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1. Objetivos generales
1.1. Determinar la presencia de lípidos en muestras de alimentos
1.1.Objetivos Específicos
1.1.1. Llevar a cabo el proceso de saponificación, tinción y solubilidad para
determinar la presencia de lípidos en muestras alimenticias
1.1.2. Establecer las propiedades físicas y químicas de los lípidos que me
permiten su identificación.
2. Resultados
2.1. Tinción
Figura 1. Resultados de coloración mediante el Sudan III y la tinta roja. Donde las letras
corresponden a A: Huevo B: Aceite vegetal C: Margarina D: Aguacate E: Tocino y F: Caldo
de pollo.
Como se observa en la imagen, los tubos B, E y D con tinta roja se encuentran totalmente
teñidos en presencia de la tinta roja, mientras que con el Sudán 3 se aprecian la división de
la mezcla en dos fases. Por otro lado, en el resto tubos A, F y C se aprecia una contextura
similar a la de una emulsión.
2.2 Solubilidad
Como se aprecia en la figura 2, en la parte A, el tubo con agua y aceite girasol se evidencia
dos fases, mientras que el otro tubo con aceite girasol y cloroformo no se distingue ninguna
fase. Seguido, en la parte B de la ilustración, se aprecia que en el tubo con cloroformo y
margina se observa un contextura espumosa muy tenue en la superficie, pero no en dos
fases, el tubo del centro con cloroformo y caldo de pollo se observa una mezcla
heterogénea y el tubo de la derecha con huevo y cloroformo se aprecia un emulsión. La
correspondiente figura se presenta a continuación.
2.3 Saponificación
Figura 3. A: Aceite de girasol y NaOH previo a la agitación. B: Aceite de girasol y NaOH
posterior a la agitación. C: Proceso de saponificación terminado.
3. Análisis
Los lípidos, como las proteínas y los carbohidratos, son componentes esenciales de todos
los organismos vivos. Sin embargo, a diferencia de estos otros tipos de biomoléculas, los
lípidos tienen estructuras muy variadas. A menudo se definen como compuestos orgánicos
insolubles en agua (o solo escasamente solubles) que se encuentran en los sistemas
biológicos, pero esta es una definición muy amplia.
Unas características de estos, es que son muy solubles en solventes orgánicos no polares,
y son hidrofóbicos (no polares) o anfipáticos (que contienen regiones tanto polares como no
polares). También su baja solubilidad se debe a que su estructura química es
fundamentalmente hidrocarbonada (alifática, alicíclica o aromática), con gran cantidad de
enlaces C-H y C-C. La naturaleza de estos enlaces es 100% covalente y su momento
dipolar es mínimo. (Gutiérrez, s.f.)
Para el desarrollo de esta práctica se hizo uso del Sudán III para la identificación de lípidos.
Figura 4. Estructura química del Sudán III (PubChem, s.f.).
Sudán III, 1-(4-(fenil diazenil) fenil) azo naftaleno-2-ol, es un miembro de los colorantes de
Sudán que se utilizan para este tipo de pruebas. Básicamente, este tinte se usa para
colorear sustancias orgánicas no polares como aceites, grasas, ceras y otras moléculas de
hidrocarburos de cadena larga. En este laboratorio de bioquímica, el Sudán III se utilizó
para la determinación de lípidos (”Why do we use Sudan III to identify lipids? | eNotes",
s.f.).
Para la presente práctica se emplean dos lípidos esenciales, los cuales son la margarina y
el aceite vegetal. Si bien, ambos pertenecen a familia de las grasas, su composición a nivel
de ácidos grasos varía así como sus propiedades físicas. Por un lado, el aceite vegetal es
un triglicérido en fase líquida de origen vegetal y animal, cuya composición principal
consiste en la presencia de un ácido graso poliinsaturado llamado ácido linoleico1 , ácidos
grasos mono insaturados y saturados en menores proporciones por cada 100g de aceite
(Wikipedia contributions, margarina, 2019). Asimismo, se cree que el aceite de girasol es
más saludable a nivel nutricional que otros aceites. Siguiendo con esta línea, se presenta la
estructura del principal ácido graso del aceite de girasol (ácido linoleico).
Por otro lado, la margarina es una grasa de contextura semi sólida o de emulsión
compuesta de agua y aceite a temperatura ambiente (Carrero I, Herráez A.). Asimismo, está
compuesta por ácidos grasos poliinsaturados, insaturados y saturados al igual que los
aceites vegetales en un muestra de 100g de margarina. No obstante, algunas margarinas
se componen de colesterol2 a razón de 1-2 mg por cada margarina (Top culinario, 2016) . Lo
anterior, propicia que a nivel nutricional la margarina no sea tan favorable en comparación
con aceites de origen vegetal, ya que la acidificación del colesterol propicia enfermedades
severas cardiovasculares y metabólicas. De la misma manera, es importante recalcar que
actualmente no todas las margarinas comerciales son elaboradas a base de colesterol, pero
la gran mayoría de estas si lo contienen. Con esto, se presenta la ilustración del colesterol
presente en la gran mayoría de margarinas.
1 Ácido linoleico: es una ácido graso poliinsaturado con dos dobles enlaces de la familia de los esenciales, es
decir el organismo no puede producirlo y se adquiere a partir de la dieta.
2 Colesterol: El colesterol es una sustancia cerosa y parecida a la grasa que se encuentra en todas las células
del cuerpo (MedLine plus, 2019).
Figura 6: Ilustración del colesterol presente en la margarina.
Como se observa en la figura 2 del ítem 2.2 de resultados, al añadir el aceite vegetal al tubo
con agua, se aprecia claramente la presencia de dos fases, ya que el agua al ser más
densa que el aceite vegetal (997 kg/m³ y 923 kg/m³ respectivamente) (Las Valdesas, 2019)
esta tenderá a dirigirse a lo profundo del recipiente que lo contiene, dejando sobrenadante
al aceite. Asimismo, las fuerzas intermoleculares del agua (dipolo permanente y enlaces por
puentes de hidrógeno) son completamente diferentes a las fuerzas intermoleculares del
aceite de girasol (Fuerzas de Van der Waals), haciendo que estas sustancias nos sean
miscibles entre sí.
Por otra lado, en la figura 2 del presente ítem, al adicionar el aceite vegetal al tubo con
cloroformo, no se observa ninguna división de fases, puesto que el cloroformo es un
solvente orgánica apolar (CHCl3) muy afín con sustancias apolares como el aceite vegetal. A
lo anterior se le suma que, ambas sustancias al ser hidrofóbicas presentan fuerzas
intermoleculares similares, haciéndolas miscibles entre sí.
De la misma manera, en la figura 2 del ítem 2.2 de resultados, se exhibe que en los tubos
“D” donde se adicionan los tres alimentos (caldo de pollo, huevo y margarina) en presencia
de cloroformo, la solubilidad de estas diluciones varía de tubo a tubo. Por una parte, el tubo
con margarina se encuentra totalmente soluble en el cloroformo, debido a que la margarina
es un lípido compuesto de ácidos grasos, por ende, es completamente soluble en el
solvente orgánico en cuestión (cloroformo). Por otro lado, el tubo con el caldo de pollo se
aprecia dos fases debido a que el caldo de pollo no presenta una gran cantidad de
componentes apolares afines al cloroformo, por ende, este alimento no es completamente
soluble en cloroformo. Por último, el tubo con el huevo inmerso en cloroformo ocurre lo
mismo, ya que como hemos expuesto con anterioridad, el componente principal del huevo
es la proteína ovoalbúmina y no precisamente una gran cantidad de lípidos es por esto que
se aprecia una contextura de emulsión en este tubo, pues el huevo no se solubiliza en el
cloroformo.
Una de las principales reacciones que son capaces de realizar los lípidos, más
específicamente los triglicéridos es la saponificación. La saponificación es una reacción de
síntesis de jabón (sal del ácido graso) en un medio potencialmente alcalino de especies
químicas como NaOH o KOH; dicha reacción produce, a parte de la sal del ácido graso,
glicerol (glicerina) (Grasas y aceites, 2014). Como se menciona anteriormente, el medio
altamente alcalino es crucial para que esta reacción se genere, ya que el grupo hidroxilo de
esta base fuerte ataca al carbono de los grupos carboxílicos de las cadenas laterales de los
ácidos grasos, liberando el grupo glicerol, seguidamente, el contra ion de la base fuerte
(como Na+ o K+) interacciona electrostáticamente con el grupo carboxilo estabilizando la
molécula. Asimismo, es importante un medio de alta temperatura (ebullición) durante un
tiempo prolongado, seguido a esto es importante dejar secar la solución. Con esto, se ilustra
la reacción respectiva reacción de saponificación de un triglicérido.
Figura 7: Saponificación de un grasa en presencia de tres moles de de NaOH generando
así, glicerina y jabón (Química Orgánica Explicada, 2019).
Con esta introducción se procede a analizar los resultados obtenidos en el ítem 2 literal 2.3.
Como se observa en la figura 3, al adicionar el NaOH al 20% en los 2 mL de aceite vegetal,
se genera emulsión al agitar muy fuertemente, puesto que el aceite al ser un molécula muy
apolar, es completamente insoluble en un a un disolvente tan polar como lo es Hidróxido de
sodio, por esto, podemos observar en la figura 3 imagen B, dos fases bien demarcadas.
Una vez se lleva a ebullición la disolución y se deja enfriar, se genera un precipitado de
tonalidad blancuzca, dicho precipitado es la sal del correspondiente al aceite de girasol, es
decir el jabón producido por este ácido graso.
Como lo dicho anteriormente, las sales de los ácidos grasos (jabones) son molécula
anfipáticas (p. ej., poseen dominios polares y apolares) que forman micelas de manera
espontánea. La forma en que se pliega depende del medio circundante. Ya que, en un
medio acuoso, las cadenas hidrófobas se ubicaran en el interior, mientras que las cabezas
polares en el exterior. Sin embargo, si el solvente es orgánico, entonces los componentes
de la micela se invierten, de ahí el nombre de micela inversa. Las cabezas polares son se
resguardan en el interior mientras que las cadenas hidrofóbicas se exponen (ScienceDirect,
s.f.).
Figura 8. Micela en agua (derecha) y en un solvente orgánico (izquierda)
Las micelas ayudan en el proceso de limpieza del jabón, al por ejemplo eliminar la suciedad
de la ropa. Esto funciona de forma que cuando se coloca un paño sucio en una solución
jabonosa, la cola larga hidrocarbonada no polar de las moléculas de jabón apunta hacia las
partículas de suciedad aceitosa y las cabezas polares apuntan hacia el agua. Esto forma
una estructura esférica con partes polares de la molécula en la superficie y partes no
polares en el centro. Esta estructura esférica se llama micela como ya se mencionó
anteriormente. Esta micela es atraída hacia el agua y transporta las partículas de suciedad
aceitosa junto con ella. Esto hace que las partículas de suciedad se desprendan de las
fibras de la tela. De esta manera, la ropa queda libre de suciedad o polvo (Nedungadi P, et
al. 2013).
El omega 3 son un conjunto de ácidos grasos importantes para salud del humano; Los tres
principales ácidos grasos omega-3 son el ácido alfa-linolénico (ALA), el ácido
eicosapentaenoico (EPA) y el ácido docosahexaenoico (DHA). El ALA se encuentra
principalmente en aceites vegetales como el aceite de linaza, de soja (soya) y de canola.
Los DHA y EPA se encuentran en el pescado y otros mariscos (National Institute of Health,
2018). Sin embargo, estos ácidos grasos son aceites esenciales, es decir el organismo es
incapaz de producirlo por sí sólo, por ende, para aumentar la concentración de estos ácidos
grasos en el individuo es indispensable su consumo a partir de ciertos alimentos que los
contienen.
Los ácidos grasos EPA y DHA pasan por numerosos sistemas biológicos para favorecer la
salud humana. El DHA tiene un efecto beneficioso en la estructura de la membrana celular y
asiste en el normal crecimiento y desarrollo. Mientras que ambos EPA y DHA, son
indispensables para el sistema inmunitario donde controlan los procesos clave que
respaldan nuestra salud. Juntos proporcionan numerosos e importantes beneficios en todo
el ciclo de vida humano (KD Pharma Group, 2017).
Una prueba de colesterol completa, también llamada panel de lípidos o perfil de lipídico, es
un análisis de sangre que puede medir la cantidad de colesterol y triglicéridos en la sangre
(Mayo Clinic, 2019).
Una prueba completa de colesterol incluye el cálculo de cuatro tipos de grasas (lípidos) en
la sangre:
4. Conclusiones
Así mismo, podemos decir que se verificó la hidrofobicidad de los diferentes alimentos por
medio de la prueba de solubilidad. Ya que a partir de esta se logró observar que los lipidos
al estar sometidos a un solvente polar se separan en dos fases, mientras que al estar
disueltos en un solvente polar como el cloroformo se disuelven en su totalidad mostrando
una sola fase homogénea.
Por el contrario, no se logró verificar la acción limpiadora del jabón producido mediante la
saponificación, puesto que este no presentó ninguna de las características ni propiedades
asociadas a este. Unas de las posibles razones por las cuales no se logró este objetivo,
pudo ser a causa de las concentraciones de base adicionadas a la solución, así como el
tiempo que se dejó calentar o la fuerza con la que se mezclaron. Todos estos siendo
factores que pudieron afectar el resultado final de la saponificación.
Why do we use Sudan III to identify lipids? | eNotes. (s.f.). Recuperado 18 octubre, 2019, de
https://www.enotes.com/homework-help/why-do-we-use-sudan-iii-identify-lipids-595653
Nedungadi P., Raman R. & McGregor M. (2013, October). Enhanced STEM learning with Online
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Mayo Clinic. (2019, 12 julio). Cholesterol test - Mayo Clinic. Recuperado 18 octubre, 2019, de
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March, J. (s.f.). Ácidos grasos esenciales. Recuperado 18 octubre, 2019, de
http://elfarmaceutico.es/index.php/cursos/item/7349-%C3%A1cidos-grasos-esenciales
Ácidos grasos Omega 3: EPA / DHA / DPA: ¿Por qué son tan importantes? (s.f.). Recuperado 18
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importantes
Saponificación - Reacción química del jabón • Química Orgánica Explicada. (2010, 23 julio).
Recuperado 18 octubre, 2019, de http://quimicaorganicaexplicada.com/saponificacion-
reaccion-quimica-del-jabon/