SEMANA 1

HISTORIA DE LA MICROBIOLOGIA:

• Antony van Leeuwenhoek→ minúsculos animálculos, obtiene 200-300 aumento en el

vidrio, primero en dar a conocer sus observaciones con descripciones exactas y
dibujos. “minúsculos animálculos”.
• Generación espontánea:
o Kircher→ restos de pescado en beaker→ formación de larvas
o Needham→ carne + agua en frasco cerrado→ enturbiamiento.
• Biogénesis
o por Francesco Redi: Restos de pescado en 2 beakers → 1 cerrado y 1 tapado→
en el tapado crece larvas, la vida genera vida. La vía no se genera de la nada.
o Lázaro Spallanzani→ carne + agua + calor x 1 hora→ 1 matraz abierto y 1
cerrado→ el matraz cerrado estaba totalmente limpio, en el abierto si había
turbidez.

Pasteur: hirvió matraz y lo dejo cerrado→ no hubo crecimiento (los microorganismos

se quedan en el cuello de cisne), si el cuello de cisne se rompe a las horas había una
turbidez del crecimiento bacteriano.

John Tyndall: partículas suspendidas en el ambiente que transportan microorganismos

(se pueden ver mediante la luz del sol por ejemplo).

Los virus no son seres vivos

Las Procariotas se clasifican en :

o Bacterias
o Archeobacterias: resisten ambientes adversos, temperatura alta,
concentraciones altas de sal, pH extremo y otros.

Eucariotas

OJO: Hay características en común entre archeobacterias y eucariotas como:

• El factor 2 de elongación contiene aminoácido diftamina y por lo tanto es ADP

ribosilable.
• Las polimerasas de ARN dependientes de ADN son enzimas con múltiples
componentes y son insensibles a antibióticos de rifampicina y estreptomicina.
 •

DIFERENCIAS ENTRE PROCARIOTAS (bacterias) Y EUCARIOTAS:

• Procariotas sin núcleo

• ADN libre en el citoplasma en procariotas
• Fimbrias en procariotas
• Presencia de esteroles en membrana celular de eucariotas
• Flagelo eucariota complejo
• Pared celular de peptidoglucano en las bacterias, en las eucariotas algunas contiene
esto, pero también hay de quitina.
• Ribosoma 70S en procariotas, en eucariotas 80S
• Pili sexual en procariotas.

Escherichia coli:

• Reino: procariotas
• División: gracilicutes
• Clase: escotobacteria
• Orden: eubacteria
• Familia: enterobacteriacea
• Genero: Escherichia
• Especie: coli
• Subtipo: E. coli O157

Morfología bacteriana:

• Cocos: esféricos, ejm. Streptococcus

• Bacilos: forma de píldora o bastones, ejem. E. coli
• Espiroqueta: forma de serpiente, ejm. Treponema
• Cocobacilos: forma oval, ejem. Bordetella pertussis
• Filamentoso: forma de moho, ejm. N. actinomices
• Helicobacter pylori: forma peculiar
• Corynebacterium diphteriae: diversas formas
• Vibrio cholerae: forma de coma
Agrupaciones bacterianas:

• Coco→ diplococo (2)→ estreptococos (cadena linear de 6 o más)

• Coco → tétradas (4)→ sarcina (cubo)
• Coco→ estafilococo (racimo de uvas)
• Bacilo→ Diplobacilo (2) → etreptobacilo (cadena lineal) → empalizada (unión por los
lados laterales)

Tamaño de microorganismos:

• Ojo humano → 40 um
• Microscopio luminoso: protozoarios y hongos microscópicos (4-10 um), bacterias (0,2 -
10 um)
• Microscopio electrónico: virus (0,03 – 0,3 um)

Características de agentes infecciosos

• Las bacterias son mas grandes que los virus.

• Los virus no tiene pared celular, las bacterias y hongos si lo tienen.
• Virus no tienen vida independiente.

Partes de una bacteria:

• Citoplasma con el ADN libre

• Ribosomas
• Membrana celular con alguna invaginaciones o mesosomas, además de prominencias
que se conocen como pili o pelo.
• Pared celular : permite clasificar a las bacterias en gram positivas o negativas.
• Capsula: parte externa, la protege de ambientes extremos.
• Flagelo

CAPSULA: o glicocálix, es un factor de virulencia bacteriano (molécula o enzima que

favorece la enfermedad) en este caso protege a la bacteria.

• No es característica de una especie, porque no todas lo tienen, conformada por capas

externas laxas.
• No son importantes para el crecimiento bacteriano, pero si es importante para la
supervivencia en el hospedero.
• Está compuesto por proteínas o polisacáridos.
• Funciones: resistencia a la desecación o falta de agua, resistencia a antibióticos (la
capsula gruesa esconde a los receptores por lo que evita el mecanismo de acción de
antibióticos), resistencia a fagocitosis, permite la fijación a los células de los
hospedadores, barrera frente a moléculas toxicas
• Se detectan con tinción negativa (tiñe el fondo) la parte no coloreada es la capsula y
también mediante la reacción Quellung

PARED CELULAR: su función es resistir a la presión interna bacteriana, dar rigidez y forma
a la célula.

• Principal componente: peptidoglicano (PG), tanto las gram positivas y gram negativas
contienen peptidoglicano.
PEPTIDOGLICANO: formado por derivados de azucares como N acetil glucosamina y N
acetilmuramico unidos por enlaces beta 1,4, unido al acido N acetilmuramico se
encuentran unidos los tetrapeptidos. El enlace beta 1,4 es degradado por lisozimas.

Todas las especies de staphilococcus poseen cadenas de pentaglicina que le dan rigidez
a la pared celular , estos están ubicados en las cadenas de peptidoglicano (se ubican de
forma transversal uniendo las cadenas paralelas de PG). En este caso la enzima que
ayudara a romper los puentes de pentaglicina será la enzima lisostafina.

Es decir que la pared celular de una gram positiva contiene más capas paralelas de
peptidoglicano con cadenas intracatenarias e intercatenarias, además contiene cadenas
pentaglicina (característica de staphylococcus), por lo que al intentar extraer el ADN de
esta bacteria se necesita a la lisostafina (rompe cadenas de pentaglicina) y a la lisozima.

Conocer la pared celular nos ayudara a saber como actúan los antibióticos sobre las
bacterias y esto es inhibiendo la síntesis de peptidoglicano.

Inhibidores de la síntesis de PEPTIDOGLICANO:

• Vancomicina inhibe el entrecruzamiento de cadenas de peptidoglicano en la

pared celular, en los tetrapeptidos.
• Un antibiótico betalactámico (afecta la síntesis de las uniones intercatenarias,
inhibe la formación de la pared celular) entra en competencia con el
tetrapeptido, por lo que el betalactámico gana y no se da el entrecruzamiento
de la pared de peptiglicano y la bacteria muere.
PSEUDOPEPTIDOGLICANO: presente en algunas archeas metonogenas. En lugar de N
acetilmuramico se encuentra el acido Nacetiltalosamuronico. En lugar de enlaces
glucosídicos beta 1,4 esta los beta 1,3.

Sin embargo las bacterias tienen componentes propios como:

o Gram positivo: ácidos teicoicos

▪ El PG representa el 90% de la pared celular.

ACIDOS TEICOICOS: es un polímero que contiene glicerol y enlaces fosfodiéster.

Sirven para el paso de iones a través de la pared celular.

Cuando están unidos al Peptidoglicano son ácidos teicoicos, algunos ácidos

teicoicos de cadenas largas están unidos a los lípidos de la membrana ahí se
denominan ácidos lipoteicoicos.

o Gram negativas: lipopolisacáridos (LPS)

▪ Encima del espacio periplásmico, se encuentra el PG que representa el
10%, después esta la membrana externa.

▪ La membrana externa consta de capa lipídica interna, de

lipopolisacáridos (en la parte superficial), proteínas periféricas e
integrales, porinas.
• Los lipopolisacáridos de la membrana externa están formado
por:
• Lipido A ( conformado por ácidos grasos y disacáridos
difosfato): permite clasificar a las bacterias ya que son
idénticos a las bacterias afines.
• núcleo polisacárido : es idéntica dentro de las especies
bacterianas.
• antígeno O (somático) :diferencia a los
serotipos dentro de una especie). El antígeno O cambia
su naturaleza para evadir las defensas del hospedador,
se unen a los antibióticos para proteger a la pared
celular de un ataque directo como una especie de
impedimento estérico, debido a que son cadenas muy
largas.
• Los lipopolisacáridos pueden producir trombosis, lipoglicemia,
fiebre, hipotensión y shock, etc.
• ENDOTOXINA: La membrana externa puede ser toxica para los
animales, específicamente por el Lipido A Por ejemplo
hemolinfa de cangrejo contiene amebocitos que reacciona y
genera coagulación→ prueba LAL para detectar las endotoxinas
bacterianas en fármacos estériles.
 Las porinas son canales de entrada y salida de tipo lipofílicos, son importantes para la
resistencia a antibióticos, además son receptores específicos de fagos (virus de
bacterias) para permitir que se inyecten ADN foráneos a la bacteria. La porina es el canal
de entrada para el ADN durante la conjugación bacteriana.

BACTERIAS ACIDO RESISTENTES: su pared celular es rica en lípidos, su superficie es hidrofóbica,

cuando se tiñen no se decoloran ni con soluciones acidas.

Las bacterias acido resistentes contiene ácidos micólicos (son ácidos grasos de alto peso
molecular, con diferentes tamaños de cadenas) que permiten clasificar en :

- Mycobacterias: 60 a 90 atomos de carbono

- Nocardia: 50-62 atomos de carbono
- Corynebacterium: 22 a 36 atomos de carbono

- Su pared celular contiene peptidoglucano

- Propiedades por el alto contenido en lípidos: crecimiento lento (20 horas), resistencia
a acidos y álcalis, agentes ambientales, desecación y antimicrobianos. Sus colonias son
en forma de cérea, crecen en forma de grumus.
SEMANA 2: ESPORAS Y FACTORES DE VIRULENCIA BACTERIANO

Bacteria más virulenta: Bacillus anthracis

Endospora bacteriana: Se forman a partir de células vegetativas que se sometieron a estrés.

- son formas de resistencia; resisten al calor, desecación, radiación y agentes químicos.

- Resistentes a lisozima
- Retractiles e impermeables a colorantes
- Solo se tiñen con tinciones selectivas
- Su localización es variada

Tiene capacidad de resistencia debido a que posee tres capas adicionales:

- Exosporio (proteína)
- Cubierta espora(proteína)
- Cortex (peptidoglicano especial)
- Pared celular
- Membrana plasmática
- Citoplasma: aquí también tiene cambios.

Características de endospora bacteriana:

- El complejo calcio acido dipicolínico es el 10% seco, ayuda a la deshidratación y

estabiliza el ADN frente al calor.
- Protoplama deshidratado
- Metabólicamente inertes
- Citoplasma acido
- Alta concentración de SASP (pequeñas moléculas solubles en acido): protegen al
ADN del daño potencial de Radiacion UV, calor seco. Además sirven como fuente de
carbono y energía durante la germinación (endospora → célula vegetativa).

Fases de la esporulación:

- Géneros que pueden generar esporas: bacillus y clostridium.

- Ciclo Vegetativo: desarrollo de una célula bacteriana
- Fase de esporulación:
a) Fase I: condiciones de estrés en la celula vegetativa→ cambio conformacional
(formación de septo y preespora)
b) Invaginacion: la célula madre rodea completamente a l aa preespora.
c) Fase III: formación del cortex
d) Fase IV: cubierta de espora
e) Fasee V: cubierta de espora
f) Fase VI: estapa de maduración y lisis celular→ la celula madre muere
g) L a endospora se encuentra libre
h) Se repite el ciclo

Diferencias entre célula vegetativa y endospora:

Sobre la endospora

- La endospora es Refrigente
- Alto contenido de calcio
 - Tasa de respiración baja o nula
- Nula síntesis de macromoléculas
- Contienen acido dipicolínico
- Resistencia a la lisozima
- Alta resistencia al calor, radiación, productos químicos, lisozima
- Bajo contenido de agua
- Pequeñas proteínas solubles en acido (SASP) están presente únicamente en ellas.

PATOGENICIDAD Y VIRULENCIA:

Patogenicidad: capacidad de causar enfermedad por la superación de las defensas del huésped.

Virulencia: grado o extensión de patogenicidad

Factores de virulencia:

- Factores de adhesión: fimbrias, pilis

- Pigmentos
- Mecanismos de evasión de las defensas del huésped: capsula, toxinas, enzimas
diversas.
- Enzimas extracelulares
- Toxinas
- Factores antifagociticos
- Resistencia microbiana
- Fatores que favorecen la invasión: flagelo, toxinas, enzimas.

Respuestas con daños se basa en 3 principios:

 - Patogénesis microbiana es el resultado de la interacción huésped-microorganismos.
- El resultado es el daño al anfitrión o huésped
- El daño es el reflejo de la acción de virulencia o respuesta del huésped.

Tipos de factores de virulencia:

Puertas de entrada: oído, ojo, piel, mucosa respiratoria, mucosa gastrointestinal, parenteral
(hepatitis B y C), urogenital / sistema reproductivo, transplacental.

- Salmonella typhi produce enfermedad cuando se ingiere, no por la piel.

- Estreptococos que son inhalados producen enfermedad , si son ingeridos no.
- Bacillus anthrasis genera enfermedad por mas de un portal de entrada (piel ,
gastrointestinal, respiratorio).

Tipo de transmisión:

- Diseminacion respiratoria o salival

- Diseminación fecal oral
- Diseminación venérea: sexual
- Zoonosis: vector, reservorio vertebrado, vector-reservorio vertebrado.

Numero de bacterias invasoras:

- Menos de 200 shigellas son necesarias para producir disentería

- Mientras que la salmonella necesita 10 6 -10 9 son requeridos para generar infección.

Sistemas reguladores de virulencia bacteriana:

- Escherichia coli: gen regulador es el drax fur→ funciones reguladas :pielonefritis

- Bordetella pertucis: gen regulador bvgAS
 - Staphylococcus aureus: genes agr→ hemolisinas

Factor de virulencia codificados por plásmidos: variado entre toxinas, hemolisina

- Echerichia coli: factor de virulencia como enterotoxinas

Factores de virulencia codificado por fagos: toxinas

- Corynebacterium diphtheriae: toxina de difteria (la mayoría de estas toxinas se

denominan de forma similar que la bacteria) que liberan toxinas.

Mecanismos de invasión en fase temprana:

- Adherencia: adhesinas fimbriales y no fimbriales, intrnalizador en células M.

- Movilidad y quimiotaxis: flagelos y fimbrias
- Invasión por disparo o cierre: sistema de secresion de tipo II, jeringas moleculares,
efectores de mimetismo molecular.

Mecanismos de invasión en fase tardia:

- Sobrevivencia intracelular: sideróforo: captura hierro, mimetismo molecular (evitar ser

destruido)
- Movilidad intracelular: escape vascular y de unión a componentes del citoesqueleto→
listeria monocytogenes
- Evasión de la respuesta inmune: capsula, inmunoglobulinas
- Sometimiento y confrontación: enzimas del hospedero, proteasas de las IgAs,
adherencia a receptores alternativos.

1. Adherencia: adhesinas
a. Adhesinas: proteínas o polisacáridos, tienen afinidad por los azucares lectinas.
Se encuentra en la pared celular o en los pili, fimbrias o flagelos
2. Unión e internalización en células M
a. Células M: adsorción de partículas, bajo contenido de lisozima, permite el
ingreso de shigella (mediada por secresion tipo 3). Son endociticas por
naturaleza.
3. Sideróforos:
a. Entrerobactina: secuestra hierro → el huésped secuestra a la enterobactina
con hierro, ocurre la glicosilación de la enterobactina y sigue secuestrando
hierro.

Crecimiento de bacterias durante una infección:

- La bacteria entra en contacto con factores de virulencia.

4. Pigmentos: favorecen la patogénesis de enfermedades, interfiere en mecanismos

inmune del hospedero, propiedades proinflamatorias o citotóxicas.
a. Le da a la bacteria protección contra radiación UV, contra oxidantes, calor y
frio extremo, etc.
b. Ejemplos: estafiloxantina (dorado)→ staphylococcus aureus
 c. Ejemplos: prodigiocina (rojo) → serratia marcescens , propiedad
imnumosupresor.
d. Ejemplos: piocianina (azul verdoso)→ pseudonoma spp.

Mecanismos de evasión de las defensas del huésped:

1. Capsula: previene la fagocitosis de las células. Son polisacáridos pero también tiene
aminoácidos (bacillus anthracis).
2. Componentes de la pared celular. Proteína M de Streptococcus pyogenes→ media la
fijación e inhibe fagocitosis.
3. Crecimiento intraceular
4. Antigeno: suprime el sistema inmune, evitar fagocitosis
5. Evita fagocitosis: capsula, bloqueo lisosoma.

Islas de patogenicidad: fracción de ADN genómico de un microorganismo patógeno que le

faculta como virulento, son fracciones que codifican factores de virulencia.

- Concepto originado del estudio de cepas de Escherichia coli uropatogena

- Codifican sistemas de secresion: Spi1, Sp12→ Salmonella, Cag en H. pylori, Region LEE
en ECEP.
- Codifican adhesinas, sideroforeos y tomaxias: E.coli uropatogenica, Yersinia Spp. Y V.
cholerae.

ENZIMAS: activas contra componentes del hospedero, están dañan las células y obtienen
nutrientes digiriendo los sustratos en pequeños componentes asimilables por las bacterias.

- Proteasas.
- Neuraminidasas
- Fosfolipasa
- Ejemplos: coagulasa, hialuronidasa, catalasa, etc.

Ayudan en el proceso de virulencia:

- Colagenasa y Hialuronidasa: destruye parte de la matriz extracelular para permitir el

ingreso de la bacteria.
- Coagulasa forman coágulos para proteger a la bacteria ( staphilococcus aereus →
coagulasas positivos ) mientras que la quinasa permite la diseminación de la bacteria,
mediante la destrucción de los coágulos.
- Enzimas que producen daño tisular: ADNasa, lipasa, fosfolipasa, proteasas.

Invasinas: flagelo, colagenasa, neuraminidasa, coagulasa, quinasa.

TOXINAS BACTERIANAS:

1. Exotoxinas: forman parte de bacterias en su crecimiento y metabolismo

a. Producidas por gram negativa y gram positiva
b. De naturaleza proteica
c. Altamente toxicas, frecuentemente fatales, no producen fiebre, inestables
termicamente
d. Genes para exotoxinas están en plásmidos de bacterias o bacteriófagos.

Clasificación:

a) Citotoxina: afecta diferentes tipos de células

 b) Neurotoxina: afecta neuronas
c) Enterotoxinas: afecta enterocitos

Estructura y mecanismo de acción:

d) Toxina AB: ejemplos→ la diftérica, colérica (afecta enterocitos, ADP ribosil

transferasa produce diarrea y deshidratación), tetánica
e) Toxinas de membrana: dañan la membrana celular
▪ Toxina alfa: citólisis, daño celular mediante la fosfolipasa
▪ Listeriolisina: formación de poros en membranas
f) Superantigeno: actúa en la membrana extracelular produciendo una activación
permanente de linfocitos lo que conduce a fiebre, exantema e hipotensión. ,
ejemplo→ toxina del síndrome shok toxico (S. aureus) → produce exantema.
▪ CPA, TCR
▪ En cambio el antígeno convencional tienen un mecanismo similar pero
produce activación lábil, no es permanente.
g) Enterotoxina termolábil ECET (parecido a la colérica): transporte retrogado
(aparato de Golgi (se separa el A)—Reticulo endoplasmatico)→ activación de
adenilato ciclasa→ AMP cíclico→ PKA → inactiva una bomba de sodio NHE3 y
promueve la expresión de cloro y bicarbonato→ aumenta la secreción de
solutos y se pierde agua.
2. Endotoxinas son lipopolisacáridos : parte integral de la pared celular de las bacterias
gram negativas, componente toxico es el lípido A. La endotoxina se libera cuando la
bacteria gram negativa se lisa (a veces durante la replicación).
Las endotoxinas son poco toxicas, excepcionalmente fatales. Producen fiebre
a. Bacteria gram negativa→LPS (PAMP) → TLR-4 (PRR)→ macrófago→ cascada
de transcripción→ produce citoquinas proinflamatorias (IL-1, IL-6,IL-8. TNF
alfa,PAF) favorece lisis por formación de MAC.
b. Producen fiebre
Sistemas de secreción para transferir proteínas:

- A modo de jeringa molecular→ invade la célula hospedera→ inyectan proteínas

efectoras → polimerizan la actina celular → estimula que la celula se invagina y capte
bacterias.
- Sistema de secreción de tipo 3: ayuda a que la bacteria secrete factores de
virulencia→ shigella, salmonella entérica, etc.

Resistencia bacteriana a antibióticos:

- Debido a la Modificación de antibióticos→ betalactamasas

- Modificación del blanco: metilación de ribosomas en resistencia a eritromicina
- Remodelación de la pared celular: resistencia a vancomicina
- Bombas de eflujo→ resistencia a tetraciclinas
- Sobreproducción del blanco o sustrato→ sulfamidas
- Modificación de enzimas que activan antibiótico→ pirazinamida
- Etc

Mecanismo de acción de la resistencia a antibióticos o antimicrobianos:

- Enzimas que degradan al antimicrobiano, expulsión del antimicrobiano o modificación

del antimicrobiano.

Causas de la resistencia antibiótica:

- Cuando se consume gran cantidad de antibióticos mayor será la posibilidad de que

adquieran resitencia: Fuerte presión selectiva, se adquiere mediante la transferencia
de genes.
- Conjugación: genes de resistencia por plásmidos o pilis entre diferentes células
- Transducción: transferencia de gen mediadas por bacteriófagos
- Transformación: Adquisición de ADN celular con el gen de resistencia.

BIOPELICULAS:

- Plantónicos → forman biopelículas, comunidades de microorganismo sumergidos en

matriz polimerica (exopolisacáridos, proteínas y ADN) adheridas a una superficie.
- Se forman como mecanismo de defensa, habitad mas
- Se forman con la adherencia mediante flagelos, fimbrias (gram neagativas) y adhesinas
(gram positivas).
- Liberan Exopolisacaridos: forman la matriz polimérica: alginato, celulosa, glucosa y
galactosa.

- Forma de comunicación: Quorum sensing: forma de comunicación de bacterias en la

biopelícula.
- Aspectos negativos: infección de heridas, de implantes y catéteres, infección
pulmonar, placa dental, obstrucción de tuberías, corrosión.
 - Aspectos positivos: descontaminación de derramamiento de petróleo, de aguas
residuales, fermentación en la industria de alimentos, probióticos, protegen a lapiel
como parte del microbioma.

SEMANA 3: CONTROL DE CRECIMIENTO MICROBIANO

Agentes microbianos: físicos o químicos

- Daño al ADN: radiaciones ionizantes
- Desnaturalización de proteínas: desnaturalización (la estructura terciaria se
desorganiza) y la proteína deja de funcionar.
- Desorganización de la membrana o pared celular: las sustancias dañinas se van
a concentrar en la membrana celular afectando las propiedades físicas y
químicas de esta, altera sus funciones normarles, destruyen o inhiben a la célula.
- Sustracción de los grupos sulfhidrilos libres: las enzimas y coenzimas funcionan
solo cuando estos grupos sulfhidrilos estén libres y reducidos. Las sustancias
oxidantes interfieren con la función al formar enlaces disulfuro entre grupos
sulfhidrilos vecinos.
- Antagonismo químico: se da por interferencia de una sustancia química con la
reacción normal entre cierta enzima y su sustrato.
AGENTES FISICOS:
El propósitos de la esterilización es destruir todos los microorganismos, incluyendo
esporas.
1. Calor: desnaturalización y coagulación de las proteínas. Se puede dar por :
a) calor húmedo:

▪ por ejemplo, se puede dar en la autoclave

▪ ruptura de ADN, Perdida de viabilidad, perdida de la integridad funcional de la
membrana.
▪ De acción letal rápida
▪ Parámetros: 121º C x 15 libras de presión durante 15 minutos
▪ La atmosfera debe estar libre de aire, se debe asegurar que todo el autoclave se llene
o se sature de vapor de agua.
▪ Se puede esterilizar la mayoría de medios de cultivo, gasas, vendaje, ropa,
guardapolvo, guantes, agua, etc.

Pasteurización: no es un método de esterilización, pero destruye microorganismos, se

usa en industria alimentaria. Se da por un cambio brusco de temperatura, primero hay
un calentamiento a 62º C x 30 minutos después se enfría rápidamente. Solo mata
microorganismos patógenos u otros, no destruye esporas.
 b) Calor seco
• daño por oxidación, efectos tóxicos por las concentraciones elevadas de
electrolitos.
• En el horno se puede esterilizar materiales de vidrio, de metal, polvos, sustancias
insolubles en agua e impermeables al calor, pero NO se pueden esterilizar
plásticos (estos ya entran a la autoclave.
• Parámetros de 180º C por 1.5-2 horas.
• Prueba LAL: hemolinfa de cangrejo→ produce coagulación cuando esta en
contacto con el lipopolisacárido (Lípido A o pirógeno endogeno) → indica
positivo para presencia de pared celular bacteriana. Los materiales con los que
se trabajara la prueba de LAL se debe despirogenizar.
• Cuando la temperatura es mayor a 250º C ocurre despirogenizacion.
• Incineración: materiales se llevan a la llama del mechero.

c) Filtración: no mata las bacterias, solo las retiene o las separa.

• Se usa para sustancias que no pueden ser sometidas al calor.
• Se usan filtros de membrana→ acetato de celulosa, poros de 0.45 um
• No llegan a retener a los virus.
• Se pueden usar en algunas pruebas de control de calidad de agua: se toman
muestras de 100 mL de diferentes puntos de control del agua potable→ se hacen
pasar por la membrana de filtración-→ el filtro de membrana se retira y se coloca
en un medio rico en nutrientes→ se incuba→ se analiza los microorganismos
presentes que crecieron en la superficie de la membrana→ se cuentan en UFC/
100 mL.

d) Radiaciones: Rayos UV, Rayos X, rayos gamma y catódicos.

• Es bactericida en el rango de 240-280 nm (260 nm máx. Absorción del ADN).
• Daña uniones entre pirimidinas adyacentes→ se forman dímeros → distorsión
del ADN→ muerte bacteriana.
• La luz UV es mutágeno, debido a que algunas bacterias tienen mecanismos de
recuperación mediante enzimas que rompen a los dímeros (dinero de timina)
formados → fotorreactivación.
• La radiación UV no atraviesa superficies.
• Rayos ionizantes: es un método efectivo bactericida, debido a que tiene mayor
energía, mayor letalidad.
o Resistencia: esporulados > gram(+) > gram(-)
o Se utilizan para esterilizar suturas de catgut y nylon, material quirúrgico
y medico descartable.

e) Osmosis inversa:
• No destruye bacterias, se logra separar microorganismos.
 • ¿Como funciona? Se aplica presión a la solución que tiene mayor concentración
de solutos→pasan a través de membrana semipermeable → los solutos o
microorganismos quedan retenidos→ se obtiene agua purificada.
• Logra separar los contaminantes, bacterias y virus del agua.
• Remueve > 99% de microorganismos, no tiene interferencia química.

CONTROLES DE ESTERILIZACION:
1. Indicadores Biológicos: Debe ser apropiado al proceso de esterilización que se
usa, la resistencia del microorganismo debe ser estable o no variar
significativamente, no debe presentar problemas de seguridad, no deben ser
patógenos, generalmente se usan esporas bacterianas:

a. Para autoclave: Bacillus stearothermophilus

i. Para ello se utiliza ampollas que contienen esporas de un bacillus
que se colocaran en el autoclave utilizando los parámetros
usados para la esterilización → la ampolla es generalmente de
color morado→ se somete a incubación a 55ª C x 24-48 horas→
se observa el color de la ampolla-→ si se mantiene igual que su
color inicial→ indica que la espora se ha destruido→ el
autoclave funciona correctamente. Si el color cambia significa
que la espora se convirtió en célula vegetativa cambiando de color
y el autoclave no funciona bien.

b. Para filtración: Pseudomonas diminuta.

2. Controles fisicoquímicos: Ejemplo termocuplas.

AGENTES QUIMICOS:
Se basan en dos mecanismos de acción: 1) acción en la membrana plasmática y 2)
acción en las proteínas moleculares.
Como actúa?:
1. Fase 1: el agente químico entra en contacto con la célula microbiana.
2. Fase 2:el agente químico penetra la célula. Ocurre qulacion, destrucción del
estado coloidal (desnaturalización y precipitación)
3. Fase 3: Se dan reacciones bioquímicas contra proteínas y compuestos de
naturaleza proteica como enzimas→ inhibición→ MUERTE CELULAR
Factores que afectan la acción bactericida:
1. Concentración del agente: depende del desinfectante, del microorganismo y del
método de ensayo.
 2. Tiempo: debe ser el adecuado para que el desinfectante actúe
3. Temperatura: aumentar la Temperatura acelera la velocidad de reacción química
o de desinfección.
4. Naturaleza del medio adyacente: el efecto letal del desinfectante disminuye en
presencia de materiales orgánicos, pH del medio y presencia de materiales
extraños. La superficie debe estar limpia antes de aplicar el agente químico
Clasificación de los desinfectantes hospitalarios:
1. De alto grado: para objetos que se usan en procedimientos invasivos y que no
pueden soportar métodos de esterilización.
2. De grado medio: para limpiar superficies o instrumentos en el que la
contaminación por esporas bacterianas sea poco probable. Ejemplo: especulo.
3. De bajo grado: para instrumentos que no se usan en procesos de invasión y que
no son muy importantes. Ejemplo: tensiómetro.
Fenol y derivados:

• Se utiliza como un desinfectante patron o de referencia, mediante el coeficiente

fenólico: cociente de la actividad germicida del compuesto valorado y una
concentración determinada del fenol.
• Coeficiente fenólico : dilución más alta del desinfectante que mata al
microorganismo en 10 minutos pero no en 5 minutos / la más alta dilución del
fenol que logra matar microorganismos en 10 min pero no en 5 min.
o Coeficiente = 1→ equivalencia de actividad
o Coeficiente > 1→ actividad menor que el fenol
o Coeficiente <1→ actividad mayor que el fenol.
• Mecanismo de acción del fenol: rompe la pared celular, su actividad es suceptible
al pH del medio lo que ocasiona que su actividad bactericida disminuya.
• Desventaja: son absorbidos por materiales poroso, irrita mucosas.
Alcoholes:

• Mientras mas grande la longitud de la cadena → su actividad bactericida se

incrementa (max. 5-8 carbonos)
• Su actividad bactericida es mayor en presencia de agua, es por ello que el alcohol
de 76° tiene mayor actividad bactericida que el de 96°.
• No tienen actividad sobre esporas.
• Se pueden usar sobre la piel seguido de alcohol yodado.
Aldehídos:

• Mecanismo de acción: proceso de alquilación de componentes celulares, por ello

se consideran desinfectantes de alto grado.
• Se usan como:
o Formaldehido: su actividad se potencia con alcohol. A bajas
concentraciones → bacteriostático. De 20% a más → bactericida.
 o Glutaraldehído: se usa más en las industrias a una cc. del 2%. Mas activo
a pH alcalino, pero menos estable. Se inactiva con materia orgánica.
• Ventajas: tienen amplio espectro de acción, no son corrosivos.
• Desventajas: con la piel o mucosas tienen efectos irritantes y tóxicos.
Halógenos:
Se usan con mas frecuencia:

• Compuestos yodatos: mas eficaces, son altamente reactivos→ precipitan

proteínas y oxidan enzimas esenciales. Estable y no toxico en tejidos (se usa
como antiséptico).
• Compuestos clorados: oxidan irreversiblemente los grupos sulfhídrilos de
enzimas
o Clorhexidina (derivado del cloro): bloquea grupos ácidos en la capa
mucina de la superficie bucal, , desplazan el calcio de la placa oral. Se
presenta como sal→ digluconato (antiséptico).
USO de cloro en la INDUSTRIA:
La cloración del agua es común en la industria, se puede usar hipoclorito de sodio,
calcio, o cloro gaseoso.
Uso:
1. Ingresa una cantidad de cloro al agua: dosificación de cloro.
2. Una cantidad reacciona con impurezas inorgánicas → esto es la demanda de
cloro
3. La otra cantidad reacciona con impurezas orgánicas-→ se denomina cloro
residual combinado
4. La cantidad final que no reacciona con lo demás es el -→ cloro residual libre ,
este es el que se controla. Se le otorga valores como de 0.25-0.5 ppm. Cantidad
que el agua debe siempre contener.
Sales de metales pesados:
Los mas usados con el mercurio, plata y arsénico: son bactericidas o bacteriostáticos
depende de su concentración.
Usos:

ç
Compuestos de amonio cuaternario (QUATs):

• Formados por grupos orgánicos unidos al N por medio de enlaces covalentes.

 • Mecanismo de acción: desnaturaliza membranas celulares.
• Su actividad máxima presenta los grupos con 8-18 carbonos.
• Tienen acción bacteriostática o bactericida, depende de la concentración.
• Ventajas: no son corrosivos, estables a alta temperatura, estables de forma
relativa a materia orgánica.
• Desventajas: no actúan sobre Pseudomonas, Mycobacterium.
SINERGISMO DE DESINFECTANTES: combinaciones de estos.
Permite ampliar el espectro antimicrobiano, disminución de la toxicidad, potenciar
efecto, menor tiempo de biodegradación, mayor rendimiento, evitar corrosividad, bajar
costos, etc.
Óxido de etileno:

• Gas→ permite esterilizar objetos sensibles al calor.

• Mecanismo de acción: alquilación de grupos terminales OH, carboxilos, aminos y
sulfhidrilos.
• Ventajas: efectivo contra bacterias, esporas, hongos y virus. Penetra materiales no
sellados herméticamente.
• Desventajas: irritante, inflamable, volátil, proceso lento, se ve afectado por el pH del
objeto, temperatura y tiempo.
Agentes oxidantes:

• Ozono, acido peracético y peróxido de hidrogeno.

• El ozono destruye a los microorganismos por su elevado potencial de oxidación.
• Se emplea sobre → implantes de plástico, lentes de contacto y prótesis quirúrgicas.
IMPORTANTE: el etanol, el peróxido de hidrogeno, sol. de hipoclorito de sodio, cloruro
de benzalconio y la clorhexidina → se pueden usar para inactivar el SARS-COV-2 sobre
superficies inertes.

SEMANA 4: GENETICA BACTERIANA

Bacterias: procariotas con muchas diferencias genéticas comparado a las eucariotas. La

compresión de la genética bacteriana ha ayudado a entender el origen de algunos métodos
básicos en la biología molecular.

Cromosoma bacteriano:

- ADN circular de doble hebra

- Contiene proteínas histónicas, histonas.
- Ubicado en el nucleoide.
- No hay zonas no codificantes o intrones.
- Se replican antes de su fisión.
- Su replicación solo tiene un punto de inicio.
- Compactación: numero de bucles varia de acuerdo al tamaño del cromosoma y la
especie
- Actividad génica: ADN→ ARN → proteína
- Gen bacteriano → transcripción ARN→ traducción → proteína
- Policistronica: todos los genes bacterianos se traducen en un solo punto, darán origen
a varias proteínas.
- ADN bacteriano contiene : promotor (donde el ARN polimerasa se une), operador (aquí
es donde se une la proteína represora), genes.
- Gen regulatorio

Regulación genética:

- Los genes bacterianos están organizados como operones.

- Gen regulatorio: regula la transcripción de los genes estructurales de la bacteria.
a) Genera la transcripción de un ARN mensajero→ proteína represora: se une a la
zona del operador y evita que la ARN polimerasa realice una copia.
b) Mecanismo de control en la transcripción:
- Operón Lac (se expresa solo cuando la lactosa esta presente): cuando no hay lactosa,
siempre está el gen represor, la proteína represora será codificada por el gen
estructural y evitará la transcripción del ARN polimerasa → inhibe la traducción del
operan LAC.
- El represor LAC actúa como sensor de lactosa, normalmente bloquea la transcripción
del operon, pero deja de actuar como represor cuando la lactosa esta presente.
- Cuando hay lactosa (inductor) –> se une a la proteína represora→ esta no se se une a
la zona de operador → el ARN polimerasa transcribe la zona del operón LAC.
Elementos extracromosomicos:

- Plásmidos contiene: zona promotora, zona que codifica para un gen que tiene
resistencia a ciertos antibióticos (genes de resistencia)..
- La bacteria no muere si pierde su plásmido.
- A partir de los plásmidos se genera el ADN recombinante.
- Transferencia horizontal y vertical de genes.

Mecanismos para transferir de manera horizontal sus genes: transformación, conjugación

y transducción:

- Transformación: bacteria integra en su genoma material exógeno (ADN circundante en

su medio)→ adquiere mayor información genética, puede darle resistencia a algún
antibiótico, por ejemplo.
- Conjugación: ligado a un componente extracromosomico que son los plásmidos → la
batería genera una copia de su plásmido (es f positiva) y la transfiere a otra (f negativas).
También pueden transferir parcialmente parte de su genoma.
- Transducción: el bacteriófago inyecta su material genético en la bacteria, este material
genético se integra al genoma de la bacteria→ puede que partes del genoma bacteriano
se incluyan en el bacteriófago y se transfiera a otra bacteria.

Mecanismos de la conjugación: transferencia de plásmidos.

- ¿Como nació este conocimiento? Por Lederberg y Tatum: bacterias auxotrofica no

pueden sintetizar aminoácidos, no pueden crecer. Las bacterias en el experimento
 crecieron debido a que juntaron 2 bacterias auxotroficas→ cada una aporto los genes
que codificaban aminoácidos.
- Comparten información a través de un contacto directo entre bacterias.
- El factor F de fertilidad (plásmido) de la bacteria F positiva permite compartir genes con
otra bacteria mediante la formación del pili de conjugación. La copia del plásmido es
transferida de una F positiva a una F negativa.
- Plásmido: factor F → ahí está codificado la información que dará origen a la Pili de
conjugación→ puente de conjugación → replicación de plásmido → la copia del
plásmido se transfiere a la otra bacteria, esta se convierte de F negativa a F positiva.
- Otra forma de conjugación: El factor F puede estar en el cromosoma → célula de
recombinación de alta frecuencia , no hay transferencia de plásmido completo → se
forma el Pili de conjugación (puente)→ una zona del plásmido se transfiere a otra
bacteria.

Mecanismo de transformación:

- Introducir material genético

- En el medio bacteriano puede haber ADN provenientes de otras bacterias (que
murieron) → a través del fenómeno de la transformación → las bacterias toman ese
ADN exógeno y lo integran dentro de su cromosoma → la información que adquiere
puede ser útil para su resistencia, la bacteria se diversifica.
- Esto debido a que tiene zonas de reconocimiento de ADN y la puede integrar a su
cromosoma.
- Esto se descubrió por los experimentos de Griffith: hicieron un coctel de cepas muertas
patogénicas y cepas simples( que no eran patogénicas) → el ratón murió. Se comprobó
que las cepas no patogénicas adquieren información patogénica a partir de las bacterias
patogénicas muertas.

Mecanismo de transducción:

- Incluye a virus que infectan bacterias → bacteriófagos.

- El bacteriófago inyecta su material genético en la bacteria→ forma nuevos
bacteriófagos→ lisis de la bacteria o ciclo lítico, también puede ocurrir el ciclo
lisogénico.
- Ciclo lisogénico: el material genético inyectado por el bacteriófago se integra al
cromosoma de la bacteria → la bacteria se divide→ genera nuevas bacterias con
material de bacteriófagos.
- Transducción generalizada: material genético ingresa→ se replica-→ genera nuevos
fagos → uno puede ser defectivo y puede llevar la información del cromosoma
bacteriano → esta información se puede transferir a otras bacterias.
- Transducción especializada: fago viral se integra al cromosoma bacteriano→ el
bacteriófago induce el ciclo lítico→ se forman nuevos bacteriófagos que contiene
información del bacteriófago y de la bacteria → puede ocurrir transferencia horizontal
de la información a otras bacterias.

Mecanismo de Transposición:

- Transposones: genes saltarines, se transfieren de una zona del cromosoma a una zona
del plásmido → este plásmido puede ser replicado y transferido a otra bacteria.

Aplicaciones de componentes bacterianos:

 - Gen que codifica la insulina –> se integra al plásmido→ el plásmido se introduce a la
bacteria → se comprueba que adquirió el gen que codifica a la insulina comprobando
su resistencia a la ampicilina→ proceso largo de incubación, etc. → generación de ADN
recombinante y proteínas recombinantes posteriormente.
- Metagenómica→ tomar bacterias del ambiente
- CRISPRCAS/9: Las bacterias tienen Cas2 que detectan cuando un bacteriófago ha
incluido su material genético en la bacteria—Z hacen una copia y lo integran en su
genoma. RNA guia

SEMANA 5: Nutrición microbiana

Nutrición:

- Fines energéticos → reacciones de mantenimientos

- Fines biosintéticos →reacciones plásticas o anabolismo

Clases de nutrientes:

- Universales: requeridos por todos los microorganismos : agua , CO2, fosfatos y sales
minerales: requeridos por ciertos organismos nutricionalmente exigentes.
- Factores de crecimiento

Composición química de células microbianas:

- Macromoléculas: polisacáridos , lípidos, ácidos nucleicos y proteínas.

- Agua: solvente ideal debido a su polaridad y cohesión

Los nutrientes de pueden clasificar según:

- macronutrientes:agua, etc.

- Micronutrientes: trazas

Elementos esenciales para todos los microorganismos: CHONPS y Selenio.

Cationes y aniones esenciales para la mayoría de microorganismos: sodio, magnesio, potasio

calcio y cloro.

Nitrógeno:

- Cuando se quiere dar este a un cultivo o macroorganismo se opta por obtenerlo de una
fuente:
a) Inorgánica: NH4
b) Orgánica: aminoácidos, bases nitrogenadas de nucleótidos.

AGUA (macronutriente): todas las bacterias necesitan de agua.

 - Principal constituyente del protoplasto bacteriano
- La disponibilidad del agua se mide por un parámetro llamado actividad del agua o
potencial de agua, indicativo del agua libre, se expresa como:

Organismos capaces de sobrevivir con poca cantidad de agua: xerófilos.

CARBONO:

- Los microorganismos lo pueden utilizar del CO2 y compuestos orgánicos:

a) Endógeno: procedente de descarboxilaciones
b) Exógeno: el CO2 de la atmosfera

FOSFORO:

- Necesario para la síntesis de ácidos nucleicos y fosfolípidos.

NITROGENO Y ASUFRE:

- En la célula se encuentran en estado reducido como radical NH2 (aminoácidos, bases

nitrogenadas) y radicale SH sulfhidrilo (aminoácidos y coenzimas como la CoA.
- Pero entran a las células en formas químicas: nitrato, sulfatos.

-
- El nitrógeno y azufre ingresan a a la célula en forma de nitratos y sulfatos.
- En la célula se encuentran reducidos.

FIJACION DE NITROGENO DE LA ATMOSFERA:

- Bacterias fijadoras de nitrógeno o diazotrofos.

- Estas bacterias pueden encontrarse en asociación simbiótica con leguminosas y
bacterias del grupo Rhizobium

SALES MINERALES:

- ION potasio: en gram positivas está asociado a ácidos teicoicos.

- Magnesio: estabiliza ribosomas, membranas y ácidos nucleicos. Participa como
cofactor. Participa en las clorofilas y bacterioclorofilas de bacterias fotosintéticas.
- Calcio: cofactor de enzimas, como proteinasas.
- Hierro: para captar hierro las bacterias necesitan de sideróforos → secretan moléculas
que enlazan hierro

MACRONUTRIENTES O ELEMENTOS TRAZA:

- Manganeso: cofactor de enzimas, puede sustituir al Mg.

- Cobalto: para la vitamina B12.
- Zinc: para ADN y ARN polimerasa.
- Molibdeno: implicadas en la asimilación de nitratos, forma parte como cofactor en el
complejo nitrogenasa.
- Níquel: participa en hidrogenasas.
-

FACTORES DE CRECIMIENTO: moléculas orgánicas específicas que en pequeñas

cantidades, las bacterias lo necesitan para crecer.

- Suelen ser coenzimas o sus precursores, vitaminas.

- Brucella: requieren en su medio de cultivo a la biotina, niacina, tiamina y acido
pantoténico
- Haemophilus: necesitan suplementos de hemo y piridin-nucleotido.
- Ejemplos: biotina, cobalamina, tiamina, piridoxal, niacina, riboflavina, acido
pantoténico, acido lipoico, vitamina K.

BORO: autoinductor de la percepción de quorum sensum.

SELENIO: selenio cisteína, formiato deshidrogenasa, algunas hidrogenasas

MECANISMOS DE NUTRICION:

1. Por su fuente de energía:

• Luz: fotótrofos
i. Fuente de carbono:
1. Compuestos orgánicos→ fotoheterotrofos: bacterias verdes
chloroflexus.
2. CO2 → fotoautotrofos : Usan el agua para reducir CO2:
fotosíntesis oxigénica → cianobacteria como el nostoc. No usan
agua para reducir CO2 : fotosíntesis anoxigénica→ clorobium,
croratium.
a. Autotrofos: el CO2 puede ser incorporado con el ciclo
de Krebs, vía del hidroxipropionato, via acetil CoA
reductiva, ciclo de Kalvin.
• Quimiotrofos
▪ Se dividen en
• Oxidan compuestos orgánicos: Quimioorganotrofos
• Oxidan compuestos inorganicos: Quimiolitotrofos, donadores
de electrones:
o Bacterias nitrificantes: oxidan amoniaco a nitrito→
nitrato
o Oxidan sulfatos
▪ Por su fuente de carbono:
• Compuestos orgánicos → quimioheterotrofos
 • CO2→ quimioautotrofos
2. Por su fuente de carbono:
• Naturaleza Orgánica: heterótrofos
• Naturaleza Inorgánicos: autótrofos : CO2 como fuente de carbono.

CO2 Y ácido sulfhídrico: quimioautótrofo

GLUCOSA como fuente de carbono y CO2 como energía: quimio heterótrofa

LUZ y CO2: fotoautótrofo

FACTORES AMBIENTALES Y ATMOSFERICOS SOBRE EL CRECIMEINTO BACTERIANO:

Temperatura, radiaciones, tensión de oxígeno, pH

Efecto del pH:

Se pueden clasificar según el pH óptimo para su crecimiento, en donde tienen un mayor

crecimiento, ya que puede haber bacterias que sean neutrofilas pero que sean
resistentes a pH ácidos, estas seria bacterias neutrofilas acido resistentes:
a. Neutrófilo: pH 7 → Escherichia coli
b. Acidófilo: pH < 5.5
c. Alcalofilo: pH > 7

Efecto de la temperatura:

• Psicrófilo: crecen a 0° C como temperatura optimo, crecen de 15° C a menos. Ejemplo:

Polaromonas.
• Mesófilo: 20-45° C
• Termófilo: 55- 65° C → geobacillus stearothermophilus, thermus aquaticus.
• Para comprobar si un autoclavado ha sido adecuado se puede usar esporas de
geobacillus sterotehermophilus.
• En PCR se usan polimerosas de thermus aquaticus , debido a que se necesita trabajar a
temperaturas altas.
• Hipertermofilo: 85-113° C
Medio fluido de tioglicolato:

• Parte superior aerobio, oxigeno.

• Parte inferior: anaerobio

Compuestos esenciales para la vida: CHONPS , Se

CRECIMENTO BACTERIANO:

• FISON BINARIA: se replica SDN→ elongación celular→ formación de septo→ septo

completo→ divisoma celular → separación celular.
• Generación: intervalo que transcurre en la formación de dos células a partir de una
célula.
• Tiempo de generación:
• División celular en diferentes tiempos:
• Igual: fisión binaria
• Desigual
o Gemación
o Gemación de hifas
o División celular a partir de un tallo→ caulobacter
 o Crecimiento sin diferenciación en el tamaño celular (polar) →
phodopseudonomas.
o División celular en bacterias por esporas: streptomyces

Fisión binaria: se necesita un aparato de división llamado divisoma

3. Cada célula hija recibe una copia del cromosoma

4. El ADN se ancla a la membrana
5. Se forma un septo
a. Replicación de ADN.
i. MinC: inhibe la división celular, previene que FtsZ del divisoma
ensamble el anillo
ii. MinE: inhibe la actividad de MinC

A Escherichia coli le toma 40 minutos la replicación del cromosoma, sin embargo puede
dividirse cada 20 minutos, esto ocurre porque forman multiples horquillas de replicación.

Proceso de biosíntesis de peptidloglicano:

6. Se necesita también de autolisinas, se encuentran en el divisoma iran abriendo el

peptidoglicano, hidrolizan el enlace peptídico del acetilglucosamina y acetilmuramico
del peptidoglicano.

Curva de crecimiento:

1. Fase de latencia: depende del tamaño y edad del inoculo, cambios en la composición y
concentración de nutrientes. Por ello se seleccionan bacterias que se encuentren su
fase de crecimiento exponencial.
2. Fase de crecimiento exponencial: depende de las condiciones pH temperatura
nutrientes, procariotas crecen mas rápido que eucariotas.
3. Fase estacionaria: cuando los nutrientes se acadaban, o se producen descehos toxicos.
Crecimiento es igual a muerte.
4. Fase de muerte: cuando se produce lisis celular, las células entran a ffase de muerte.

SEMANA 6: Metabolismo microbiano

Conjunto de reacciones químicas que tienen lugar en la célula bacteriana.

7. Obtener energía en forma de ATP

8. Sustancias precursoras → componentes macromoleculares de célula bacteriana

Nutrientes –catabolismo→ carbono y energía ---anabolismo → elementos estructurales →

crecimiento y diferenciación → metabolismo primario (trofofase) y metabolismo
secundario (idiofase).

NAD ---reducción + 2 electrones → NADH

Mecanismos de generación de energía en bacterias:

• 1, fosforilación : fotosíntesis
o Sustrato reducido --- oxidación -→ sustrato oxidado + energía
o Glucosa + 6 O2 --→ 6 CO2 + agua + 317.66 kcal/mol.
o Glucolisis y ciclo de Krebs
 o Metabolismo de carbohidratos: glucosa en la via de las pentosas
fosfato y Entner Doudoroff y de la glucolisis.
o Via glucolítica: 3 etapas:
o Ruta de Embden Meyerhoff: glucosa → 2 piruvatos, 2 ATP y 2 NADH +
2H.
▪ Etapa 1: fosforilación, metabolito intermediario clave de la
glucolisis es la fructosa 1,6 difosfato.
▪ Etapa 2: Oxidación
▪ Etapa 3:
▪ RUTA EMBDEN MAYERHOFF (EMP): catabolismo de azucares
en bacterias.
o Ruta de las pentosas fosfato: glucosa 6 fosfato→ ribulosa 5 P→
fructosa 6 fosfato y gliceraldehido 3 fosfato.
▪ Puede ser simultanea a la ruta de EM.
▪ Funciona en condiciones aerobias y anaerobias.
▪ Esta via vuelve a la via glucolítica a través del gliceraldehido 3
fosfato.
▪ Tiene una fase oxidativa y otra no oxidativa
o Ruta de Entner Doudoroff: presentes en ciertas Gram negativas
aerobias, muy rara en hongos, infrecuente como vía de fermentación.
La glucosa 6 fosfato-→ piruvato y gliceraldehido 3 fosfato. Y vuelve a
la via glicolitica. Produce ATP, NADH y NADPH.

Las tres vías (glucolisis, pentosa fosfato y Entner) convergen en la formación de piruvato.
 • Fosforilación oxidativa
• Fosforilación a nivel sust rato: NADH

QUIMIOHETEROTROFOS: dos procesos: fermentación y respiración.

a. En la respiración el NADH2 se oxida usando un aceptor de electrones externo.

b. Fermentacion: oxidación parcial de un compuesto orgánico, en ausencia de
oxigeno.
i. Condiciones anerobias
ii. Se da en el citoplasma
iii. No requiere transporte de electrones, pero Vibrio succigenes puede
tenerlo.
iv. Intermediario importante: piruvato
v. Permite la regeneración del NAD.

9.
i. Fermentacion alcohólica: sustrato piruvato, productos: etanol y CO2.
Ganancia neta: 2 ATP por glucosa. pH acido de 2 a 4. Temperatura
entre 10 y 35° C, pH:2-4. Fermentadores: Sacharomyces cerevisiae.

Se puede obtener etanol: malta → cerveza, frutas→ vino, desechos→

combustible.

ii. Fermentacion homoláctica: obtención de acido lactico. Leche → yogurt

y queso por Lactobacillus o Streptococcus. Granos → pan de centeno
por Lactobacillus bulgaricus. Carne → salchichas por pediococcus.

iii. Fermentacion láctica u homofeementativa: producto: acido lactico.

iv. Fermentacion heterolactica: se obtiene acido lactico y etanol + CO2 y

ATP a partir de glucosa.
 v. Fermentacion acido mixta: da como productos, acido acetico, formico,
etanol, CO2, H2 y butanodiol.

vi. Fermentación butnodiolica: se produce butanodiol y acetoina,

presente en Klebsiella, serratia y erwinia.

vii. Fermentacion proprionica: forma propionato, de la obtención del

piruvato en la glucolisis. Se da en propionibacterias gran posisitivas,
sin esporas y anaerobias, los sustratos son azucares, se da en el
metabolismo rumial (rumiantes). Estas bacterias se usan para la
maduración de quesos y para obtener derivados lacteos. }

viii. Fermentacion butírica: a partir de piruvato se obtiene butanol . Se da

por clostridios gran +, esporulados, bacilos, anaerobios estrictos
móviles. Importancia: indica enfermedades en los animales, pero
también las bacterias sirven para obtener queso suizo a partir de la
leche por acción del Propionibacterium freudenreichii, entre otros.

RESPIRACION AEROBIA:

1. Vias oxidativas de la glucosa

a. Glucolisis
b. Via de las pentosas fosfato
c. Via Entner
2. Ciclo de Krebs: via glucolítica → piruvato → acetil CoA→ ciclo de Krebs
→ 36 ATP. Metabolitos intermedios: succinil Coa, alfa cetoglutarato,
oxalacetato.
3. Cadena respiratoria

Respiracion anaerobia
Ciclo de los acido trigarboxilicos TAG o ciclo de Krebs, mediante la formación

El piruvato es el punto común de glucolisis, pentosa fosfato y Ebnter.

Transportadores de electrones:

Fotosíntesis:
Función de los pigmentos: captar la luz. Como clorofila.

Reacciones:

SEMANA 7: ENTEROBACTERIAS PATOGENAS

Enterobacterias: bacterias que se encuentran en el intestino.

Característica de los lipopolisacaridos de la membrana externa: presencia de 1 o 3 antígenos

para subdividir las especies:

- Antígeno O: en todas las enterobacterias, termoestable

- Antigeno K: permite formar la capsula bien definida o capsula adherente amorfa.
 - Antigeno H: flagelos peritricos.

Si la enterobacteria tiene movilidad tiene flagelos peritricos.

Las enterobacterias se encuentran como Bacilos Gram negativos que fermentan glucosa. :

Para la identificación de enterobacterias s realizan tres pruebas: frementan la glucosa, reducen

nitratos, prueba de oxidasa negativa.

Para saber el genero de enterobacteria se recurre a prueba de fermentación acido láctica y

fementacion butanodiol.

10. Fermentadores
a. Enterobacterias: fermentan la glucosa, reducen nitritos, oxidasa negativo ya
que carecen de citocromo oxidasa. .
i. Fermentación acido mixta: producen lactato, acetato, succinato
ii. Fermentación butanodiol: producen butanodiol, etanol y CO2.

E. Coli enterohemorrágica: incapaces de fermentar el sorbitol.

E. coli enteropatogenico (EPEC):

E. coli enteroinvasivo:

E. coli enteroagregativa: causa diarrea aguda o persistente. Se adhiere a la mucosa, la

biopelícula y produce efecto citotóxico. Posee capacidad

E. coli de adherencia difusa (DAEC):

Pruebas en laboratorio: Agar Mc Conkey

Antigeno VI→ salmonella