ASIGNATURA: Inmunología FECHA: _______________

DOCENTE: María de los Ángeles Barrón García GRUPO: _______________

INTEGRANTES: MESA:

PRÁCTICA: REACCIONES DE AGLUTINACIÓN EN MEDIO SALINO. PRUEBAS CRUZADAS

OBJETIVO
La importancia transfusional del sistema ABO radica en las características de sus anticuerpos.
Las pruebas cruzadas pretransfusionales intentan detectar reacciones Ag-Ac potenciales antes de
que la sangre sea transfundida. Cada unidad de sangre extraída debe ser examinada y clasificada de
forma individual para descartar incompatibilidades entre el donante y el receptor, a fin de que la
transfusión se realice con las máximas garantías.

INTRODUCCIÓN
Las pruebas cruzadas se basan en la selección de unidades de sangre de donadores de los tipos ABO
y Rh. Se hacen para determinar la capacidad serológica entre el donador y receptor de la transfusión
sanguínea. Estas pruebas están introducidas por Hektoenen 1907 por la búsqueda del rechazo de
numerosas transfusiones incompatibles en aquella época. La transfusión sanguínea puede
complicarse por reacción inmunológica o por contaminación de agentes infecciosos. La prueba
cruzada de la sangre del donador con la del receptor puede constar de dos partes conocidas como
fase mayor y fase menor. El resultado positivo, es decir, la aglutinación o hemolisis de los hematíes,
probados indican incompatibilidad, mientras que el resultado negativo indica compatibilidad.

FUNDAMENTO
Las reacciones son llevadas in vitro, en medio salino o albuminoso, es una reacción entre los glóbulos
rojos, los plasmas del donador y el receptor alternativamente. La prueba consta de dos partes
(mayor y menor).
La mayor consistirá en la mezcla de los eritrocitos del donador con el suero del receptor, los
resultados que obtendrán son simples (aglutinación=positiva, o aglutinación=negativa) lo que
suceda marcara como compatible. Esta prueba representa un 75%. La prueba menor se realizará de
manera inversa (suero del receptor con eritrocitos del donador) esta representará la prueba menor
(25%). Las condiciones de completa compatibilidad se darán por no aglutinación en ambas pruebas.
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PROCEDMIENTO
MATERIALES Y EQUIPO REACTIVOS
2 jeringas de 5 mL Sangre venosa
Equipo de extracción de sangre (torundas, Solución salina
torniquete)
6 Tubos (de plástico) para sangre tapón rojo
Micropipeta (100 µl - 500 µl) VESTIMENTA
Puntas para micropipeta Uniforme
Microplaca Bata de laboratorio
Gradilla Cubrebocas (x2)
Centrifuga Cofia (x2)
Vale elaborado Guantes (x2)

Se seleccionarán dos tipos de sangre diferente (de preferencia que sean de los tipos A Y B) y dos con
tipos pertenecientes ya compatibles (A o B y uno AB). Si es necesario, las muestras procesadas se
compartirán entre los equipos de manera que por equipo se pueda completar el esquema.

A) Obtención de los eritrocitos

DONADOR: se extraen 3 mL de sangre (venosa) y se transfieren a un tubo para dejar coagular,
después se centrifuga a 1000 rpm por 10 min, se separa el suero (sobrenadante o fase líquida)
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utilizando una micropipeta de 500 µl con una punta nueva y se pasa a otro tubo etiquetado como
SD (suero del donante); el precipitado se resuspende (con suavidad) con una micropipeta de 500 µl
y una punta nueva, se toma una gota (200 µl) de este y se pasa a un tubo que contenga 2.5 mL de
solución salina que se debe marcar como ED (eritrocitos del donante).
RECEPTOR: se extraen 3 mL de sangre y se le da el mismo tratamiento que a la sangre del donador,
pero sus tubos serán marcados como SR y ER respectivamente.
NOTA: Siempre que se use la micropipeta debe utilizar una punta nueva, no mezcles las sustancias
introduciendo la misma punta en ambas sustancias.
B) Prueba mayor en placa
Mezclar 2 gotas del suero R con 2 gotas de eritrocitos D suspendidos en solución salina
Desplazar con movimiento de vaivén suavemente la placa y observar hasta 5 minutos la reacción
Resultado:
Incompatible: presencia de hemólisis (aglutinación)
Compatible: no se presenta hemólisis (aglutinación)
NOTA: Siempre que se use la micropipeta debe utilizar una punta nueva, no mezcles las sustancias
introduciendo la misma punta en ambas sustancias.
C) Prueba menor en placa
Mezclar 2 gotas del suero D con 2 gotas de eritrocitos R suspendidos en solución salina
Desplazar con movimiento de vaivén suavemente la placa y observar hasta 5 minutos la reacción
Resultado:
Incompatible: presencia de hemólisis (aglutinación)
Compatible: no se presenta hemólisis (aglutinación)
NOTA: Siempre que se use la micropipeta debe utilizar una punta nueva, no mezcles las sustancias
introduciendo la misma punta en ambas sustancias.
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RESULTADOS Y DISCUSIONES
EJEMPLO DE COMO DISTRIBUIR LAS MUESTRAS EN LA MICROPLACA
EAa - SAb (Prueba SAa - EAb (Prueba EAa - SB (Prueba SAa - EB (Prueba
mayor) menor) mayor) menor)
EAa - SAB (Prueba SAa - EAB (Prueba
mayor) menor)

Escribe los resultados obtenidos en una tabla y realiza los dibujos correspondientes que los
interpreten
TIPO PRUEBA COMPATIBILIDAD INCOMPATIBILIDAD
(ABO) (%) (%)
Mayor
Menor
Mayor
Menor
Mayor
Menor
Mayor
Menor

Determina la importancia de realizar esta prueba de compatibilidad

Describe las consecuencias de realizar una transfusión de sangre entre donante y receptor
incompatibles
Explica lo que ocurre en caso de que haya diferente tipo de sangre entre una madre y el feto
En caso de extrema urgencia, si es necesario hacer una transfusión de sangre, ¿en qué porcentaje
debe darse el resultado de esta prueba? ¿cuándo no debe realizarse en ninguna circunstancia?

CONCLUSIONES
En base a tus resultados obtenidos y los objetivos planteados elabora tus conclusiones

REFERENCIAS