Universidad de Oriente

Núcleo de Bolívar
Escuela de Ciencias de la Salud
“Dr. Francisco Battistini Casalta”
Departamento de Bioanálisis
Hematología II

Sistema ABO

Profesor(a): Estudiantes:

M.Sc. Carmen Cuba Mariannys Urrieta 26.244.081

Angelo Garcia 28.229.217

¿Que es el sistema ABO?

La sangre tiene propiedades antigénicas distintas en cada

individuo al igual que propiedades inmunitarias diferentes,
estas diferencias permitieron el descubrimiento de varios
sistemas de grupos sanguíneos.

Es el sistema que se usa para agrupar la sangre humana en

diferentes tipos de acuerdo con la presencia o ausencia de
ciertos marcadores en la superficie de los glóbulos rojos.
Determinación o tipiaje del grupo sanguíneo

Consiste en un proceso de clasificación de

la sangre basado en la detección de los
antígenos presentes en la superficie de los
eritrocitos

Fundamento

Se basa en la aglutinación de los glóbulos

rojos del paciente con antisueros comerciales
y la detección en el suero de anticuerpos
contra los antígenos
Pruebas

1) Prueba celular: para determinar los antígenos

(prueba celular, globular o directa)

2) Prueba sérica o grupo inverso para determinar

anticuerpos. (Prueba sérica, inversa o indirecta)

• Las dos pruebas se practican simultáneamente porque ellas se

complementan y en esta forma una verifica los resultados de la
otra.

• Deben realizarse a temperatura ambiente (20 a 24ºC) o menos,

la incubación a 37°C debilita la reacción.

• En aquellos casos en que haya discrepancias entre ambas

pruebas, la investigación adicional revelará una condición que
podrá ser de importancia clínica o simplemente interesante desde
el punto de vista serológico.
Reactivos

Los reactivos comerciales empleados en la

clasificación de los antígenos, son antisueros
usualmente provenientes de individuos que han
sido estimulados con sustancias de grupo
sanguíneo A y B para producir ac de altos títulos

Se utilizan tres reactivos:

• Suero anti A (de sangre b), de color azul y que

contiene aglutininas alfa

• Suero anti B (de sangre a), de color amarillo y

que contiene aglutininas beta

• Suero anti AB que contiene las dos aglutininas,

alfa y beta
Materiales y equipos

• 1 gradilla

• 16 tubos 10 x 75

• 4 tubos 13 x 100

• 4 pipetas Pasteur con bulbo

• Centrifuga clínica

• Centrífugas Serofuge

• Sueros hemoclasificadores Anti-

A, Anti B. Anti-AB
• Albúmina bovina al 22% o 33%

• Solución fisiológica en Pizeta

• Sangre problema
Prueba en tubo

Procedimiento:

1) Toma de muestra sin aditivos: Centrifugar y separar el suero. Colocar el suero en

otro tubo identificado

2) Lavado: Colocar en tubo identificado una alícuota de GR en estudio. Lavarlos 1

vez con SSF.

3) Suspensión: Eliminar sobrenadante. Hacer una suspensión al 5 % con SSF.

4) Identificación: Seleccionar 3 tubos 12 x 75 mm. Identificarlos como A, B y AB

respectivamente.

5) Mezclar: En tubo A una gota de anti-A, en el tubo B una gota de suero Anti-B y
en el tubo AB una gota de suero Anti AB, luego se le agregara a cada tubo una gota
de la suspensión de hematíes, posteriormente centrifugar a 3.400 rpm x 15 seg o
1.000 rpm x 1 min

6) Lectura: Agitar suavemente para desprender el botón de células del fondo del
tubo. Inclinarlo para apreciar aglutinación. Anotar el resultado, tubo en mano.
Prueba en lamina

• Materiales usados para esta prueba:

• Placa de metacrilato (o vidrio)

• Pipetas Pasteur

• Varillas o palillos para mezclar

• Muestra de sangre recogida con

tubo EDTA
Reactivos

• Anti-A (azul)

• Anti-B (amarillo)

• Anti-AB (incoloro)

• Solución de albúmina (control)

al 22-30 %

Procedimiento:

1) Anotamos en una hoja de trabajo los datos

del paciente

2) Sobre una placa de metacrilato bien limpia y

seca dejar caer una gota de cada uno de los
reactivos
3) Añadir junto a cada gota de reactivo otra de la sangre a estudiar
utilizando una pipeta Pasteur y procurando que sea más pequeña
que aquella (Aproximadamente la mitad)

4) Mezclar cada gota de reactivo con la de sangre utilizando un

palillo, varilla de cristal o el fondo de un tubo de hemólisis. Si se
utilizan palillos emplear uno distinto para cada mezcla. Si se utiliza
varilla de cristal o tubo de hemólisis limpiarlo cuidadosamente
entre mezcla y mezcla. Formar un círculo de 2 a 2,5 cm de
diámetro.

5) Balancear la placa suavemente y observar durante 2 minutos la

formación de aglutinados.

6) Se Anotan los resultados en la hoja de trabajo y se realiza la

lectura:

• Si aglutina, el resultado es positivo y se anota: +

• Si no aglutina, el resultado es negativo y se anota: o
Prueba Sérica, Inversa o Indirecta

Para realizarla se emplea:

• Suero del paciente a quien se le determina el grupo

sanguíneo

• GR testigos A1 y B, preferiblemente Rh (D) negativo.

Recomendaciones para esta prueba:

• No debe realizarse en laminas porque generalmente

la concentración de los Ac, no es lo suficientemente
alta para causar la aglutinación de los GR son
centrifugar.
• Si las células son preparadas en el laboratorio deben
ser frescas (preparar el mismo día).
• Realizar una suspensión al 5 %.
Procedimiento:
1)Identificación: Marcar 2 tupos de 12 x 75 mm. Como
AyB

2)Mezcla: Colocar 2 gotas de suero en estudio en cada

tubo. Agregar una gota de GR A1 en el tubo A y una
gota de GR B en el tubo B y luego Mezclar, si se desea
potenciar la aglutinación los tubos se pueden incubar
por 5 min o más a la temperatura del laboratorio.

3)Centrifugar: a 3500 rpm por 15seg o 1000 rpm por 1

min

4)Observar: Sobrenadante sobre fondo blanco bien

iluminado para descartar hemolisis

5)Lectura: agitar suavemente para desprender botón

de células del fondo del tubo. Inclinar y leer contra un
fondo iluminado: aglutinación

6)Resultados: Anotar inmediatamente, tubo en mano

los resultados de la aglutinación.
Interpretación de resultados
Discrepancias entre la prueba globular y
la prueba sérica

•Cuando los resultados entre ambas pruebas no concuerdan,

existe discrepancia y ésta debe investigarse.

•Si se trata de una unidad de sangre donada, ésta debe

conservarse aparte y no transfundirse hasta que no se haya
resuelto la discrepancia.

•Cuando la muestra de sangre es de un paciente que requiere la

transfusión, puede ser transfundido con GR del grupo O, tomando
previamente suficiente muestra para el estudio de la discrepancia.
Errores

Los principales errores que pueden existir en la clasificación

sanguínea, son los siguientes:

• Error en la preparación de la suspensión de glóbulos rojos

así si se ha colocado demasiada sangre (mezcla de color
rojo intenso) en exceso de glóbulos rojos puede absorber
la aglutinina del suero y no evidenciar la aglutinación.

• Si se ha colocado poca sangre (La mezcla color rosa muy

pálido) la escases de glóbulos dificultará la lectura
macroscópicamente.
Con respecto a los sueros hemoclasificadores:

a)Pueden estar envejecidos, mal preparados y

su potencia débil. contaminado control de
calidad se observa turbio y de mal olor.

b)Con respecto a la muestra de sangre: sangre

vieja o contaminadas con bacterias.

c)Con respecto a la manipulación:

•rotulación equivocada de los tubos

•colocación errónea de los reactivos

•equivocación en los reportes.

¡Muchas gracias por su atención!