Parcela inoculada con Arthrospira
Parcela Testigo Parcela con urea
fresca Inactiva

Parámetros S1 S2 S3 S1 S2 S3 S1 S2 S3 S1 S2 S3
Raíz (cm) 8,0 7,0 7,0 10,0 8,0 8,0 8,0 10,0 7,0 8,0 5,0 10,0
Tallo (cm) 20,0 21,5 19,0 34,0 39,0 30,0 18,0 21,0 19,0 18,0 17,0 16,0

Peso húmedo (mg) 256,7 243,1 207,9 786,2 352,8

811,4 486,9 777,6 639,1 342,3 281,5 238,0

Peso seco (mg) 154,0 138,2 82,4 174,9

136,4 92,4 292,2 163,9 64,0 66,6 46,6 20,8

Peso seco con respecto al

40,1 9,2 -26 134 31,3 -48,7 -46,7 -62,7 -83,3
testigo %

S: Semanas. La parcela testigo no tenía cianobacteria, ni estaba fertilizada. La parcela con Arthospira inactiva consistió
en aumentar la temperatura a 95ºC.

45
 Figura 5. Comparación de las mediciones de los
parámetros de crecimiento vegetal vs
tratamiento
En la figura 5. Se muestran los resultados de los
ensayos realizados con los diferentes tratamientos
dados a las parcelas experimentales. De modo
general, no hubo un crecimiento significativo
comparado con la parcela testigo o control sin
inocular, aunque es necesario tener en cuenta para la
continuidad de la siguiente etapa, la interacción planta
– microorganismo para describir con mayor exactitud
el beneficio de cada tratamiento en particular.
CONCLUSIONES
No existen evidencias que soporten que la inoculación
de la Arthospira en plantas de arroz promueva su
crecimiento vegetal bajo las condiciones de este ensayo.
Desconocemos sì el tiempo de evaluación fue muy corto,
sì la concentración del inoculante fue el adecuado, sì la
fertilización puede determinar el efecto de la inoculación.
Es necesario desarrollar más experimentos para
modular la respuesta del inoculante frente a la promoción
de crecimiento del arroz.
Es necesario evaluar nuevos aislamientos para
determinar su potencial en la promoción de crecimiento
vegetal en arroz.
RECOMENDACIONES
Con el objeto de continuar con el desarrollo de un
biofertilizante, es necesario seguir con algunos de los
aislamientos, mezclas o consorcios como promotores de
crecimiento vegetal como futuros inoculantes, es
importante establecer que mecanismos de acción están
involucrados en la promoción de crecimiento vegetal de
los consorcios no definidos y las cepas aisladas, por lo
que se recomienda evaluar sí la producción de
reguladores de crecimiento como giberelinas y
citoquininas u otro mecanismo en particular podrían estar
interviniendo en la promoción de crecimiento vegetal.
En este trabajo se encontró que las inoculaciones
individualmente no presentaron efecto en la promoción
de crecimiento. En este sentido se podría establecer sí
algunos mecanismos de promoción de crecimiento como
la producción de reguladores de crecimiento vegetal
cambian cuando el microorganismo actúa
individualmente o en mezcla.
En general, el aislamiento y los tratamientos
evaluados en campo no mostraron promoción de
crecimiento por lo que se recomienda el desarrollo de una
formulación que confiera más estabilidad y permanencia
al inoculante en campo. Igualmente, es necesario
determinar un plan de manejo integral del inoculante que
incluya la combinación de la fertilización inorgánica y
orgánica para suplir las demandas nutricionales de la
planta y mejorar indicadores de calidad de suelo según la
cultivariedad y tipo de suelo que se piense emplear.
AGRADECIMIENTOS
Este trabajo fue financiado por el SENA a través del
Concurso de Nano, Micro Biotecnología 2013 -2014.
Agradecemos a la Fundación TERRAZUL por el
escalamiento de la cianobacteria. Igualmente a los
aprendices Peralta, Torres y Rodríguez por su apoyo
técnico durante los ensayos .
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47
 Determinación preliminar de metabolitos de alto valor agregado
(ácido láctico, ácido acético, etanol) en una bebida funcional de
panela fermentada con kéfir de agua nativo.
Gaviria Maria Isabel1, Guzman Ruth Marleny2, Muñoz Laura Jassiel3.

I. Ingeniera biológica, Tecnoparque Sena nodo Medellín. isabelita867@misena.edu.co

II. Aprendiz Sena Centro Tecnológico de Gestión industrial (CTGI). ruthguzman667@gmail.com
III. Ingeniera de Alimentos, Grupo de Investigación Bioali, Universidad de Antioquia.
laurajassiel1583@gmail.com

Resumen Los gránulos de kéfir son un consorcio microbiano
constituido por bacterias ácido lácticas, bacterias ácido acéticas y
levaduras embebidas en exopolisacáridos; El kéfir de agua se utiliza
como inóculo para fermentar agua de panela obteniendo una bebida
carbonatada, alcohólica y acida. Objetivo: determinar los
metabolitos de alto valor agregado (ácido láctico, ácido acético,
etanol) en la bebida fermentada de panela con kéfir de agua nativo
por las técnicas de cromatografía gaseosa y cromatografía liquida
de alta resolución. Métodos: para la determinación de metabolitos se
utilizó: cromatografía líquida de alta eficiencia y cromatografía
gaseosa. Para la observación de grupos microbianos se utilizó
tinción de Gram. Resultados: Se obtuvo fermentaciones con
contenidos de: Ácido láctico: 643.2407115 (ppm), ácido acético:
ND y etanol: 0.45264318 (%v/v). Conclusión A un tiempo de 48
horas a las condiciones de fermentación utilizadas en este
experimento se puede decir que el bioproceso es incompleto.
Abstract The kefir grains are a microbial consortium of lactic acid
bacteria, acetic acid bacteria and yeasts embedded in
exopolysaccharide; Kefir water is used as inoculum to ferment sugar
water getting a carbonated, alcoholic and acidic drinks. Objective:
To determine the high-value metabolites (lactic acid, acetic acid,
ethanol) in the fermented drink kefir native brown sugar with water
by the techniques of gas chromatography and high resolution liquid
chromatography. Methods for determination of metabolites was
used: high efficiency liquid chromatography and gas
chromatography. For the observation of microbial groups Gram
stain was used. Results: Fermentations were obtained with contents
of: lactic acid: 643.2407115 (ppm), acetic acid and ethanol ND:
0.45264318 (% v / v). Conclusion In a time of 48 hours the
fermentation conditions used in this experiment can be said that the
bioprocess is incomplete.
Palabras claves: kéfir, consorcio microbiano, acido láctico,
bebida funcional.
la elaboración de bebidas alcohólicas, como solvente químico
industrial, en la industria cosmética, como agente
desinfectante en aplicaciones médicas y como combustible
[3]. A pesar de las múltiples aplicaciones en diferentes
industrias, el gránulo de kéfir impacta directamente el sector
alimenticio en donde ha sido usado desde hace varios años de
forma empírica y recientemente con mayor tecnología para
conservar por más tiempo bebidas como la leche y algunos
extractos de frutas, encontrando que además otorga
beneficios adicionales a la salud del tracto digestivo, como su
efecto antagónico comprobado contra bacterias de los
géneros Salmonella sp y Shiguella sp, unos de los principales
patógenos en alimentos [4]. Por lo anterior, en conjunto entre
Tecnoparque SENA nodo Medellín y el grupo de
Biotecnología de alimentos de la Universidad de Antioquia
se han venido desarrollando varios proyectos en el tema de
productos fermentados con kéfir e incluso el
aprovechamiento de la biomasa como cultivo starter
(iniciador) o suplemento biológico. El presente trabajo tiene
como objetivo principal establecer una caracterización
preliminar mediante el uso de técnicas cromatográficas, de
los principales metabolitos producidos durante la obtención
de una bebida funcional probiótica a base de panela; se usó la
panela como sustrato debido a su carácter tradicional y alto
valor nutritivo, que la hace uno de los productos de mayor
consumo en todos los estratos socioeconómicos y representa
una oportunidad de llevar un producto con mayor valor
agregado y carácter probiótico a un amplio sector de
consumidores.

I. INTRODUCCIÓN

Los gránulos de kéfir de agua son una comunidad

microbiana conformada por una estructura exopolisacárida
donde conviven en simbiosis diversos microorganismos
(bacterias ácido lácticas, bacterias acéticas y levaduras) que
crecen y fermentan mejor en un ambiente microaerófilo o
anaerobio [1]. Los metabolitos producidos en la fermentación
tienen aplicaciones industriales importantes; el ácido láctico
es usado como acidulante conservante en la industria
alimentaria y otras numerosas aplicaciones en industrias
farmacéuticas, del cuero y textiles [2]. El etanol es usado en Fig 1. Gránulo kéfir de agua visto al estereoscopio

48

II. METODOLOGÍA
Microorganismo
Los gránulos de kéfir de agua utilizados en el presente
estudio fueron proporcionados por el grupo de investigación
BioAli (Biotecnología en Alimentos: grupo de investigación
adscrito a la Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia).
Los gránulos se reactivaron tomando 700g de estos y se
llevaron a 2 litros de solución de panela al 10% p/p dejando
fermentar por 24 horas en frasco hermético de vidrio con
escape de gas a temperatura ambiente (25°C).
Se observaron los diferentes grupos microbianos mediante
la técnica tinción de Gram en un microscopio de fluorescencia
marca CARL ZEISS en campo claro a 50x, haciendo
seguimiento durante la fermentación a 4 litros.
Medio de cultivo
Para obtener una bebida de carácter tradicional pero con
mayor valor agregado, se usó panela en polvo adquirida en
empresa de la ciudad de Medellín; esta fue empleada en cada
uno de los experimentos, diluyéndose con agua potable a una
concentración de 103,83 g/L.
Ensayos de fermentación
Ensayos a 4 Litros
En estudios previos se determinó que la producción de los
principales metabolitos de interés en matraz era estimulada
por cultivos estáticos debido al carácter anaerobio del
consorcio microbiano; por tal razón, para determinar la
estabilidad del cultivo se realizaron 12 corridas en estático
usando un recipiente a escala de 4 litros sellado
herméticamente con escape de gas para propiciar una
atmosfera anaerobia sin agitación y a temperatura ambiente,
durante un tiempo de fermentación de 48h. La concentración
inicial de biomasa e n peso húmedo fue de 90 g/L (9% p/v); la
panela usada como sustrato se agregó a una concentración de
10,4 %p/v. En este paso, y dado que el diseño experimental
se trata de un simple monitoreo de las variables respuesta (pH
final, Brix final) al mantener constantes el pH inicial y Brix
inicial, se hará solo un cálculo de media y varianza. Con los
resultados obtenidos en este ensayo, se propondrá un diseño
experimental con concentración de fuente de Carbono como
factor con varios niveles de estudio y el contenido de los
diferentes metabolitos (Acido láctico, acético y Etanol) como
variables respuesta, lo cual nos permitirá ajustar los datos a un
modelo de optimización según las características
organolépticas de la bebida deseada (mayor o menor
contenido alcohólico y capacidad astringente).
Teniendo clara la estabilidad del cultivo frente a la
condiciones de fermentación, se realizó una cinética de
crecimiento acoplada a la producción de metabolitos en
volumen de 4 litros y a las mismas condiciones
experimentales del ensayo anterior; se tomaron muestras cada
24h durante 4 días para monitoreo de los metabolitos de
interés por cromatografía y producción de biomasa.
Ensayos a 11 litros
Se usó un biorreactor New Brunswick modelo Bioflo
con volumen de trabajo a 11 litros; se mantuvo la cantidad de
inóculo y fuente de Carbono a 9% p/v y 10,4% p/v
respectivamente; se usó la mínima agitación del sistema (50
rpm) para garantizar la mezcla de nutrientes y se monitoreó la
producción de los principales metabolitos de interés (Acido
láctico, acético y Etanol) por medio de cromatografía.
Métodos analíticos
El seguimiento a la producción de biomasa en 4litros se
realizó mediante análisis de peso seco, filtrando el grano del
recipiente y secándolo a una temperatura de 60°C por 24h.
Las técnicas cromatográficas fueron usadas con el fin de
caracterizar preliminarmente la bebida obtenida y enfocar el
posible mercado. La producción de ácido láctico y ácido
acético fue determinada por el método de cromatografía
liquida de alta eficiencia con Cromatógrafo Thermo Scientific
Accela 600 con columna C18, mediante el método descrito
por S. De Baere [6]. La producción de etanol fue determinada
por cromatografía gaseosa Shimadzu modelo GC-2014. El
seguimiento de la fermentación se realizó mediante la
medición de pH con un potenciómetro marca HACH y grados
Brix con un refractómetro automático marca ATAGO.
III. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Ensayos a 4 litros
De la tabla 1 se puede inferir que a las 48h de
fermentación se dá una producción de ácidos considerable,
dado el descenso de pH, aunque este se estabiliza en un valor
promedio de 3,42 el cual aún es tolerable por los
microorganismos especialmente para las bacterias acéticas.
Por lo contrario el consumo de azúcares de acuerdo a los
grados brix indica que aún queda sustrato por metabolizar que
puede ser biotransformado por otros grupos microbianos
(levaduras y bacterias acéticas) en productos como etanol y
ácido acético.
TABLA 1: SEGUIMIENTO GRADOS BRIX Y PH EN FERMENTACIÓN A 48H
corridas
Ph inicial Ph final Brix inicial Brix final
1 4,81 3,55 9 4
2 4,77 3,5 9 6
3 4,68 3,47 9 6
49
 4 4,53 3,51 9 4,7
5 4,57 3,4 9 6
6 4,43 3,44 9 6
7 4,77 3,46 9 4,7
8 4,6 3,45 9 6
9 4,72 3,4 9 6
10 4,87 3,34 9 4,7
11 4,47 3,33 9 6
12 4,79 3,33 9 6 Fig.3cromatograma ácido láctico
13 4,58 3,36 9 5
14 4,48 3,4 9 4,7
15 4,61 3,29 9 6
16 4,65 3,48 9 6

Media 4,64 3,42 9 5,49

Varianza 0,018 0,0056 0 0,504

En cuanto a la cinética de crecimiento y producción de Fig.4 Cromatograma Etanol

metabolitos, en la figura 2 se puede observar que el pico de
máxima producción de biomasa (día 2) no está acoplado a
los de máxima producción de Etanol, ácido láctico y
acético que se da en el día 3; sin embargo se puede ver la
producción continua de dichos metabolitos desde el día 1
cuando el microorganismo se encuentra en fase
exponencial, indicando que pueden estar parcialmente
acoplados al crecimiento. Los dos metabolitos de mayor
producción son el etanol y el ácido acético. Se puede
concluir que para el caso de una bebida funcional
probiótica el tiempo óptimo de fermentación son dos días,
ya que en ese momento se presenta la máxima
concentración de microorganismos probióticos, así como
una buena cantidad de ácido láctico y la cantidad de ácido
acético es un poco mayor que la de etanol, otorgándole a la
bebida una ligera acidez y capacidad astringente.
La producción de ácido acético no fue inicialmente
detectada debido a algún tipo de error experimental en el
procesamiento de las muestras para cromatografía que se
pudo superar en réplicas posteriores.
Por último se realizó un seguimiento mediante tinción de
gram durante los 4 días de la fermentación, encontrando
diferencias marcadas entre del día cero y el día 2, en cuanto a
los grupos morfológicos observados; en este sentido, el estado
inicial del grano presenta mayor cantidad de bacilos y algunos
cocos, morfologías típicas de las bacterias ácido lácticas y
acéticas, mientras que a las 48h la predominancia de las
levaduras es evidente y coincide con la máxima pendiente del
tramo linear en la producción de etanol observada en la figura
2.

Fig 2. Datos de peso seco (-(WDQRO¸iFLGROiFWLFRŶ\iFLGRDFpWLFR

Ÿ) en el tiempo a 4litros.
Fig.5: kéfir de agua vista al microscopio en BF a 50x. 0 horas.
En el análisis cromatográfico se encontró presencia de los
picos representativos para Etanol y Ácido láctico (Figuras 3 y
4).

50

Fig.6: kéfir de agua vista al microscopio en BF a 50x luego de 48h.
Ensayos a 11 litros
En la figura 7 se muestran los resultados del seguimiento
en la fermentación a 11 litros. Se puede observar que la
cinética de producción de metabolitos se conserva con su pico
en el día 3 así como la concentración de ácido láctico y
acético (1000 ppm y 2000 ppm respectivamente); sin embargo
la producción de etanol se incrementa en más de un 400%,
indicando que el cambio de escala y probablemente la
agitación aunque leve, pudieron tener influencia en que
prevalezca la población de levaduras por encima de los demás
géneros bacterianos, afectando principalmente a las bacterias
ácido lácticas que son anaerobias. También se observa como
la concentración de ácido acético empieza a incrementarse a
partir del día 3, lo que coincide con el metabolismo de las
bacterias acéticas que metabolizan el etanol para producirlo.
Estos resultados evidencian la necesidad de realizar un
diseño experimental en pro de la optimización de una bebida
con carácter no tan alcohólico y por ende de consumo en más
grupos poblacionales, así como el establecer criterios de
escalado confiables que permitan la aplicación industrial del
proceso. Se aconseja realizar nuevos ensayos a nivel de 11
litros pero sin agitación, para mantener el equilibrio natural de
los microorganismos en el gránulo.
Fig 7. Etanol (¸), ácido láctico (Ŷ) y ácido acético (Ÿ) en el tiempo a
11litros.
A pesar de que este contenido tan elevado de etanol no es
adecuado para los objetivos perseguidos por el presente
trabajo (obtener una bebida funcional) abren camino en la
posible utilización del gránulo de kéfir en la producción de
etanol con fines industriales. En la figura 8 se observa el
cromatograma para el etanol con su pico característico a un
tiempo de retención de 4,75 min.
Fig 8. Cromatograma de Etanol y área máxima encontrada a nivel de
biorreactor.
IV. CONCLUSIONES
Existen diferencias morfológicas marcadas a diferentes
tiempos de fermentación, encontrando que a 4 litros el
gránulo de kéfir inicia con un equilibrio entre sus poblaciones
microbianas que rápidamente se desplaza hacia las levaduras.
La producción de etanol es la principal causa del descenso
del pH en la fermentación, debido a que es el principal
metabolito producido en el proceso.
La obtención de una bebida funcional basada en la
fermentación de panela con kéfir de agua parece tener
viabilidad técnica; sin embargo se requieren ensayos de
optimización tanto a nivel de matraz como de bioreactor para
optimizar la bebida en función del mercado y las
características organolépticas deseadas por el cliente.
V. AGRADECIMIENTOS
A Tecnoparque - Sena nodo Medellín, al Centro
tecnológico de gestión industrial Sena y al grupo de
investigación BioAli por su amplia colaboración en el
desarrollo de este trabajo formativo.
VI. BIBLIOGRAFIA
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52
 Estudio agroecológico de incidencia de compuestos bioactivos de la
Familia Loranthaceae en la nanoestructura del hongo Hemileia
vastatrix en Pitalito-Huila
Una alternativa para el control de la roya en cultivos de café.
Autor Primera afiliación.
Experta: PhD. SOLARTE, Carmen. Química. Universidad
del Tolima, carsolarte@gmail.com, 3013061528,
http://201.234.78.173:8081/cvlac/visualizador/generarCurric
uloCv.do?cod_rh=0000456381, Ibagué-Tolima.
Autores Segunda afiliación.
Esp. ÁVILA, Carolina. Bióloga. Centro de Gestión y
Desarrollo Sostenible Surcolombiano-Instructora,
cavilac@misena.edu.co. 3152939556,
http://201.234.78.173:8081/cvlac/visualizador/generarCurric
uloCv.do?cod_rh=0001407033, Pitalito-Huila
Esp. BLANCO, Carlos. Ing. Agroecólogo. Centro de
Gestión y Desarrollo Sostenible Surcolombiano-Instructor,
carlosblancoro@misena.edu.co.311509020,
http://201.234.78.173:8081/cvlac/visualizador/generar
CurriculoCv.do?cod_rh=0000543560, Pitalito-Huila.
M.Sc. GASCA, Jemid. Biólogo. Centro de Gestión y
Desarrollo Sostenible Surcolombiano-Instructor,
jemigascavargas@misena.edu.co. 3133762125,
http://201.234.78.173:8081/cvlac/visualizador/generarCurric
uloCv.do?cod_rh=0000015802, Pitalito-Huila.
Esp. PATIÑO, Lina. Microbióloga. Centro de Gestión y
Desarrollo Sostenible Surcolombiano-Asesora Tecnoparque,
lfpatino40@misena.edu.co, 3156307253, Pitalito-Huila.
M.Sc. SANDOVAL, Claudia. Bióloga. Centro de Gestión y
Desarrollo Sostenible Surcolombiano-Instructora,
clsandoval08@misena.edu.co, 3002709376,
http://201.234.78.173:8081/cvlac/visualizador/generarCurric
uloCv.do?cod_rh=0000710679, Pitalito-Huila.
M.Sc. SILVA, Yesenia. Química/Gestión de la Innovación.
Centro de Gestión y Desarrollo Sostenible Surcolombiano-
Instructora, yeseniasilva@misena.edu.co, 3133864062,
http://201.234.78.173:8081/cvlac/visualizador/generarCurric
uloCv.do?cod_rh=0000521760, Pitalito-Huila.
Autores Tercera afiliación.
DIAZ, Juan Carlos. Centro de Gestión y Desarrollo
Sostenible Surcolombiano-Aprendiz Tecnólogo en Gestión
Sostenible de la Biodiversidad Vegetal, Pitalito-Huila.
GOMEZ, Karen. Centro de Gestión y Desarrollo Sostenible
Surcolombiano-Aprendiz Tecnólogo en Gestión Sostenible
de la Biodiversidad Vegetal, Pitalito-Huila.
PEREZ, Andrés. Centro de Gestión y desarrollo Sostenible
Surcolombiano-Aprendiz Tgo. Control Ambiental. Pitalito-
Huila.
MUÑOZ, Marly. Centro de Gestión y desarrollo Sostenible
Surcolombiano-Aprendiz Tecnólogo en Gestión Sostenible
de la Biodiversidad Vegetal, Pitalito-Huila.
RAMIREZ, Jhininson. Centro de Gestión y Desarrollo
Sostenible Surcolombiano-Aprendiz Tecnólogo en Gestión
Sostenible de la Biodiversidad Vegetal, Pitalito-Huila.
RAMOS, María Lili. Centro de Gestión y Desarrollo
Sostenible Surcolombiano-Aprendiz Tecnólogo en Gestión
Sostenible de la Biodiversidad Vegetal, Pitalito-Huila.
RENGIFO, Solangie. Centro de Gestión y Desarrollo
Sostenible Surcolombiano-Aprendiz Tecnólogo en Gestión
Sostenible de la Biodiversidad Vegetal, Pitalito-Huila.
RODRIGUEZ, Yesica. Centro de Gestión y Desarrollo
Sostenible Surcolombiano-Aprendiz Tecnólogo en Gestión
Sostenible de la Biodiversidad Vegetal, Pitalito-Huila.
ROJAS, Diego. Centro de Gestión y Desarrollo Sostenible
Surcolombiano-Aprendiz Tecnólogo en Gestión Sostenible
de la Biodiversidad Vegetal, Pitalito-Huila.
TOBAR, Yesika. Centro de Gestión y Desarrollo Sostenible
Surcolombiano-Aprendiz Tecnólogo en Gestión Sostenible
de la Biodiversidad Vegetal, Pitalito-Huila.
53
 Abstract
Plants of Loranthaceae family are considered to be
hemiparasites and have a negative incidence in the
economy of coffee plantations. Scientific studies reported
secondary metabolites existence with properties of interest
for micro-organisms control. This project suggests
developing an agro ecological study of the incidence of
Loranthaceae extracts in Hemileia vastatrix
nanostructure, a phyto pathogenic fungus that causes
Roya disease in coffee plantations. Additionally
mircopropagation methods will be explored in order to be
adapted under nursery conditions where raw materials
will be kept safe for further extractions.
Keywords: Loranthaceae, hemiparasite, antimicrobial,
secondary metabolites, electron microscopy, Hemileia
vastatrix.
INTRODUCCIÓN
Mundialmente, Colombia es considerada uno de los hotspots
en biodiversidad. Colombia posee 54871 especies y es el
segundo país con mayor diversidad de plantas. Donde las
plantas de la familia Loranthaceae hacen parte. Las especies
de esta familia son las principales plantas hemiparásitas de la
flora tropical junto con otras familias dentro del orden
Santalales.
Su importancia económica radica en el hecho de considerarse
les parasitas de especies de interés económico como cítricos,
café, cacao, guamos, guayabos, aguacate, etc [1] la cual es
removida de forma manual por los agricultores de los arbustos
de café.
En Colombia la familia Loranthaceae se encuentra
representada con 10 géneros y alrededor de 51 especies [1].
Literatura científica han reportado presencia de metabolitos
secundarios en este tipo de plantas hemiparásitas[2]. Los
cuales son de sistema defensivo en las plantas. Este tipo de
compuestos no han sido investigados en Colombia a partir de
plantas de la familia Loranthaceae.
Por consiguiente, la actividad química y biológica de estos,
representan una fuente alternativa innovadora en el uso
agroecológico para el control de otras especies fitopatogenas
como el caso del hongo causante de la roya.
El hongo Hemileia vastatrix, constituye el agente causal de la
roya del cafeto, microorganismo del grupo de los
Pucciniomycetes, con tres tipos de esporas; siendo las
urediosporas capaces de infectar Coffea spp.; como: Coffea
arabica, Coffea canephora y Coffea liberica [3].
H. vastatrix constituye la fitopatología de mayor importancia
económica a nivel nacional; dado que el cultivo del café es
considerado como el producto agrícola colombiano más
importante en el comercio internacional; donde una mínima
reducción en el rendimiento o un ligero aumento en los costos
de producción, pueden tener un gran impacto en los
caficultores [4].
La roya del cafeto (Hemileia vastatrix), desde los comienzos
del siglo XX fue una constante preocupación de los
colombianos, hasta cuando arribó al Brasil en 1970. A partir
de ese momento, Colombia tomó una serie de acciones
orientadas a afrontar la eminente llegada del patógeno [5].
Desde entonces, fitopatologos y fitomejoradores trabajaron en
la realización de nuevos cruces con progenitores resistentes al
hongo H. vastatrix, con mezclas de la variedad Colombia.
Originando diversidad genética de plantas de café. Sin
embargo en los años 2007-2008, época de altas precipitaciones
en el país, influyó para que la roya aumentara su incidencia de
infección alrededor del 10% en café [6]. Lo que permitió ver
que el hongo Hemileia vastatrix también originó una
variabilidad genética; originando la llegada de una nueva
estirpe; detectando un nuevo grupo de Hemileia vastatrix
bastante heterogéneo de altos porcentajes en su polimorfismo.
De esta manera el hongo H. vastatrix se ha adaptado a nuevos
genotipos de cafeto resistentes [7].
Por tanto, el objetivo de este estudio es realizar un análisis
preliminar de la relación planta hospedera-Hemiparásita, a
nivel histológico y nanoestructural del hongo H. vastatrix,
además de sus ambientes agroecológicos en plantaciones de
café; realizando la evaluación de los metabolitos secundarios
de la planta hemiparásita en el control de H.vastatrix . Con el
fin de proporcionar un producto ecológico alternativo a
fungicidas tradicionales (químicamente sintetizados), tóxicos
que alteran la calidad del café y calidad de vida de los
consumidores.
Esta propuesta pretende realizar la por un lado la demarcha
fitoquímica de los compuestos bioactivos -metabolitos
secundarios- que presentan un alto contenido de taninos que se
encuentran en depósitos intracelulares del tejido
parénquimatico [2]. Entre ellos los taninos condensados como
las proantocianidinas y antoncianidinas; y los hidrolizables
que son polímeros heterogéneos, formados por ácidos
fenólicos simples como el ácido gálico y azúcares simples [8],
por otro lado ver la incidencia de los metabolitos secundarios
en la estructura nanoestructuras celulares del hongo.
Dado que Colombia representa el tercer país con mayor
diversidad de la familia de loranthaceae. Se pretende estudiar
la interacción agroecológica de metabolitos secundarios
presentes en plantas de esta familia encontradas en el sur del
Huila, con el fin de evaluarlos, como control biológico en
microorganismos - H.vastatrix- [9,10]. Ya que estudios
previos en microbiología han reportado que los ácidos
tanínicos inhiben el crecimiento de microorganismos,
Alterando su metabolismo donde la incidencia del efecto es
notoria a nivel estructural. [11]. Lo que representaría una
nueva fuente económica de la biodiversidad regional,
generando un valor comercial a una planta no valorizada.
54
El presente documento hace refencia a los avances
preliminares obtenidos hasta la fecha, con la participación de
actores quienes ejecutan las actividades de investigación
aplicada por la modalidad de formación e innovación por
proyectos. Liderada por aprendices e instructores vinculados
al proyecto tecnológico –Uso Sostenible y Conservación de la
Biodiversidad- en los diversos ambientes de aprendizaje del
Centro de Desarrollo Sostenible Sur Colombiano- en Pitalito,
Figura 2. a y b. Especies de la familia Loranthaceae
Huila.
comúnmente llamado pajarito o matapalo. c. Inserción del
pajarito en una planta de café.
I. METODOLOGÍA
Ambientes de aprendizaje empleados: Laboratorio de
Biodiversidad, Aérea rural municipio de Pitalito,
Procedimientos y Resultados Huila.

1. Estudio de la relación agroecológica de la planta

2. Análisis de ultraestructuras
hospedera/hemiparásita
Fijación de Material Vegetal
‡6H realizaron guías de campo para el estudio
Durante la ejecución del presente proyecto se dio
etnobotánico y conocer la relación café-hemiparásita.
inició a establecer la estandarización de protocolos
para el análisis y caracterización histológica, que
‡6H LQLFLDURQ ODV SULPHUDV VDOLGDV GH FDPSR DO
permitirá establecer un patrón de una especie
corregimiento Chillurco, vereda Danubio. Se
hemiparásita.
visitaron dos fincas cultivadoras de café variedad
Caturra y Castilla. Junto a los aprendices se
x Preparación del material vegetal:
realizaron dos parcelas de 100m2 por finca con el
objeto de conocer relación planta
Para la obtención de cortes finos es
hemiparásita/hospedera (Figura 1). Se hicieron
indispensable que el tejido este previamente
entrevistas semi-estructuradas con el fin de conocer
endurecido: Con el fin de endurecer los tejidos se
los usos que se les da a la planta hemiparásita de
usaron las técnicas más frecuentes que se empleadas
Loranthaceae.
en métodos de inclusión.
Hasta el momento se han registrado dos especies
El tejido se impregnó en parafina dado que ésta
pertenecientes a la familia Loranthaceae presentes en
es una sustancia hidrofóbica, llevando a cabo un
el café (Figura 2) y la comunidad las reconoce como
proceso previo: Los tejidos fijados se deshidrataron
pajarito o matapalo.
por una hora en alcoholes de concentración diferente
(50%v/v, 70%v/v, 80%v/v, 90%v/v, 96%v/v y
100%v/v). Posteriormente se pasaron por solventes
de polaridad intermediarios como el xileno, el
benceno y el tolueno (conocidos como agentes
aclarantes). Finalmente fueron sumergidos en
parafina fundida y se dejaron solidificar
constituyendo bloques histológicos para observación
por microscopia de óptica [12]. La parafina se
eliminó en un solvente orgánico, de nuevo se
incluyen en xilol, y la muestra se rehidrato haciéndola
pasar por una serie de graduaciones de creciente de
alcohol etílico hasta llegar a una solución 100% de
agua. Ya rehidratado se tiño el tejido.
Una vez teñido, se deshidrató de nuevo, para que
Figura 1. a, b. Desarrollo de la parcela de 100m2 para
pudiera fijarse de modo permanente el cubreobjetos.
determinar la influencia del pajarito en plantas infectadas
con roya. c. Entrevista a cultivadores para conocer el uso de x Cortes del material vegetal preparado:
las plantas comúnmente llamadas pajarito. d. Café con
roya. El material vegetal, fue cortado en láminas delgadas
empleando un bisturí Nº3, para posibilitar su
55
observación con el microscopio óptico y de barrido
electrónico para así lograr analizar la relación entre la
ultraestructura de la planta hospedera -hemiparásita.
Se realizaron respectivas observaciones en
microscopia óptica -Microscopio óptico Carl Zeiss
Axio Lab A1 50X.-. Que permitió ver los resultados
previos de procesamiento de la muestra. Para así
posteriormente mejorar detalles de cotes para los
posteriores análisis del tejido de la planta
hemiparásita y la relación de los ases vasculares para
establecer un análisis fisiológico que permita su
propagación en laboratorio.
La evaluación de las observaciones de estructuras de
histología se realizó por microscopia óptica y de
urediosporas de Hemileia vastatrix por microscopia
electrónica, así como de ultraestructuras de los tejidos
y hongos con presiones variables [13].
Seguimiento del proceso infectivo de plántulas de
café de diferentes variedades, para monitoreo del
desarrollo de Hemileia vastatrix en hojas, ha sido
estudiado realizando inoculación de esporas en
cámaras húmedas in vitro, a partir de un número
inicial de esporas por mililitro del hongo.
Al momento ha sido estandarizado el método de
propagación in vitro del hongo H. vastatrix
efectuando un aislamiento de las esporas mediante
raspado superficial de hojas afectadas, mezclando las
esporas con agua destilada estéril y almacenando en
un frasco de spray previamente desinfectado.
Posteriormente se depositaron en cámaras húmedas
construidas con servilletas humedecidas con agua
destilada estéril, dispuestas en un recipiente de vidrio
desinfectado y esterilizado con antelación. El estudio
se realizó teniendo en cuenta fotoperiodos y variación
de temperaturas (Figura 3).
a b
Figura 3. a. Hongo de la roya H. vastatrix cultivado in
vitro en cámara húmeda. b. Observacion de urediosporas
de H. vastatrix a 50x
El hongo cultivado fue observado por microscopia de
fluorescencia a 50X -Microscopio óptico Carl Zeiss
Axio. Que permitió ver los resultados previos de
procesamiento de la muestra.
Ambientes de aprendizaje empleados: Laboratorio de
nanotecnología - Cabina extracción de gases-
Microscopio electrónico barrido EVO HD15,
Microscopio óptico Carl Zeiss Axio Lab A1.
3. Elucidación de metabolitos secundarios de la planta
hemiparásitas.
Para lograr la elucidación de los metabolitos fue
necesario realizar los siguientes procedimientos
descritos a continuación.
-Caracterización del material de ensayo según
propiedades físicas de las plantas hemiparásitas tabla
1. La planta hemiparásita que se utilizó como
material de partida para los procedimientos de
extracción y elucidación de metabolitos secundarios
debe ser representativa del lote que se inspecciona.
Por consiguiente se tuvo en cuenta la toma de la
muestra representativa del lote de partida: éste
procedimiento, se realizó a dos especies de
hemiparásitas (clasificación botánica en proceso) que
han sido encontradas hasta la fecha en los muestreos
en campo. Posteriormente se llevaron al laboratorio a
fin de iniciar los análisis.
-Análisis proximal
A fin de evitar alteraciones físicas, químicas y
biológicas se dio inició con la deshidratación del
material vegetal.
El material fresco fue segmentado en hojas, tallos,
raíz y fruto (figura 4) a fin de efectúa la
determinación de humedad relativa aplicando la
técnica de deshidratación completa con aire caliente
(AOAC 986.21). Posteriormente, el material
deshidratado se conservó y almacenó en bolsas
plásticas con sierre hermético. en un lugar fresco y
preservad de la humedad a fin de ser utilizado como
material de partida para los siguiente análisis.
Figura 4. Planta hemiparásita perteneciente a la familia
Loranthaceae. a. Planta fresca colectada en campo. b.
Hojas deshidratadas. c. Tallos deshidratados. d. Flores
deshidratadas.
56
 Tabla 1. Resultados Propiedades física de plantas
hemiparásitas -Extracción del crudo
La extracción de mezcla de taninos condensados e
ESPECIE TIPO DE ASPECTO hidrolizables se ha realizado a partir de diferentes
MUESTRA partes de la planta hemiparásita como hojas, tallos,
Forma Hoja Redonda, gruesa y
textura áspera
raíces y flores.
Color Hoja Verde oscura La obtención de ésta mezcla de compuestos
A Longitud 25 cm aprox. proantocianidinas, se realizó por reacción de
Tallo hidrogenación térmicamente asistida por lo método
Color Verde y naranja de reflujo con HCl. Mientras que los ácidos fenólicos
Floración
Forma Hoja Alargada, delgada y
simples ser obtuvieron por percolación a temperatura
textura lisa. ambiente (Figura 5).
Color Hoja Verde oscura
B Longitud 40 cm aprox.
Tallo
Color Verde y blanca
Floración

Los análisis realizados para la determinación de

humedad relativa y compuestos volátiles se determinaron
porcentajes de humedad relativa para cada tipo de
muestra de las dos especies identificadas tabla 2.

Tabla 2. Resultados Humedad relativa para especies de

Loranthacea
TIPO DE HUMEDAD
ESPECIE MUESTRA (g/100 g muestra)
Figura 5. técnicas de extracción empleadas a.
Raíz 67 hidrogenación termoasistida. b. percolación.
Hoja 70
A
Tallo 48 La extracción por reacción de hidrogenación
Flor 64 térmicamente asistida por lo método de reflujo, ha
Raíz 63 mostrado la presencia de color rojo que indica la
B Hoja 68 presencia de proantocianidinas, compuestos bioactivos.
Tallo 46
Flor 65 Mientras que los extractos obtenidos por percolación a
temperatura ambiente, empleando solventes de diferentes
Los resultados del análisis proximal se determinó polaridades, ha mostrado presencia de coloración verde,
inicialmente hallando el contenido de fibra bruta por que puede deberse a presencia de ácidos fenólicos
Digestión según la norma AOAC 920.169, materia grasa simples.
por soxhlet por la norma AOAC 963.15, minerales,
proteína por el método Kjendhal siguiendo la norma -Aislamiento de metabolitos por técnicas
AOAC 920.165, y carbohidratos totales por diferencia de cromatográficas empleando inicialmente por
porcentaje al final de hallar los anteriores. Cromatografía en Capa fina TLC utilizando extractos
fenólicos obtenidos por percolación (figura 6). Con
Los resultados reportados en la tabla 3, son datos únicos ello se ha dado inducción a aprendices en esta
sin repetitividad de dado que son resultado previos. técnica, que ha permitido avanzar en la selección se
solventes para mejorar la separación de compuestos
Tabla 3. Resultados de Análisis proximal preliminar de bioactivos que debe dar paso al análisis de éstos por
dos especies de Loranthaceae. cromatografía en fase Sólida SPE y posteriormente a
los análisis por cromatografía de gases.

57

Figura 6. Análisis de identificación preliminar de
compuestos bioactivos por cromatografía en capa fina. a.
tratamiento de placas cromatográficas. b. Placas
cromatográficas luego de elución y revelado de muestra,
evidencia del proceso de avance de identificación de
compuestos bioactivos.
-Evaluación de Fenoles totales y la Caracterización
del extracto por cromatografía de gases acoplado a
masas GC-MS serán ejecutadas, dada a limitantes de
reactivos y accesorios específicos que se requieren
éstas técnicas para su ejecución.
Ambientes de aprendizaje empleados: Laboratorio de
biodiversidad - Rotaevaporador IKA RV10 BASIC, Horno
se secado Drying Oven, mufla Themolyne DVS402,
Balanzas analíticas OHAUS.
4. Evaluación de metabolitos en el control biológico
Seguimiento del proceso infectivo de plántulas de
café de diferentes variedades, para monitoreo del
desarrollo de Hemileia vastatrix en hojas, a través de
la inoculación de esporas en cámaras húmedas in
vitro e in vivo, a partir de un número inicial de
esporas por mL del hongo [15]. Los cuales serán
tratados con metabolitos secundarios extraídos de
plantas de la familia Loranthaceae. Este mismo
seguimiento ser llevará a cabo en plántula jóvenes en
variedad caturra y castilla, de alrededor de 6 meses de
edad y bajo condiciones de invernadero.
Ambientes de aprendizaje empleados: laboratorio de
control biológico y nanotecnología - Microscopio
electrónico barrido EVO HD15, Microscopio óptico Carl
Zeiss Axio Lab A1, Estereoscopio Nikon Modelo CD-S
Cabinas de Flujo laminar Class II y Vivero.
5. Propagación in vitro de plantas hemiparásitas.
Se establecieron clones vegetales mediante cultivo in
vitro de plántulas hemiparásitas loranthaceae
obtenidos de explantes, donde se emplearon
modificaciones del medio de Murashige-Skoog [16].
Para el proceso de esterilización se procedió haciendo
desinfección del material vegetal de la siguiente
manera:
‫ڹ‬Se lavó inicialmente con agua y jabón, haciendo
cepillados, para luego realizar dos cambios con
extran y agua esterilizada, destilada en un volumen
de 1/1. Cada cambio por 5 minutos.
‫ڹ‬Se realizaron dos cambios en 100 mL de agua
destilada estéril + 1 gota de tween 80 (1/1000), Cada
cambio por 5 minutos. También se utilizo en 100 ml
de Hipoclorito de Sodio 5.25 % + 1 gota de tween 80
(1/1000) constante agitación durante 5 minutos.
‫ڹ‬Finalmente se enjuagó con agua destilada estéril 3
veces.
Para la Preparación Del Medio De Cultivo Se
utilizaron los siguientes reactivos -macro/micro
nutrientes, hormonas y reguladores de crecimiento-
mostrados en la tabla 4.
Los resultado de los primeros ensayos mostraron un
activación metabólica a las siguientes dos semanas de
realizado la siembra de los diferentes explantes
vegetales (Figura 6). Lo que evidencio un buen
rendimiento con las condiciones mostrados en cuanto
a la preparación de medios.
Figura 6. Explante de hemiparásita de la familia
Loranthaceae cultivado in vitro.
Ambientes de aprendizaje empleados: laboratorio de
micropropagación vegetal-biotecnología.
II. RESULTADOS
Los avances preliminares del proyecto a la fecha de acuerdo a
los resultados esperados, mostraron un avance de aproximado
del 35% según lo establecido en el cronograma de actividades,
dado alas limitaciones de accesorios y reactivos.
En estudio en campo de relación planta hospedera-
hemiparásita ha arrojado como resultado el registro de dos
especies pertenecientes a la familia Loranthaceae presentes en
el café y la comunidad las reconoce como pajarito o matapalo
y que se encuentran el etapa de ser clasificadas y herborizadas
(figura 2).
Además el cultivo del hongo mostró resultados de viabilidad
in vitro que permitirían hacer un análisis en condiciones
contralada del efecto de metabolitos secundarios de la
hemiparasita sobre el hongo para futuros ensayos (figura 3).
Los ensayos de análisis proximal permitieron elucidar las
diferencias en la cantidad de compuesto que se podrían
58
encontrar durante la extracción en cada una de sus partes, dado
a la variabilidad de componentes encontrados, como aceites
esenciales que son metabolitos secundarios tabla 2 y 3.
La extracción por reacción de hidrogenación térmicamente
asistida por lo método de reflujo, ha mostrado la presencia de
color rojo que indica la presencia de proantocianidinas,
compuestos bioactivos (figura 6b). Mientras que los extractos
obtenidos por percolación a temperatura ambiente, empleando
solventes de diferentes polaridades, ha mostrado presencia de
coloración verde, que puede deberse a presencia de ácidos
fenólicos simples.
Referente al establecimiento in vitro de plántulas se vio
viabilidad para posible establecimiento de un banco de germo
plasta de plántulas haciendo sustentable y sostenible de
plantas hemiparasitas (figura 6).
Por último, los estudios preliminares de este proyecto permite
dar continuidad con análisis, para evaluar la incidencia de los
metabolitos secundarios en la estructura nanoestructuras
celulares del hongo y ver su efecto por técnicas de
microscopia electrónica de barrido y microscopia de fuerza
atómica. De esta forma, lograr a futuro establecer un producto
comercial como control biológico. Amigable con la
agroecología sin compuesto de síntesis orgánica, que facilita la
contaminación y deterioro de la calidad de ciertos productos
como la tasa de café.
Tabla 4. Medio de cultivo para micro propagación de
hemiparásitas de la familia Loranthaceae.
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59


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(VWHDJUDGHFLPLHQWRQRVRORHVSDUDWRGRVORVSDUWLFLSDQWHVGHHVWHFRQFXUVRVLQRDTXLHQHVFUH\HURQHQ
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