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PROCESOS BIOTECNOLOGICOS
Q. EN .A. LUZ CARMEN CASTILLO MTZ.

Estructura Eucariota: Núcleo esta definido. Son procariotas. Procariota: Su significado del griego es "Antes del núcleo" ya que no poseen un núcleo celular lo que conlleva a que su ADN no tenga una envoltura nuclear y que este libremente en el citoplasma Bacteria: Son organismos unicelulares muy pequeños y relativamente sencillos. .

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ELEMENTOS OBLIGADOS • Pared celular • Membrana plasmática • Citoplasma • Ribosomas • Región nuclear • • • • • ELEMENTOS FACULTATIVOS Flagelos Pelos Endosporas Inclusiones citoplásmicas Cápsula .

PROCARIOTA .

Pueden poseer también. y en su zona central aparece un nucleoide que contiene la mayor parte del ADN bacteriano. fimbrias o pili muy numerosos y cortos. Presenta un aspecto viscoso. implantados en la membrana mediante un corpúsculo basal . que pueden servir como pelos sexuales para el paso de ADN de una célula a otra . • Facultativos: Muchas bacterias pueden presentar flagelos generalmente rígidos.La célula bacteriana consta de elementos: • obligados como el citoplasma.

Movilidad y fijación .

C-Amphitrichous. A-Monotrichous. B-Lophotrichous.Examples of bacterial flagella arrangement schemes. D-Peritrichous .

de acuerdo a la resistencia al ácido alcohol que presenten. La bacterias se pueden agrupación y color: Gram positivas o Gram negativas.Morfología de las bacterias La clasificación de las bacterias se basa en el estudio de sus características mediante técnicas que oscilan entre las más sencillas tinciones y los más complejos estudios moleculares. La mayor parte de las bacterias puede ser ubicada en uno de estos dos grupos o en un tercero. .

Tinción de Gram .

una proporción importante de bacterias puede dividirse en dos grandes grupos: Gram positivas (se observan de color azul . .se aprecian de color rojo).• Con la tinción diferencial de Gram. que se combinan con elementos cargados negativamente. herramienta de gran utilidad. • La técnica se basa en las diferencias físicas fundamentales de la pared celular y emplea colorantes catiónicos (cristal violeta y safranina).debido al colorante cristal violeta) y Gram negativas (pierden el cristal violeta y conservan la safranina .

La pared celular de los procariotas La capa responsable de la rigidez en las paredes de Gram (+) y Gram (-) es el peptidoglicano (o mureína). Gram positivas Gram negativas En Bacteria el peptidoglicano representa hasta el 90% de la pared En Bacteria el peptidoglicano constituye el 10% de la pared .

pared celular y cápsula/glicocálix . En Bacteria Gram negativas la pared contiene además de peptidoglicano una capa adicional compuesta de lipolisacárido • Envoltura celular .Bacteria Gram positivas La pared contiene además del peptidoglicano pequeñas cantidades de ácidos teitoicos. • Muchas Bacteria Gram positivas tienen varias capas de peptidoglicano (hasta 25).Cuenta con 3 capas: membrana citoplásmica.

Yersinia. Shigella. Vibrio. Campylobacter . Salmonella. Pseudomonas. • Bacilos facultativos: Aromonas. Escherichia. Citrobacter. Flavobacterium. Serratia.Gramnegativas • Bacilos aerobios: Acinetobacter.

Tipos de metabolismo .

Fuente de carbono • AUTOTROFOS: Carbono Inorgánico Cuya fuente única de carbono es el CO2 • HETEROTROFOS: Carbono Orgánico Cuando su fuente de Carbono es materia orgánica. .

Fuente de energía • FOTOTROFOS: Energía Solar (LUZ). FOTOHETEÓTROFOS: Utilizan la luz como fuente de energía y las biomóleculas como fuente de Carbono LUZ Compuesto Células Orgánicos FOTOAUTÓTROFOS: Utilizan la luz como fuente de energía y el CO2 como fuente de Carbono Luz O2 CO2 Células .

QUIMIOHETERÓTROFOS: O2 CO2 Compuesto Células Orgánicas • QUIMIAUTOTROFOS: Cuya fuente de energía es un compuesto químico que se oxida.Fuente de energía • QUIMIOTROFOS: Energía química. Fe +2 Fe +3 H2S S CO2 Células .

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• Oval o esférica (coco) • Cilíndrica o en forma de bastón (bacilo) • Formas intermedias de algunos casos anteriores.Formas bacterias.(Esférica y bastón = cocobacilo) • Espiral o helicoidal (espirilo) • Filamentosa .

En forma cúbica de 8 elementos: Sarcinas.Agrupación bacteriana • COCOS (aislado) En parejas: Diplococos. En racimos: Estafilococos. En cubo: Tétradas. . En cadena: Estreptococos.

Agrupaciones helicoidales • HELICOIDAL  Borrelia Treponema Leptospira .

reproducen lo hacen a través de fisión binaria es una forma de reproducción asexual. y cuando se minutos.Reproducción • Las bacterias se bacterianas pueden desarrollan a un tamaño duplicarse hasta en 9. Bajo condiciones optimas una bacteria puede desarrollarse y dividirse extremadamente rápido. así las poblaciones .8 fijo.

se • Tras la duplicación del ADN. la pared bacteriana crece hasta formar un tabique transversal separador de las dos nuevas bacterias.Reproducción • Generalmente las bacterias reproducen por bipartición. que está dirigida por la ADN-polimerasa que se encuentra en los mesosomas. .

Reproducción por bipartición .

las bacterias poseen unos mecanismos de producción sexual o parasexual. que esta dirigida por al ADN-polimerasa que se encuentra en los mesosomas. • Pero además de este tipo de reproducción asexual.• Tras la duplicación de ADN. Que puede realizar por: • Transformación. mediante los cuales se intercambias fragmentos de ADN. la pared bacteriana crece hasta formar un tabique transversal separador de las dos nuevas bacterias. • Conjugación • Transducción .

Transformación • Consiste en el intercambio genético producido cuando una bacteria es capaz de captar fragmentos de ADN. de otra bacteria que se encuentran dispersos en el medio donde vive. .

además del cromosoma bacteriano . un fragmento de ADN. a otra bacteria receptora F-.Conjugación • En este proceso. • La bacteria que se llama F+ posee un plásmido. una bacteria donadora F+ transmite a través de un puente o pili.

. que se comporta como vector intermedio entre las dos bacterias. se realiza a través de un virus bacteriógrafo.Transducción • En este caso la transferencia de ADN de una bacteria a otra.

Tarea 1 • Realizar una investigación de la célula eucariota. y realizar un cuadro comparativo entre los eucariotas y las procariotas .

Ejemplos: • LEVADURAS • ALGAS • PROTOZOOS .

PROTOZOO
• Su tamaño va desde 1 µm, son visible a simple vista. • Se multiplican por bipartición o gemación o esporulación o reproducción asexual. • Se encuentran en agua dulce, salada, suelos, plantas y parásitos animales

Alga celular
• Pueden ser microscópicos o gigantes de mas de 100 pies. • Su reproducción es por fisión binaria asexual. • Crecen en agua dulce y marina y en el suelo.

Algas y microalgas: biohidrógeno
 Organismos fotosintéticos.  Viven usualmente en medios acuáticos aunque también se pueden encontrar en ambientes terrestres y algunas especies pueden en condiciones heterótrofas.  Especies: Formas unicelulares (microalgas) Estructuras muy complejas (macroalgas).  Alimento: Son fosfatos y nitratos que pueden extraer de residuos orgánicos.

como alimento y suplemento de efluentes y como materia prima para cosméticos.Aplicaciones: Como fertilizantes. En años recientes se han estudiado como alternativa para la obtención de biocombustibles: biodícel. biohidrógeno y biometano. bioetanol. Biorremediación: Degradación de sustratos. .

Nucléico o ADN O RNA envuelta en una capa de proteína. .2 µm • Consta de una cadena de Ác. • Son parásitos obligados es decir requieren una célula viva para su propagación. • Su tamaño es de 0.015 µm a 0.VIRUS • No son considerados como células.

. 3.Tarea 2 Realizar un esquema de cada de las siguientes bacterias su forma.Escherichia coli 2.Bacillus subtilis. 1.Staphylococcus aureus 5. tipo de alimentación y su reproducción...Saccaromyces cereviceae ..-Pseudomonas 6.-Streptococcus faecalis 4. tipo de bacterias por su tinción gram.

Aislamiento e identificación .

Aislamiento e identificación .

. Un medio de cultivo debe contener todos los nutrientes necesarios en cantidades adecuadas para sobrevivir. A estas sustancias se les llama nutrientes.O. pueda desarrollar debe tomar del ambiente las sustancias necesarias para obtención de energía que será empleada para la biosíntesis y como consecuencia particular la reproducción celular.Introducción Para que un M.

agua y pH adecuado.Medios de cultivo Conjunto de nutrientes con determinadas condiciones ambientales que permiten que los microorganismos crezcan y se reproduzcan. factores decrecimiento. . Aportan carbón y nitrógeno y elementos minerales.

3) Estudios microscópicos. 2) Como paso previo para el estudio e identificación del mio. . 4) La realización de antibiogramas para determinar la sensibilidad.Usos 1) Separación y aislamiento de los diferentes especies de microbios presentes en una siembra. 5) Pruebas CMI (Concentración mínima de inhibición) 6) Para conservación de especias microbianas o muestras. Visualización de las características de las colonias en medios sólidos. Problema.

Factores de crecimiento: Sales. Factores de arranque: Factores inhibidores: . Gelatinas NO ENERGETICOS Fuentes de Azufre: Aminoácidos. Fuentes de fósforos:  Fosfatos.Requerimientos ENERGETICO Fuentes de Carbono: Azucares Fuentes de Nitrógeno.

Factores de crecimiento. Vitaminas.Componentes principales • • • • • Agar. Extractos de carne o levaduras Minerales .

vitaminas hidrosolubles y sales. Pectona Principal fuente de Nitrógeno orgánico: puede contener además algunas vitaminas y a veces carbohidratos.Extracto de carne • Contiene las substancias hidrosolubles del tejido animal que incluyen carbohidratos. dependiendo del material proteico digerido. . compuestos orgánicos de nitrógeno.

5 La mayoría de las bacterias asociadas a la vida vegetal o animal.5 a 7.pH • pH óptimo 6.5 para algunas especies exóticas .5 o máximo de 9. • pH mínimo 0.

• Presión hidrostática: Tensión al líquido. Halofilicas: Bacterias que viven en altas concentraciones de NaCl. .Agua • Presión Osmótica: Tensión que se ejerce cuando el agua difunde a través de una membrana. • Halofilicas facultativas: Bacterias que viven con o sin NaCl. • • Plasmolisis: La bacteria explota.

el agar no es fuente de nutrientes para las bacterias. . Extracto de levadura • Una fuente muy rica de vitaminas B. el agar disuelto se gelifica cuando la temperatura se reduce por debajo de 45 ºC.Agar • Usado como agente solidificante. contiene además nitrógeno orgánico y compuestos carbonados.

Ch.5.O. 2. Medios enriquecidos: Son medios que han sido complementado con otros nutrientes que proporcionan.A.N. . E.. Medios basales: Son medios simples que contienen en general los nutrientes esenciales para promover el desarrollo a microorganismos poco exigentes nutricionalmente ‘in vitro’ . Ejemplo : A. M. G. mas exigentes.S. Ejemplo G. ‘Factor de crecimiento’ cuya finalidad es promover el desarrollo de M.Clasificación de los medios 1..

BP. patógenos que pudieran encontrarse en dicha muestra.3.O. .Medios Diferenciales: Contienen sustancias químicas o indicadores que permiten identificar con facilidad algunos géneros o especies bacterianas por el aspecto característico de las colonias y su capacidad bioquímica.V.Medios selectivos o inhibitorios: Se utiliza para suprimir el desarrollo y al mismo tiempo promover y/o seleccionar el crecimiento de los M.B.. Ejemplo: Las bioquímicas. 4. Ejemplo: A. y A.

Ejemplo: Cary-Blair . 6.. Tienen la capacidad amortiguadora que facilita la viabilidad del M. para que no se multiplique pero que permanezca latente.O.5.. Ejemplo: Caldo tetrationato.Medios de transporte: Sirven para mantener viables a los M.Medios de enriquecimiento: Son generalmente caldos que poseen un efecto inhibitorio sobre géneros bacterianos favoreciendo al mismo tiempo al desarrollo de otro que interesa más..O. por un lapso corto de tiempo y que posteriormente deseamos recuperar.

Ejemplo: B. estos medios deben estar desprovistos de carbohidratos.A.B. .Medios de conservación: Son generalmente medios basales. destinados para el mantenimiento de bacterias. esto es con el propósito de que el medio no se acidifique y las bacterias no mueran..7.

Métodos de aislamiento . Inoculo 3. Material de siembra 2.Técnicas para aislar e identificación de microorganismos 1.

• Incubación :A temperatura adecuada de 12 a 24 horas . Si la muestra es líquida se tomará con pipeta graduada o pipeta Pasteur una cantidad suficiente después se homogeniza.Preparación de Inoculo • Definición: Es una cantidad suficiente y representativa de la bacteria problema. • Preparación: Si la muestra es sólida o semisólida se tomada con asa estéril. Debe partir de un cultivo puro con una concentración adecuada.

. a)Si se utiliza asa de siembra se toma de la muestra problema y se adiciona al medio líquido agitando el asa.Métodos de siembra 1. c)Si se realiza con hisopo realice igual que en a). b)Si se realiza con pipeta se toma el volumen conocido (según dilución) de la muestra problema y se vierte al medio de cultivo líquido agitando vigorosamente. Siembra del inoculo en medio líquido.

Técnica de Barry .Siembra del inoculo en medio sólido.

Aislamiento en Estría .

Estría múltiple .

Técnica de los cuatro cuadrantes .

Técnica por dilución .

Siembra del inoculo por picadura a) Siembra por picadura .

Siembra por estría en tubo con medio sólido inclinado (bisel o pico de flauta) .

Siembra por picadura y estría .

Temperatura PSICRÓFIALAS: CRECEN DE 0-20 ºC MESÓFILAS: CRECEN DE 25-40 ºC TERMÓFILAS FACULTATIVAS: CRECEN DE 25-55 ºC TERMÓFILAS: CRECEN A TEMP >A 50 ºC .

ANAEROBIAS: CRECEN SOLO EN AUSENCIA DE O2 LIBRE ANAEROBIAS FACULTATIVAS: CRECEN EN PRESENCIA O AUSENCIA O2 LIBRE MICROAEROFILAS: CRECEN EN PEQUEÑAS CANTIDADES DE O2 LIBRE .Requerimientos del oxigeno AEROBIAS: CRECEN SOLO EN PRESENCIA DE O2 LIBRE . . .

Morfologia • Entre las principales características de las bacterias se encuentran su tamaño. forma. estructura y tipo o modo de agrupación. • Todas estas características van a constituir la morfología propias de las células bacterianas: .

. • Agrupaciones microscópicas solo por microscopía y corresponde a lo que realmente se entiende por agrupación bacteriana.Agrupación • Las agrupaciones macroscópicas son visibles a simple vista y corresponden a su crecimiento en un punto en un medio de cultivo sólido para formar colonias que serán distintas y características para cada tipo bacteriano. es decir las tendencia que representan los distintos tipos bacterianos para asociarse entre sí formando pequeños grupos de 2 o más bacterias.

Criterio importante a la hora de una valoración taxonómica de los mismos. Características o tipo de medio de cultivo sólido. Tipo de microorganismo problema. 2. La reproducción de esa bacteria en otras muchas en ese punto del medio sólido origina lo que se conoce como colonia • Estas colonias presentaran una morfología microscópica fácilmente reconocible y variable en función de: 1.Morfología microscópica Tras el periodo de incubación estimado como el adecuado en el medio sólido donde se ha realizado la siembra. • . deberán aparecer pequeñas masas visibles a simple vista.

Conteo de colonias en los diferentes medios de cultivo y como se reporta .

. Ejemplo: No existe crecimiento de UFC en placa de 1:100. entonces se reporta: >100 UFC/ml Valor estimado.Conteo de UFC • Sin colonias Reportar menos de 1 por el inverso de la dilución más baja.

.500 ó 5. REPORTAR: >250 UFC/ 10g o ml de muestra valor estimado.Conteo de UFC • Más de 250 UFC / g o ml Reportar mayor de 6.700 veces por el inverso de la dilución más baja.

. de “Chiken Happy” y te piden que le realices una prueba al producto final. sabemos que pueden crecer microorganismos mesolíticos.Eres el Jefe de Laboratorio de Microbiología. ni medio de cultivo).Tarea 3 • 1. Como control de calidad. Es necesario crear un medio rico en nutrientes que crezcan de todo. • Las características son: Es polvo.. con pH de 7. psicrofilas.0. Además describe el procedimiento como lo harías (no omitas ningún paso.

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