Práctica número: 6

Siembra en tubo

Integrantes: Terán Dávila Ingrid, Rojas Balleza Karla Paola, Hernandez Mota Eduardo,
Sanchez Sanchez Crhistian, Paredes Bonhomme Elthon Carlos.

Asignatura: Microbiología

Licenciatura QFBT

Periodo 2022-1

Fecha de entrega:  13 de junio de 2022

Docente: Angela Jazmin Venegas Colin

RESUMEN

Se efectuó la elaboración de siembra en tubo y su aplicación en el laboratorio para así tener

conocimiento sobre esta técnica para poder emplearla adecuadamente en nuestro ámbito
laboral. Teniendo como finalidad el aislamiento de bacterias extraídas de orina humana,
apreciando el cultivo y su crecimiento, realizando correctamente el experimento.

PALABRAS CLAVE: Técnica, aislamiento, bacterias, orina humana, cultivo, crecimiento.

INTRODUCCIÓN caldo simple. Se toma el material a diluir y

El agar es una sustancia carragenina, un
polisacárido sin ramificaciones obtenido
de la pared celular de varias especies de
algas de los géneros gelidium.
Proporcionando los agarra fuentes de
carbohidratos, nitrógeno y vitaminas.
El agar nutritivo es un medio de cultivo
más usado ya que es un medio no
selectivo, permitiendo el crecimiento de
cualquier medio bacteriano.
La composición química del medio EMB
contiene azul de metileno, eosina.
Tipos de siembra (Tubo)
Siembra por dilución: Se toma el tubo
de ensayo con medio líquido, como el
se siembra en el tubo con el uso del asa
cargada con el material bacteriológico, se
agita, con movimientos moderados.
Siembra por estrías en superficie: Se
siembra el material en la superficie de el
agar inclinado en un tubo de ensayo, allí
se extiende por toda la superficie con el
asa bacteriológica, previamente
esterilizada y cargada con el material a
sembrar, haciendo estrías no muy
amplias, pero tampoco muy estrechas. Se
inicia por la parte más profunda de la
superficie inclinada y se termina la estría
en la parte más cerca de la boca del tubo.
Siembra por punción
Como es obvio, el instrumento de siembra El tubo de cultivo orina es importante ya
a emplear será la aguja de platino y el que está compuesto por diferentes
medio de cultivo sólido, generalmente, en medios selectivos y diferenciales que
tubo de ensayo. Las manipulaciones y la permiten la identificación y el aislamiento
observancia de las precauciones de de manera presuntiva de
asepsia, son similares que cuando se microorganismos, facilitando el
utiliza el asa. La particularidad que tiene diagnóstico de varias infecciones leves o
este método, es que la aguja (con el graves recurrentes y asintomáticas que
inoculo) debe atravesar pueden generarse en el tracto urinario.
perpendicularmente el medio de cultivo.
OBJETIVOS

Técnicas de siembra (tubo) General

· Identificar las características
Siembra por inoculación o agitación: físicas de los diferentes agares
Con un asa bacteriológica, esterilizada, se utilizados en tubos
toma cantidad de inoculo, se introduce en de ensayo, sembrando medios de
el centro del medio líquido, agitándose, no cultivo sólidos, líquidos y
tocando la pared del tubo. semisólidos.
Siembra por estría ( en tubos de agar
inclinado): Específicos
Muestra de material en asa de siembra,
deslizar en zigzag, empezar por superficie · Realizar diferentes tipos de
más profunda. técnicas de inoculación de
acuerdo a las necesidades del
Siembra por picadura: cultivo y del medio sembrado.
Asa recta, tomar la muestra, sembrar en · Identificar el aislamiento de
agar semisólido, en el tubo de ensayo bacterias mediante los distintos
hasta que la muestra quede bien tipos de siembra.
impregnada al agar. · Conocer la técnica de estriado
en tubo.
Siembra por vertido en placa:
Diluciones en varios tubos, pipeta 1cc de
muestra o dilución, agregar tubo de HIPÓTESIS
ensayo estéril, se agrega medio licuado, Se identificarán las características
mantener a 55°C, movimientos rotatorios, adecuadas de los diferentes medios de
solidificar. cultivo, para así determinar el crecimiento
de bacterias adecuado según su cultivo y
tener un crecimiento bacteriano
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA progresivo.
Se realizará la siembra en tubo haciendo
uso de agar nutritivo, agar TSL y agar METODOLOGÍA
SIM, identificando sus características
físicas, así como sembrar medios de Siembra en tubo con agar inclinado,
cultivos sólidos y semisólidos. solo estriado:
a. Esteriliza la zona de trabajo
JUSTIFICACIÓN enjugándose con jabón y posteriormente
limpiándola con alcohol etílico.
b. Flamea con el mechero
c. Una vez estéril nuestra zona de trabajo
se deja el mechero encendido para crear
una atmósfera de esterilidad alrededor del
área de trabajo.
d. Tomar un asa de nicromo en punta y
esterilizar en el mechero.
e. Una vez fría el asa, tomar muestra,
siempre considerando un halo de
esterilidad alrededor del mechero de
aproximadamente 15 cm.
f. Destapa el tubo y flamea la boca del
mismo
g. Realiza la descarga sobre la parte más
profunda del pico de flauta del agar y
estría hacia la parte más alta, con cuidado
de no romper el medio.
h. Retira el asa y esteriliza el mechero.
i. Tapa el tubo,flameando antes de tapar
la boca del mismo.
j. Etiqueta e incuba a 37 °C en estufa
incubadora por 48 hrs.
k. En caso de no poder checar
crecimiento, guardará 2°C.
Siembra en tubo con agar semi sólido:
a. Realiza los pasos de la siembra en agar
inclinado de la a -f.
b. Introduce el asa picando el medio
exactamente por la mitad, hasta ¾ del
medio sin llegar hasta el fondo.
c. Retira el asa, procurando pasar por
donde mismo que se introdujo en el
medio.
d. Esteriliza el asa en el mechero.
e. Tapa el tubo, flameando antes de tapar
la boca del mismo.
f. Etiqueta e incuba a 37 °C en estufa
incubadora por 48 hrs.
g. En caso de no poder checar
crecimiento, guardar a 2 °C.
Siembra en tubo con caldo:
a. Realiza los pasos de la siembra en agar
a inclinado de la a-f.
b. Introduce el asa de nicromo en el caldo
y agita dentro de él haciendo movimientos
en círculo.
c. Retira el asa,
d. Esteriliza el asa en el mechero.
e. Tapa el tubo, flameando antes de tapar
la boca del mismo.
f. Etiqueta e incuba a 37 °C en estufa
incubadora por 48 hrs.
g. En caso de no poder checar
crecimiento, guardar a 2 °C.
Siembra en tubo con agar inclinado,
picadura y estriado:
a. Esteriliza la zona de trabajo
enjugándola con jabón y posteriormente
limpiándola con alcohol etílico.
b. Flamea con el mechero
c.Una vez estéril nuestra zona de trabajo
se deja el mechero encendido para crear
una atmósfera de esterilidad alrededor del
área de trabajo.
d. Tomar un asa de nicromo en punta y
esterilizar en el mechero.
e.Una vez fría el asa, tomar muestra,
siempre considerando un halo de
esterilidad alrededor del mechero de
aproximadamente 15 cm.
f. Destapa el tubo y flamea la boca del
mismo
g. Realiza la descarga sobre la parte más
profunda del pico de flauta del agar,
picando el medio sin tocar el fondo y al
sacar, procurando hacerlo por donde
mismo que se introdujo,se estría hacia la
parte más alta, con cuidado de no romper
el medio.
h. Retira el asa y esteriliza el mechero.
i. Tapa el tubo, flameando antes de tapar
la boca del mismo.
j. Etiqueta e incuba a 37 °C en estufa
incubadora por 48 hrs.
k. En caso de no poder checar
crecimiento, guardar a 2 °C
RESULTADOS
Fig 1. Siembra en tubo con picadura,
estriado y semisólido
ANÁLISIS DE RESULTADOS
Como se observa en la figura 1. se pudo
identificar correctamente el aislamiento de
bacterias mediante los distintos tipos de
siembra, así como las técnicas que se
necesitan saber para poder lograr una
correcta siembra, en la caso del caldo
nutritivo no se pudo llevar a cabo como lo
esperábamos, por lac condiciones en las
que se fue implementada ya que las
instrucciones que marcaba el proveedor
no contenían un paso fundamental,
observando que al hacer el cultivo no se
dio la proliferación.
CONCLUSIONES
Se identificaron las características de las
diferentes siembras en tubo, con ello
aislando las bacterias encontradas,
utilizando medios de cultivo sólidos,
líquidos y semisólidos mediante la técnica
de estriado en tubo.
REFERENCIAS
-Luciana Hernández. 25 de Octubre del
2019. Tubos en medio de cultivo.
Microbiología. Recuperado de:
https://practicasdemicrobiologia.wordpress
.com/uiojmn
-Programa chuletas. 4 de diciembre del
2015. Siembra en tubo de medios
líquidos. Recuperado de:
https://www.xuletas.es/ficha/siembra-tubo
-Baixardoc. Octubre 2017. Técnicas de
siembra en tubo. Métodos y técnicas para
cultivos. Recuperado de:
https://baixardoc.com/