ENEC E INDAPVS

LABORATORIO CLINICO
UROLOGIA
LIC ANIBAL SEVILLANOS

SE TRABAJO EL AREA DEL 20 DE SEPTIEMBRE AL 15 DE OCTUBRE

ALUMNO: JOHNNY ORLANDO ICO CHOC

GUIA DE TRABAJO SEROLOGIA

 1. Describa brevemente los niveles de bioseguridad en el manejo de muestras dentro del
laboratorio clínico. ¿Qué niveles de riesgo a exposición de las muestras? ¿En qué nivel
de bioseguridad y riesgo se clasifica el laboratorio las muestras de serología?
Nivel de Bioseguridad 1
También conocido como nivel básico 1.
Las prácticas, los equipos de seguridad, el diseño y la construcción de la instalación del Nivel de
Bioseguridad 1 son adecuados para la educación o capacitación secundaria o universitaria, y para
aquellas instalaciones en las que se trabaja con cepas definidas y caracterizadas de microorganismos
viables que no se conocen como generadores de enfermedad sistémica en humanos adultos sanos.
El BSL-1 representa un nivel básico que se fundamenta en prácticas microbiológicas estándar sin
ninguna barrera primaria o secundaria especialmente recomendada, salvo una pileta para lavado de
manos.
Nivel de Bioseguridad 2
También conocido como nivel básico 2.las prácticas, los equipos, el diseño y la construcción de
instalaciones del Nivel de Bioseguridad 2 son aplicables a laboratorios educativos, de diagnóstico,
clínicos u otros laboratorios donde se trabaja con un amplio espectro de agentes de riesgo moderado
que se encuentran presentes en la comunidad y que están asociados con enfermedad humana de
variada gravedad.
Con buenas técnicas microbiológicas, estos agentes se pueden utilizar en forma segura en
actividades realizadas en una mesa de trabajo, siempre que no se produzcan salpicaduras o
aerosoles en cuyo caso se utilizará CSB.
Se deben utilizar las demás barreras primarias que correspondan, tales como máscaras contra
salpicaduras, protección facial, batas y guantes y contar con barreras secundarias, tales como piletas
para lavado de manos e instalaciones de descontaminación de desechos a fin de reducir la
contaminación potencial del medio ambiente.
Nivel de Bioseguridad 3
También conocido como nivel de contención. Las prácticas, equipos de seguridad y el diseño y la
construcción de las instalaciones del Nivel de Bioseguridad 3 pueden aplicarse a instalaciones
clínicas, de producción, investigación, educación o diagnóstico, donde se trabaja con agentes
exóticos o indígenas con potencial de transmisión respiratoria, y que pueden provocar una infección
grave y potencialmente letal. Al manipular agentes del Nivel de Bioseguridad 3 se pone mayor
énfasis en las barreras primarias y secundarias para proteger al personal en áreas contiguas, a la
comunidad y al medio ambiente de la exposición a aerosoles potencialmente infecciosos.

Nivel de Bioseguridad 4
También conocido como nivel de contención máxima. Las prácticas, equipos de seguridad, y el
diseño y la construcción de instalaciones del Nivel de Bioseguridad 4 son aplicables al trabajo con
agentes peligrosos o tóxicos que representan un alto riesgo individual de enfermedades que ponen
en peligro la vida, que pueden transmitirse a través de aerosoles y para las cuales no existen vacunas
o terapias disponibles.
El aislamiento completo del personal de laboratorio de los materiales infecciosos en aerosol se logra
principalmente trabajando en un CSB Clase III o en un traje de cuerpo entero, con provisión de aire
y presión positiva. Por lo general, la instalación del Nivel de Bioseguridad 4 es un edificio separado
o una zona totalmente aislada con sistemas de gestión de desechos y requisitos de ventilación
especializados y complejos para prevenir la liberación de agentes viables al medio ambiente.

2. Qué es la enfermedad del sarampión, quien la produce, como se detecta a nivel de

laboratorio:
- El sarampión es una enfermedad altamente contagiosa causada por un virus que se
reproduce en la nariz y en la garganta de un niño o adulto infectado. Luego, cuando una
persona con sarampión tose, estornuda o habla, las gotas infectadas se expulsan al aire,
donde otras personas pueden inhalarlas.
- El sarampión es causado por un virus de la familia de los paramixovirus y normalmente se
suele transmitir a través del contacto directo y del aire
- Para detectar anticuerpos anti-sarampión o anti-parotiditis la determinación se realiza a
partir de una muestra de sangre venosa; para detectar el virus, puede utilizarse sangre,
orina, esputo, aspirado nasofaríngeo, frotis faríngeo, una muestra del interior de la mejilla
(frotis bucal), líquido cefalorraquídeo u otro tejido del organismo

3. Qué es la enfermedad de rubeola, quien la produce, como se detecta a nivel de

laboratorio:
- La rubéola es una enfermedad viral contagiosa que ocurre más seguido en niños. El virus es
transmitido a través de las vías respiratorias, y los síntomas aparecen usualmente a las 2-
3 semanas después de la exposición. 
- La rubeola o, desusado, rubéola, es una enfermedad infecciosa causada por el virus de
la rubeola, un virus de ARN perteneciente al género Rubivirus de la familia Togaviridae.
- Por eso, los médicos, por lo general, confirman la rubéola con la ayuda de análisis de
laboratorio. Es posible que te realicen un cultivo de virus o un análisis de sangre, que
pueden detectar la presencia de distintos tipos de anticuerpos contra la rubéola en la sangre.

4. Que es la brucelosis, quien la produce, como se detecta a nivel de laboratorio:

- La brucelosis es una infección bacteriana que se transmite de los animales a las personas.
Lo más común es que las personas se infecten al comer productos lácteos crudos o sin
pasteurizar. 
- A brucelosis es una enfermedad bacteriana causada por varias especies de
brucella que infectan principalmente al ganado vacuno, porcino, caprino y ovino y a los
perros
- El diagnóstico de brucelosis se puede realizar de manera directa, aislando el
microorganismo a partir de cultivos de sangre, médula ósea u otros tejidos o indirecta a
través de métodos serológicos que detectan anticuerpos.

5. Que es la tularemia, quien la produce, como se detecta a nivel de laboratorio:

- La tularemia es una enfermedad infecciosa muy poco frecuente que suele atacar la piel, los
ojos, los ganglios linfáticos y los pulmones. La tularemia es causada por la
bacteria Francisella tularensis. La enfermedad afecta principalmente a conejos, liebres y
roedores, como ratas almizcleras y ardillas
- La tularemia generalmente se puede diagnosticar mediante análisis de sangre. Una prueba
busca anticuerpos contra la bacteria y con esa prueba no se sabrá si has tenido la infección
hasta varias semanas después.

6. Que es la sífilis, quien la produce, como se detecta a nivel de laboratorio:

- La sífilis es una enfermedad de transmisión sexual (ETS) que puede tener complicaciones
muy graves cuando se deja sin tratar, pero es fácil de curar con el tratamiento adecuado.
- La causa de la sífilis es una bacteria llamada Treponema pallidum.
- diagnostico por medio de pruebas como: VDRL RPR, PRUEBAS SEROLOGICAS
7. Qué es la toxoplasmosis, quien la produce, como se detecta a nivel de laboratorio:
- Es una enfermedad parasitaria, quien la puede contagiar un gato al estar infectado.
- el causante de la toxoplasmosis es el parasito Toxoplasma gondii.
- el diagnostico puede ser, por medio de un frote, pruebas serológicas, etc.
8. Que significan las siglas VIH, quien la produce, como se detecta a nivel de laboratorio:
- virus de la inmunodeficiencia humana.
- El test de VIH es un análisis de sangre que detecta la presencia de anticuerpos al VIH.
Existen dos tipos de test: el llamado ELISA que es una extracción de sangre y se realiza en
un laboratorio, y el test rápido, para el que se depositan unas gotas de sangre de la yema de
un dedo sobre una tira reactiva y cuyo resultado se obtiene veinte minutos después
9. Que significan las siglas SIDA, quien la produce, como se detecta a nivel de
laboratorio:
- Síndrome de inmunodeficiencia adquirida
- Una persona puede contagiarse por tener muchas parejas sexuales y tener relaciones sin
protección con personas infectadas con el virus

10. Que es la hepatitis, que tipos existen, quien la produce, como se detecta a nivel de
laboratorio
- La hepatitis es una enfermedad inflamatoria del hígado que imposibilita su
correcto funcionamiento, limitando así muchas funciones vitales
- Hasta la fecha, hay por lo menos cinco tipos conocidos de hepatitis viral, la A, la B, la C, la
D y la E
- Análisis de sangre, pruebas serológicas

11. Que es el método ELISA:

La técnica ELISA : ensayo por inmunoadsorción ligado a enzimas es una técnica
de inmunoensayo en la cual un antígeno inmovilizado se detecta mediante
 un anticuerpo enlazado a una enzima capaz de generar un producto detectable, como
cambio de color o algún otro tipo; en ocasiones, con el fin de reducir los costos del ensayo,
nos encontramos con que existe un anticuerpo primario que reconoce al antígeno y que a su
vez es reconocido por un anticuerpo secundario que lleva enlazado la enzima anteriormente
mencionada. La aparición de colorantes permite medir indirectamente
mediante espectrofotometría el antígeno en la muestra.
12. Que es el método IFI:
La IFI es una técnica de tamizado inicial que, de acuerdo a los sustratos utilizados (células
HEp-2, neutrófilos o tejidos) permite identificar los posibles antígenos reconocidos por los
autoanticuerpos presentes en los sueros de los pacientes con enfermedades autoinmunes.
13. Qué es el método Western Blot:
Western blot es una técnica de laboratorio utilizado para detectar una proteína específica en
una muestra de sangre o tejido. El método implica el uso de electroforesis en gel para
separar las proteínas de la muestra. Las proteínas separadas se transfieren del gel a la
superficie de una membrana. La membrana se expone a u n anticuerpo específico contra la
proteína en estudio. La unión del anticuerpo se detecta usando un marcador radiactivo o
químico. Un Western Blot se utiliza a veces para diagnosticar enfermedades.
14. Que es el método IHA:
Las pruebas de hemaglutinación (HA) e inhibición de la hemaglutinación (IHA) han sido
empleadas desde los comienzos de la virología moderna, en la primera se aprovecha la
propiedad de los virus de unirse a la membrana de los eritrocitos de ciertas especies
mientras que su contraparte serológica se emplea como un índice de reactividad para la
evaluación de los niveles de anticuerpos. Estas propiedades han sido explotadas para
caracterizar e identificar receptores de la superficie celular para diferentes virus.  En la
actualidad, los ensayos de HA e IHA han sido útiles en la detección de antígenos;
reemplazando las técnicas tradicionales y produciendo una mayor agilidad en la definición
del diagnóstico.

15. Describa la metodología RPR:

FUNDAMENTOS DEL METODO: En la prueba rápida para reaginas plasmáticas (RPR),

las "reaginas" presentes en el suero de individuos infectados con Treponema pallidum, se
detectan por acción de las mismas con antígeno de cardiolipina, lecitina y colesterol
adsorbido sobre partículas de carbón. La reacción produce una aglutinación visible
macroscópicamente, favorecida por las partículas de carbón. Las reacciones inespecíficas se
evitan con el empleo de antígeno altamente purificado y el agregado de cloruro de colina,
por lo que no es necesario inactivar la muestra.
PROCEDIMIENTO
1 PRUEBA CUALITATIVA Llevar a temperatura ambiente los reactivos y la
muestra antes de realizar el ensayo. En cada uno de los círculos de la tarjeta de
reacción colocar con un gotero plástico provisto:
Muestra o Controles 1 gota (50 ul)
Con el extremo cerrado del gotero distribuir la muestra uniformemente en todo el
círculo. Con el gotero metálico provisto, en posición vertical, agregar en el centro
del círculo: Reactivo A 1 gota (17 ul) SIN MEZCLAR, hacer rotar
horizontalmente la tarjeta de reacción en forma manual o con agitador rotativo a
 100 rpm durante 8 minutos. Observar la presencia o ausencia de aglutinación al
cabo de este tiempo. Tiempos de lectura mayores pueden dar lugar a falsos
resultados.
1 PRUEBA SEMICUANTITATIVA Efectuar diluciones seriadas 1:2, 1:4, 1:8,
hasta 1:64 empleando solución fisiológica y proceder de la misma manera que en
la técnica cualitativa. El título estará dado por la inversa de la última dilución que
se observe reactiva.
2 INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS
Reactivo: presencia de aglutinación visible en forma de grumos negros sobre el
fondo claro que indica presencia de "reaginas" en la muestra.
No reactivo: aspecto gris homogéneo que indica ausencia de "reaginas" en la
muestra.
16. Describa la metodología FR:
FUNDAMENTOS DEL METODO: Los Factores Reumatoideos, grupo de anticuerpos
del tipo IgM, se detectan mediante una reacción inmunológica de aglutinación. El Reactivo
látex-FR posee inmunoglobulinas IgG humanas, absorbidas sobre las partículas de látex.
Mezclando de forma directa la muestra con el Reactivo látex-FR, la presencia de Factores
Reumatoideos (con capacidad anti IgG) provocan la aglutinación de las partículas de látex,
que se visualiza macroscópicamente.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS.
Negativo: No aglutinación. La suspensión se mantiene homogenea, dentro de los 2 minutos
de reacción.
Positivo: Aglutinación. Se forman finos grumos en la suspensión, dentro de los 2 minutos
de reacción. El resultado POSITIVO, indica un contenido de FR igual o mayor a 10 Ul/ml
PROCEDIMIENTO II:
Ensayo SEMICUANTITATIVO Las muestras POSITIVAS pueden diluirse 1:2, 1:4, 1:8,
etc., con solución de cloruro de sodio 0,9%. Ensayar cada dilución de forma idéntica a
PROCEDIMIENTO 1. Interpretación de los resultados La concentración aproximada de FR
en la muestra, se obtiene multiplicando la inversa de la máxima dilución que presenta
aglutinación visible, por la sensibilidad del método que es de 10 UI/ml. Los resultados se
expresan en UI/ml

17. Describa la metodología ASO:

FUNDAMENTOS DEL METODO:
Los anticuerpos antiestreptolisina O se detectan en suero por su reacción con la
estreptolisina O adsorbida sobre soporte inerte de látex. Los anticuerpos antiestreptolisina
reaccionan con la estreptolisina produciendo una aglutinación visible macroscópicamente
PROCEDIMIENTO
Llevar los reactivos y la muestra a temperatura ambiente. Agitar el Reactivo A antes de
usar, vaciando previamente la pipeta del gotero.
I- TECNICA CUALITATIVA: En uno de los sectores delimitados de la placa adjunta al
equipo colocar: Reactivo A 1 gota (25 ul) Muestra o Controles 25 ul Mezclar con palillo
descartable (uno para cada muestra) hasta obtener una suspensión uniforme en la superficie
delimitada de la placa. Inmediatamente disparar un cronómetro, balancear suavemente la
placa y observar macroscópicamente el resultado dentro de los 2 minutos
II- TECNICA SEMICUANTITATIVA: (Titulación) Los sueros positivos pueden titularse
efectuando diluciones seriadas en tubos de Kahn. a) Colocar 0,5 ml de solución fisiológica en cada
uno de los tubos. b) Agregar 0,5 ml de suero al tubo No 1 y mezclar. Transferir 0,5 ml de esta
dilución al tubo No 2 y mezclar, continuando así las diluciones hasta el último tubo. Las diluciones
así obtenidas equivalen a 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, etc. c) Ensayar cada dilución según técnica I.
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS
Negativo: suspensión homogénea.
Positivo: aglutinación que aparece dentro de los 2 minutos. Se califica de 1 a 4 +. Título: inversa
de la máxima dilución a la que se produce aglutinación visible macroscópicamente. El nivel
aproximado de antiestreptolisina O en la muestra, puede ser calculada por la fórmula siguiente:
ASO (UI/ml) = Título x Sensibilidad de la reacción (200 UI/ml) Ejemplo: la muestra presenta un
título de 1:2. El nivel de ASO es de 2 x 200 = 400 UI/ml
18. Describa la metodología VDRL:
PRINCIPIO DEL METODO
Las "reaginas", presentes en individuos infectados por T. pallidum se detectan en suero por
la reacción con un antígeno cardiolipínico purificado y estabilizado. Si la muestra contiene
reagina, ésta se unirá al antígeno produciendo una floculación visible en microscopio. Las
reacciones inespecíficas se evitan con el empleo de antígeno altamente purificado y el
agregado de cloruro de colina característica de la técnica USR (Unheated Serum Reagin) en
la que no es necesario inactivar la muestra
PROCEDIMIENTO
Tanto los reactivos como la muestra deben estar a temperatura ambiente antes de realizar la
prueba.
I- PRUEBA CUALITATIVA EN SUERO
En cada uno de los sectores delimitados da placa colocar: Amostra 50 ul Con
gotero provisto colocar: Reactivo A 1 gota Agitar horizontalmente la placa a 180
rpm durante 4 minutos. Observar inmediatamente en microscopio con poco
aumento (60 a 100 X).
II- PRUEBA SEMICUANTITATIVA EN SUERO
Preparar diluciones de la muestra 1:2, 1:4, 1:8, 1:16 y 1:32 con solución fisiológica
y realizar para cada dilución la prueba como se describe en I.
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS:
Reactivo: presencia de floculación.
No reactivo: ausencia completa de floculación. Prueba semicuantitativa: el título estará
dado por la inversa de la última dilución que se observe reactiva. Leer atentamente las
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO.
19. Describa la metodología PCR:
Mientras el virus que provoca la COVID-19 se propaga por todo el mundo, el OIEA, en
colaboración con la Organización de las Naciones Unidas para la Alimentación y la
Agricultura (FAO), ofrece su apoyo y sus conocimientos especializados para ayudar a los
países a utilizar la reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa en tiempo
real (RT-PCR en tiempo real), uno de los métodos de laboratorio más exactos para detectar,
seguir y estudiar el coronavirus.

20. Cuál es la importancia del estudio serológico en la sangre:

Las pruebas serológicas permiten comprobar la presencia de anticuerpos en la sangre