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CLULAS PROCARIOTAS
En racimos de cocos (estafilococos), Cadenas de cocos o Bacilos (estreptococos o estreptobacilos), diplococos, sarcinas
(agrupados en tetradas u 8 cocos en forma de cubo).
Pared celular:
Es una capa rgida presente en todas las bacterias, con excepcin de los micoplasmas.
Este est formado por cadenas de dos azcares, la N-acetilglucosamina y el N-acetilmurmico, unidos a cortas cadenas
de aminocidos.
Y las inclusiones celulares (de reserva carbonada, polifosfato, azufre o con funciones especficas).
Nucleoide:
En las bacterias tambin existe material gentico en forma de uno o varios plsmidos
Pequeas molculas de ADN circular extracromosmico que se replican de forma independiente al cromosoma
principal.
Apndices externos:
Las clulas procariotas pueden presentar apndices externos, como flagelos, pelos y fimbrias.
Flagelos:
Las bacterias pueden presentar uno o varios flagelos situados en los extremos (flagelacin polar) o alrededor de toda
la superficie (flagelacin peritrica).
Los flagelos estn constituidos por un filamento rgido y curvado que se une a la estructura basal, anclada a la clula, a
travs de un gancho.
La estructura basal est formada por una serie de anillos, uno de los cuales, el anillo M, tiene capacidad de rotacin (lo
cual permite el movimiento de todo el flagelo).
Fimbrias y pelos:
CLULAS EUCARIOTAS
Membrana Celular: Rodea la clula, la protege y permite el paso de ciertas sustancias del exterior al interior de la
clula.
Ncleo: Contiene la informacin gentica de la clula, organizado de forma lineal, replicacin del DNA y sntesis de
RNA.
Mitocondria: Son los centros del metabolismo oxidativo, responsables de generar la mayora del ATP.
Cloroplastos: Centros donde se lleva a cabo la fotosntesis, se encuentran solo clulas de plantas y algas verdes.
Aparato de Golgi: Continua el procesamiento de protenas, son clasificadas para su transporte hacia su destino final.
Adems sntesis de lpidos y algunos polisacridos que componen la pared celular.
Citoesqueleto: Proporciona el marco estructural de la clula, determina la forma de la clula y la organizacin general
del citoplasma
TINCION DE GRAM
TINCIN DE GRAM
TINCIN:
El uso de colorantes permite cambiar el color de las clulas de los microorganismos y poder realizar la observacin en
microscopio ptico.
TINCIN SIMPLE:
Se caracteriza por
Se utiliza un solo colorante y este debe ser bsico (azul de metileno o fucsina).
TINCIN NEGATIVA:
Es un tipo de tincin simple pero con ciertas diferencias ya que nos permite observar caractersticas estructurales de la
bacteria.
Se caracteriza por:
Nos permiten visualizar sobre un fondo oscuro la forma de la bacteria y alguna otra estructura como es la presencia de
capsula.
TINCIN DIFERENCIAL:
Nos permite visualizar su morfologa otras caractersticas como puede ser la composicin de la pared bacteriana.
TINCIN DE GRAM:
Es un procedimiento de gran utilidad empleado en los laboratorios donde se manejan pruebas microbiolgicas.
Es definida como una tincin diferencial, ya que utiliza dos colorantes y clasifica a las bacterias en dos grandes grupos:
Hoy en da, sigue siendo una de las tinciones ms utilizadas universalmente debidas a lo econmico, sencillas y eficaz
que resulta.
En microbiologa clnica resulta de gran utilidad, ya que a partir de muestras clnicas directas provenientes de sitios
estriles.
Se puede saber de manera rpida las caractersticas de la muestra y hacer una diferencia de los potenciales
microorganismos causantes de una infeccin.
Los principios de la tincin de Gram estn basados en las caractersticas de la pared celular de las bacterias, la cual le
confiere propiedades determinantes a cada microorganismo.
La penicilina mata a las gram positivas, ya que bloquea la formacin de enlaces peptdicos entre las diferentes cadenas
del peptidoglucano.
No contiene Lipopolisacridos.
Pared de peptidoglucano.
Posteriormente, se coloca lugol, el cual sirve como mordiente e impide la salida del cristal violeta.
Formando un complejo cristal violeta/yodo que satura los espacios del peptidoglicano de la pared bacteriana.
En seguida, se coloca una mezcla de alcohol-acetona, la cual deshidrata la pared bacteriana y cierra los poros de la
misma.
Tambin destruye la membrana externa de las bacterias Gram negativas debido a que sta es soluble a la accin de
solventes
Las bacterias Gram positivas, al contener una gran cantidad de peptidoglicano, retienen con mayor fuerza este
complejo.
Mientras que las Gram negativas no lo pueden retener por tener menos cantidad de peptidoglicano.
Por ltimo, se coloca safranina, la cual funciona como un colorante secundario o de contra tincin.
Sirve para teir las bacterias que no pudieron retener el complejo cristal violeta-yodo.
No todas las bacterias se pueden teir por esta tcnica, ya que carecen de pared celular (micoplasma).
O su pared celular tiene una composicin qumica diferente (micobacterias, que cuentan con una gran cantidad de
cidos miclicos).
HISTORIA
Paul Erlich, basndose en los hallazgos de Koch inform mes y medio despus su mtodo para teir el bacilo.
Franz Ziehl cambio el mordiente de Erlich, por otra substancia semejante pero de composicin ms precisa.
Us cido Carblico, dio un paso prctico y reproducible, que continua usndose en nuestros das.
Friedrich Neelsen informo que obtena excelentes resultados con la Fucsina en cido carblico al 5%.
Adems demostr que la decoloracin con cido sulfrico al 25% le daba excelentes resultados.
Una vez teidos, los bacilos presentan resistencia a la decoloracin con sustancias cidas.
Saprofitos del suelo, agua, hasta grmenes capases de producir lesiones en el ser humano.
Las infecciones microbianas son intracelulares y provocan por lo general lesiones granulomatosas de
crecimiento lento.
La cual le confiere a las micobacterias una elevada hidrofobia y produce sus caractersticas de tincin
acido-resistencia.
Esquema de la composicin de la pared celular de las micobacterias.
FUNDAMENTO
Algunas bacterias tienen la propiedad de resistir la decoloracin con cidos fuertes despus de ser
teidos con fucsina caliente.
Los cidos miclicos junto con lpidos libres proveen a la clula una barrera hidrofbica.
La tincin se basa en colocar carbol-fucsina y calentar la preparacin ligeramente para solubilizar las ceras,
lpidos y otros cidos grasos, para permitir el paso libre del colorante.
Al enfriar, los componentes de la pared vuelven a solidificar, resistiendo la accin abrasiva del alcohol-
cido.
La tcnica fuerza la penetracin de la fucsina en la pared celular mediante la accin del fenol y el calor.
Permitiendo el paso del colorante bsico que se une a los cidos miclicos de carga negativa.
El calor aumenta la energa cintica de las molculas del colorante, facilitando su entrada a las bacterias.
Cuando cesa la aplicacin de calor y se elimina el exceso de fenol mediante lavado con agua, la pared
recupera su consistencia cerosa.
TCNICA
Fijar la muestra con calor, haciendo pasar el portaobjeto 3 veces sobre la flama del mechero.
Colocar el colorante primario (carbofucsina) y flamear la muestra por debajo del portaobjeto hasta el
desprendimiento de vapores blancos, durante 5 minutos.
Aadir el colorante de contraste (azul de metileno) durante 1 - 2 minutos y lavar con agua corriente.
TIPO DE MUESTRAS
Lquido Cefalorraquideo.
Lquido Pleural.
Lquido Sinovial.
Lquido Pericrdico.
Lavado Broquioalveolar.
Abcesos.
Aspirados.
Expectoracin.
Aspirado Endotraqueal.
TUBERCULOSIS
MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS
Presenta una membrana citoplsmica cubierta por una capa extensa de peptidoglicanos unidos a
polisacridos.
Los cuales se encuentran esterificados con los cidos miclicos, formados por lpidos libres, glucolpidos
y peptidoglucolpidos.
Tal estructura, que le brinda una apariencia cerosa, le confiere una alta hidrofobicidad.
Los cidos miclicos forman complejos con apariencia acordonada cuando se unen a carbohidratos.
Los sulfolpidos presentes inhiben la fusin fago-lisosomal y a menudo se consideran indicadores de cepas
virulentas.
TUBERCULOSIS
Enfermedad sistmica, crnica, que afecta principalmente al sistema respiratorio; es causada por el complejo
de Mycobacterium tuberculosis y se adquiere principalmente por va area.
Aunque se trata principalmente de una enfermedad pulmonar (85%), afecta tambin a otros rganos y tejidos.
EPIDEMIOLOGA
La tuberculosis se mantiene como una de las enfermedades infecciosas de mayor mortalidad en el mundo.
La transmisin zoontica de estos patgenos ocurre principalmente por el contacto estrecho con el ganado y el
consumo de productos de estos animales, tales como leche no pasteurizada.
De acuerdo con informacin del Sistema nico para la Vigilancia Epidemiolgica, Mxico registra cada ao unos
15 mil casos nuevos de tuberculosis pulmonar y alrededor de 2 mil defunciones.
PATOGENIA
La infeccin primaria ocurre habitualmente por inhalacin del microorganismo en aerosoles de una persona infectada.
Los macrfagos los distribuyen a otras reas pulmonares y a ganglios linfticos regionales.
En los pulmones, las clulas T activadas producen citocinas, tales como IFN-g y factor de necrosis tumoral alfa (TNFa).
que producen entonces xido ntrico (NO), que contribuye fundamentalmente en el control de la
infeccin.
Una vez que se monta una respuesta inmune celular, las bacterias disminuyen y se desarrollan
granulomas.
La caseificacin consiste en la licuefaccin de un tubrculo maduro, con la formacin de una cavidad en la que los
bacilos se multiplican.
Varios componentes de la pared celular de las micobacterias tienen actividad inmunomoduladora, entre ellos:
La lipo-arabinomanana y lipoprotenas.
CUADRO CLNICO
a mayor parte en el transcurso de los dos primeros aos posteriores a la adquisicin de la infeccin.
TUBERCULOSIS PRIMARIA:
El tubrculo puede sufrir fibrosis y calcificacin, aunque algunas bacterias no proliferativas pueden persistir.
De manera alternativa, una lesin caseosa (en licuefaccin) puede abrirse y descargar su contenido.
Creando una cavidad que puede facilitar la dispersin, a travs de las vas linftica y hematgena a
tejidos diversos:
hgado, bazo, riones, hueso o meninges. Los signos y sntomas dependen del rgano o tejido afectado.
REACTIVACIN DE LA TUBERCULOSIS:
Ocasionada habitualmente por la reactivacin de micobacterias latentes en una lesin primaria (con
mayor frecuencia, de origen pulmonar).
TUBERCULOSIS MILIAR:
Ocurre cuando la bacteria se disemina a travs de la sangre, invadiendo muchos rganos a la vez.
Suele aparecer en pacientes muy inmuno-comprometidos, o con casi inexistente sistema inmune
DIAGNSTICO
BACILOSCOPA:
Examen microscpico para la deteccin de bacilos cido alcohol resistentes mediante la tincin de
ZiehlNeelsen.
Presenta baja sensibilidad, ya que se requieren a l menos 5 000 bacilos/ml de esputo para que la
microscopa resulte positiva.
La sensibilidad es an menor en casos de tuberculosis extra-pulmonar, cuando existe co-infeccin con HIV y cuando la
infeccin es debida a micobacterias no tuberculosas.
Conocida como mtodo de Mantoux, s un mtodo estndar para determinar si una persona est
infectada por el microbio Mycobacterium tuberculosis.
La prueba cutnea de la tuberculina se realiza inyectando 0.1 ml de derivado proteico purificado de la tuberculina en la
cara anterior del antebrazo.
Cuando se aplica correctamente, la inyeccin debe producir una elevacin leve de la piel (una roncha)
de 6 a 10 mm de dimetro.
La reaccin debe medirse en milmetros de induracin (rea palpable, elevada, endurecida o con
hinchazn).