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LABORATORIO DE BACTERIOLOGÍA

DEL IVIA
9 Laboratorio de Referencia para Bacterias
Fitopatógenas: convenio con el Ministerio de
Agricultura

9Proyectos de investigación nacionales e


internacionales sobre bacteriosis de frutales:
ƒAgrobacterium tumefaciens
ƒErwinia amylovora
ƒXhantomonas arboricola pv. pruni
INSTITUTO VALENCIANO DE INVESTIGACIONES AGRARIAS
Tumores causados por
Agrobacterium tumefaciens
9 Afecta a 643 especies vegetales.
9 Produce tumores principalmente en raíces,
cuello y a veces en la parte aérea.
9 Enfermedad distribuida por los cinco
continentes.
9 Patógeno de calidad en la UE (Dir. 93/33). Lotes de
plantas con síntomas no se pueden comercializar.
9 Provoca pérdidas económicas en patrones frutales,
viña y rosal, especialmente en vivero.
9 Hábitat: suelo, plantas con tumores (rizosfera).
Híbrido melocotonero X almendro GF677
Tumores causados por
Agrobacterium tumefaciens
9 Biología e epidemiología de la bacteria.

9 Desarrollo de protocolos de diagnóstico


de la enfermedad en plantas con y sin
síntomas: Transferencia a los laboratorios
de Sanidad Vegetal de las CC.AA..

9 Control de la enfermedad mediante


agentes de control biológico.

9 Evaluación de la sensibilidad de patrones


a la enfermedad en programas de mejora.
Control de los tumores causados por
Agrobacterium tumefaciens mediante
el agente de control biológico K84

9 Utilizada en más de 12 países de los cinco


continentes.
9 No registrada en ningún país de la UE (Australia,
Nueva Zelanda, EE.UU, Turquía, Irán,.. etc.) .
9 Eficaz como método preventivo en más de 20
especies de plantas cultivadas.

9 Tratamiento de semillas, estaquillas, cicatrices


foliares, raíces y plantas enteras.

9 Cepa mejorada K1026 (Australia, EE.UU, Turquía)


Eficacia práctica de la
lucha biológica con K84
y K1026 en España K84
% of plants with galls

% of plants with galls


100 100
Control Control
80 80 K84
K84
K1026 K1026
60 60

40 40

20 20

0 0
1 2 3 4 1 2 3 4

Assay Assay
Tumores causados por
Agrobacterium tumefaciens
9 En el IVIA hemos demostrado la
eficacia de los agentes de
biocontrol K84 y K1026 en el control
de los tumores causados por
Agrobacteirum tumerfaciens.

9 Ni K84, ni K1026 están disponibles


comercialmente.

9 Colaborado con una empresa para


el posible registro de la cepa K1026
en la U.E.
GRACIAS POR VUESTRA ATENCIÓN
% plantas con tumores

0
25
50
75
100
MARIANA
2624

AC 9912-03

ST-N2

AC 9903-02

VVA-1

AC 9908-09

MA 4001

AC 9904-03

LUCERO

CIRPAC
Sensibilidad patrones a Agrobacterium

AC 9917-26

PUMISELECT

LC-52
Tumores cuello
Tumores aéreos

AC 9917-01

TORINEL
Fuego Bacteriano
causado por Erwinia amylovora
9 Enfermedad: fuego bacteriano (“fire blight”) de
las Rosáceas.
9E. amylovora: Organismo de cuarentena en la UE.
9 Distribución geográfica: Europa, América del
Norte, Nueva Zelanda.
9Huéspedes
Cultivados Ornamentales o silvestres
Peral (Pyrus) Crataegus
Manzano (Malus) Cotoneaster
Membrillero (Cydonia) Pyracantha
Níspero (Eriobotrya) Sorbus
Rubus Stranvaesia (Photinia)
Prunus
9Síntomas: necrosis de flores, hojas y ramas.
Fuego Bacteriano en PERAL
Fuego Bacteriano en MANZANO
Fuego Bacteriano en NÍSPERO
Fuego Bacteriano en Cotoneaster spp.
Fuego Bacteriano en Pyracantha spp.
Fuego Bacteriano-Erwinia amylovora

9 Transmisión: plantas con síntomas o infecciones latentes,


insectos, lluvia, viento, técnicas culturales.

9 Impacto económico del Fuego Bacteriano:


- Considerada como la enfermedad más grave de los
frutales de pepita (peral, manzano y níspero).

9 Riesgo fitosanitario:
- Alto, introducida en España con plantas importadas de
países de la UE.

9 Identificación en España: primer foco en 1995. Varias CCAA.


Erradicados desde entonces.
Detección de E. amylovora en España
La Rioja Álava Vizcaya Guipúzcoa 1995
2000 2000 1999 Navarra 1996
León
2006 Valladolid Gerona 2003
2000
Huesca
Segovia 1998
1996 Lérida 1997
Zaragoza 2000
Guadalajara
1998
Madrid 1998
1995 1999
1996 2000
1997 2003
1998 2006

Erradicación obligatoria según RD 1190/1998, 1201/1999, 1512/2005


Control preventivo de E. amylovora

Diagnosis of E. amylovora
http://www.csl.gov.uk/science/organ/ph/diagpro/
Quick

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DIAGPRO (DIAGNOSTIC PROTOCOLS)


Eficacia de las medidas aplicadas

9 La combinación de inspecciones intensivas y programas


rápidos de erradicación general o selectiva ha tenido éxito.

9 Trece años después de la primera detección, España es


todavía Zona Protegida (ZP) para el fuego bacteriano.

9 Situación única: primer país europeo donde la


erradicación ha impedido hasta el momento la diseminación
generalizada del fuego bacteriano.
Xanthomonas arboricola pv. pruni

9Enfermedad: Mancha bacteriana


9Organismo de cuarentena en la UE
-PLANTAS HOSPEDADORAS
Especies del género Prunus:
Ciruelo europeo y japonés, Melocotonero, Nectarina,
Albaricoquero, Cerezo, Guindo, Almendro,
Paraguayo, Ciruelo Mirobolan y Prunus
ornamentales

-SÍNTOMAS:
Se observan en frutos (lesiones pardas, gomosas); hojas (manchas
y necrosis), y ramas, (chancros)

INSTITUTO VALENCIANO DE INVESTIGACIONES AGRARIAS


SINTOMATOLOGÍA

Fotos: Sanidad Vegetal. Valencia. M. Roselló. 2004

Foto: Sanidad Vegetal. Valencia. M. Roselló. 2006

Foto: Universidad de la República de Uruguay Foto: Sito Ufficiale della Regione Veneto. Italia.
-DISTRIBUCIÓN MUNDIAL (2006):
EPIDEMIOLOGÍA DE X arboricola pv pruni

9 Medios de transmisión: plantas con síntomas o infecciones


latentes, insectos, lluvia, viento, técnicas culturales.

9 Posee fase epifita (vive en la superficie de los huéspedes


sin provocar síntomas)

9 Sobrevive en hojas caídas varios meses, constituyendo una


fuente de inóculo

9 Impacto económico:
- Enfermedad muy grave, afecta a frutales de gran
importancia económica (melocotonero, ciruelo, nectarino,
albaricoquero, cerezo).
INTRODUCCIONES EN ESPAÑA DE LA BACTERIA X arboricola pv pruni

9 2001: Extremadura
9 De nuevo brotes en 2007
•Lleida
9 2004: Valencia. Aparición en un
•Zaragoza

vivero. Xap probablemente •Valencia


•Badajoz
introducida en el vivero con material •Alicante

vegetal

9 2004: plantas del vivero de Valencia, cultivadas en


Zaragoza.
9 Inspecciones en parcelas de melocotonero en Aragón con
síntomas en 2008
9 2006: síntomas en almendros en la zona de Alicante.
9 2008: síntomas de Xap observados en una plantación de
Albesa, Lleida.
Síntomas en ciruelo

INSTITUTO VALENCIANO DE INVESTIGACIONES AGRARIAS


Chancros en ciruelo

INSTITUTO VALENCIANO DE INVESTIGACIONES AGRARIAS


Manchas bacterianas en hojas de ciruelo

INSTITUTO VALENCIANO DE INVESTIGACIONES AGRARIAS


Alta incidencia de X. arboricola pv. pruni
en el vivero de Valencia

Fotos: Montse Roselló

9 Todas las plantas de frutales de hueso en el vivero


fueron destruidas.
INSTITUTO VALENCIANO DE INVESTIGACIONES AGRARIAS
INSPECCIÓN PARCELAS ARAGÓN 2008

INSTITUTO VALENCIANO DE INVESTIGACIONES AGRARIA


Almendros afectados por Xap

Foto: Montse Roselló

INSTITUTO VALENCIANO DE INVESTIGACIONES AGRARIAS


Diagnosis de X. arboricola pv. pruni
9 DIAGNOSIS Y DETECCIÓN:
• Aislamiento
• PCR (CoF/CoR)
9 IDENTIFICACIÓN:
• Perfil de ácidos grasos
• Características bioquímicas
• API 50 CH
• Immunofluorescencia (IPV-Bologna)
• ELISA (Adgen)
• ERIC y BOX PCR
• PCR (CoF/CoR)
• Inoculación
- HR (tabaco + 72h., tomate + 48h.)
- Ensayo en hoja (ciruelo, melocotonero, almendro, GF 305)
- Plantas en maceta (ciruelo, melocotonero, almendro)
INSTITUTO VALENCIANO DE INVESTIGACIONES AGRARIAS
COST Action 873: Bacterial diseases
of stone fruits and nuts
Xap Diagnostics - developing a diagnostic protocol for
Xanthomonas arboricola pv. pruni. dedicated to producing a
validated molecular diagnostic test for this stone fruit
disease.

Pantoea agglomerans complete genome sequencing - The


complete genomes of biocontrol and clinical strains of this
bacterium are being sequenced in a consortium of COST873
laboratories from CH and ES within a STF.

Copper resistance in Xanthomonas


Early detection of resistance. COST873 Task 16.
CONCLUSIONES
9 Inspecciones: básicas para la prevención de la
introducción de bacteriosis; material muestreado debe ser
analizado en laboratorio.

9Necesidad de una óptima coordinación entre toma de


muestras y análisis en laboratorio para un diagnóstico fiable.

9Se han desarrollado métodos de análisis para estas


bacteriosis de los frutales, se han evaluado y transferido a
los Servicios de Sanidad Vegetal de las CCAA.
CONCLUSIONES
9 El control de las bacteriosis debe ser integrado para ser
eficaz y basarse en el conocimiento de la biología de cada
patógeno.
9La carencia de métodos eficaces de control para los
patógenos de cuarentena, E amylovora y X arboricola pv pruni,
exige tomar medidas rápidas y drásticas de erradicación.
9Se han evaluado métodos de control biológico de A
tumefaciens que han demostrado ser efectivos.

9Se está trabajando en el estudio de las bases biológicas de


las bacteriosis para un control eficaz.
Agradecimientos

9Equipo de Bacteriología del IVIA.


9Subdirección General de Agricultura
Integrada y Protección Vegetal, Ministerio
de Medio Ambiente y Agricultura.

GRACIAS POR SU ATENCIÓN

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