UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE GROHMANN

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

CARRERA PROFESIONAL DE INGENIERÍA PESQUERA

PRACTICA N° 8

TEMA: “TIPOS DE TÉCNICAS EN EL USO DE

DIAGNOSTICO DE ENFERMEDADES”

Alumno: Oscar Fernando Valdivia Cáceres

Código: 2018-107046

Docente: MSc. Ederson Juan Montalico Pongo

Curso: Sanidad Acuícola

Tacna- Perú
2022
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FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
CARRERA PROFESIONAL DE INGENIERÍA PESQUERA

PRACTICA N° O8
TIPOS DE TÉCNICAS EN EL USO DE DIAGNOSTICO DE
ENFERMEDADES
I. INTRODUCCION

Las Técnicas Diagnósticas son un tipo de método o prueba que se usa como
ayuda para diagnosticar una enfermedad o afección. Las pruebas de
Imaginología y las pruebas para medir la presión arterial, pulso y temperatura son
ejemplos de técnicas diagnósticas.

II. OBJETIVOS

➢ Reforzar los conocimientos de los estudiantes con respecto a el uso que

tiene las técnicas de diagnostico en la sanidad acuicola
➢ Reforzar los conocimientos teóricos impartidos en clase acerca de la
utilidad de las técnicas de diagnostico

III. MATERIALES

Equipos y materiales

➢ Laptop, computador o celular

➢ Hoja de apuntes

IV. PROCEDIMIENTO

El estudiante deberá responder de forma breve las siguientes preguntas.

La respuesta debe ser individual, por lo que cada estudiante debe elaborar su propio
informe y subirlo al aula virtual
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V. CUESTIONARIO

1. Explique cómo se realiza la técnica de tinción GRAM

Tinción de Gram
Primeramente escogemos u obtenemos algún pez para hacer la técnica
Luego con ayuda de un kit de disección procedemos a hacer la necropsia en el pez
Aquí procedemos a hacer los muestreos en distintos órganos del pez
Metemos un hisopo dentro del órgano para obtener muestras
Una vez sacado la muestra lo llevamos a un portaobjetos y ponemos ahí las muestras
en zigzag para cada muestra que obtengamos
Para luego llevarlo a rotular la muestra
Una vez rotulada agregamos tinción de Gram en las muestras para así teñirlas, después
lavamos las muestras con agua destilada con mucho cuidado ya que se puede eliminar
el colorante y por ultimo lo llevamos a un laboratorio para que proceda su
investigación

2. Explique cómo se realiza un cultivo celular de una bacteria patógena

Técnica de cultivo celular
Primeramente obtenemos el pez para hacer la técnica, luego procedemos a hacer una
necropsia con ayuda de un kit de disección, para después empezar a tomar las
muestras frotando diferentes órganos del pez para tener distintas muestras
Una vez tomada la muestra lo frotamos en un porta objetos en forma de zigzag cada
muestra
Después lo llevamos a una placa Petri en forma de zigzag, con bastante asepsia para
evitar que se contamine
Después realizamos el cultivo en una campana extractora
Una vez que esté listo lo llevamos a incubar las muestras y así proceder al crecimiento
de la bacteria, finalmente después de días de incubación llevarlas a analizar en un
microscopio

3. Explique como se realiza la técnica de inclusión en parafina

Inclusión de parafina
Primeramente tener un pez para hacer las muestras, con ayuda del kit de disección
proceder a hacer la necropsia, luego las muestras obtenidas llevarlas a un frasco con
formol y sellarlo, luego llevarlos a unos casetes para su deshidratación para luego
sumergir los casetes en alcohol (puede ser el etanol) así retiramos todo el agua de los
órganos con ayuda del alcohol
Después se sumerge los casetes en un inclusión de parafina, con ayuda del alcohol
hacemos la inclusión en parafina, una vez secos lo llevamos al microscopio para
obtener algunos resultados de las muestras, en las muestras se usa albumina que sirve
para pegarlos en los porta objetos
Luego lo llevamos a desparafinar las muestras para después rehidratar las muestras
con agua, luego teñimos los cortes de los tejidos con ayuda de la hematoxilina eosina,
y así poder llevarlo al microscopio y obtener los resultados
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4. Explique cómo se realiza una técnica de inmunofluorescencia indirecta o ELISA

Primeramente escogemos el pez para las pruebas, luego hacer la necropsia con
ayuda de un kit de disección, con ayuda de un hisopo frotamos los órganos del
pez, luego llevarlo a un porta objetos frotándolo en forma de zigzag y proceder a
rotular la muestra
Así poder fijar la muestra con un fijador citológico y después guardarlas en una
caja de tecnopor con hielo luego se adiciona un anticuerpo a la muestra y se deja
reposar unos 60 minutos
Después lavamos y limpiamos con un anticuerpo monoclonal, se adiciona un
segundo anticuerpo marcado con fluoresceína de color verde a la muestra y se
deja reposar
Volvemos a lavar la muestra con el segundo anticuerpo monoclonal marcado
con fluresceina para después llevarla a un microscopio epifluroescencia y se
elige la amplitud de onda para excitar la fluoresceína

5. Explique cómo se realiza una técnica de PCR anidada

PCR anidada
Primeramente obtener el pez para empezar las pruebas, después procedemos a hacer
la necropsia con ayuda de un kit de disección, luego en un frasco poner la muestra con
el patógeno y llenar el frasco con RNA later, después analizamos el ARN y ADN de la
muestra esto ayudara a poder observar la enzima polimerasa y los nucleótidos dentro
de unos tubos de eppendorf.
Después colocamos los tubos en el termociclador esto ayudara a regular la
temperatura
Dentro del termociclador hay un amplificador de adn que según la temperatura
ayudara a activar los primers y la enzima polimerasa
Una vez hecho esto las muestras pasan por un electroforesis en gel, previamente
cargado con gel de agarosa y bromuro de etilio para sus lecturas, poco a poco iran
cargando las muestras en la peineta, una vez tengamos las muestras en un búfer poner
la muestra donde se detectara los electrodos positivos y negativos
Finalmente las muestras ya pasadas por la electroforesis son llevadas a una camara de
luz uv para su lectura

Tacna, Agosto del 2022.

MSc. Ederson Juan Montalico Pongo Curso: Sanidad Acuícola