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Realiza Análisis
Citoquímicos a líquidos
y secreciones
corporales
Manual de Prácticas de laboratorio.
QFB. Silvia Medina Arreguín
1
Contenido
PRESENTACIÓN ................................................................................................................................ 3
REGLAS DE TRABAJO EN EL LABORATORIO ……………………………………………………………………………………4
PRACTICA N° 1 .................................................................................................................................. 5
EXAMEN GENERAL DE ORINA ( EGO )
PRACTICA N° 2 ................................................................................................................................ 11
ESPERMATOBIOSCOPÍA DIRECTA
PRACTICA N° 3 ................................................................................................................................ 18
CITOLOGÍA DE MOCO NASAL
PRÁCTICA N° 4 ............................................................................................................................ 23
CITOLOGÍA DE MOCO FECAL
PRACTICA No 5................................................................................................................................ 27
SANGRE OCULTA EN HECES
FUENTES DE INFORMACIÓN ......................................................................................................... 31
Las actividades prácticas realizadas dentro del laboratorio son formativas; porque permiten
al estudiante desplegar habilidades analíticas y experimentales mediante la observación y el
desarrollo de experimentos, utilizando la capacidad de un manejo ordenado de muestras biológicas,
sustancias químicas, material y equipo de laboratorio como por ejemplo el microscopio óptico y la
centrifuga, todo ello aplicando normas de seguridad.
Cada una de las prácticas presenta los objetivos que se persiguen en el desarrollo de la
misma, una breve introducción al tema sobre el que se trata, así como las competencias genéricas,
disciplinares y profesionales que han de lograrse. Contiene también un listado de los recursos
necesarios para su realización así como los procedimientos redactados de manera detallada.
Están incluidas además; figuras e imágenes que sirven como apoyo visual para la mejor
comprensión del uso de los materiales.
Hemos convenido incluir también un breve cuestionario que el estudiante deberá resolver
consultando fuentes de información sugeridas o investigadas por él con la finalidad de ampliar sus
conocimientos.
1. Durante las sesiones, siempre deberá usar una bata de laboratorio blanca, limpia,
bien abotonada, que deberá quitarse antes de salir del laboratorio.
2. Presentarse con el manual de prácticas y haber leído la práctica que corresponda
a esa sesión.
PROCEDIMIENTOS DE LABORATORIO
1. Antes y después de cada sesión de práctica los alumnos deberán limpiar las
mesas de trabajo.
OBJETIVO: Realizar un examen general de orina para determinar las características físicas,
químicas y citoquímicas, de la muestra.
C O M P E T E N C I A S A D E S A R R O L L AR
COMPETENCIA PROFESIONAL COMPETENCIA DISCIPLINAR COMPETENCIA GENÉRICA:
Realiza examen citoquímico de CE 14: Aplica Normas de 5. Desarrolla innovaciones y
una muestra de orina seguridad en el manejo de propone soluciones a partir de
sustancias, instrumentos y equipo métodos establecidos.
en la realización de actividades 5.1 Sigue instrucciones y
de su vida cotidiana procedimientos de manera
reflexiva, comprendiendo como
cada uno de sus pasos contribuye
al alcance de un objetivo
5.6 Utiliza tecnologías de la
información y la comunicación
para procesar e interpretar
información.
INTRODUCCIÓN:
La orina constituye un ultra filtrado del plasma sanguíneo, a través del cual se desechan desechos
tóxicos como la creatinina, este proceso en general permite mantener el equilibrio hídrico del
organismo.
El examen general de orina EGO, es una evaluación física, química y microscópica de la orina, que
permite medir y detectar diversos metabolitos y residuos de sustancias químicas que son
excretadas por las vías urinarias.
Dentro de la información que podemos obtener en este examen se encuentran las características
físicas las cuales comprenden: el aspecto, el olor, el color y grado de turbidez así como la
densidad.
Por su parte en análisis químico nos permite evaluar las diversas sustancias presentes en la orina,
mediante una tira reactiva que contiene unas almohadillas impregnada de reactivos químicos que
cambian de color al ponerse en contacto con las sustancias que queremos investigar.
PROCEDIMIENTO
Examen físico
1.- Vierte parte de la muestra en un tubo de ensaye transparente y que pueda usarse para
centrífuga (fig 1)
2.-Sosten el tubo con la muestra frente a una fuente de luz, para evaluar y registrar el color de la
orina.(fig. 2)
3.- Observa el aspecto de la orina: apreciar la transparencia o el grado de turbidez. ( clara,
nublada, turbia)
4.-Detecta cualquier olor inusual. El olor de la orina es suigeniris, pero en determinados casos
podrá tener un olor amoniacal (por infección urinaria) o dulzón ( cetonuria, ayuno prolongado,
diabetes mellitus)
5.- La densidad se determinará con la tira reactiva.
Registre sus observaciones en una tabla
http://www.slideshare.net/StarWarsFan/realizar-un-examen-general-de-orina-12145352
Color
Olor
Aspecto
Densidad
http://www.slideshare.net/StarWarsFan/realizar-un-examen-general-de-orina-12145352
Examen microscópico
1.- Centrifuga la muestra por 5 minutos a 2500 revoluciones por minuto (rpm) la centrifugación
concentrará en el fondo del tubo todos los sedimentos
2.- Con cuidado retire el sobrenadante y mezcle bien el sedimento como se muestra en la imagen
que se presenta. Mezclar bien el sedimento asegura una buena distribución de los elementos
presentes.
3.- Pon una gota de sedimento bien mezclado en un portaobjetos y coloca un cubreobjetos sobre la
gota de la muestra.
Examina la muestra con el microscopio (aumento 40X)
5.- Reporta los resultados de su observación. Asegúrate que haya un atlas de sedimento de orina
cerca cuando realices el examen de sedimento para que puedas comparar lo encontrado en tu
muestra
http://www.slideshare.net/StarWarsFan/realizar-un-examen-general-de-orina-12145352
Desecha la muestra, la tira reactiva y el recipiente que contenía la muestra de manera adecuada.
REPORTA TODOS TUS RESULTADOS (utiliza para ello una tabla de Word).
1.-Menciona los colores que clínicamente puede presentar una muestra de orina y cuál es la causa
2.- Explica por qué una muestra de orina puede tener un olor amoniacal
3.- Menciona la utilidad de realizar un EGO.
4.- Menciona que enfermedades pueden detectarse a través de un EGO.
5.- Menciona las medidas de seguridad al realizar un EGO
Indicadores de contenido
Total
ESPERMATOBIOSCOPÍA DIRECTA
OBJETIVO: Realizar una espermatobiosciopía directa para indagar si la calidad y cantidad de líquido
seminal son las adecuada para lograr la fertilización.
C O M P E T E N C I A S A D E S A R R O L L AR
FUNDAMENTO
La Espermatobiosciopía es, si no el más importante, uno de los más importantes estudios para
diagnóstico de infertilidad en hombres. Es un estudio que debería ser de rutina para los
pacientes que han tenido dificultades para ser padres, acompañado a su vez de algunos otros
estudios que el médico especialista sugiera. La espermatobiosciopía directa es una técnica que se
practica como parte del protocolo de estudio de una pareja con problemas de fertilidad, por su
relativa simplicidad, se practica antes de someter a la mujer a una serie de estudios más
complicados.
RECURSOS NECESARIOS
PROCEDIMIENTO
EXAMEN FÍSICO
Volumen Viscosidad y tiempo de licuefacción Aspecto
Después de transcurrida la
1.- mida el 1.-La licuefacción debe de ser total antes licuefacción el líquido seminal
volumen con de 30 minutos adquiere un aspecto homogéneo
ayuda de una 2.- Para valorar la viscosidad, sumergir la
probeta graduada varilla de vidrio o el aplicador de madera
en la muestra y medir la longitud del
filamento (normal 5 a 10 mm. Otro criterio
es que debe gotear libremente
Para determina el pH utilice un papel indicador, el esperma recién emitido tiene un valor de pH
ligeramente alcalino que varía de 7.3 a 7.5, esta determinación se hace lo más pronto posible ya
que en contacto con el medio ambiente el smen se va alcalinizando pudiendo llegar hasta un pH de
8
1.- Después de que la licuefacción se ha completado, se coloca una gota de semen entre
portaobjetos y cubreobjetos
2.-Para medir la motilidad, se utiliza el objetivo seco fuerte del microscopio y se cuenta por
separado el número se espermatozoides inmóviles o acinéticos: con motilidad in situ y con
movilidad de progresión (la que puede ser rápida o lenta) presentes en 10 campos
(aproximadamente 200 espermatozoides como mínimo)
5.- La morfología se puede apreciar desde el paso 2 simplemente observando las formas de los
espermatozoides. Sin embargo para una mejor observación se realiza un frotis y se tiñe con
Wright y observar con objetivo de inmersión, contar al menos 200 espermatozoides y reportar en
porcentaje.
2.- Cargar la pipeta de Thoma para glóbulos blancos, esto se logra aspirando el semen hasta la
marca 0.5 y luego se aspira el líquido de dilución hasta la marca de 11 (dilución 1:20), si el número
de espermatozoides es muy bajo conviene aspirar semen hasta la marca de 1 (dilución 1:10)
3.-Se agita vigorosamente la pipeta hasta que el líquido en la porción del ámpula sea homogéneo
4.- Se desechan las tres primeras gotas y se carga la cámara cuenta glóbulos Fig. 3
5.- Se cuentan los espermatozoides en 4 cuadros grandes Fig.. 4. Para el cálculo se multiplica por
la dilución y por la corrección de profundidad de la cámara para obtener la cifra por milímetro
cúbico finalmente por 1000 para obtener la cifra por mililitro.
Fig. 1
CÁMARA DE NEUBAUER
http://www.marienfeld-
superior.com/index.php/334/articles/camaras-
de-recuento.html
Fig. 2
Manera correcta de deslizar el portaobjetos
sobre la superficie de la cámara de Neubauer
Fig. 3
Llenado de la cámara de Neubauer
CALCULOS
Normal
VISCOCIDAD
Presenta filamentos de 2-5 mm
LICUEFACCIÓN Completa a los 60 minutos.
7.3- 7.5
PH
Más del 25 % de
espermatozoides anormales
tienen importancia en relación
con la esterilidad y subfertilidad
MOVILIDAD 80% de espermatozoides con
movilidad progresiva y rápida
(A los 30 min.)
Después de 2 hrs de un 60 a un
70%
60 millones / mL
150-200 millones en la
RECUENTO
eyaculación completa
Siendo 40 millones / mL la
cantidad mínima normal.
Realiza un dibujo de las formas normales y anormales que pueden presentar los espermatozoides.
Indicadores de contenido
Total
C O M P E T E N C I A S A D E S A R R O L L AR
COMPETENCIA COMPETENCIA COMPETENCIA GENÉRICA:
PROFESIONAL DISCIPLINAR CE 14: Aplica 5.Desarrolla innovaciones y
Realiza un análisis citológico Normas de seguridad en el propone soluciones a partir de
de una muestra de moco nasal manejo de sustancias, métodos establecidos.
para identificar el tipo de instrumentos y equipo en la 5.1 Sigue instrucciones y
células que están presentes en realización de actividades de procedimientos de manera
ella. su vida cotidiana reflexiva, comprendiendo
como cada uno de sus pasos
contribuye al alcance de un
objetivo
5.6 Utiliza tecnologías de la
información y la comunicación
para procesar e interpretar
información.
INTRODUCCIÓN.
Esta práctica se realiza para ver qué tipo de celularidad está presente en el moco nasal nos
orientará si el problema es de tipo infeccioso o alérgico o su combinación. Se realiza mediante un
frotis de la mucosa del cornete inferior, empleando un hisopo adaptado de (rinoprobe). Obtenida la
realiza muestra se colorea y se realiza el conteo celular diferencial.
La mucosa o membrana mucosa es un tipo de tejido que reviste la cavidad nasal. Las membranas
mucosas son generalmente tejidos húmedos, bañados por secreciones, tal como ocurre en la
nariz. La composición del moco es el 95% es agua, 3% elementos orgánicos y 2% minerales. La
cantidad secreta es de 0´1 a 0´3 ml/kg/.
Propiedades físicas: El moco nasal tiene una viscosidad que cambia con el grado de hidratación
y el contenido en mucina. Su pH experimenta variaciones nictamerales. Su propiedad física más
característica es su poder tampón: las soluciones ácidas o alcalinas son normalizadas a un pH de
7 en pocos minutos.
SIGNIFICADO CLINICO:
Esta técnica nos sirve para identificar las células que están presentes en el exudado nasal.
PROCEDIMIENTO.
1. Toma una pequeña porción de moco nasal con un hisopo estéril de uno de los cornetes
2. Realiza un extendido en un portaobjetos limpio y desengrasado.
3. Dejar secar
4. Tiñe con la tinción de Wright: cubrir el frotis con colorante de Wright durante 8 minutos, sin
volcar agregar una cantidad igual del amortiguador de Wright soplando ligeramente para
mezclar ambos líquidos, dejar actuar de 6 a 10 minutos, se formara una superficie de brillo
metálico. Volcar y lavar con agua corriente y dejar secar.
5. Se observa al microscopio en objetivo de 100 X y se realiza un recuento de 100 células
mononucleares y polimorfonucleares.
6. Realizar una tinción de Gram para observar presencia de bacterias.
INTERPRETACIÓN
Eosinófilosen el moco nasal por encima de 20 por campo corroboran la alergia en la etiología.
Neutrófiloselevados relacionado con la presencia de infecciones bacterianas agudas.
Linfocitos sugiere procesos infecciosos de tipo crónico.
Células caliciformes cuando predominan sugieren la presencia de alergia.
RESULTADOS
Dibuja la citología encontrada la cantidad de las diferentes células encontradas.
CONCLUSIONES PERSONALES
Indicadores de contenido
Total
OBJETIVO
Realizar las técnicas de citología del moco fecal, para identificar la presencia de células que
permitan diagnosticar procesos infecciosos.
C O M P E T E N C I A S A D E S A R R O L L AR
COMPETENCIA PROFESIONAL COMPETENCIA DISCIPLINAR COMPETENCIA GENÉRICA:
Realiza un análisis citológico de CE 14: Aplica Normas de 5. Desarrolla innovaciones y
una muestra de materia fecal. seguridad en el manejo de propone soluciones a partir de
sustancias, instrumentos y equipo métodos establecidos.
en la realización de actividades 5.1 Sigue instrucciones y
de su vida cotidiana procedimientos de manera
reflexiva, comprendiendo como
cada uno de sus pasos contribuye
al alcance de un objetivo
5.6 Utiliza tecnologías de la
información y la comunicación
para procesar e interpretar
información.
INTRODUCCIÓN.
La observación microscópica del moco fecal en fresco con azul de metileno tiene utilidad para
evaluar la celularidad de la muestra y la posible presencia de parásitos. Aunque la positividad de la
citología de moco fecal es relativamente baja en la mayoría de las diarreas agudas que son de
etiología viral, al igual que el bajo porcentaje del aislamiento en coprocultivos.
RECURSOS NECESARIOS
1.- Toma una pequeña porción de moco presente en la muestra o materia fecal
4.- Tiñe con la tinción de Wright: cubrir el frotis con colorante de Wright durante 8 minutos, sin
volcar agregar una cantidad igual del amortiguador de Wright soplando ligeramente para
mezclar ambos líquidos, dejar actuar de 6 a 10 minutos, se formara una superficie de brillo
metálico. Volcar y lavar con agua corriente y dejar secar.
Indicadores de contenido
Total
COMPETENCIA PROFESIONAL:
Realizar un análisis de detección de sangre oculta en las heces.
COMPETENCIA GENERICA
5. Desarrolla innovaciones y propone soluciones a problemas a partir de métodos establecidos. Atributo 5.1
Sigue instrucciones y procedimientos de manera reflexiva, comprendiendo como cada
uno de sus pasos contribuye al alcance de un objetivo.
COMPETENCIA DISCIPLINAR
10.- Relaciona las expresiones simbólicas de un fenómeno de la naturaleza y los rasgos observables a simple
vista o mediante instrumentos o modelos científicos.
14.- Aplica normas de seguridad en el manejo de sustancias, instrumentos y equipo en la realización de
actividades de su vida cotidiana
Introducción.
Esta prueba se utiliza principalmente para la detección del cáncer de colon y recto, pero también
puede detectar la sangre que proviene de cualquier otro lugar del tracto digestivo, de manera que
una prueba positiva puede indicar la existencia de una entre varias enfermedades diferentes.
Alguna de las causas más frecuentes de un resultado positivo en la prueba de sangre oculta en
heces son las siguientes:
- Úlcera péptica: Inflamación del intestino, que en ocasiones está producida por una infección
- Cáncer de estómago, colon o recto
- Hemorroides
- Medicamentos que irritan el tracto digestivo, como los antiinflamatorios no esteroideos
Si la sangre proviene del tracto gastrointestinal (GI) superior la materia fecal generalmente es de
color negro. En cambio si el sangrado ocurre en el GI inferior el color no varía presentándose rojo.
Suele haber anemia por deficiencia crónica de hierro pudiendo ser severa.
Las personas mayores de 45 años deben realizarse un estudio de sangre oculta en materia fecal
junto con una sigmoidoscopía aproximadamente cada 3-5 años.
Debe investigarse SOMF en pacientes con dolor abdominal sin causa aparente.
Debe recolectarse al menos 2-3 muestras en días consecutivos incrementándose así la
sensibilidad en una 60-70 %
Se demuestra la presencia de SOMF utilizando tests que determinen la presencia de hemoglobina.
Estos se basan en la actividad peroxidasa de la hemoglobina.
Esta práctica se hará con el Hematest, como todas las pruebas en papel de guaiaco para la sangre
oculta, está basada en la oxidación de los compuestos fenólicos presentes en el guaiaco con la
producción de compuestos quinonas de color azul. Debido a su similitud con los grupos prostéticos
Variables preanalíticas:
Algunos alimentos pueden dar falsos positivos por contener mioglobina (carne) o hierro.
Las bacterias en el intestino y los vegetales ingeridos, tales como el rábano picante o los nabos
tienen actividad peroxidasa, por tanto, pueden aumentar falsamente la actividad perioxidásica
fecal.
Cuando se emplean técnicas basadas en la acción peroxidasa de la hemoglobina es importante
que el paciente realice la dieta previa.En el caso de usar técnicas inmunológicas no es necesaria la
realización de la dieta.
Algunos medicamentos pueden también dar falsos positivos como el ácido acetilsalicílico,
esteroides, warfarina.La presencia de grandes cantidades de vitamina C puede dar valores
falsamente negativos.
Algunos alimentos pueden afectar los resultados del examen. No consuma los siguientes alimentos
durante 3 días antes del examen:
Carnes rojas
Cantalupo (melón)
Brócoli crudo
Nabos
PROCEDIMIENTO
CONCLUSIONES PERSONALES
RESULTADOS
CUESTIONARIO
1.- ¿Para qué es útil la prueba de sangre oculta en heces?
2.- ¿De dónde proviene la sangre que se detecta en el análisis de sangre oculta en heces?
3.- Nombra otra prueba para detectar la sangre que está oculta en las heces que se encuentre en
el mercado?
4.- ¿Qué puede dar falsos positivos en esta prueba?
5.- ¿Qué puede dar falsos negativos en esta prueba?
6.- ¿Cuáles serán los valores normales de esta prueba?
Indicadores de contenido
Total
13.- http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003393.htm
16.http://sistemainterno.com/web/gaamsa/files/2012/11/gaamsa_ficha_tecnica_sangre_oculta_en_
heces_hema_screen.pdf 2016
17.-http://www.medicina21.com/doc.php?apartat=Tecnicas&id=1213 2016